RAPD技术

摘要： 当前,在农作物育种技术不断创新发展的大背景下,传统育种技术在农作物生产种植中的局限性愈来愈明显。DNA分子标记技术(RAPD技术)广泛普及,已经成为了农作物遗传育种的重要辅助手段,在许多蔬菜作物中得到应用。为了更好地发挥RAPD技术的应用优势,文章分析了其技术原理与优劣势,并从扩充程序改进和技术应用稳定性提高入手,结合番茄作物育种探讨该技术改进与应用的实际情况,旨在为相关农作物育种工作者提供参考。

摘要： 为了解豫北地区规模化养殖场猪源大肠杆菌的耐药性及基因多态性,对分离的21株猪源大肠杆菌进行药物敏感实验,采用PCR技术对其耐药基因进行检测,RAPD技术进行基因多态性分析.结果表明:豫北地区规模化养殖场分离的猪源性大肠杆菌菌株对常见16种抗生素存在不同情况的耐药性.其中对四环素、红霉素、麦迪霉素、阿莫西林、磺胺异恶唑、环丙沙星、新生霉素、复方新诺明、恩诺沙星、甲氧苄啶的耐药率均为100％,对庆大霉素、洛美沙星的耐药率为85％以上,对其他药物的耐药率相对较低;PCR检测得到8种耐药基因的条带;对菌株进行RAPD分析得到7种不同的基因型.大肠杆菌极易产生耐药性,耐药基因广泛存在于耐药菌株中,但耐药表型与耐药基因之间无绝对相关性.豫北地区猪源大肠杆菌感染多重耐药十分严重,严重影响了该地区猪源大肠杆菌病的诊治和预防.

摘要： 呼伦贝尔地区柞林资源丰富,气候适宜,具有发展柞蚕业得天独厚的优势.本文在介绍呼伦贝尔地区柞蚕业发展现状及RAPD技术的基础上,分析开展柞蚕分子生物学育种的必要性.

摘要： 为了更科学的对灵芝菌株进行分类与鉴定,利用拮抗、ITS和RAPD技术对21株灵芝菌株进行分类鉴定和遗传多样性分析.拮抗试验结果表明,大部分菌株之间存在不同程度的拮抗作用,少数菌株之间没有拮抗或拮抗极不明显;ITS序列分析结果表明,21个菌株分为3个组,菌株间遗传距离的变化范围在0.000 ～0.072,平均遗传距离为0.039,菌株1号(赤68)与3号(Ga15)的遗传距离为0.000,证明其亲缘性较近;RAPD结果表明,各菌株间的相似系数在0.83以上,所有菌株分为两个组,4号(867)菌株单独为1组,其它20个菌株为1组;相似系数在0.932的相似水平上,所有菌株分为14个组;1号菌株与3号菌株的相似系数则超过了0.95,有可能是同种异名.3种方法其结论一致,且能准确鉴定21株灵芝亲缘关系.

摘要： 本文主要对种子检验技术的应用实践进行分析.具体是对RFLP技术、RAPD技术以及免疫3种检验技术的优劣势进行分析的基础上,通过查阅相关资料对其在各类农作物中的应用原理与应用效果进行归纳.希望各种检验技术在农作物种子检测中的应用,在提高其纯度方面发挥一定的辅助作用.

摘要： 利用拮抗、ITS和RAPD方法对14株香菇菌株进行分类鉴定和遗传多样性分析.拮抗试验表明,大多数菌株之间存在不同程度的拮抗作用,少数菌株之间没有拮抗或拮抗极不明显.ITS序列分析表明,14个菌株间的同源性均达95%以上,其中3号菌株(LC206)与5号菌株(LC2)的遗传距离非常小,表明其亲缘性很近.RAPD结果表明,相似系数在0.67以上,供试菌株分为2组,12号(L0302)菌株单独为一组,其他13个菌株为一组;相似系数在0.95以上,供试菌株分为13个组,3号与5号菌株相似系数则超过了0.95,很可能是同种异名.以上3种方法分类结果一致,说明能准确鉴定14株香菇的亲缘关系.

摘要： 本研究采用RAPD技术,选用5条寡核苷酸引物对受酸雨—铜(Cu2+)复合胁迫的马尾松幼苗DNA进行扩增.结果表明马尾松基因组的图谱产生明显的改变,包括RAPD谱带的增加和缺失.

摘要： 目的:比较来自不同生态环境、不同地理位置及不同形态和不同生理生化特性的六株钝顶螺旋藻的系统进化关系和遗传多样性,试图从DNA水平探讨它们长期在不同的生存环境作用下遗传进化关系和种质资源的多样性,为螺旋藻种间系统发育关系的研究及正确地进行种间分类提供参考.方法:用RAPD分子标记技术和ITS序列对六株不同来源螺旋藻进行扩增,利用PopGen32、MEGA 5.0等软件分析其遗传多样性,构建系统发育树并进行进化地位的比较.结果:RAPD结果显示,不同来源的六株螺旋藻分为两大枝,FACHB-HY独为一枝与其他五株亲缘关系最远.Spi-wz、FACHB-350、FACHB-793、FACHB-904和FACHB-834聚为一枝,而FACHB-834与其他四株的关系较远,Spi-wz和FACHB-904、FACHB-793和FACHB-350亲缘关系最近,ITS基因的同源性比较结果与RAPD分子标记的结果一致.结论:来自不同生态环境的螺旋藻株在长期的进化地位和系统发育关系上存在有差异,表现出遗传多样性和种资资源的多样性.RAPD分子标记和ITS序列同源性聚类结果相一致.

摘要： 本文概述了RAPD技术在中药原植物遗传多样性、原植物品种鉴别、中药材真伪鉴别、野生和栽培品种研究、种质资源和道地药材研究、中成药鉴别等方面的应用与发展，并对RAPD技术在中药鉴定中的前景进行展望。

摘要： 土壤微生物对土壤中有机质的转换起着至关重要的作用,土壤微生物多样性的变化对地表生态系统、土壤的结构、土壤的肥力和植物的健康等有重要的影响.本文利用RAPD技术分析牡丹江地区的3个林型及其3个不同林龄共9块样地的根际微生物的多样性,得到了椴树红松林、蒙古栎红松林和云冷杉红松林3种林型内的土壤微生物多样性的变化趋势,及其微生物构成差异性.

摘要： 本文通过介绍RAPD技术的由来,原理及方法,通过分析RAPD的技术特点,目前，RAPD标记已被广泛应用于分了生药学各方面.应用RAPD技术进行药用植物生物多样性研究，可以在遗传多样性水平上了解天然产物多样性与物种、生态及地理分布的关系，挖掘潜在的药物资源，为开发新药寻找途径。RAPD标记可用于生药分类，在DNA分子水平上鉴别生物不同种、亚种、变种甚至株。此外，RAPD标记可用来制作生物类生药系统发育关系上的树状图，特别是种内水平。RAPD技术是新近发展起来的一种分子生物学分析方法，所用的引物为随机设计的单引物，不需分类对象的特异DNA信息，适用于分析同科同属甚至同种下的种型差异，可以在同一条件下对分析对象的随机扩增的多态性DNA进行比较，达到分析种型差异和分子分类的目的，其以简便、快速、灵敏、成本低的特点在中药种内鉴别等方面具有独特的优势，在中药材的真伪鉴别、野生和栽培品种鉴别、种质资源和道地药材研究中展示了广阔的应用前景，为中药鉴定提供了新思维和新视野。

摘要： 本文通过介绍RAPD技术的由来,原理及方法,通过分析RAPD的技术特点,目前，RAPD标记已被广泛应用于分了生药学各方面.应用RAPD技术进行药用植物生物多样性研究，可以在遗传多样性水平上了解天然产物多样性与物种、生态及地理分布的关系，挖掘潜在的药物资源，为开发新药寻找途径。RAPD标记可用于生药分类，在DNA分子水平上鉴别生物不同种、亚种、变种甚至株。此外，RAPD标记可用来制作生物类生药系统发育关系上的树状图，特别是种内水平。RAPD技术是新近发展起来的一种分子生物学分析方法，所用的引物为随机设计的单引物，不需分类对象的特异DNA信息，适用于分析同科同属甚至同种下的种型差异，可以在同一条件下对分析对象的随机扩增的多态性DNA进行比较，达到分析种型差异和分子分类的目的，其以简便、快速、灵敏、成本低的特点在中药种内鉴别等方面具有独特的优势，在中药材的真伪鉴别、野生和栽培品种鉴别、种质资源和道地药材研究中展示了广阔的应用前景，为中药鉴定提供了新思维和新视野。

摘要： 本文通过介绍RAPD技术的由来,原理及方法,通过分析RAPD的技术特点,目前，RAPD标记已被广泛应用于分了生药学各方面.应用RAPD技术进行药用植物生物多样性研究，可以在遗传多样性水平上了解天然产物多样性与物种、生态及地理分布的关系，挖掘潜在的药物资源，为开发新药寻找途径。RAPD标记可用于生药分类，在DNA分子水平上鉴别生物不同种、亚种、变种甚至株。此外，RAPD标记可用来制作生物类生药系统发育关系上的树状图，特别是种内水平。RAPD技术是新近发展起来的一种分子生物学分析方法，所用的引物为随机设计的单引物，不需分类对象的特异DNA信息，适用于分析同科同属甚至同种下的种型差异，可以在同一条件下对分析对象的随机扩增的多态性DNA进行比较，达到分析种型差异和分子分类的目的，其以简便、快速、灵敏、成本低的特点在中药种内鉴别等方面具有独特的优势，在中药材的真伪鉴别、野生和栽培品种鉴别、种质资源和道地药材研究中展示了广阔的应用前景，为中药鉴定提供了新思维和新视野。

摘要： 本文通过介绍RAPD技术的由来,原理及方法,通过分析RAPD的技术特点,目前，RAPD标记已被广泛应用于分了生药学各方面.应用RAPD技术进行药用植物生物多样性研究，可以在遗传多样性水平上了解天然产物多样性与物种、生态及地理分布的关系，挖掘潜在的药物资源，为开发新药寻找途径。RAPD标记可用于生药分类，在DNA分子水平上鉴别生物不同种、亚种、变种甚至株。此外，RAPD标记可用来制作生物类生药系统发育关系上的树状图，特别是种内水平。RAPD技术是新近发展起来的一种分子生物学分析方法，所用的引物为随机设计的单引物，不需分类对象的特异DNA信息，适用于分析同科同属甚至同种下的种型差异，可以在同一条件下对分析对象的随机扩增的多态性DNA进行比较，达到分析种型差异和分子分类的目的，其以简便、快速、灵敏、成本低的特点在中药种内鉴别等方面具有独特的优势，在中药材的真伪鉴别、野生和栽培品种鉴别、种质资源和道地药材研究中展示了广阔的应用前景，为中药鉴定提供了新思维和新视野。

摘要： 利用RAPD技术对11份有代表性的石斛兰种质资源的组培苗进行了遗传亲缘关系及分类研究.从所筛选的Sangon引物中选取12条多态性好、条带清晰且稳定的随机引物对11份石斛兰种质资源的基因组DNA进行扩增,共产生229条谱带,其中多态性谱带为229条(100％),表明11份种质资源遗传的多样性和遗传基础的丰富性.各种质间的遗传距离为0.000～20.000,并根据遗传距离构建了亲缘关系树状图.当遗传距离D=19.500时,11份石斛兰种质分为2大组；当遗传距离D=17.250时,可把11份石斛兰种质分为4组；当遗传距离D=10.500时,11份石斛兰种质可分为8小组.聚类分析结果与传统的分类有一定的相似性.

摘要： 利用RAPD技术对11份有代表性的石斛兰种质资源的组培苗进行了遗传亲缘关系及分类研究.从所筛选的Sangon引物中选取12条多态性好、条带清晰且稳定的随机引物对11份石斛兰种质资源的基因组DNA进行扩增,共产生229条谱带,其中多态性谱带为229条(100％),表明11份种质资源遗传的多样性和遗传基础的丰富性.各种质间的遗传距离为0.000～20.000,并根据遗传距离构建了亲缘关系树状图.当遗传距离D=19.500时,11份石斛兰种质分为2大组；当遗传距离D=17.250时,可把11份石斛兰种质分为4组；当遗传距离D=10.500时,11份石斛兰种质可分为8小组.聚类分析结果与传统的分类有一定的相似性.

摘要： 利用RAPD技术对11份有代表性的石斛兰种质资源的组培苗进行了遗传亲缘关系及分类研究.从所筛选的Sangon引物中选取12条多态性好、条带清晰且稳定的随机引物对11份石斛兰种质资源的基因组DNA进行扩增,共产生229条谱带,其中多态性谱带为229条(100％),表明11份种质资源遗传的多样性和遗传基础的丰富性.各种质间的遗传距离为0.000～20.000,并根据遗传距离构建了亲缘关系树状图.当遗传距离D=19.500时,11份石斛兰种质分为2大组；当遗传距离D=17.250时,可把11份石斛兰种质分为4组；当遗传距离D=10.500时,11份石斛兰种质可分为8小组.聚类分析结果与传统的分类有一定的相似性.

摘要： 利用RAPD技术对11份有代表性的石斛兰种质资源的组培苗进行了遗传亲缘关系及分类研究.从所筛选的Sangon引物中选取12条多态性好、条带清晰且稳定的随机引物对11份石斛兰种质资源的基因组DNA进行扩增,共产生229条谱带,其中多态性谱带为229条(100％),表明11份种质资源遗传的多样性和遗传基础的丰富性.各种质间的遗传距离为0.000～20.000,并根据遗传距离构建了亲缘关系树状图.当遗传距离D=19.500时,11份石斛兰种质分为2大组；当遗传距离D=17.250时,可把11份石斛兰种质分为4组；当遗传距离D=10.500时,11份石斛兰种质可分为8小组.聚类分析结果与传统的分类有一定的相似性.

摘要： 运用RAPD和ISSR对栎叶枇杷、大渡河枇杷和普通枇杷的遗传关系进行研究,结果表明:栎叶枇杷与普通枇杷的相似系数最小,比栎叶枇杷与大渡河枇杷的相似系数小,而大渡河枇杷与普通枇杷的相似系数处于二者之间;以大渡河枇杷作为待定杂种获得了最高的叠加性(44.9％和45.8％);通过DNA指纹图谱分析发现,栎叶枇杷和普通枇杷的特异性谱带在大渡河枇杷上均存在。因此,支持大渡河枇杷为栎叶枇杷和普通枇杷种间杂种的结论。

摘要： 运用RAPD和ISSR对栎叶枇杷、大渡河枇杷和普通枇杷的遗传关系进行研究,结果表明:栎叶枇杷与普通枇杷的相似系数最小,比栎叶枇杷与大渡河枇杷的相似系数小,而大渡河枇杷与普通枇杷的相似系数处于二者之间;以大渡河枇杷作为待定杂种获得了最高的叠加性(44.9％和45.8％);通过DNA指纹图谱分析发现,栎叶枇杷和普通枇杷的特异性谱带在大渡河枇杷上均存在。因此,支持大渡河枇杷为栎叶枇杷和普通枇杷种间杂种的结论。

摘要： 本发明提供了一种桃叶卫矛的RAPD反应体系，属于生物学分子标记技术领域，所述RAPD反应体系总量为20μL，包括如下含量组分：模板DNA25～30ng，引物0.15～0.25μmol/L，MgCl22.50～2.70mmol/L，dNTP 0.10～0.15mmol/L，Taq DNA聚合酶1.75～2.50U，余量为ddH2O。本发明建立的桃叶卫矛的RAPD反应体系扩增出的条带清晰、完整，稳定性高，弥补了国内对桃叶卫矛遗传多样性研究的空白。

摘要： 本发明公开了一种用于区分丝瓜品种的RAPD引物，属于分子生物学分子标记领域。该方法通过设计筛选出的4个RAPD随机引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1～4所示，用于扩增未知丝瓜品种的DNA，通过统计凝胶电泳后的谱带，区分出具有唯一特异性谱带的品种，并建立被区分品种的树形鉴别图。本发明的引物提高了RAPD反应的稳定性，操作简便，高效准确，节省引物，仅通过4次PCR就可轻松的将“长香玉”等20个丝瓜品种在分子水平上进行快速区分，所得到的品种鉴定图比聚类树更具有直观性，即根据品种鉴定图就可以快速找出能区分任意两个品种的引物，该方法可以实现丝瓜种苗早期鉴定，在其他物种上也具有广泛的通用性。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴定西瓜品种苏蜜6号种子纯度的RAPD引物，包括引物JAASRP1059和JAASCR1036，引物JAASRP1059的序列为5'‑GTTGCCAGCC‑3'；引物JAASCR1036的序列为5'‑GTGACGTAGG‑3'。利用该RAPD引物能鉴定苏蜜6号种子纯度，首先提取苏蜜6号DNA，采用RAPD引物JAASRP1059和JAASCR1036，以西瓜杂交种苏蜜6号种子基因组DNA为模板进行PCR扩增；将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。通过比较DNA片段序列差异形成的多态性扩增片段及电泳图谱的位置差异，可以鉴定苏蜜6号遗传纯度，鉴定结果快速稳定可靠，而且操作简单方便。

摘要： 本发明涉及螺旋藻生产技术，旨在提供一种通过RAPD检测鉴别螺旋藻藻丝沥水性能优劣的方法。该方法包括：从培植池取钝顶螺旋藻藻液，用毛细吸管显微分离法挑取长度≥300μm的藻丝单体，培养成藻丝群体；对所得藻丝群体取样，然后进行随机扩增多态性DNA分析与检测；如果最终无法用引物S90扩增出590bp的条带，表明被鉴别藻丝具有良好沥水性能；反之，则表明被鉴别藻丝沥水性能差。本发明的方法基于RAPA技术鉴别螺旋藻藻丝沥水性优劣，与常规方法相比不仅简便、高效，而且成本低，并适合高通量筛检。

摘要： 本发明涉及分子生物技术领域，具体来说是利用RAPD分子标记技术鉴定石榴芽变品种的方法；该RAPD随机引物组由100条引物组成；鉴定步骤包括（1）石榴叶片DNA提取；（2）PCR扩增；（3）电泳检测；（4）数据记录；（5）结果判定。本发明可以在实验室进行，根据RAPD位点的多态性，利用PCR扩增和电泳技术鉴定石榴品种，在时间上充分提高了试验效率，具有快速、准确、操作方便等优势，并且鉴定结果不易受环境影响。本发明可以用于对供试石榴品种与已知石榴品种进行品种鉴定，或构建石榴品种数据库。该方法为准确鉴定石榴种质资源，尤其是同物异名和同名异物现象奠定了基础，也为新品种保护奠定了基础。

摘要： 本发明提供了一种桃叶卫矛的RAPD反应体系，属于生物学分子标记技术领域，所述RAPD反应体系总量为20μL，包括如下含量组分：模板DNA25～30ng，引物0.15～0.25μmol/L，MgCl22.50～2.70mmol/L，dNTP 0.10～0.15mmol/L，Taq DNA聚合酶1.75～2.50U，余量为ddH2O。本发明建立的桃叶卫矛的RAPD反应体系扩增出的条带清晰、完整，稳定性高，弥补了国内对桃叶卫矛遗传多样性研究的空白。

摘要： 本发明公开了一种用于猕猴桃的RAPD分子标记多态性选育方法及引物和试剂盒，该方法包含：以待测猕猴桃的基因组DNA为模板，以如SEQ ID.NO1所示的核苷酸序列或如SEQ ID.NO2所示的核苷酸序列为引物，进行PCR反应，根据PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳条带判断待测猕猴桃的变异多态性：若PCR扩增产物与对照相比特异条带大于或等于1条，同时扩增条带大于或等于7条，则该枝条、种苗或果实为具有丰富变异多态性；如果PCR扩增产物与对照相比无特异条带，且小于7条扩增条带，则枝条、种苗或果实为非变异多态性枝条。本发明的方法提高了猕猴桃育种和筛选效率，缩短育种年限。

摘要： 本发明公开了一种用于区分大蒜品种的RAPD引物，属于分子生物学分子标记领域。该方法通过设计筛选出的3个RAPD随机引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1～3所示，用于扩增未知大蒜品种的DNA，通过统计凝胶电泳后的谱带，区分出具有唯一特异性谱带的品种，并建立被区分品种的树形鉴别图。本发明的引物提高了RAPD反应的稳定性，操作简便，高效准确，节省引物，仅通过3次PCR就可轻松的将‘中蒜3号’等16个大蒜品种在分子水平上进行快速区分，所得到的品种鉴定图比聚类树更具有直观性，即根据品种鉴定图就可以快速找出能区分任意两个品种的引物，该方法可以实现大蒜种苗早期鉴定，在其他物种上也具有广泛的通用性。

摘要： 本发明公开了一种用于区分丝瓜品种的RAPD引物，属于分子生物学分子标记领域。该方法通过设计筛选出的4个RAPD随机引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1～4所示，用于扩增未知丝瓜品种的DNA，通过统计凝胶电泳后的谱带，区分出具有唯一特异性谱带的品种，并建立被区分品种的树形鉴别图。本发明的引物提高了RAPD反应的稳定性，操作简便，高效准确，节省引物，仅通过4次PCR就可轻松的将“长香玉”等20个丝瓜品种在分子水平上进行快速区分，所得到的品种鉴定图比聚类树更具有直观性，即根据品种鉴定图就可以快速找出能区分任意两个品种的引物，该方法可以实现丝瓜种苗早期鉴定，在其他物种上也具有广泛的通用性。

摘要： 本发明公开了一种高精度RAPD检测系统，包括高速高分辨率图像采集模块、红外照明光源、瞳孔对光反射组件、视觉通道、反射镜、眼罩、主控板及内嵌于计算机中的高速高精度瞳孔追踪模块和数据处理控制模块。本发明可实时显示双侧瞳孔跟踪状态，并提供测量控制按钮，方便医师使用，一个医师即可完成所有操作；通过主控板、瞳孔对光反射组件及数据处理控制模块可实现多模式测试模式，客服了单一模式的劣势；通过双相机高速高分辨率图像采集模块实现了双相机双目同步成像，解决了单相机双目成像瞳孔成像畸变的问题；通过高速高精度瞳孔追踪模块和数据处理控制模块提高了测量精度。