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Western blotting

Western blotting的相关文献在1999年到2022年内共计217篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、分子生物学、基础医学 等领域,其中期刊论文214篇、会议论文3篇、相关期刊132种,包括激光生物学报、生物工程学报、生物技术通报等; 相关会议3种,包括中国蚕学会第六届青年学术研讨会、第四届全国创伤外科学术研讨会、浙江省农业科学院第十二届青年学术论文报告会等;Western blotting的相关文献由1006位作者贡献,包括刘志刚、王冬梅、刘祥等。

Western blotting—发文量

期刊论文>

论文:214 占比:98.62%

会议论文>

论文:3 占比:1.38%

总计:217篇

Western blotting—发文趋势图

Western blotting

-研究学者

  • 刘志刚
  • 王冬梅
  • 刘祥
  • 张杰
  • 俱雄
  • 倪志勇
  • 刘宇
  • 刘欣
  • 吕建祎
  • 孙天杰
  • 期刊论文
  • 会议论文

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排序:

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作者

    • Ishrat Parveiz Bhat; Tahseen Bilal Rather; Irfan Maqbool; Gowhar Rashid; Kulsum Akhtar; Gulzar A Bhat; Fazl Q Parray; Besina Syed; Ishrat Younas Khan; Mohsin Kazi; Muhammad D Hussain; Mudassar Syed
    • 摘要: BACKGROUND Connective tissue growth factor(CTGF)is a mediator of transforming growth factor-beta signaling and plays a key role in connective tissue remodeling,inflammatory processes and fibrosis in various illnesses including cancer.AIM To investigate the role of CTGF in colorectal cancer(CRC)progression and to compare the CTGF expression with different clinicopathological parameters.METHODS Real-time polymerase chain reaction,immunohistochemistry and Western blotting was performed to evaluate the CTGF expression and the results were statistically analyzed against the clinicopathological variables of patient data using STATA software version 16.RESULTS CTGF expression levels in tumor specimens were significantly higher than their paired normal specimens.The higher protein expression levels showed a significant association with smoking,staging,tumor grade,invasion depth,necrosis of tumor tissue,and both lymphovascular and perineural invasion.As per the cox regression model and classification tree analysis,tumor-nodemetastasis stage and perineural invasion were important predictors for CTGF expression and prognosis of CRC patients.Survival analysis indicated that CTGF overexpression was associated with poorer overall and disease-free survival.CONCLUSION Expression of CTGF was increased in CRC and was linked with poor overall and disease-free survival of CRC patients.These findings support prior observations and thus CTGF may be a possible prognostic marker in CRC.
    • 刘力源; 徐雁龙
    • 摘要: 目的明确己糖激酶-3(HK3)在乳头状肾细胞癌中的表达水平,探讨其与乳头状肾细胞癌患者的临床病理特征的相关性及对预后的影响。方法通过TCGA数据库及Western blotting法检测HK3在乳头状肾细胞癌组织及癌旁组织中转录水平以及蛋白水平的表达差异。采用χ2检验分析HK3蛋白的表达情况及其与临床病理特征之间的关系;采用Kaplan-Meier法及log-rank检验绘制生存曲线并比较生存差异,分析HK3蛋白表达与无病生存期(DFS)和总体生存期(OS)的关系。结果HK3在乳头状肾细胞癌组织中表达上调,差异有统计学意义(P0.05);高表达的HK3与乳头状肾细胞癌患者的DFS及OS有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳头状肾细胞癌组织中HK3的表达明显高于癌旁组织。HK3的高表达常提示患者的不良预后,筛查HK3的表达量对患者的临床治疗及预后具有一定的参考意义。
    • 王利娜; 马俊骥; 姜慧卿
    • 摘要: 目的探讨实验性肝硬化大鼠肾脏病理组织学改变及其血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在大鼠肾组织中的表达变化。方法通过胆总管结扎术(common bile duct ligation,CBDL)建立胆汁性肝硬化大鼠模型。将30只SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、CBDL术后2周组和CBDL术后5周组。观察实验大鼠肝脏、肾脏组织病理学改变,测定肝硬化大鼠内生肌酐清除率(creatinine clearance rate,CCR)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。应用TUNEL法检测肝硬化大鼠肾组织细胞的凋亡率,免疫组化和Western blotting检测HO-1在肝硬化大鼠肾组织细胞中的表达。结果CBDL大鼠模型2周时肝脏出现纤维化,5周时形成肝硬化。5周时,光镜下肾小管上皮细胞坏死脱落;电镜下示足突细胞广泛融合,细胞数减少,肾间质系膜区变宽,毛细血管基底膜不规则增厚。CBDL大鼠在2周和5周时CCR逐渐降低(P<0.05),肾组织MDA含量升高(P<0.01)。实验大鼠肾组织细胞凋亡率于5周时达到高峰,肾组织细胞HO-1阳性表达率则最低,与2周时比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Person相关分析显示,实验大鼠肾组织MDA与凋亡率呈正相关,肾组织HO-1表达与细胞凋亡率呈负相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胆汁性肝硬化大鼠肾脏存在病理组织学改变,HO-1参与了大鼠肾组织损伤的病理生理过程。
    • 韦悠; 谢芝勋; 邓显文; 李小凤; 谢志勤; 范晴; 张艳芳; 黄娇玲; 王盛
    • 摘要: 【目的】获得截短表达的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2重组蛋白及其单克隆抗体,为建立快速灵敏的病毒检测方法提供基础材料。【方法】对Fiber-2基因序列进行密码子优化,截取Fiber-2蛋白抗原性集中片段,PCR扩增其基因序列,连接至pET-32a(+)构建原核表达载体。将表达的重组蛋白进行纯化,并通过Western blotting验证其在大肠杆菌中的表达情况。将重组蛋白免疫BALB/c小鼠后取脾细胞与SP2/0细胞融合,利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选阳性细胞株,再利用秋水仙素裂解法、间接ELISA法和间接免疫荧光法(IFA)对其进行鉴定。【结果】成功构建Fiber-2基因截短片段的原核表达系统,获得大小约为67 kD的Fiber-2截短蛋白,以包涵体的形式出现,经纯化后可获得单一的特异性条带,经Western blotting鉴定证明其可与FAdV-4阳性血清结合从而产生一条特异性条带。经过4次亚克隆后筛选到5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株(2C2、4F6、5A5、6G10和10B5),其抗体分泌稳定性、特异性好,诱生的细胞上清液抗体效价为1:1600~1:6400,腹水抗体效价为1:320000~1:1280000,秋水仙素裂解检测染色体数目为94~110条。2C2、4F6和10B5杂交瘤细胞分泌的抗体重链为IgG2b亚型,轻链为Kappa链;5A5和6G10杂交瘤细胞分泌的抗体重链为IgG1亚型,轻链为Kappa链。5株杂交瘤细胞株与感染FAdV-4的鸡肝癌上皮细胞系(LMH)进行IFA检测,结果均为阳性。【结论】制备的Fiber-2截短重组蛋白及单克隆抗体具有良好的反应原性和特异性,可用于FAdV-4病毒检测试剂盒研发。
    • Lifei Liang; Haiyan Wang; Minzhen Wu
    • 摘要: Objective: To understand the infection of HTLV among voluntary blood donors in Wuzhou City, and to provide reference for the national health administrative department to formulate blood safety screening strategies. Methods: The HTLV double-antigen sandwich ELISA reagent was used to screen the blood samples of unpaid blood donors, and the reactive samples in the initial screening were subjected to a double-well retest;Specimens that were still reactive in the retest were further confirmed by viral nucleic acid amplification test (PCR) and western blotting (WB). Results: A total of 9 of 20,222 unpaid blood donation samples were screened to be reactive, and the screening response rate was 0.04%;Two samples of HTLV-1 nucleic acid and western blotting (WB) were confirmed to be positive, and the other seven samples were negative;The confirmed positive rate was 0.01%. Conclusion: There was a certain positive rate of HTLV-1 serological screening among the non remunerated blood donors in Wuzhou City, and the confirmation test confirmed that there was a certain risk of HTLV infection;In order to further understand the HTLV infection of blood donors in this city, we should further increase the number of screening samples, so as to obtain more reliable and accurate data in this region, and provide data and reference for the health administration department to formulate HTLV screening strategies for blood donors.
    • 高泽川; 王萌; 秦玉洁; 赵凌; 潘阳阳; 何翃闳; 刘敏清; 杨姗姗; 赵天; 崔燕; 余四九
    • 摘要: [目的]探究透明质酸合成酶2(hyaluronate synthase 2,HAS2)和前列腺素内过氧化物合酶2(prosta-glandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)在牦牛不同时期卵巢中的定位与表达情况,为进一步提高耗牛生育能力提供理论依据.[方法]采集临床健康牦牛不同时期(卵泡期、黄体期、妊娠期)的卵巢作为试验样品,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting方法检测牦牛不同时期卵巢中HAS2、PTGS2基因水平和蛋白水平的表达量,采用免疫组化(IHC)法检测HAS2和PTGS2在牦牛不同时期卵巢中的分布情况.[结果]HAS2基因在耗牛黄体期卵巢的表达量显著高于卵泡期和妊娠期(P<0.05),在卵泡期卵巢的表达量显著高于妊娠期(P<0.05);PTTGS2基因在黄体期卵巢的表达量显著高于其他2个时期(P<0.05),在卵泡期卵巢的表达量显著高于妊娠期(P<0.05).HAS2蛋白在耗牛3个时期卵巢中均有表达,其中在黄体期卵巢的表达量显著高于其他2个时期(P<0.05),且妊娠期卵巢的表达量显著高于卵泡期(P<0.05);PTGS2蛋白在黄体期卵巢的表达量显著高于其他2个时期(P<0.05),且卵泡期卵巢的表达量显著高于妊娠期(P<0.05).IHC试验表明,HAS2和PTGS2蛋白在耗牛卵巢黄体细胞中表达量最高,在卵泡颗粒层和卵丘细胞中也有表达.[结论]HAS2和PTGS2在牦牛不同时期卵巢中的表达具有显著差异性,推测HAS2和PTGS2可能参与牦牛生殖生理过程的调控.
    • 杜金梁; 曹丽萍; 贾睿; 顾郑琰; 何勤; 徐跑; JENEY Galina; 马玉忠; 殷国俊
    • 摘要: 为了研究甘草总黄酮对高脂饲料造成的罗非鱼(Oreochromis niloticus)脂肪肝损伤是否具有保护作用,随机将180尾健康无伤罗非鱼分成6组,即对照组、高脂饲料模型组和4个不同浓度甘草总黄酮组(0.05、0.10、0.50、1.00 g·kg-1甘草总黄酮),每组30尾.饲喂90 d后,采集罗非鱼各实验组肝,测定肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)活性、丙二醛(MDA)含量、甘油三酯(TG)含量、总胆固醇(TC)含量、总抗氧化能力(T-AOC)水平,Western blotting法检测肝中核转录因子-κB P65(NF-κB P65)和核转录因子-κB C-Rel(NF-κB C-Rel)蛋白表达水平,RT-PCR法测定肝中微粒体甘油三酸酯转移蛋白(MT-TP)和载脂蛋白B100(ApoB100)基因表达情况.结果表明:与对照组相比,高脂饲料模型组罗非鱼肝匀浆中TG、TC、MDA含量极显著(P<0.01)升高,GSH活性、SOD活性、T-AOC水平均极显著(P<0.01)降低;MTTP和ApoB100 mRNA表达水平降低(P<0.01或P<0.05);Western blotting结果显示,NF-κB P 65和C-Rel蛋白表达水平升高.饲料中加入甘草总黄酮后,与高脂饲料模型组相比,罗非鱼肝中GSH活性、SOD活性、T-AOC水平不同程度提高,TC、TG、MDA含量和NF-κB P65、C-Rel蛋白表达水平不同程度降低,MTTP和ApoB100的mRNA表达水平升高,以0.50 g·kg-1甘草总黄酮组效果较好.说明甘草总黄酮对于罗非鱼脂肪肝损伤具有一定的保护作用,可以缓解高脂饲料造成的脂肪肝损伤.
    • 邓培渊; 王林青; 袁洪哲; 李长看
    • 摘要: 为阐明甜菜夜蛾Spodoptera exigua化学感受蛋白识别外源化合物的特性和作用机制,运用Western blot-ting法分析SexiCSP2蛋白在成虫各组织的表达谱,荧光竞争结合试验法测定SexiCSP2蛋白与25种外源配基的结合特性,运用分子对接、分子动力学、结合自由能计算等方法研究SexiCSP2与配基的结合模式.结果 显示SexiCSP2在成虫接触和非接触性器官中均有表达,与己醛结合能力最强,解离常数为1.3 μmol/L;分子模拟结果显示SexiCSP2与己醛结合形成1个氢键,两者结合自由能为-32.94 kJ/mol,主要驱动力为范德华力,主要抑制力为非极性溶剂化能.这些结果说明SexiCSP2在甜菜夜蛾识别外源化合物中起重要作用,可以作为防控甜菜夜蛾的有效靶标.
    • 范会芬; 孙天杰; 苏伟华; 肖付明; 张洁; 王冬梅
    • 摘要: 为阐明GmWRKY50转录因子在大豆与大豆花叶病毒(SMV)互作过程中的作用机制,以大豆叶片的RNA为模板,利用PCR技术克隆了GmWRKY50基因的编码区全长,利用MEGA 7.0软件对不同物种中GmWRKY50的相似氨基酸序列进行比对并进行系统进化树分析,通过原核表达技术,构建pColdⅡ-GmWRKY50重组质粒,转化大肠杆菌BL21后,利用IPTG对带有His标签的GmWRKY50重组蛋白进行诱导,经Ni-NTA柱对重组蛋白进行纯化,收集纯化后的重组蛋白进行多克隆抗体的制备,通过Western Blotting检测GmWRKY50在SMV侵染前后的表达水平变化.结果表明,GmWRKY50基因的CDS全长为495 bp,编码165个氨基酸,在N端含有一个WRKY结构域,属于WRKY DNA-binding结构域蛋白.序列比对及系统进化树分析表明,大豆GmWRKY50与拟南芥AtWRKY50同源关系最近;IPTG浓度为0.5 mmol/L,诱导时间为4 h,重组蛋白的诱导效果良好,利用镍离子亲和纯化获得与His蛋白标签融合的目的蛋白,具有较高的可溶性.以融合蛋白为抗原制备的多克隆抗体可以特异性结合GmWRKY50蛋白,GmWRKY50蛋白在不亲和组合中受SMV侵染诱导而上调表达,为进一步研究转录因子GmWRKY50在大豆抵御SMV侵染过程中的功能奠定了基础.
    • 李浩; 汪敏; 张敬敬; 顾佳; 王冬梅
    • 摘要: 为了深入探究钙依赖蛋白激酶(Calcium dependent protein kinase,CDPK)在小麦与叶锈菌互作过程中的功能机制,本试验结合叶锈菌生理小种260侵染小麦品种TcLr26后的RNA-seq数据和NCBI基因组数据筛选得到抗病相关基因TaCDPK6,并对TaCDPK6进行了蛋白质理化性质分析;利用RT-qPCR和Western blotting技术检测TaCDPK6基因及其表达蛋白在小麦与叶锈菌互作过程中的表达模式.结果表明,TaCDPK6蛋白分子大小为57 kD,理论等电点为7.61,为亲水性蛋白质;在小麦叶片接种叶锈菌后,随着接种时间的延长,目的基因及蛋白呈先上升后下降的表达趋势,并且在4~8 h表达量达到最高,与RNA-seq数据分析得到的表达趋势基本一致.结果表明TaCDPK6在小麦抵抗叶锈菌的基础防御反应中可能发挥正调控作用.
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