SDS-PAGE

摘要： 为探究产蛋白酶乳酸菌在风干牛肉发酵过程中对肌原纤维蛋白的影响。以牛肉为研究对象,分别接种乳酸乳球菌(S-1)、格氏乳球菌(S-2)、戊糖片球菌(S-3)制备风干牛肉,以不添加发酵剂的样品为对照组(CK),采用理化分析和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)技术检测风干牛肉发酵过程中肌原纤维蛋白降解情况。结果表明,在发酵和贮藏阶段,非蛋白氮、氨基酸态氮、TCA-可溶性肽含量随着发酵时间延长而逐渐升高,且接种组显著高于对照组(P0.05)。S-1组和S-2组样品中总游离氨基酸的含量显著增加(P<0.05),SDS-PAGE结果显示接种组中蛋白质降解程度明显高于对照组。在风干牛肉的制作过程中,接种产蛋白酶乳酸菌可以明显提高蛋白质的降解程度,三株乳酸菌中S-1组对蛋白质的降解作用最明显。

摘要： 为探讨不同解冻方式对羊肉脂质及蛋白质氧化的影响,以哈萨克羊半膜肌及背最长肌为研究对象,测定其脂质、蛋白质氧化指标,结合SDS-PAGE观察不同部位肌肉蛋白质降解情况。结果表明:冷藏解冻后羊半膜肌及背最长肌过氧化值为3.33、4.58 mmol·kg^(-1),丙二醛质量比为0.16、0.24 mg·100 g^(-1),羰基质量摩尔浓度为3.59、4.62 nmol·mg^(-1),巯基质量摩尔浓度为41.26、38.73 nmol·mg^(-1),疏水键质量为64.72、75.25μg;静水解冻后2种肌肉过氧化值为4.91、5.79 mmol·kg^(-1),巯基质量摩尔浓度为38.40、33.40 nmol·mg^(-1)、全蛋白溶解度为184.50、171.90 mg·g^(-1),肌浆蛋白溶解度为69.07、60.77 mg·g^(-1),肌原蛋白溶解度为115.43、111.13 mg·g^(-1);而空气解冻后2种肌肉的过氧化值为7.00、7.71 mmol·kg^(-1),丙二醛质量比为0.33、0.44 mg·100 g^(-1),羰基质量摩尔浓度为13.19、14.06 nmol·mg^(-1),巯基质量摩尔浓度为17.46、12.56 nmol·mg^(-1),疏水键质量为75.20、82.47μg。5种解冻方式羊肉氧化程度由低至高依次为冷藏解冻、静水解冻、超声波解冻、微波解冻、空气解冻(P<0.05)。SDS-PAGE结果表明:羊肉经冻结-解冻后蛋白质均存在不同程度的降解,超声波解冻对背最长肌蛋白质降解影响较大。研究表明:冷藏解冻及静水解冻后羊肉氧化程度较低,具有较好的品质,更适于冻结羊肉的解冻。

摘要： 本试验旨在比较鸡体内小肠液(ESIF)和模拟小肠液(SSIF)对饲料蛋白质进行仿生消化后残渣中蛋白质分解产物片段分布的差异。采用两样本比较试验设计,其中小肠液分别为ESIF和SSIF,以豆粕、棉籽粕、菜籽粕、玉米蛋白粉和酪蛋白为蛋白质饲料原料的代表性底物。在单胃动物仿生消化系统中,以2种小肠液对每个饲料原料进行仿生消化,每个处理5个重复,每个重复1根消化管。以生理盐水提取残渣的蛋白质,然后进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,使用GS-900成像系统搭配Image Lab进行蛋白质分子量分布计算及采用Quantity One软件进行相似性分析。结果表明:ESIF和SSIF对豆粕、棉籽粕、菜籽粕、玉米蛋白粉和酪蛋白的消化残渣蛋白质分子量分布的相似性分别为69.9%、30.8%、90.1%、77.7%和74.2%(P<0.01)。ESIF消化残渣在13~74 ku低分子量蛋白质的分布上显著高于SSIF(P<0.05),而在104~132 ku高分子量蛋白质的分布上显著低于SSIF(P<0.05),这一差异在棉籽粕上更加明显。由此可见,ESIF与SSIF水解饲料后残渣中蛋白质分子量分布的相似性因饲料来源的不同而呈现较大的差异;ESIF水解饲料后残渣中分子量相对低的蛋白质占比高,而SSIF水解残渣中分子量相对高的蛋白质占比高。

摘要： 以沁州黄小米和阳曲县小米两种山西优质小米资源为原料,分析比较两种小米的营养成分含量。采用超声波辅助法优化小米全蛋白提取工艺。结果表明,沁州黄小米在蛋白质、脂肪、淀粉含量等方面优于阳曲县小米。通过超声波辅助提取小米全蛋白的最佳工艺条件为:料液比1∶20,pH为8.0,超声40 s。

摘要： 研究不同pH和离子强度对荞麦蛋白溶解特性和乳化特性的影响,同时采用SDS-PAGE电泳分析了不同条件下荞麦蛋白的亚基组分分布.结果表明,荞麦蛋白溶解度在等电点两侧逐渐呈上升趋势,离子强度对于荞麦蛋白的溶解度影响不大;碱性条件下荞麦蛋白的乳化活性及乳化稳定性优于酸性条件.SDS-PAGE结果显示,荞麦蛋白中的部分亚基含有二硫键,而且不同pH和离子强度条件下荞麦蛋白亚基的组成有较大差异.

摘要： 利用转谷氨酰胺酶(TG)催化大豆分离蛋白(SPI)进行交联,探讨不同温度、pH和盐离子条件下改性前后大豆分离蛋白的溶解性,并利用SDS-PAGE电泳技术对改性后的大豆分离蛋白组分进行了亚基分析,旨在为改性大豆分离蛋白在食品中的应用提供一定的参考.结果显示,与SPI相比,经TG酶改性后的大豆分离蛋白(MSPI)在不同处理条件下的溶解性均有明显下降;SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,在不同温度下,14.4～22.0 ku的B-11S亚基不容易形成沉淀;在不同pH条件下,等电点附近沉淀的亚基数量最多而上清液中几乎没有,这与等电点附近溶解性的变化规律相符;在不同盐离子浓度下,MSPI溶液中的亚基种类未发生变化.

摘要： 为了更好地了解市售椰浆中椰子蛋白质量状况,本研究以市售的10种椰浆为样品,采用反向高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)及十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium laurylsulfonate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对提取蛋白进行分析,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization tandem time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF/TOF-MS)对蛋白进行鉴定.结果表明:椰浆RP-HPLC约在10.4 min和11.9 min分别出现1个色谱峰,大多数样品峰面积大小都与蛋白标签含量一致,SDS-PAGE条带数量和颜色的深浅与RP-HPLC得到的峰面积结果一致,个别样品标签含量高,SDS-PAGE能分离出的蛋白条带数量也较多,但RP-HPLC的椰子蛋白峰面积小,经MALDI-TOF/TOF-MS鉴定,部分条带没有鉴定出椰子有关的肽段或蛋白.研究结果为椰浆蛋白的食品安全与质量控制提供了方法参考和示范.

摘要： 目的:分析酸枣仁、牛蒡子、王不留行、决明子、牵牛子五种药材炒制前后蛋白质成分的变化,为探索子类中药“逢子必炒”炮制机制奠定基础。方法:采用裂解液提取总蛋白进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较酸枣仁、牛蒡子、王不留行、决明子、牵牛子炒制前后电泳图谱异同。结果:酸枣仁、牛蒡子、王不留行、决明子、牵牛子炒制前后蛋白质电泳图谱差异明显。结论:经炒制后,上述种子类中药的蛋白质组分发生共性的变化。

摘要： 为了探讨CdCl2对犬肾上皮(MDCK)细胞的毒性作用,以终浓度为15、25、50、75和100 μmol·L-1的CdCl2处理MDCK细胞,每隔24 h观察细胞形态变化,SDS-PAGE检测细胞蛋白质合成情况,MTT法检测细胞存活率.结果显示:当CdCl2浓度大于15 μmol·L-1时,MDCK细胞的生长受到抑制,细胞贴壁状况变差,细胞变圆,存活率降低,总蛋白质含量减少;CdCl2浓度越高、处理时间越长,细胞受到的抑制作用越明显.

摘要： 彩色蛋白凝胶试剂盒是一种用于蛋白SDS-PAGE电泳的凝胶试剂盒,其上层浓缩胶可为肉眼可见的红、黄、绿、紫.市面上常见的SDS-PAGE蛋白凝胶浓缩胶为无色透明,将蛋白胶放于无色透明的蛋白电泳缓冲液中,蛋白点样孔则为无色,肉眼点样蛋白样品时很难区分各个梳空,容易造成蛋白点样戳中蛋白凝胶而溢散在电泳缓冲液中等.彩色蛋白凝胶试剂盒通过不断筛选测试染料,最终得到红、黄、绿、紫四种惰性染料,不会在蛋白电泳时发生染料迁移,也不会吸附结合变性的蛋白样品,着色鲜艳均匀,且不会影响蛋白胶的柔软性.

摘要： 目的：研究全蝎(scorpio)信息药效组分的组合模式及其鉴定方法,为全蝎药效组分鉴定方法的建立提供科学数据。rn 方法：用盐析法制备供试品,用考马斯亮蓝法、SDS-PAGE法和AlphaEase Fc 4.0.0软件综合分析全蝎信息药效组分。rn 结果：全蝎信息药效组分的含量为51.85％(n=10),初步确定10个组分(KDa)：94.1620,66.4000,40.3570,27.5410,22.5180,19.5200,12.7660,11.1900,9.6653,8.5342。结论：全蝎10个信息药效组分组合模式稳定,可用于全蝎的品质鉴定;为中药信息药效组分鉴定方法的建立提供了新的方法和科学数据。

摘要： 目的：研究全蝎(scorpio)信息药效组分的组合模式及其鉴定方法,为全蝎药效组分鉴定方法的建立提供科学数据。rn 方法：用盐析法制备供试品,用考马斯亮蓝法、SDS-PAGE法和AlphaEase Fc 4.0.0软件综合分析全蝎信息药效组分。rn 结果：全蝎信息药效组分的含量为51.85％(n=10),初步确定10个组分(KDa)：94.1620,66.4000,40.3570,27.5410,22.5180,19.5200,12.7660,11.1900,9.6653,8.5342。结论：全蝎10个信息药效组分组合模式稳定,可用于全蝎的品质鉴定;为中药信息药效组分鉴定方法的建立提供了新的方法和科学数据。

摘要： 目的：研究全蝎(scorpio)信息药效组分的组合模式及其鉴定方法,为全蝎药效组分鉴定方法的建立提供科学数据。rn 方法：用盐析法制备供试品,用考马斯亮蓝法、SDS-PAGE法和AlphaEase Fc 4.0.0软件综合分析全蝎信息药效组分。rn 结果：全蝎信息药效组分的含量为51.85％(n=10),初步确定10个组分(KDa)：94.1620,66.4000,40.3570,27.5410,22.5180,19.5200,12.7660,11.1900,9.6653,8.5342。结论：全蝎10个信息药效组分组合模式稳定,可用于全蝎的品质鉴定;为中药信息药效组分鉴定方法的建立提供了新的方法和科学数据。

摘要： 目的：研究全蝎(scorpio)信息药效组分的组合模式及其鉴定方法,为全蝎药效组分鉴定方法的建立提供科学数据。rn 方法：用盐析法制备供试品,用考马斯亮蓝法、SDS-PAGE法和AlphaEase Fc 4.0.0软件综合分析全蝎信息药效组分。rn 结果：全蝎信息药效组分的含量为51.85％(n=10),初步确定10个组分(KDa)：94.1620,66.4000,40.3570,27.5410,22.5180,19.5200,12.7660,11.1900,9.6653,8.5342。结论：全蝎10个信息药效组分组合模式稳定,可用于全蝎的品质鉴定;为中药信息药效组分鉴定方法的建立提供了新的方法和科学数据。

摘要： 目的：获得高表达量、高免疫原性的重组蛋白作为包被抗原，为下一步构建ELISA试剂盒，检测特异性IBV抗体奠定基础。方法：成功将IBV S1、M、N多表位抗原基因片断用BamHI和XhoI双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T-1，转化E．coli BL21。采用IPTG进行诱导，SDS—PAGE鉴定表明，多表位抗原大部分在上清中融合表达，同时也存在包涵体形式，分子量大小约为63KD。Western-blots显示，该融合蛋白能与抗IBV阳性血清发生特异性反应。结论：本实验室构建的重组载pGEX-4T—1-D在E。coli BL21中得到成功表达并能与抗IBV阳性血清发生特异性反应，为进一步构建ELISA检测试剂盒的研究奠定了基础。

摘要： 目的：获得高表达量、高免疫原性的重组蛋白作为包被抗原，为下一步构建ELISA试剂盒，检测特异性IBV抗体奠定基础。方法：成功将IBV S1、M、N多表位抗原基因片断用BamHI和XhoI双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T-1，转化E．coli BL21。采用IPTG进行诱导，SDS—PAGE鉴定表明，多表位抗原大部分在上清中融合表达，同时也存在包涵体形式，分子量大小约为63KD。Western-blots显示，该融合蛋白能与抗IBV阳性血清发生特异性反应。结论：本实验室构建的重组载pGEX-4T—1-D在E。coli BL21中得到成功表达并能与抗IBV阳性血清发生特异性反应，为进一步构建ELISA检测试剂盒的研究奠定了基础。

摘要： 目的：获得高表达量、高免疫原性的重组蛋白作为包被抗原，为下一步构建ELISA试剂盒，检测特异性IBV抗体奠定基础。方法：成功将IBV S1、M、N多表位抗原基因片断用BamHI和XhoI双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T-1，转化E．coli BL21。采用IPTG进行诱导，SDS—PAGE鉴定表明，多表位抗原大部分在上清中融合表达，同时也存在包涵体形式，分子量大小约为63KD。Western-blots显示，该融合蛋白能与抗IBV阳性血清发生特异性反应。结论：本实验室构建的重组载pGEX-4T—1-D在E。coli BL21中得到成功表达并能与抗IBV阳性血清发生特异性反应，为进一步构建ELISA检测试剂盒的研究奠定了基础。

摘要： 目的：获得高表达量、高免疫原性的重组蛋白作为包被抗原，为下一步构建ELISA试剂盒，检测特异性IBV抗体奠定基础。方法：成功将IBV S1、M、N多表位抗原基因片断用BamHI和XhoI双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T-1，转化E．coli BL21。采用IPTG进行诱导，SDS—PAGE鉴定表明，多表位抗原大部分在上清中融合表达，同时也存在包涵体形式，分子量大小约为63KD。Western-blots显示，该融合蛋白能与抗IBV阳性血清发生特异性反应。结论：本实验室构建的重组载pGEX-4T—1-D在E。coli BL21中得到成功表达并能与抗IBV阳性血清发生特异性反应，为进一步构建ELISA检测试剂盒的研究奠定了基础。

摘要： 目的:建立流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。方法：采用免疫印迹，糖蛋白染色，edman N端测序方法确定甲流H1N1疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，Lowry蛋白定量与SDS-PAGE密度扫描的方法确定神经氨酸酶含量。结果：确定甲流疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，并且测定了其含量。结论：成功建立了流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。

摘要： 目的:建立流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。方法：采用免疫印迹，糖蛋白染色，edman N端测序方法确定甲流H1N1疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，Lowry蛋白定量与SDS-PAGE密度扫描的方法确定神经氨酸酶含量。结果：确定甲流疫苗原液中神经氨酸酶SDS-PAGE条带位置，并且测定了其含量。结论：成功建立了流感疫苗神经氨酸酶含量测定参考品。