冻干保护剂

摘要： 为探究1株鸡白痢沙门菌噬菌体STP98-a的液体发酵条件及噬菌体发酵液的后处理工艺,本试验在100 mL液体增殖体系下,通过对STP98-a培养时间、噬菌体与宿主菌接种比例及起始宿主菌活菌数进行优化,确定STP98-a的液体发酵工艺;发酵液离心后收集上清液,以0.22μm滤膜过滤后加不同冻干保护剂,以冷冻干燥法制备噬菌体冻干粉,通过测定冻干粉效价,计算噬菌体存活率,确定STP98-a的最优冻干保护剂;并将确定的STP98-a最优发酵工艺及发酵液后处理工艺应用于20 L发酵体系进行验证。结果表明:(1)当噬菌体与宿主菌接种比例0.001,起始宿主菌活菌数10^(9)CFU/mL,37°C、180 r/min发酵2 h时,STP98-a效价最高,达2.00×10^(10)PFU/mL。(2)冻干保护剂筛选结果显示,在复合冻干保护剂(脱脂奶粉20%、海藻糖1%、蔗糖2%)下冻干效果最好,噬菌体STP98-a存活率为86%。(3)在20 L发酵体系下,STP98-a发酵液效价达1.50×10^(11)PFU/mL,冻干粉效价达2.72×10^(11)PFU/g。综上,噬菌体发酵工艺及后处理工艺的确定使发酵罐大批量生产噬菌体这一技术得以实现。

摘要： 大肠埃希菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7,E.coli O157∶H7)作为一种食源性致病菌,其分布广泛、危害性大。为了研制一种基于E.coli O157∶H7的既能实现快速、简单和灵敏检测,又能够实现常温储存及运输的试剂盒,本研究利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)技术,结合真空冷冻干燥技术,研制了保留核酸检测性能、易于常温储存及运输、减少气溶胶污染的E.coli O157∶H7荧光定量冻干检测试剂盒。研制的试剂盒采用冻干技术保留了核酸扩增试剂的检测性能,复水后,在Taq DNA聚合酶的作用下通过循环扩增实时监测荧光信号的积累,实现荧光定量检测,所提出的方法在40 min内可检测到2.1 copies/μL的eaeA基因。该技术为E.coli O157∶H7的检测提供良好的研究基础和技术参考,填补了市场灵敏度高、便于储存的E.coli O157∶H7检测试剂盒的缺乏。

摘要： 目的:研制人心肌肌钙蛋白I-C(cTnI-C)质控物,并评价cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性。方法:使用重组的cTnI-C复合蛋白制备质控品,筛选合适基质和冻干保护剂,获得稳定的cTnI-C质控物。结果:胎牛血清基质更有利于cTnI-C质控物的稳定,添加3%海藻糖可显著提高cTnI-C质控物的热稳定性,质控物瓶间均一性无显著差异(F<2.39),37°C加速条件下可保存14 d,2~8°C贮存有效期为13个月,复溶后在2~8°C下可保存7 d。结论:本研究制备的cTnI-C质控物的免疫反应性、均一性和稳定性良好,可作为cTnI检测系统的校准物和质控物原料,提高临床实验室cTnI检测质量。

摘要： 为制备羊源解淀粉芽孢杆菌fsznc-06菌.剂,采用响应面法,分析优化冻干保护剂配方,从离心条件、保护剂筛选与复配、稳定性检测等方面探究对菌体存活率的影响.结果表明,最佳离心条件为6000 r/min离心10 min,优化后的冻干保护剂配方为丙三醇(3.102 g/100 mL)、蔗糖(2.926 g/100 mL)和葡萄糖(7.096 g/100 mL),在该条件下解淀粉芽孢杆菌存活率达到96.47%,与理论预测值接近.冻干菌剂在4°C条件下贮存稳定性更高,保藏180天后的存活率约为66.30%,说明响应面法可用于优化解淀粉芽孢杆菌冻干保护剂.

摘要： 乳杆菌是目前开发研究较为深入的一类重要的益生菌,是人类肠道中重要的生理菌,在食品应用方面有广阔的市场空间。通过冷冻干燥技术得到高存活率的乳杆菌菌粉是目前研究的热点。冷冻干燥过程中低温、渗透压等不利条件会对乳杆菌造成损伤,使得冻干后的乳杆菌菌粉存活率下降,有效活菌数减少。文章按照乳杆菌菌粉生产工艺流程,从乳杆菌生长培养基优化、胁迫预处理、冷冻保护剂的添加、预冷冻条件优化4个方面对目前关于提高乳杆菌冷冻干燥存活率的研究进行综述。

摘要： 为提高真空冷冻干燥蓝靛果粉的品质,添加单一保护剂(麦芽糊精)和复合保护剂(麦芽糊精/羧甲基纤维素钠、麦芽糊精/海藻酸钠、麦芽糊精/阿拉伯胶、麦芽糊精/β-环状糊精)制备出5种蓝靛果粉,以色泽、出粉率和花色苷含量的综合评分为指标,确定每种复合保护剂的最佳添加量依次为羧甲基纤维素钠2.5%、海藻酸钠1.5%、阿拉伯胶2%、β-环状糊精1%。其中添加2%阿拉伯胶的蓝靛果粉花色苷含量最高((18.09±0.98)mg/g),对2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基的清除能力最强((93.04±0.30)%),添加1%β-环状糊精的蓝靛果粉总多酚和总黄酮含量最高。相比单一保护剂,添加复合保护剂的蓝靛果粉扫描电镜显示为更圆润光滑的球形。蓝靛果冻干粉中的花色苷在胃消化条件下比肠消化条件下稳定,随着体外消化的进行,花色苷含量呈下降趋势,且复配组蓝靛果粉的花色苷保留率均高于只添加麦芽糊精组(D5),其中麦芽糊精/羧甲基纤维素钠组(D1)和麦芽糊精/阿拉伯胶组(D3)中花色苷的保留率更高。

摘要： 为提高干酪乳杆菌LTL1361在真空冷冻干燥过程中的冻干存活率,以脱脂乳为基础保护剂,通过单因素实验以及Plackett-Burman试验确定影响干酪乳杆菌LTL1361冻干存活率的主要因素,基于上述试验结果进行BoxBehnke响应面试验设计构建数据集,并构建人工网络耦联遗传算法(BP-GA)模型对干酪乳杆菌LTL1361的冻干保护剂配方进行深层模拟预测。结果表明:采用单因素及Plackett-Burman试验筛选出主要影响菌株冻干存活率的三个因素为:海藻糖、谷氨酸及甘露醇,并确定将上述三种因素与基础脱脂乳为优化条件开展后续试验。通过构建BP-GA模型进行全局寻优,得到干酪乳杆菌LTL1361的最佳保护剂浓度配比为脱脂乳10.3%、谷氨酸0.8%、海藻糖6.7%和甘露醇4.0%,此时菌株的最高冻干存活率达到89.56%,经过与响应面模型结果比较,发现BPGA模型具有更好的预测性能。利用BP-GA模型,本研究探索出了一种较高冻干存活率的益生菌冻干保护剂配方,并对制备高活性菌株冻干制剂以及商业化直投式发酵剂研发提供参考。

摘要： 【目的】利用响应面分析法优化含活性肽CC34毕赤酵母重组菌的冻干营养保护剂组合配方。【方法】通过单因素试验,筛选脱脂乳粉、海藻糖、山梨醇和谷氨酸钠提高毕赤酵母重组菌存活率的最佳范围;利用Box-Behnken法建立毕赤酵母重组菌存活率回归方程,分析3种保护剂组合对菌体存活率的效应关系。【结果】脱脂乳粉浓度为10%时毕赤酵母重组菌冻干存活率最高,达到51.23%;海藻糖浓度为15%时冻干存活率最高,达到67.50%;山梨醇浓度为20%时冻干存活率最高,达到52.19%;谷氨酸钠浓度为3%时冻干存活率最高,达到36.92%。通过响应面法获得含活性肽CC34毕赤酵母重组菌冻干保护剂组合中脱脂乳粉、海藻糖、山梨醇的浓度分别为10.75%、15.70%、20.19%,通过最优模型预测毕赤酵母重组菌的存活率为77.00%,应用此最优保护剂组合进行冻干试验,菌体冻干存活率为78.98%。【结论】本试验通过响应面法优化了毕赤酵母重组菌复合冻干保护剂配方,在脱脂乳粉浓度为10.75%、海藻糖浓度为15.70%、山梨醇浓度为20.19%条件下,可获得较高的菌体冻干存活率(78.98%)。该复合冻干保护剂可用于含活性肽CC34毕赤酵母重组菌的保存和后续试验研究。

摘要： 本研究以植物乳杆菌BLPS-9为研究对象,对其中试发酵工艺进行优化,采用正交因素对其保护剂配方进行筛选.结果表明:经优化后植物乳杆菌BLPS-9中试发酵液活菌数可达50×108 cfu/mL,确定最佳离心条件10000 r/min、离心10 min活菌数最高,保护剂配方为脱脂奶粉25％、海藻糖7.5％、甘油0.75％;在最适离心条件下采用最佳冻干保护剂进行冷冻干燥,植物乳杆菌BLPS-9存活率可达91.01％,菌粉活菌数为6.0×1011 cfu/g.在4°C和-20°C条件下贮存28 d,活菌数无明显损失.本研究为进一步提高乳酸菌制品的货架期提供了参考.

摘要： 为提高益生菌冻干粉存活率.本文采用真空冷冻干燥法,分别以植物乳杆菌SC1、凝结芽孢杆菌XP2、酿酒酵母菌SAl为实验菌株,研究冻干保护剂脱脂乳粉、低聚木糖、可溶性淀粉和Vc钠盐对三种益生菌冻干存活率的影响.通过单因素和正交试验筛选出最优组合.结果表明经-70 °C预冷冻2 h,-50 °C,10 Pa条件下冷冻干燥38 h,保护剂最佳配方组合分别为,植物乳杆菌:可溶性淀粉10％,VC钠盐3％,脱脂乳粉12％,低聚木糖14％;凝结芽孢杆菌:低聚木糖8％,VC钠盐4％,可溶性淀粉14％,脱脂乳粉8％;酿酒酵母菌:低聚木糖10％,Vc钠盐2％,脱脂乳粉12％,可溶性淀粉12％.添加最优保护剂组合,三株菌的冻干存活率分别为83.2％、83.7％和86.7％,活菌数均高于1.0 × 108 CFU/g,具有较好的应用价值.

摘要： 对于细胞或其他生物组织的冷冻干燥,冻干保护剂溶液的最大冻结浓缩浓度W'g及其对应的玻璃化转变温度T'g和初始溶液化温度T'm是优化冷冻干燥过程的重要参数.通常冻干保护剂溶液是由电解质、糖类、蛋白质、聚合物或其他溶质组成的多元溶液.本文通过假设多元溶液中不同种溶质分子间的相互作用不会影响各个溶质结合或束缚未冻结水的能力,得到多元溶液的最大冻结浓缩浓度W’g与溶质的质量百分数Wi的关系为:W'g=∑Wi/∑[(1+ai)Wi],其中ai(g水/g)表示单位质量溶质最大可结合或束缚的未冻水质量;结合多元溶液的玻璃化转变温度线和平衡冻结线,可分别得到T'g和T'm的计算方程.比较计算值与文献给出的实验测量值,发现上述理论可以较准确的估算多元溶液的T'g和T'm值.

摘要： 人体细胞的冻干保存与低温保存所选择的保护剂有较大的区别.为了建立细胞在冻干操作的预冻阶段的准确物理模型,需要冻干保护剂溶液的液相线信息.为此本文使用冰点渗透压仪和差示扫描量热仪(DSC)测量了海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)、羟乙基淀粉(HES)分别与氯化钠和水组成的三元溶液,BSA、HES分别与海藻糖、氯化钠和水组成的四元溶液的冻结点.根据实验数据拟合了氯化钠、海藻糖、BSA和HES的渗透质量摩尔浓度与冻结点的关系,并采用多项式加和法预测了海藻糖/氯化钠/水三元溶液、海藻糖/BSA(HES)/氯化钠/水四元溶液的液相线.与实验值相比,预测值略偏高,但仍能较好地反映液相线随溶液成分的变化.

摘要： 由20%（w/v）海藻糖+1%牛血清白蛋白（w/v）+缓冲液组成的冻干保护剂溶液在人血小板冷冻干燥中具有良好效果。本文利用自制的冷冻干燥装置，实验研究了该溶液的一次干燥过程，在预冻冷却速率10°C/min、真空度10Pa条件下，根据试验数据拟合得到水蒸气在干燥区的有效水蒸气扩散系数为1.27×10-3m2/s，。建立了瓶装溶液样品一次干燥过程的传热传质模型，并进行了数值求解，计算结果与实验结果符合较好。模拟分析表明，随着样品容量的增加，干燥区水蒸气传质阻力增大，一次干燥进程明显减慢。

摘要： 采用不同高压灭菌条件处理的不同比例的脱脂奶粉、蔗糖、海藻糖以及维生素C组成的保护剂配方对鸡基因工程复合抗病毒制剂进行冻干，冻干后通过外观检查、pH值检测、复水性检测及效价测定比较筛选出了理想的冻干保护剂，之后将普通水剂型和冻干型鸡基因工程复合抗病毒制剂分别置于4°C、-20°C、-70°C条件下进行保存期试验，结果表明采用脱脂奶粉+蔗糖、脱脂奶粉+蔗糖+海藻糖+维生素C两种配方对鸡基因工程复合抗病毒制剂的保护效果最好，冻干后效价仍为220，普通水剂和冻干型鸡基因工程复合抗病毒制剂在-70°C保存条件下保存360天内效价均未降低，普通水剂分别于90d、180d后效价开始明显下降，而冻干型鸡基因工程复合抗病毒制剂的效价均无明显降低，稳定性良好。本研究初步筛选出了鸡基因工程抗病毒制剂的冻干配方，显著延长了其保存期，为鸡基因工程抗病毒制剂规模化生产和推广应用奠定了基础。

摘要： 采用动态热分析仪(DMA),研究了冻干保护剂种类、浓度以及预冻结速率对冻干猪关节软骨杨氏模量的影响.结果表明:1)在中、低浓度范围内(小于40％v/v),样品的杨氏模量随着冻干保护剂浓度的增大而增大,在高浓度范围内(大于40％v/v)随着冻干保护剂浓度的增大而减小；2)样品经过中低浓度冻干保护剂处理慢速预冻结速率(1°C/min)对冻干关节软骨的杨氏模量的保护效果最好,而样品经过高浓度冻干保护剂处理快速(20°C/min)预冻结速率对冻干关节软骨的杨氏模量的保护效果最好；3)在一定浓度范围内(即大于30％ v/v小于60％v/v)相同浓度下样品经DMSO处理的杨氏模量最大,甘油次之,丙二醇的最小,这是由3种保护剂官能团的水合作用所决定的.

摘要： 为了使重组猪α干扰素(rPoIFN-α)制品更好地应用于生产实践之中，本文采用保守的冻干工艺重点对rPoIFN-α制品的冻干保护剂进行筛选。通过外观检测、水分含量、活性检测对十四种冻干保护剂进行了比较和筛选。研究结果表明终浓度2%、4%和5%的甘露醇的保护效果较好，活性保持率分别为102.8%，95.1%，108.3%。然后将活性好的这三个配方再冻干三批制品进行放置40°C加速稳定性实验。结果表明，在40°C放置三个月后，三个保护剂制品效价基本没变化，稳定性良好，有效期暂定为两年。本研究初步探索了rPoIFN-α的冻干配方，为rPoIFN-α的产业化打下基础。

摘要： 冷冻干燥是长期、有效保存细胞的手段之一.本文以肝癌细胞Hep-G2为研究对象,选取了不同体积分数的Me2SO、丙三醇及不同质量浓度的PVP、复方保护剂进行冷冻干燥保存,通过检测细胞回收率、存活率和24h贴壁率筛选出最佳保护剂配方.结果表明:添加40％PVP(w/v)+10％甘油(v/v)+15％FBS(v/v)+20％海藻糖(w/v)保护剂的细胞,在复水后回收率、存活率和24h贴壁率分别为29.58％、42.18％和18.71％,与对照组相比三项指标均得到有效提高,该种保护剂的效果最佳.

摘要： 目的:将无明胶无人血白蛋白保护剂应用于病毒类疫苗的冻干。方法:以麻疹疫苗为例,将无明胶无人血白蛋白保护剂用于冻干,制备3批疫苗。按《中国药典》三部(2O1O年版)要求对疫苗原液、半成品、成品进行检定;分别将制备的疫苗于2～8°C放置3、6和9个月,检测疫苗外观、病毒滴度及水分的变化,于37°C放置l、2、3周,检测病毒滴度的变化。结果:应用无明胶无人血白蛋白保护剂制备的疫苗原液、半成品及成品的各项检定指标均符合《中国药典》三部(2O1O版)要求;无明胶无人血白蛋白保护剂麻疹疫苗成品于2～8°C放置9个月的外观、病毒滴度和水分及37°C放置3周的病毒滴度均符合《中国药典》三部(2O1O年版)的要求。结论:无明胶无人血白蛋白保护剂可以应用于病毒类疫苗的冻干。

摘要： 冷冻干燥保存技术为血小板的长期保存提供了一种有效的解决办法.在冷冻干燥中,提高一次干燥温度可有效缩短冻干操作时间,减少能量消耗,提高生产效率.为此,本文尝试选用部分玻璃化转变温度较高的聚合物羟乙基淀粉(HES)作为冻干保护剂成分,结合海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)对人血小板进行了冷冻干燥的实验研究.DSC检测表明,羟乙基淀粉的加入可以提高保护剂溶液的玻璃化转变温度.在试验的六组配方中,以10％(wt/wt)海藻糖+3％(wt/wt)HES+1％(wt/wt)BSA相对较好,其溶液的玻璃化转变温度为-30.6±0.1°C,采用它冻干血小板复水后的数值恢复率达到85％以上,非活化率达到80％以上,但各试验组都存在复水后血小板细胞平均体积偏大、聚集效果不佳的问题.

摘要： 本研究对两歧双歧杆菌的四种发酵培养基进行了筛选,确定了适合两歧双歧杆菌BB-G90生长的发酵培养基;研究了五种冻干保护剂对两歧双歧杆菌BB-G90活菌的影响;利用筛选的最优发酵培养基培养两歧双歧杆菌BB-G90,在调控pH=5.0±0.5条件下进行300L罐中试发酵试验,确定了两歧双歧杆菌BB-G90的发酵参数及冻干保护剂配方等生产工艺.试验结果表明:两歧双歧杆菌BB-G90最适发酵培养基为M3培养基,最优冻干保护剂配方为B3;在调控pH=5.0±0.5条件下发酵终止时间为22h,此时,发酵液OD600值为5.62,发酵液活菌数为1.80×109cfu/ml.发酵液经离心、乳化及冻干后,菌粉活菌数为4.10×1011cfu/g.

摘要： 本发明提供一种冻干保护剂、荧光PCR检测试剂盒及其冻干工艺，其中，冻干保护剂用于荧光PCR试剂的冻干，冻干保护剂包括以下组分：海藻糖、羟乙基淀粉和吐温20。本发明的冻干保护剂通过采用海藻糖、羟乙基淀粉和吐温20，在冻干过程中既维持了蛋白质的活性构象、具有适合的玻璃化温度，又在冻结和脱水过程对蛋白质起到很好的保护作用，并且不会对PCR反应产生抑制作用。该冻干保护剂可以应用于不同厂商的荧光PCR试剂的冻干，产品的通用性强，对荧光PCR试剂性能无抑制作用。

摘要： 本发明公开了一种冻干保护剂及其在冻干青春双歧杆菌中的应用，属于微生物技术领域。本发明提供了一种可显著提高青春双歧杆菌冻干存活率的冻干保护剂，此冻干保护剂的成分包含山梨糖醇、棉子糖和乳清蛋白；使用此冻干保护剂制备青春双歧杆菌冻干粉时，青春双歧杆菌的冻干存活率高达97.43±4.98％。

摘要： 本发明公开了一种冻干保护剂及其在冻干罗伊氏乳杆菌中的应用，属于微生物技术领域。本发明提供了一种可显著提高罗伊氏乳杆菌冻干存活率的冻干保护剂，此冻干保护剂的成分包含水苏糖、酪蛋白酸钠、甘氨酸和硫酸钠；使用此冻干保护剂制备罗伊氏乳杆菌冻干粉时，罗伊氏乳杆菌的冻干存活率高达100％。

摘要： 本发明适用于生物技术诊断检测领域，提供了一种冻干保护剂、PCR扩增试剂及其冻干方法和应用，该PCR扩增试剂包括扩增反应体系和冻干保护剂；其中，冻干保护剂包括如下组分：甘油、海藻糖、蔗糖、吐温‑80、右旋糖酐‑40、甘氨酸、组氨酸、谷氨酸钠、抑菌剂、叔丁醇。本发明提供的冻干保护剂，可与荧光PCR需要用到的组分制备在一起，也可搭配任意PCR检测所需引物和探针，并进行冻干以制得PCR扩增试剂；该PCR扩增试剂不仅能够实现常温运输及保存，且在使用时只需用ddH2O溶解，然后加入样本核酸即可，具有操作方便的优点。

摘要： 本发明公开了一种LAMP冻干微球的冻干保护剂、LAMP冻干微球及其制备方法。LAMP冻干微球的冻干保护剂含有海藻糖、β‑环糊精、甘露醇和甘油。其能最大限度地减少冻干LAMP试剂在制备、分装等过程中对其活性成分的损伤，保持其活性不降低、不易吸潮并具有良好的复溶性；同时不影响对LAMP体系的灵敏度、精密性等性能；显著延长LAMP试剂的有效期，制备得到的冻干试剂能在室温条件下放置至少1年，无需冷冻保存和干冰运输。制备得到的冻干微球的结构稳定，复溶性好。还可以实现一管冻干，使用者无需临时配制反应体系，不仅操作简便，还消除了人为操作对结果导致的误差。

摘要： 本发明公开了一种适用于核酸检测试剂盒冻干的冻干保护剂及其冻干方法，通过本发明提供的冻干工艺可以将各种液体核酸检测试剂盒制备成冻干制剂，使其可以完全摆脱冷链运输的限制，便于常温长途运输和常温长期储存，为各种液体核酸检测试剂盒提供了稳定的保存方法。冻干制剂具有稳定性高、使用方便的特点，冻干制剂含水量低，延长了核酸检测试剂的保质期。在本发明中对冻干所需的保护剂进行了优化，使冻干后的成品制剂性能更加稳定。

摘要： 本发明公开了一种冻干保护剂、用其制备普洱茶用直投式冻干菌剂的方法与应用,该冻干保护剂在制备普洱茶发酵用直投式冻干菌剂中使用，包括质量百分含量为5‑15wt％生茶汤、0.5‑10wt％蔗糖和余量的水；优选质量百分含量为8％‑12％生茶汤、4‑8％蔗糖和余量的水；更优选质量百分含量为10wt％生茶汤、6wt％蔗糖和余量的水。用本发明的冻干保护剂和方法制备得到的菌剂活菌含量高，存活率高，作为发酵剂时接种量小，能直接使用，避免了繁冗的扩大培养过程，既节约劳动力，缩短生产周期，又可有效地防止菌种在逐级扩培过程中污染及退化，保存管理方便，产品品质稳定，经简单复水处理后可直接作为种子菌株发酵普洱茶使用。

摘要： 本发明公开了一种冻干保护剂、用其制备普洱茶用直投式冻干菌剂的方法与应用，该冻干保护剂，在制备普洱茶发酵用直投式冻干菌剂中使用，包括质量百分含量为5‑15wt％生茶汤、0.5‑10wt％蔗糖和余量的水；优选质量百分含量为8％‑12％生茶汤、4‑8％蔗糖和余量的水；更优选质量百分含量为10wt％生茶汤、6wt％蔗糖和余量的水。用本发明的冻干保护剂和方法制备得到的菌剂活菌含量高，存活率高，作为发酵剂时接种量小，能直接使用，避免了繁冗的扩大培养过程，既节约劳动力，缩短生产周期，又可有效地防止菌种在逐级扩培过程中污染及退化，保存管理方便，产品品质稳定，经简单复水处理后可直接作为种子菌株发酵普洱茶使用。

摘要： 本发明公开了荧光PCR试剂冻干保护剂、冻干方法及应用，按质量百分含量计，所述冻干保护剂包括：海藻糖5‑15％，羟丙基‑β‑环糊精1‑10％，葡聚糖40 0.5‑5％，余量为水。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明所述荧光PCR试剂冻干保护剂不仅能够对荧光PCR试剂的冻干过程起到保护的作用，而且添加的保护剂成分简单，不影响荧光PCR的扩增反应；(2)所述冻干保护剂冻干后冻干球外观成型完整，冻干前后试剂性能变化小，冻干球稳定性好；(3)所述冻干保护剂简化了冷冻干燥程序，适应性较强，本冻干保护剂可适用于无甘油或低甘油含量的酶反应体系。

摘要： 本发明提供一种冻干保护剂、荧光PCR检测试剂盒及其冻干工艺，其中，冻干保护剂用于荧光PCR试剂的冻干，冻干保护剂包括以下组分：海藻糖、羟乙基淀粉和吐温20。本发明的冻干保护剂通过采用海藻糖、羟乙基淀粉和吐温20，在冻干过程中既维持了蛋白质的活性构象、具有适合的玻璃化温度，又在冻结和脱水过程对蛋白质起到很好的保护作用，并且不会对PCR反应产生抑制作用。该冻干保护剂可以应用于不同厂商的荧光PCR试剂的冻干，产品的通用性强，对荧光PCR试剂性能无抑制作用。