S蛋白

摘要： 推广疫苗加强针接种是预防新冠病毒传播,特别是应对奥密克戎毒株传播的有效手段之一。对于适宜接种的人群,进一步提高全程疫苗接种及加强针接种比例十分重要。当前,奥密克戎(Omicron)新冠病毒变异株已在全球大范围流行,世界卫生组织从一开始就将其列为受关注的变异株(VOC)。该变异株被划分为4个子谱系,分别命名为BA.1、BA.1.1、BA.2和BA.3。其中,BA.1亚谱系于2021年11月在博茨瓦纳和南非首次被发现,并与其衍生变异株BA.1.1(含有额外的S蛋白R346K突变)一起在几星期内成为替代德尔塔(Delta)毒株的主导流行株。

摘要： 目的 在二级生物安全实验室条件下,通过构建新型冠状病毒(新冠病毒)VSV假病毒,研究新冠病毒及其流行变异株的侵入特性。方法 通过购买的新冠病毒(Wuhan-Hu-1株)VSV-luc假病毒构建VSV-G/VSV-ΔG-luc假病毒;利用VSV-G/VSV-ΔG-luc假病毒构建新冠病毒VSV假病毒。通过分子克隆对新冠病毒S基因相应位点进行突变,构建新冠病毒不同变异株的刺突蛋白表达质粒,由此包装出新冠病毒各种变异株假病毒。比较新冠病毒Wuhan-Hu-1株与D614G株、Delta株在不同细胞系中的感染能力。结果 新冠病毒VSV假病毒构建成功。评价新型冠状病毒Wuhan-Hu-1株、D614G株、Delta株在4种不同细胞系中侵入情况,与Wuhan-Hu-1株相比,D614G株和Delta株的感染水平均明显增加(P均<0.05),同时在Calu-3和Caco-2细胞系中,Delta株的感染水平明显强于D614G株(P均<0.05)。利用模拟细胞-细胞间传播的感染试验发现,Delta株感染HEK-293T细胞与Vero细胞的能力明显高于D614G株(P均<0.05)。结论 新冠病毒Delta株的感染能力明显强于Wuhan-Hu-1株和D614G株。VSV假病毒系统能够模拟、替代新冠病毒活病毒在侵入细胞的过程中的生理功能,并且安全可靠、易于量化、应用广泛,在新冠病毒研究领域中能够发挥重要作用.

摘要： 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起猪群病毒性腹泻的主要病原之一,给我国乃至世界养猪业造成巨大经济损失。临床上7日龄以内的仔猪发病率最高,病死率可达100%,目前,疫苗仍是预防PEDV的重要手段。本文从流行病学、临床症状与疫苗研究现状等方面分析传统疫苗免疫效果差的原因,阐述PEDV的基本情况及其免疫防控,为新型疫苗研制提供理论参考。

摘要： 旨在原核表达犬冠状病毒(CCoV)的刺突(S)蛋白,以此为包被抗原,通过优化条件建立CCoV血清抗体间接ELISA检测方法。首先,将CCoV的S基因序列克隆至原核表达载体pColdⅠ中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达。Western-blot验证蛋白大小约为28 ku,纯化后作为包被抗原,通过优化条件建立检测CCoV抗体的间接ELISA,抗原包被最佳质量浓度为4μg/mL;待检血清稀释度为1∶160时D_(450)最高;酶标抗体最佳稀释度为1∶3000;TMB最佳显色时间为20 min;最佳封闭液为50 g/L脱脂奶粉溶液;阴阳性临界值为D_(450)=0.214;与犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒的阳性血清均不发生交叉反应,表明特异性好;批内变异系数最大值为4.531%,批间变异系数最大值为2.908%,表明重复性好;该方法能检测到640倍稀释的血清,表明敏感性较高。应用该方法对161份临床犬血清进行检测,发现阳性率为98.7%,说明CCoV的感染率较高。本研究为CCoV抗体检测提供了有效工具。

摘要： 近期,本土新冠肺炎疫情呈多点散发、多地频发态势,针对变异株的二代疫苗被业内视为新的增长点。《中国商界》记者近日在采访中了解到,各大疫苗公司针对变异株的二代疫苗市场正在上演“能力与速度”的比拼。市场竞争加剧新冠疫苗待“升级”9月1日,国内疫苗企业沃森生物宣布,公司与复旦大学、蓝鹊生物共同研发的“新型冠状病毒变异株mR NA疫苗(S蛋白嵌合体)”于近日获得国家药品监督管理局批准的《药物临床试验批件》。

摘要： 【目的】探索猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S蛋白的结构和功能,为建立PEDV感染的诊断方法和疫苗开发提供理论依据。【方法】以PEDV经典CV777株为模板,通过PCR扩增获得S、S1基因片段;PCR扩增产物分别克隆pET-30a(+)原核表达载体和pFLAG-CMV-3真核表达载体,构建原核表达质粒pET-30a-PEDV-S和真核表达质粒pFLAG-CMV-3-PEDV-S1;将pET-30a-PEDV-S转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达PEDV-S重组蛋白,通过变性、复性、浓缩纯化重组蛋白并进行Western blotting检测;将PEDV-S重组蛋白免疫C57BL小鼠制备多克隆抗体,获得的多克隆抗体经间接免疫荧光试验(IFA)检测特异性,通过间接ELISA法检测多克隆抗体效价;将pFLAG-CMV-3-PEDV-S1转染至HEK293T细胞,以制备的多克隆抗体为一抗,经IFA测定PEDV-S1蛋白的抗原性和多克隆抗体的反应性。【结果】成功克隆出PEDV S和S1基因,构建了可表达PEDV-S重组蛋白的原核表达质粒和在HEK293T细胞中高效表达S1蛋白的真核表达质粒;PEDV-S重组蛋白在IPTG为0.5 mmol/L、16°C诱导8 h条件下可获得最高表达量,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果显示,PEDV-S重组蛋白成功表达;ELISA检测结果显示,制备的多克隆抗体效价达1∶3280500;IFA结果显示,多克隆抗体有良好的特异性,可特异性识别PEDV-S和PEDV-S1蛋白。【结论】本研究获得了PEDV-S重组蛋白,并成功表达S1蛋白,制备出PEDV-S蛋白多克隆抗体,为研究S蛋白的结构和功能提供了条件,为揭示PEDV致病机制奠定了基础。

摘要： 新冠病毒(SARS-CoV-2)出现越来越多侵染性更强的突变体,比较有代表性的毒株是B.1.351和B.1.617,它们的共同特点是在S蛋白484号位点有氨基酸突变。484号位点是一个与hACE2上的残基K31相互作用的位点。从分子动力学和蛋白质对接的角度入手,通过研究新冠病毒的E484K和E484Q突变,发现与hACE2直接作用的氨基酸残基(A475、N487)间的氢键键长缩短。动力学结果表明,475~489这段氨基酸序列具有高度的活跃性,是一个不应该被忽略的药物设计靶点。可以为开发新冠病毒抑制剂提供新靶点,一定程度上预测新冠病毒未来进化方向,同时也为类似的冠状病毒的突变研究提供新思路。

摘要： 引发新型冠状病毒肺炎的病原体SARS-CoV-2为单股正链RNA病毒,传染性强,已在世界范围内多个国家传播,成为全球关注的热点.研究表明血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)可能是SARS-CoV-2感染宿主的受体,因而了解SARS-CoV-2作用于ACE2的不同机制对于开发治疗性药物和疫苗研发具有重要参考价值.本文综述了ACE2在机体不同组织表达情况与组织损伤的关系,ACE2参与免疫炎症的调节过程及年龄、性别、不同基础疾病等因素对ACE2表达和组织损伤的机制进展.

摘要： 新冠肺炎(COVID-19)在全球范围爆发,至今仍未得到有效控制。新冠病毒(SARS-CoV-2)表面的刺突蛋白(spike protein, S)在病毒传播中起着十分重要的作用,针对它的分析在疾病预防与免疫中具有重要的应用价值。本文分析了新型冠状病毒基因序列的碱基分布及S蛋白基因的突变情况。针对相关新冠病毒基因序列进行多种可视化处理及分析,选择多条S蛋白基因序列,运用BLAST以及MEGA6软件进行信息比对、对齐,再进行信息熵的计算、展示可视化分布及相关分析。结果显示,新冠病毒基因碱基的整体分布具有对称性,由于选择的S蛋白数量不大变异量较小,其信息熵可视化分布呈现的特征聚点数目也较少。

摘要： 【目的】建立快速准确检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法。【方法】以原核表达的PEDV S蛋白为包被抗原,建立高效特异的间接ELISA抗体检测方法。PCR扩增PEDV S基因并命名为SJ,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a (+),构建重组质粒pET-32a (+)-SJ。重组蛋白经诱导表达、纯化鉴定后,测定蛋白质量浓度,以其为抗原包被于板。优化ELISA反应条件,对建立方法的特异性、重复性、符合性及临床应用进行评估。【结果】原核表达的PEDV S蛋白约为35 ku,质量浓度为1.145 mg/mL。Western-blot鉴定其具有良好的反应原性,以其作为包被抗原建立的PEDV间接ELISA抗体检测方法仅对PEDV血清检测为阳性,具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于6%,利用该方法对临床样品检测的结果与市售检测结果符合率为96.67%。【结论】该方法特异性良好,重复性高,成本低,可用于临床PEDV血清抗体检测以及PEDV流行病学的监测,对本病的预防具有重要意义。

摘要： 猪流行性腹泻是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的新生仔猪严重腹泻的高度接触性传染病,近年来中国新流行的PEDV毒株对新生仔猪的发病率和死亡率均较高,对养猪业的健康发展造成了极大的威胁.通过研究表明：在感染的sf9细胞胞浆中可观察到特异性绿色荧光;利用PEDV感染猪血清抗体对其表达产物进行Western blot鉴定，结果显示在约70KDa左右出现特异性条带。

摘要： 猪流行性腹泻是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的新生仔猪严重腹泻的高度接触性传染病,近年来中国新流行的PEDV毒株对新生仔猪的发病率和死亡率均较高,对养猪业的健康发展造成了极大的威胁.通过研究表明：在感染的sf9细胞胞浆中可观察到特异性绿色荧光;利用PEDV感染猪血清抗体对其表达产物进行Western blot鉴定，结果显示在约70KDa左右出现特异性条带。

摘要： 猪流行性腹泻是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的新生仔猪严重腹泻的高度接触性传染病,近年来中国新流行的PEDV毒株对新生仔猪的发病率和死亡率均较高,对养猪业的健康发展造成了极大的威胁.通过研究表明：在感染的sf9细胞胞浆中可观察到特异性绿色荧光;利用PEDV感染猪血清抗体对其表达产物进行Western blot鉴定，结果显示在约70KDa左右出现特异性条带。

摘要： 猪流行性腹泻是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的新生仔猪严重腹泻的高度接触性传染病,近年来中国新流行的PEDV毒株对新生仔猪的发病率和死亡率均较高,对养猪业的健康发展造成了极大的威胁.通过研究表明：在感染的sf9细胞胞浆中可观察到特异性绿色荧光;利用PEDV感染猪血清抗体对其表达产物进行Western blot鉴定，结果显示在约70KDa左右出现特异性条带。

摘要： 猪流行性腹泻是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的新生仔猪严重腹泻的高度接触性传染病,近年来中国新流行的PEDV毒株对新生仔猪的发病率和死亡率均较高,对养猪业的健康发展造成了极大的威胁.通过研究表明：在感染的sf9细胞胞浆中可观察到特异性绿色荧光;利用PEDV感染猪血清抗体对其表达产物进行Western blot鉴定，结果显示在约70KDa左右出现特异性条带。

摘要： 本研究将猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白保护性抗原片段COE1与枯草杆菌芽孢外层衣壳蛋白基因cotB进行融合,构建表面展示S蛋白保护性抗原片段的重组芽孢.通过将cotB基因与COE1编码序列进行重组,构建融合表达cotB-COE1的整合型重组质粒,重组质粒与枯草杆菌淀粉酶基因amyE双交叉,获得重组枯草杆菌,对重组枯草杆菌进行淀粉酶活性分析、PCR扩增鉴定,提取重组芽孢衣壳总蛋白进行Western blot分析及对重组芽孢进行免疫荧光显微镜观察.通过淀粉酶活性分析与PCR鉴定结果表明该融合基因成功整合于枯草杆菌染色体上;Western blot分析结果在67.78kDa处获得一条特异性的蛋白杂交带;使用生物素标记抗体免疫荧光显微镜观察重组芽孢具有特异性荧光信号.结果表明PEDV S蛋白保护性抗原片段COE1成功地展示于枯草杆菌芽孢表面.

摘要： 本研究将猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白保护性抗原片段COE1与枯草杆菌芽孢外层衣壳蛋白基因cotB进行融合,构建表面展示S蛋白保护性抗原片段的重组芽孢.通过将cotB基因与COE1编码序列进行重组,构建融合表达cotB-COE1的整合型重组质粒,重组质粒与枯草杆菌淀粉酶基因amyE双交叉,获得重组枯草杆菌,对重组枯草杆菌进行淀粉酶活性分析、PCR扩增鉴定,提取重组芽孢衣壳总蛋白进行Western blot分析及对重组芽孢进行免疫荧光显微镜观察.通过淀粉酶活性分析与PCR鉴定结果表明该融合基因成功整合于枯草杆菌染色体上;Western blot分析结果在67.78kDa处获得一条特异性的蛋白杂交带;使用生物素标记抗体免疫荧光显微镜观察重组芽孢具有特异性荧光信号.结果表明PEDV S蛋白保护性抗原片段COE1成功地展示于枯草杆菌芽孢表面.

摘要： 本研究将猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白保护性抗原片段COE1与枯草杆菌芽孢外层衣壳蛋白基因cotB进行融合,构建表面展示S蛋白保护性抗原片段的重组芽孢.通过将cotB基因与COE1编码序列进行重组,构建融合表达cotB-COE1的整合型重组质粒,重组质粒与枯草杆菌淀粉酶基因amyE双交叉,获得重组枯草杆菌,对重组枯草杆菌进行淀粉酶活性分析、PCR扩增鉴定,提取重组芽孢衣壳总蛋白进行Western blot分析及对重组芽孢进行免疫荧光显微镜观察.通过淀粉酶活性分析与PCR鉴定结果表明该融合基因成功整合于枯草杆菌染色体上;Western blot分析结果在67.78kDa处获得一条特异性的蛋白杂交带;使用生物素标记抗体免疫荧光显微镜观察重组芽孢具有特异性荧光信号.结果表明PEDV S蛋白保护性抗原片段COE1成功地展示于枯草杆菌芽孢表面.

摘要： 本研究将猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白保护性抗原片段COE1与枯草杆菌芽孢外层衣壳蛋白基因cotB进行融合,构建表面展示S蛋白保护性抗原片段的重组芽孢.通过将cotB基因与COE1编码序列进行重组,构建融合表达cotB-COE1的整合型重组质粒,重组质粒与枯草杆菌淀粉酶基因amyE双交叉,获得重组枯草杆菌,对重组枯草杆菌进行淀粉酶活性分析、PCR扩增鉴定,提取重组芽孢衣壳总蛋白进行Western blot分析及对重组芽孢进行免疫荧光显微镜观察.通过淀粉酶活性分析与PCR鉴定结果表明该融合基因成功整合于枯草杆菌染色体上;Western blot分析结果在67.78kDa处获得一条特异性的蛋白杂交带;使用生物素标记抗体免疫荧光显微镜观察重组芽孢具有特异性荧光信号.结果表明PEDV S蛋白保护性抗原片段COE1成功地展示于枯草杆菌芽孢表面.

摘要： 目的：实验旨在通过分子生物学实验方法，筛选出猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV)S蛋白RBD，为后续研究PHEV分子致病机制的研究奠定基础。rn 材料方法：本实验通过应用现代生物信息学对HEVS蛋白进行生物信息学推测，预测S蛋白的各项理化性质和二级结构。根据推测出的生物学信息结果将S蛋白S1功能域分为三段基因片段，分别编码291个aa、319个aa和516个aa。包含了所有可能成为受体结合位点的区域，并将三段目的片段分别与pGEX-4T-1线性化原核表达载体连接，构建重组表达载体。rn 结果：在体外成功的获得了原核大肠杆菌细胞诱导表达的目的蛋白并对其进行纯化，将纯化后的三段重组蛋白将分别与PK-15细胞进行结合试验，同时与PK-15细胞总蛋白进行GST-Pull down实验，以期筛选出能与细胞结合的重组蛋白。rn 结论：本研究中，选用了pGEX原核表达载体系统，此系统具有高表达效率，通过体外表达已经成功获得三段分泌型表达蛋白，经生物信息学分析基本包含了可能成为RBD的全部结合位点区域。这些蛋白的获得，有助于PHEV的RBD筛选鉴定的顺利进行。

摘要： 本发明的目的在于，提供可抑制弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成的弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制剂、弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制用组合物、具有弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制作用的物质的筛选方法、抑制弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体的形成的方法、抑制变性弹性蛋白的分解降低的方法及维持正常的弹性蛋白纤维的方法等。本发明涉及一种变性弹性蛋白的分解降低的抑制剂等，其特征在于，含有选自西番莲萃取物、金盏菊萃取物、白芥萃取物、药蜀葵萃取物、白柳萃取物、菖蒲萃取物、桃仁萃取物及大豆萃取物中的1种以上的植物萃取物作为有效成分。

摘要： 本发明涉及含有抑制纤维粘连蛋白与免疫抑制性受体LILRB4的结合的物质作为有效成分的免疫检查点抑制剂、免疫检查点相关疾病的治疗剂、含有活化免疫抑制性受体LILRB4的物质作为有效成分的免疫抑制剂、抗纤维粘连蛋白抗体或其衍生物、纤维粘连蛋白类似物、用于检测纤维粘连蛋白或其部分蛋白质的试剂盒和使用所述试剂盒检测生物样品中的纤维粘连蛋白或其部分蛋白质的方法。

摘要： 本发明提供一种糖化蛋白质测定试剂，其至少包含Trinder’s试剂、4‑氨基安替比林、蛋白酶、蛋白酶的稳定剂以及亚铁氰化物，其中，至少Trinder’s试剂包含在含有Trinder’s试剂的部分组合物中，至少4‑氨基安替比林包含在含有4‑氨基安替比林的部分组合物中，蛋白酶的稳定剂是使亚铁氰化物与该蛋白酶的稳定剂混合后的氧化还原电位大于0.058V的稳定剂，氧化还原电位是包含蛋白酶的稳定剂和亚铁氰化物、不包含糖化蛋白质的反应体系的氧化还原电位。

摘要： 本发明的目的在于提供可抑制弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成的弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制剂及弹性蛋白‑抑弹性蛋白酶蛋白复合体形成抑制用组合物等。本发明涉及一种变性弹性蛋白的分解降低的抑制剂，其特征在于，含有下述通式(I)所表示的化合物及/或其衍生物作为有效成分。(式(I)中，R1～R4相同或不同，为氢原子或羟基，R1为氢原子时R2为羟基，R1为羟基时R2为氢原子，R3为氢原子时R4为羟基，R3为羟基时R4为氢原子。)

摘要： 由下述氟树脂形成了与蛋白质或包含蛋白质的组合物接触的表面的容器及用于制造蛋白质或包含蛋白质的组合物的器材具有显著的低蛋白质吸附性，其中，所述氟树脂为选自四氟乙烯‑六氟丙烯系共聚物及四氟乙烯‑全氟烷基乙烯基醚系共聚物中的至少1种氟树脂，并且，所述氟树脂的熔点为320°C以下，所述氟树脂中的相对于每1×10

摘要： 本发明提供能减小使用了特异性地结合的物质的测定中的由肝型脂肪酸结合蛋白质引起的测定值的变动幅度的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、评价该制剂的方法、制作肝型脂肪酸结合蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。一种用使用了用10mM的氧化剂在25°C下进行1小时的氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值与使用了未进行上述氧化处理的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂的测定值的比表示的氧化变动系数设定为1.4以下的肝型脂肪酸结合蛋白质制剂、用于该制剂的肝型脂肪酸结合蛋白质、编码该蛋白质的DNA、由该DNA转化得到的细胞、该蛋白质的制造方法、评价该制剂的方法、抑制使用该制剂的测定中的测定值的变动幅度的方法、制作该蛋白质的校准曲线的方法、以及定量该蛋白质的方法。

摘要： 一种由使具有免疫球蛋白折叠结构的蛋白和能够形成亚单元结构的蛋白融合而得到的单体蛋白组成的多聚体蛋白的制备方法，该制备方法包括下述步骤：步骤(A)，准备在微生物的菌体内呈不溶性颗粒形态的蛋白，该蛋白为上述单体蛋白；步骤(B)，利用含有月桂酰-L-Glu的水溶液增溶步骤(A)中准备的单体蛋白；步骤(C)，在含有精氨酸盐酸盐的缓冲液中稀释步骤(B)中得到的溶液，降低月桂酰-L-Glu的浓度；以及步骤(D)，利用凝胶过滤层析等将步骤(C)中得到的溶液的溶剂置换成缓冲液。

摘要： 由具有糖蛋白生成抑制活性的序列表中序列1记载的氨基酸序列构成的蛋白质、其变异体蛋白质、由序列表中序列2记载的核苷酸序列组成的DNA、其DNA变异体以及使用上述蛋白质和DNA的糖蛋白异常症(例如囊性纤维化症)的包括基因治疗在内的治疗药。

摘要： 本发明提供检测血清中抗Rv1860抗体、抗RV3881c抗体、抗Rv2031c抗体和抗Rv3803c抗体水平的产品在制备区分或辅助区分活动性肺结核患者与潜伏性结核感染患者用途的产品中的应用。上述4种抗原的生物标志物组合，可有效区分ATB患者和LTBI人群。在验证阶段进一步用300多份血清样品用ELISA方法对生物标志物面板进行了验证，最终结果表明微阵列检测结果与ELISA检测结果基本一致。

摘要： 本发明涉及疾病诊断领域，具体涉及一种Rv1860蛋白、RV3881c蛋白、Rv2031c蛋白和Rv3803c蛋白在制备诊断活动性肺结核感染中的用途。本发明提供一种检测血清中抗Rv1860抗体、抗RV3881c抗体、抗Rv2031c抗体和抗Rv3803c抗体水平的产品在制备具有鉴别、诊断、辅助诊断、筛查和/或辅助筛查活动性肺结核感染患者用途的产品中的应用。实验证明得到含有4种抗原的生物标志物组合，可有效筛查活动性肺结核感染患者。