核酸

摘要： 本文结合新旧教材,通过收集核酸发现史的内容,并利用时间为主要线索进行整理,使核酸科学史以完整的时间顺序呈现在课堂上,利用学生认知的时间逻辑顺序进行教学,使学生在理解基本知识的前提下,深入理解每个知识点的来源及核酸的发现过程,促进学生对本节内容的深度理解和学习,发展学生的生物学科素养。

摘要： 目的:探讨孕妇在不同孕期丙肝抗体、乙肝表面抗原、梅毒螺旋体抗体、人类免疫缺陷病毒抗体试验假阳性原因,制定日常工作流程。方法:选取2020年9月~2021年11月山东大学齐鲁医院(青岛)查体的各期孕妇1712例(观察组),根据孕周划分为妊娠早期(妊娠12周前)、妊娠中期(妊娠13~27周末)、妊娠后期(妊娠28~41周末),健康对照组为与观察组年龄相近的育龄妇女200例。电化学发光法检测丙型肝炎病毒抗体、乙型肝炎病毒表面抗原、梅毒螺旋体抗体、人类免疫缺陷病毒抗体,间接免疫荧光法检测抗核抗体,化学发光法检测抗心磷脂抗体,细胞磁化法检测不规则抗体。结果:孕期与对照组相比乙肝表面抗原假阳性率明显增高,差异有统计学意义(P0.05);中晚孕期与早期相比乙肝表面抗原假阳性率明显增高,差异有统计学意义(P0.05);假阳性标本中,中晚期孕妇抗核抗体明显高于孕早期,差异有统计学意义(P<0.05),不规则抗体、抗心磷脂抗体均有一定程度的阳性率。对所有假阳性标本进行核酸验证,结果均为阴性。结论:孕中晚期孕妇体内可产生一定量的抗核抗体、不规则抗体或抗心磷脂抗体,这些抗体可引起抗原抗体反应,使临床试验结果发生假阳性反应。

摘要： 结合目前国内外已有的一些相关理论和研究成果,对种子引发过程中的生理生化变化进行概述,主要包括种子引发对膜修复能力的影响、对酶活性及代谢的影响、对核酸的影响等,并对种子引发技术的应用前景进行展望。

摘要： 大肠埃希菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7,E.coli O157∶H7)作为一种食源性致病菌,其分布广泛、危害性大。为了研制一种基于E.coli O157∶H7的既能实现快速、简单和灵敏检测,又能够实现常温储存及运输的试剂盒,本研究利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)技术,结合真空冷冻干燥技术,研制了保留核酸检测性能、易于常温储存及运输、减少气溶胶污染的E.coli O157∶H7荧光定量冻干检测试剂盒。研制的试剂盒采用冻干技术保留了核酸扩增试剂的检测性能,复水后,在Taq DNA聚合酶的作用下通过循环扩增实时监测荧光信号的积累,实现荧光定量检测,所提出的方法在40 min内可检测到2.1 copies/μL的eaeA基因。该技术为E.coli O157∶H7的检测提供良好的研究基础和技术参考,填补了市场灵敏度高、便于储存的E.coli O157∶H7检测试剂盒的缺乏。

摘要： 月薪最高2万,吸引旅游、教培人士纷纷转行?5月23日,上海长宁区政府新闻办官方公众号“上海长宁”发布招聘启事称,有企业将大量招募核酸采样人员,月薪8000~12000元,一并公布的还有招聘条件及相关待遇。《中国经济周刊》记者了解到,招聘岗位有全职、兼职,参与此轮抗疫的志愿者将优先被录用。招聘信息发布后,两天之内已有2000多人报名,其中有之前从事旅游业、教培行业的人士报名全职岗位。

摘要： 家我是一名工作了几年的初中语文老师兼班主任。在乡镇学校教书,目前带这个班已经3年了。在教学之余,发现一些家长的工作很不好做,特别是有些家长对自己孩子的教育监督很不到位,完全就是“甩手掌柜”,直接把责任扔给老师和学校。比如,这次新冠肺炎疫情期间,我在家长群吆喝了好几次要带孩子去测核酸,也编辑了群公告。可是,到了复课的前一天进行统计时,发现班里还有6位同学没去测核酸。其中,只有1位同学的家长如实告知,其他几位家长都一声不吭。

摘要： 目的:评估2019新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测体系在质量上是否能满足临床需求。方法:对本实验室采用的新冠核酸采样管、提取试剂、两种扩增试剂及相应仪器在配套使用时的阴阳性符合率、批内精密度、批间精密度及最低检测限、交叉反应等项目进行性能验证。结果:本实验室的新冠核酸检测体系阴阳性符合率100%;ORF1ab、N与E各基因批内精密度、批间精密度CV均≤5%;新冠标准物质稀释至厂家声明的最低检测限浓度500 copies/ml时,ORF1ab、N与E每个基因重复提取扩增10次,每次均出现了扩增曲线,Ct值均<37,检出率100%,利用本核酸检测体系对人类冠状病毒(HKU1、OC43、NL63和229E)、MERS冠状病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感病毒Ⅰ型、腺病毒Ⅰ型、EB病毒、人巨细胞病毒、肺炎支原体及人基因组DNA进行提取扩增,结果为阴性。结论:本实验室的新冠核酸检测体系阴阳性符合率一致,重复性好,最低检测限与厂家声明一致,与能引起相同或相似临床症状的其他病原体及人基因组DNA不产生交叉反应,特异性好,能够在质量上保证临床新冠核酸检测的需要,可为其他实验室选择配套检测体系提供参考依据。

摘要： 目的通过国产2019-nCoV(新型冠状病毒)核酸测定试剂,测定确诊的COVID-19(新型冠状病毒肺炎)患者的多种生物样本内SARS-CoV-2核酸的携病毒情况,对机体不同系统中SARS-CoV-2的状态展开观察,并分析其临床价值,为诊断和治疗提供参考。方法收集昆明市第三人民医院53例确诊的新型冠状病毒肺(COVID-19)患者的鼻拭子、咽拭子、痰液、粪便和尿液样本,实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定法,来平行测定病毒ORF1ab基因与N基因核酸,比较不同类型样本的阳性率和一致性。结果患者的多种生物标本核酸Ct值的变化与病程都高度相关,发病15 d前后来分析核酸检测结果,发现在发病15 d后病毒核酸Ct值与15 d内相比病毒核酸载量,差异有统计学意义(P<0.05)。在发病第1~7天和8~14 d,鼻拭子阳性检出率为88.67%(47/53)和79.24%(42/53),而咽拭子阳性检出率为73.58%(39/53)和53.85%(28/52)。粪便样本核酸检测阳性率12.28%(7/57),尿液样本均未检测出病毒核酸。结论在新冠肺炎患者发病的不同阶段,鼻拭子、咽拭子、痰液样本有较高的核酸检出率;在阳性检出率方面,鼻拭子相较咽拭子偏高;SARS-CoV-2有粪-口传播可能,同时病毒液可能会潜在感染消化道。

摘要： 探讨13种呼吸道病原体核酸检测在儿童呼吸道感染中的应用效果。选取312例急性下呼吸道感染患儿为研究对象,通过采集咽拭子样本对13种呼吸道病原体采用液相芯片技术进行核酸检测,分析312例患儿病原体的检出结果及分布特征。215例患儿至少有一种呼吸道病原体检测阳性,阳性检出率为68.91%。其中,检出单一病原体阳性患儿134例,占42.94%;检出两种及两种以上病原体阳性患儿81例,占25.96%。检出率最高的3种病原体是肺炎链球菌(SP)、巨细胞病毒(CMV)和呼吸道合胞病毒(RSV)。混合感染率排名前5位的病原体有肺炎支原体(MP)、百日咳杆菌(BP)、流感嗜血杆菌(Hi)、甲型流感病毒(INF-A)和卡他莫拉菌(MC)。不同年龄组间SP、CMV、RSV、INF-A、腺病毒(ADV)的阳性检出率差异显著(P<0.05)。低年龄段患儿常见的病原体有CMV、RSV,SP检出率随患儿年龄的增长而升高。高年龄段患儿常见的病原体有INF-A、ADV。13种呼吸道病原体核酸检测能快速有效地满足呼吸道病原体的检测需要,辅助诊断儿童呼吸道感染疾病。临床诊断时要注意不同年龄组间病原体的差异和多重病原体感染。

摘要： 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)爆发以来,在一线救治COVID-19患者的过程中发现:病邪一旦传变至足厥阴肝经,病情则缠绵难解,核酸检测难以转阴;治疗上采用中医药调理中气、祛除外邪,梳理肝经气机,清泄肝经郁热,可使患者症状改善,核酸检测转为阴性,从而达到出院标准。通过分析总结从足厥阴肝经治疗核酸难以转阴COVID-19患者的理论及经验,为COVID-19的中医药治疗提供参考及思路。

摘要： 5-甲酰基胞嘧啶(5fC)属于哺乳动物中的表观遗传标记,在DNA主动去甲基化通路中发挥关键作用,开发了可逆的5fC靶向干预工具,证明葫芦脲[7]能选择性靶向DNA中的5fC-AD核苷酸,且不影响双链DNA中的氢键作用.通过CB7 驱动的主客体化学，应用于可逆调控多种5fC 靶向生物化学反应。我们证实，大环CB7 通过空间位阻产生阻碍，阻止酶与底物结合，而这种主客体相互作用可以逆转。DNA氧化是DNA 损伤的一种形式，相较于其他核苷，它具有很高的氧化电位，因此主要存在于脱氧鸟苷富集区。8-氧-脱氧鸟苷是富G 的DNA 序列中主要存在的氧化损伤形式，可能导致机体中的基因突变和损伤。作为左手旋螺旋结构，Z-DNA 具有生物活性并且与转录和基因组稳定性相关。在生理环境下控制B / Z-DNA 转换具有挑战性。我们的研究代表了第一个可逆的使用主客体作用控制含有氧化损伤核酸的B/Z转换。

摘要： 由于核酸分子骨架带有大量负电荷磷酸根,离子对反相色谱(IP-RPLC)是其最有效的色谱分离方法.其中,离子对试剂的浓度直接决定了核酸混合物的色谱分离分辨率,而传统的离子对试剂如醋酸三乙胺(TEAA)在高浓度时极大抑制核酸在电喷雾离子化质谱中的信号,这使得IP-RPLC无法与质谱检测兼容。在本工作中，建立了100mM TEAA IP-RPLC集成高浓度有机气氛电喷雾离子化质谱分析系统，同时实现了核酸样品高分辨色谱分离和高灵敏度质谱检测。

摘要： 在地球诞生的初期,地表面上仅有水、氮气、氧气、甲烷、氨气、二氧化碳、一氧化碳等气体,以及各种无机的单质与化合物的存在--这些物质构成了前生命时期的化学环境.许多研究工作很好地解释了如何在前生命时期的条件下产生组建生命大分子的单元如核苷、氨基酸等有机小分子.经过数亿年发展,在前生命时期的环境中,可能产生了无数种有机小分子—地球上的化学环境,由简单发展为复杂而又无序的状况.有机分子中的手性如何起源?这些无序、杂乱的有机小分子如何进行自组装、并最终发展为生命形式?这些问题还没有得到很好的解答.在设计与合成人工DNA的研究中发现，用开链的甘醇糖(Glycol)替换五元核糖(Ribose)时，具有不同手性的Glycol Nucleic Acid(GNA)之间也能非特异性地互相杂交形成双链结构。受此启发，认为核苷酸是生命起源的关键。在前生命时期，通过长时期的化学反应积累，形成了具有各种骨架、碱基种类与手性的核酸(Scheme 1)。只有五元环状的核苷酸具有特异性识别与自组装功能—这是开链的甘醇类核酸(GNA)所不具有的特性:两条具有序列互补且手性中心完全一致的D-型多聚核苷酸通过这种特异性自组装作用，形成稳定的双链DNA。这一过程，是一种自然选择的结果，也可能是解释手性起源的关键。拟通过化学合成法，得到一系列具有各种手性的寡聚核苷酸，然后进行表征，证明对于生命起源中这一重要过程的假设。

摘要： 利用核酸对HP-β-CD-ANS包合物的荧光猝灭作用，建立了定量测定核酸的新方法。在pH 4．20的B-R缓冲溶液中。体系的荧光猝火程度与核酸的浓度在一定范围内具有良好的线性关系，fsDNA、ctDNA和yRNA的线性范围分别为：2．5×10-8～3．0×10-5，5．0×10-9～4．0×105和2．5×10-8～5．0×10-5g·mL-1，检出限分别为8．0×10-9，3．6×10-9和6．6×10-9g·mL-1，并用于合成样品中fsDNA的定量测定，结果令人满意。

摘要： 目的：获得高活力5'-磷酸二酯酶液、提高核酸RNA酶解效率。rn 方法：采用超滤和盐析技术对从麦芽根浸提液中纯化5'-磷酸二酯酶工艺进行研究，采用单因子试验法优化酶解工艺条件。rn 结果：浸提液依次经过5万Da超滤膜浓缩、40%饱和度硫酸铵盐析、5万Da超滤膜脱盐后，酶活力可达1500U/ml；第一次超滤膜透过液可作为浸提液循环使用，酶活力是水浸提的1.15倍；第二次超滤膜透过液浓缩5倍后，可回收56.46%硫酸铵，浓缩母液可按1：2比例循环使用；在底物浓度5.8%、酶用量8%、反应时间2h条件下，RNA酶解率可达95%。rn 结论：本文初步建立了适合工业化规模的核苷酸生产新工艺。

摘要： 本文综述了目前主要核酸水解酶的种类、来源、蛋白质特性和生产方法；介绍了目前酶解法生产核苷酸的几种主要方法，比较了各种方法的优缺点及工业化应用前景；简单综述了水解液中四种核苷酸的分离纯化方法。探讨了酶解法生产核苷酸的未来发展趋势，结论是酶解法将更广泛地采用现代高新生物技术，在未来仍是核苷酸生产的主要方法。

摘要： 艾滋病又称:获得性免疫缺陷综合征(AcquiredImmune Deficiency Syndrome,AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(Human ImmunodeficiencyVirus,HIV) 感染所引起的一种传染性免疫缺陷性疾病.2014年,我国新报告艾滋病感染者和病人10.4万例,较2013年增加14.8％.广西,2015年HIV 抗体检测958万人次,新发现病例9399例.艾滋病至今尚无确切有效的治疗药物,因而对HIV 感染者进行筛查和确认是艾滋病预防控制工作的重要组成部分.具体分析了HIV实验室检测的HIV抗体检测、HIV-1抗原检测、HIV核酸检测、CD4+T淋巴细胞检测、HIV-1的分离培养技术。

摘要： 受生命系统中细胞骨架-膜蛋白-磷酯双层膜结构的启发,采用核酸自组装体作为骨架,通过特异性核酸序列组装,精确定位仔细设计的树状疏水大分子形成不连续的'框架',可以诱导其他的两亲高分子沿着'框架'进行组装,从而实现在相同环境条件以及相同动力学过程条件下,制备形状和尺寸可定制的杂化组装体.

摘要： 环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种全新的核酸扩增方法,具有简单、快速、特异性强的特点,该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于PCR技术,不依赖任何专门的仪器设备实现现场高通量快速检测,然而经过十多年的发展,由于其假阳性率高,重复性差,仍停留在实验室研究阶段,未能实际应用.本研究针对LAMP的技术原理及特点,从根源上查找技术缺陷,从LAMP的最初报道入手,合成相同的引物,采用相同的反应体系与反应条件进行试验,结果表明,关于LAMP最初报道的试验具有不可重复性,现有的反应体系也不可能克服引物二聚体引起的假阳性问题.

摘要： 免疫分析方法由于具有高度的特异性、快速、简便等优势，已广泛的应用于生命科学，药物分析，临床诊断及环境监测领域。在免疫分析过程中，如何将更多的信号分子标记于同一个抗原或抗体上，使检测信号得到增强，同时不影响抗原或抗体的识别性能，是最大的难点之一。本文以核酸/蛋白质纳米聚合物为荧光染料载体，通过核酸的多个作用位点引入大量的信号分子，搭建一种由核酸/荧光分子结合体构成的链状标记物，用于免疫检测。与常规的免疫荧光测试比较，本方法提供的标记物中的荧光信号分子不只一个，而是十几个甚至几十个，因此可以大幅度提高检测信号的强度，明显改善检测灵敏度。

摘要： 一种新的核苷三磷酸衍生物、一种核酸探针和一种能方便并高灵敏度地探测靶核酸的多标记核酸探针，以及一种制备该多标记核酸探针的方法，和一种使用该多标记核酸探针或该核酸探针探测靶核酸的方法。通过使用转谷氨酰胺酶(TGase)，并使用通过共价结合预先引入多个标记部分的多标记核酸探针，或者通过共价结合将多个标记部分引入已与靶核酸杂交的核酸探针中，从而可以方便和高灵敏度地探测靶核酸。

摘要： 一种核酸检测盒，包括一个可以改变内部容积并包含一种试剂的流体容置通道，一个连接流体容置通道并可选择打开状态或封闭状态的进出口(在所述打开状态下可以实现从检测盒(100)外部分向外注射流体，在所述封闭状态下流体注射中断)，与流体容置通道(111)相连并可选择打开状态或封闭状态的连接通道(116和117)(在所述打开状态下可实现流体向其它流体容置通道(111)的转移，在所述封闭状态下所述流体转移中止)，可保持进出口封闭的进出口垫(404和405)，可保持连接通道(116和117)封闭的连接垫(406和407)。

摘要： 本发明涉及核酸检测系统、核酸检测系统阵列、核酸检测方法以及候选引导核酸的筛选方法。所述核酸检测系统包含：基底，所述基底包含基底表面和至少两个电极；连接分子，所述连接分子具有与所述基底表面结合的第一配基和与Cas酶结合的第二配基；Cas酶，所述Cas酶与所述连接分子的第二配基结合并与引导核酸形成酶复合物，所述Cas酶包含选自Cas12(VA型)、Cas13(VI型)和Cas14(VF型)中的至少一种；引导核酸，所述引导核酸包含分别能够与酶和靶核酸结合的序列；和报告核酸，所述报告核酸包含非特异性序列。本发明的核酸检测系统具有优异的信噪比、灵敏度可达aM水平，并且检测时间大大缩短。

摘要： 根据一实施方式，根据一实施方式的核酸递送载体用于将第1序列整合到细胞基因组中。核酸递送载体包含含有第1序列的供体DNA，至少含有编码蛋白的RNA的RNA剂，所述蛋白涉及将第1序列整合到基因组中，以及包封供体DNA和RNA剂的脂质粒子。

摘要： 本发明提供核酸扩增方法、核酸提取用设备、核酸扩增反应用筒以及核酸扩增反应用试剂盒。该核酸扩增方法包括在含有核酸的试样中混合含有促溶物质的吸附液和微粒，使上述核酸吸附于上述微粒的吸附工序；用第1清洗液清洗吸附有上述核酸的微粒的清洗工序；使吸附于上述微粒的核酸溶出到溶出液中的溶出工序；以及对上述溶出液中的核酸进行核酸扩增反应的核酸扩增工序，其中，上述吸附液含有醇，第1清洗液为酸性，该核酸提取用设备、核酸扩增反应用筒和核酸扩增反应用试剂盒能够实施该方法。

摘要： 本发明提供核酸扩增方法、核酸提取用设备、核酸扩增反应用盒、以及核酸扩增反应用套件。提供一种包括向含有核酸的试样混合吸附液以及微粒并使上述核酸吸附于上述微粒的吸附工序、利用第一清洗液对吸附了上述核酸的微粒进行清洗的清洗工序、对吸附了上述核酸的微粒施加超声波并使吸附于上述微粒的核酸溶出于溶出液中的溶出工序、以及对上述溶出液中的核酸进行核酸扩增反应的核酸扩增工序的核酸扩增方法、能够实现该方法的核酸提取用设备、核酸扩增反应用盒、以及核酸扩增反应用套件。

摘要： 本发明涉及一种核酸扩增方法，其通过以高簇密度制作成为利用测序仪进行序列解析的对象的扩增核酸片段束(簇)，且使簇内核酸片段数达到10,000分子以上，提高核酸序列解析的通量且提高读取精度；通过预先使引物DNA在基体上形成图案状，在其上固定由试样DNA合成得到的大体积模板DNA进行扩增反应，实现高簇密度和提高簇内扩增片段数。

摘要： 本发明提供新的核酸提取用器具及使用其的核酸提取方法。本发明的核酸提取器具具备管，所述管在其内部依次具备：由第1油构成的第1管芯、由与油相分离的用于清洗结合了核酸的核酸结合性固相载体的第1清洗液构成的第2管芯、由第2油构成的第3管芯、由与油相分离的用于进行逆转录反应的逆转录反应液构成的第4管芯、由第3油构成的第5管芯、由与油相分离的用于使上述核酸从结合了核酸的核酸结合性固相载体溶出的溶出液构成的第6管芯、由第4油构成的第7管芯。

摘要： 本发明提供使核酸电泳的方法，该方法通过简单操作能够高效地浓缩和纯化核酸。电泳方法包括使插入了具有阴离子官能团的嵌入剂的核酸电泳。该方法包括将含有核酸的样品、具有与样品中包含的物质含有的羧基进行脱水缩合反应的官能团的化合物以及脱水缩合反应的缩合剂进行混合；以及使核酸电泳。浓缩和回收核酸的方法通过增加与嵌入剂结合的核酸的负电荷，能够增加核酸的电泳速度。使核酸电泳的方法通过使样品中的物质的羧基进行脱水缩合反应，能够通过电泳稳定地分离核酸和上述物质。

摘要： 一种新的核苷三磷酸衍生物、一种核酸探针和一种能方便并高灵敏度地探测靶核酸的多标记核酸探针，以及一种制备该多标记核酸探针的方法，和一种使用该多标记核酸探针或该核酸探针探测靶核酸的方法。通过使用转谷氨酰胺酶(TGase)，并使用通过共价结合预先引入多个标记部分的多标记核酸探针，或者通过共价结合将多个标记部分引入已与靶核酸杂交的核酸探针中，从而可以方便和高灵敏度地探测靶核酸。