假单胞菌,铜绿

摘要： 目的 探讨医用蛆虫分泌排泄物(ES)对糖尿病足溃疡(DFU)患者中性粒细胞吞噬及杀菌作用的影响.方法 采用实验研究的方法.选择东部战区空军医院内分泌科,糖尿病足中心2020年6-12月收治的符合入选标准的30例DFU患者[男16例、女14例,年龄(64±7)岁].Percoll非连续性密度梯度离心法分离中性粒细胞,将每例患者细胞分别纳入生理盐水组、蛆虫ES组(每组30孔),分别加入无菌生理盐水和终质量浓度357 μg/mL(下同)蛆虫ES.培养1、2 h,行瑞氏染色观察并计算细胞吞噬率和吞噬指数.选择10例患者,将每例患者细胞分别纳入铜绿假单胞菌+中性粒细胞组、铜绿假单胞菌+中性粒细胞+蛆虫ES组(每组10孔),分别进行相应处理;另设置单纯铜绿假单胞菌组、铜绿假单胞菌+蛆虫ES组(每组10孔),分别加入铜绿假单胞菌+RPMI 1640培养液+无菌生理盐水、铜绿假单胞菌+RPMI 1640培养液+蛆虫ES.培养2h,平板菌落计数法计数活菌菌落.分别选择6、6、3例患者,同前将每例患者细胞分别纳入蛆虫ES组和生理盐水组(每组6、6、3孔)并行相应处理.培养6h,采用实时荧光定量反转录PCR法检测细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、溶菌酶mRNA表达,采用酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清液中IL-1β、IL-6含量,采用免疫荧光法观察溶菌酶表达阳性细胞情况.对数据行单因素方差分析、配对样本t检验、LSD检验及Wilcoxon符号秩和检验.结果 培养1 h,蛆虫ES组细胞吞噬率、吞噬指数[53.5％(49.7％,58.0％)、3.18(2.96,3.32)]分别与生理盐水组[52.0％(47.5％,55.2％)、3.15(2.96,3.25)]相近(Z=-1.701、-1.092,P＞0.05);培养2 h,蛆虫ES组患者细胞吞噬率、吞噬指数[70.0％(66.7％,72.0％)、4.47(4.22,4.96)]分别明显高于生理盐水组[58.0％(55.0％,60.0％)、4.11(3.52,4.24),Z=-4.786、-4.279,P＜0.01].培养2 h,铜绿假单胞菌+中性粒细胞组活菌菌落数明显低于单纯铜绿假单胞菌组(P＜0.01),铜绿假单胞菌+中性粒细胞+蛆虫ES组活菌菌落数明显低于铜绿假单胞菌+蛆虫ES组和铜绿假单胞菌+中性粒细胞组(P＜0.01).培养6 h,蛆虫ES组细胞IL-1β、IL-6、溶菌酶mRNA表达均较生理盐水组明显上调(t=-3.279、-4.273、-4.763,P＜0.05或P＜0.01),蛆虫ES组细胞培养上清液中IL-1 β、IL-6含量分别明显高于生理盐水组(t=-9.526、-6.447,P＜0.01),蛆虫ES组溶菌酶阳性细胞明显多于生理盐水组.结论 蛆虫ES可通过促进DFU患者中性粒细胞免疫防御相关因子和溶菌酶的产生,从而增强中性粒细胞对铜绿假单胞菌的吞噬、杀菌作用.

摘要： 目的 探讨苦连肤康洗剂中抑菌剂的合理加入量.方法 以铜绿假单胞菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉为试验菌株,依照《中国药典》四部通则1 121抑菌效力检查法,对含不同抑菌剂的苦连肤康洗剂进行抑菌效力测定.结果 0.1％羟苯乙酯-0.4％苯甲酸钠的组合添加量可使苦连康肤洗剂抑菌效力达到《中国药典》2015年版中皮肤给药制剂的相关规定.结论0.1％羟苯乙酯-0.4％苯甲酸钠作为苦连康肤洗剂的抑菌剂,安全有效.

摘要： 目的 构建铜绿假单胞菌重组质粒pGEX-LasR,并在大肠埃希菌中研究其表达效率.方法 提取铜绿假单胞菌PA01株DNA,PCR扩增lasR基因,并将其与pGEX-1λT连接,构建重组质粒pGEX-LasR.将pGEX-LasR转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,筛选阳性克隆,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定,然后异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Western印迹试验分析和鉴定表达产物.结果 PCR扩增出717 bp的lasR基因;双酶切和PCR显示重组质粒构建成功;SDS-PAGE发现重组BL21(DE3)可表达相对分子质量约为53000的LasR重组蛋白,表达量约占菌体总量的21％.Western印迹试验显示,LasR重组蛋白可与铜绿假单胞菌感染的鼠血清发生特异性反应.结论 本研究成功构建了lasR基因的原核表达载体pGEX-LasR,该质粒可在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效率表达具有免疫反应性的LasR重组蛋白.

摘要： 铜绿假单胞菌是一种院内感染的常见致病菌,采用疫苗防治该菌是当前研究的热点领域之一.PcrV蛋白作为一种转运蛋白,是重要的免疫调控靶点,可作为一种有效的疫苗候选分子.本文综述了PcrV蛋白、PcrV抗体、核酸疫苗以及重组鼠伤寒沙门菌疫苗等的研究现状,为新型疫苗研发提供参考.

摘要： 铜绿假单胞菌是伴有结构性肺病患者肺部感染的常见致病菌,常常导致细菌难以清除、感染慢性化,反复急性感染诱发细菌耐药性增强,使临床治疗困难.本文重点介绍铜绿假单胞菌群感效应的机制,从基础研究方面介绍大环内酯类药物在抑制铜绿假单胞菌群感效应中的作用,并从临床研究角度将大环内酯类药物对结构性肺病治疗的研究进展作一综述.

摘要： 2018年2月,青岛市市立医院收治1例经外院转入的严重烫伤合并肺炎和脓毒症的54岁男性患者.先后使用头孢菌素、万古霉素、亚胺培南/西司他丁+环丙沙星等抗感染治疗,但无明显效果.痰液、血液及创面分泌物多次细菌培养结果提示泛耐药铜绿假单胞菌感染.入院第4天调整抗感染治疗方案,补充血浆、红细胞及白蛋白,行营养支持及对症处理,同时进行用药监护,关注药物相关不良反应.经过10余天的治疗,患者感染得到有效控制,病情逐渐好转.本病例提示,严重烧伤患者易发生严重且致命的全身性感染,抗菌药物的不规范使用增加了泛耐药菌的感染风险,清晰的抗感染思路和抗菌药物的有效应用有助于提高感染治疗的成功率,对改善严重烧伤患者的预后具有重要价值.

摘要： 目的 研究耐药铜绿假单胞菌临床分离株β-内酰胺酶基因的携带状况,及其对β-内酰胺类抗菌药物耐药性的作用.方法 收集2018年3月至2019年5月浙江省杭州市和宁波市两个地区6所医院住院患者首次发现感染时临床分离的98株耐药铜绿假单胞菌,其中宁波地区39株,杭州地区59株.所有菌株采用琼脂稀释法对14种抗菌药物进行敏感性试验,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析A、B、C、D四类共39种β-内酰胺酶基因携带情况,阳性基因测序后作BLAST比对.采用SPSS 24.0软件对数据进行分析.结果 98株耐药铜绿假单胞菌中,多重耐药(MDR)菌占81.63％,广泛耐药(XDR)菌占12.25％.所有菌株对多黏菌素B敏感,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为94.90％和82.65％,宁波地区分离株对阿米卡星、妥布霉素和庆大霉素的耐药率高于杭州地区分离株(χ2 =31.962、22.440和29.671,P ＜0.01),杭州地区分离株对氨曲南和亚胺培南的耐药率均高于宁波地区分离株(χ2 =4.181和5.543,P＜0.05).共检出7种β-内酰胺酶基因,其中PDC和OXA-50群的检出率最高,均为100.00％,TEM、GES和OXA-10群只在宁波地区分离株中检出,KPC只在杭州地区分离株中检出.β-内酰胺酶基因阳性模式有7种,所有菌株均携带PDC和OXA-50群,55株(56.12％)只检出PDC和OXA-50群.检出PDC、OXA-50群基因为国内首次报道.结论 携带PDC和0XA-50群基因是导致铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的重要原因.

摘要： Objective To investigate the drug resistance of pseudomonas aeruginosa changes in the Sixth Hospital of Ningbo, Zhejiang province, in order to provide a basis for clinical rational use of antimicrobial drugs. Methods The clinical distribution and drug resistance to commonly used antimicrobial agents in 1970 strains of pseudomonas aeruginosa from the Sixth Hospital of Ningbo in 2014 －2016 were retrospectively analyzed. The data were statistically analyzed using WHONET 5. 6 software, excel software, SPSS17. 0 software. Results Clinical specimens isolated 15 963 strains of pathogenic bacteria,including 1 970 strains pseudomonas aeruginosa,accounted for 12. 34% . The detection rate of multi－drug resistance pseudomonas aeruginosa( MDRPA) reduced year by year, the detection rate in 2014 was 60. 95% ,which in 2015 was 58. 00% ,which in 2016 was 45. 58% . Pseudomonas aeruginosa was mainly isolated from sputum(67. 16% ),followed by wound secretion(23. 05% ). The detection rate of pseudomonas aeruginosa in ICU and geriatric department was higher,accounted for 20. 25% and 25. 28% respectively. The resistance of pseudomonas aeruginosa to many kinds of antimicrobial agents was increased from 2014 to 2016,the resistance rates to cefoperazone/ sulbactam were＞30% in 3 years,the resistance rate to imipenem was higher than meropenem. The drug resistance of pseudomonas aeruginosa isolated from sputum in ICU was higher than that in geriatric department(all P＜0. 05). Conclusion Pseudomonas aeruginosa nosocomial infection in the Sixth Hospital of Ningbo is severe,the infection rate and drug resistance monitoring should be strengthened,in order to reduce the infection rate and drug resistance.%目的 探讨宁波市第六医院铜绿假单胞菌的耐药性情况,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法 回顾性调查分析宁波市第六医院2014－2016年1 970株铜绿假单胞菌临床分布及对常用抗菌药物的耐药性;数据采用WHONET 5. 6软件、EXCEL2010软件、SPSS17. 0软件进行统计分析.结果 临床标本分离15 963株病原菌,其中铜绿假单胞菌检出1 970株,占12. 34% ,多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)检出率逐年降低;其中2014年检出率为60. 95% ,2015年为58. 00% ,2016年为45. 58% .铜绿假单胞菌主要分离自痰液占67. 16% ,其次为伤口分泌物占23. 05% ;ICU及老年医学科铜绿假单胞菌检出率较高,分别占20. 25%及25. 28% ;2014－2016年铜绿假单胞菌对多种抗菌药物的耐药性均呈上升趋势,头孢哌酮/舒巴坦3年中耐药率均＞30% ,亚胺培南的耐药性高于美罗培南. ICU与老年医学科痰液中分离的铜绿假单胞菌药物耐药率相比较,ICU检出的铜绿假单胞菌的耐药率高于老年医学科(均P＜0. 05).结论 宁波市第六医院铜绿假单胞菌医院感染情况严重,应加强对其感染率和耐药性的监测,以降低感染率和耐药性.

摘要： 目的 探讨黏液型铜绿假单胞菌单一用药与联合用药的临床治疗效果.方法 将2011年6月至2017年12月秦皇岛市第二医院就诊的108例黏液型铜绿假单胞菌感染者分为亚胺培南组(26例),亚胺培南联合阿奇霉素组(56例)和克林霉素联合左氧氟沙星组(28例).采用API鉴定卡及K-B纸片扩散法对菌株进行鉴定及药敏试验,采用平板菌落计数法统计治疗2、4、8d的菌落数,统计患者治疗后1周、2周的复检阳性率.结果 黏液型铜绿假单胞菌对7种药物敏感率超过70％.亚胺培南组治疗2、4、8 d痰样本中黏液型铜绿假单胞菌菌落数分别为(7.76±0.91)×104、(7.24±0.99)×104和(6.54±1.06)×104 g.cfu/mL,明显高于亚胺培南联合阿奇霉素组(t=12.78、18.06、19.16,P<0.05)、 克林霉素联合左氧氟沙星组(t=12.40、23.83、14.65,P<0.05).亚胺培南组1周、2周后复检阳性率为83.33％和75.00％,明显高于亚胺培南联合阿奇霉素组的48.21％和21.43％(x2=11.01、8.19,P<0.05)和克林霉素联合左氧氟沙星组的50.00％和17.86％(x2=20.57、17.11,P<0.05).结论 黏液型铜绿假单胞菌使用体外药敏试验敏感药物与能抑制细菌表面生物膜作用的药物联合应用,治疗效果较单一用药明显.%Objective To investigate the clinical effect of single drug and combined drug therapy for mucus-type Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa). Methods A total of 108 cases with mucoid P. aeruginosa infection in the Second Hospital of Qinhuangdao from June 2011 to December 2017 were divided into imipenem group (n=26), imipenem combined with azithromycin group (n=56) and clindamycin combined with levofloxacin group (n=28). Strains isolated from patients were identified by API strip. Antimicrobial susceptibility testing was performed by Kirby-Bauer disk diffusion method. Plate colony counting method was used to count the number of colonies at 2 , 4 and 8 days of treatment, and the positive rates of re-examination at 1 and 2 weeks after treatment were analyzed. Results Mucoid P. aeruginosa was sensitive to 7 antibiotics with the sensitivity of over 70％. The bacterial colonies of mucoid P. aeruginosa treated with imipenem alone for 2, 4 and 8 days were (7.76±0.91)×104, (7.24±0.09)×104 and (6.54± 1.06) ×104g.cfu/mL, respectively, which were significantly more than those treated with imipenem combined with azithromycin (t=12.78, 18.06, 19.16, P<0.05) and clindamycin combined with levofloxacin (t=12.40, 23.83, 14.65, P<0.05). The positive rates of re-examination in imipenem group were 83.33％ and 75.00％ at 1 and 2 weeks after treatment, which were significantly higher than those in imipenem combined with azithromycin group of 48.21％ and 21.43％ (x2=11.01, 8.19, P<0.05), clindamycin combined with levofloxacin group of 50.00％and 17.86％ (x2=20.57, 17.11, P<0.05). Conclusions Sensitive drugs combined with drugs which can inhibit bacterial surface biofilm effect have more obvious clinical effect on mucoid P. aeruginosa than sigle drug.

摘要： 目的 研究获得性肺炎老年患者铜绿假单胞菌分离株的毒力基因和耐药基因的携带状况.方法 收集2016年1月至2017年12月在山东省日照市中心医院收治的60岁以上获得性肺炎患者痰液中分离的36株铜绿假单胞菌,采用Vitek法对9种抗菌药物进行敏感性试验,采用聚合酶链反应及序列分析法分析9种毒力基因及23种耐药基因(17种β-内酰胺酶类和6种氨基糖苷类耐药基因),阳性基因测序后直接作BLAST比对.结果 所有菌株对碳青霉烯类药物均敏感,对三代头孢菌素类、氨基糖苷类和喹诺酮类药物耐药率分别为27.78％、47.22％和30.56％;每株均检出5～8种毒力基因,其中plcH、aprA、algD、exoS、exoT、exoY和toxA检出率极高,高达97.22％～100.00％;检出6种耐药基因,分别为blaCARB、blaDHA、aac(6')-Ⅰb、aaC(6')-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ和ant(2”)-Ⅰ,分离率为8.33％～27.78％;部分基因的PCR产物测序图已比对确认.结论 铜绿假单胞菌毒力基因的高携带率与老年人的获得性肺炎关系密切;铜绿假单胞菌未携带blaIMP、blaVIM和blaNDM碳青霉烯类β-内酰胺酶基因与对碳青霉烯类药物敏感密切相关;毒力基因和耐药基因的联合检测能更好的分析老年患者感染病原菌的致病机理.

摘要： 一种基于供水管网生长环的铜绿假单胞菌和少动鞘氨醇单胞菌的灭活方法，它涉及饮用水中两种致病菌铜绿假单胞菌和少动鞘氨醇单胞菌的灭活方法。它要解决现有饮用水中铜绿假单胞菌和少动鞘氨醇单胞菌灭活效果差的问题。方法：在城市供水厂的清水池中投加α‑FeOOH和H

摘要： 本发明提供一种沼泽红假单胞菌菌株，所述沼泽红假单胞菌菌株为沼泽红假单胞菌LY‑6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO∶M2014525，沼泽红假单胞菌LY‑6的生产工艺简单、培养时间短、成本低，且该菌株可通过简单、快捷、低成本的操作方法制备得到生防菌剂，可有效防治细菌性条斑病，并具有对环境友好、对人畜无毒、对作物无药害、施用简单方便、成本低等特点。

摘要： 本发明公开了一种施氏假单胞菌，其命名为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)EBT‑2，于2019年9月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2019731。本发明还公开了一种复合菌剂，该复合菌剂由保藏编号为CCTCC M 2019730的巴利阿里假单胞菌(Pseudomonas balearica)EBT‑1的扩培菌液和保藏编号为CCTCC M 2019731的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)EBT‑2的扩培菌液按体积比1∶1混合而成。本发明最后公开了上述复合菌剂在处理垃圾渗滤液膜浓缩液中的应用。本发明复合菌剂能够实现对垃圾渗滤液膜浓缩液的高效生物脱氮。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离的短尾病毒科噬菌体Pse‑AEP‑3(登录号：KCTC 13165BP)，所述短尾病毒科噬菌体Pse‑AEP‑3具有特异性杀死铜绿假单胞菌的能力，并且具有以SEQ ID NO:1表示的基因组，并且涉及一种使用含有所述短尾病毒科噬菌体Pse‑AEP‑3作为活性成分的组合物来预防或治疗铜绿假单胞菌导致的疾病的方法。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离的短尾病毒科噬菌体Pse‑AEP‑4(登录号：KCTC 13166BP)，所述短尾病毒科噬菌体Pse‑AEP‑4具有特异性杀死铜绿假单胞菌的能力，并且具有以SEQ ID NO:1表示的基因组，并且涉及一种使用含有所述短尾病毒科噬菌体Pse‑AEP‑4作为活性成分的组合物来预防或治疗铜绿假单胞菌导致的疾病的方法。

摘要： 本发明涉及生物领域，具体涉及抑制铜绿假单胞菌中基因rsaL表达的应用及基因rsaL的表达受抑制的铜绿假单胞菌。应用为提高铜绿假单胞菌的鼠李糖脂合成基因rhlA和rhlB的转录水平、合成鼠李糖脂的能力及swarming运动能力。本发明提供菌株鼠李糖脂合成基因rhlAB的转录水平，总鼠李糖脂以双鼠李糖脂Rha‑Rha‑C10‑C10和单鼠李糖脂Rha‑C10‑C10的合成获得产量更高，性能更加稳定，解决了理化诱变过程中的恢复突变问题。此外，本发明提供的鼠李糖脂菌株swarming运动能力加强。同时本发明构建的菌株在鼠李糖脂生产过程中不需要添加抗生素，有利用后续的分离纯化。

摘要： 本发明提供了一种铜绿假单胞菌的扩增引物组、应用及铜绿假单胞菌的检测方法，所述检测铜绿假单胞菌的方法，包括以下步骤：1)提取待检测铜绿假单胞菌样品的基因组；2)提供所述铜绿假单胞菌的特异基因oprL扩增引物组：CP1、CP2、F1、F2、D1、C1、R1、D2、C2、R2、C1*、C2*以及D1*、D2*；3)在包括所述扩增引物组的多交叉恒温扩增反应体系下，使用待检测铜绿假单胞菌样品的基因组核酸作为模板进行恒温扩增，得到扩增产物；4)使用金纳米生物传感器检测步骤3)的扩增产物。本发明所述方法以多交叉恒温扩增为基础，结合纳米生物检测技术，能够快捷，敏感，高特异性的鉴定铜绿假单胞菌。

摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及鉴别铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌的方法。本发明通过对铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌的基因组序列进行分析，提供了用于高分辨熔解曲线技术鉴别铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌的特异性引物对，其序列如SEQ ID NO.1‑2所示。在此基础上，建立了利用高分辨熔解曲线技术鉴别铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌的方法。该方法具有较高的灵敏度、特异性和准确性，能够高效检出铜绿假单胞菌和恶臭假单胞菌，具有操作简单、成本低、快速、高通量等优点，可用于临床检测、农业生产、食品安全等领域的假单胞菌的鉴别。

摘要： 本发明公开了提高铜绿假单胞菌杂交效率的溶液，其特征在于：选择浓度范围10％甘油+0.05M CaCl2、15％甘油+0.1M CaCl2作为提高杂交效率的溶液，15％甘油+0.1M CaCl2溶液为宜。本发明通过生理条件的不同改变外源基因进入受体细胞的效率。在实验室条件要想获得高效率的重组体并不是非常的容易，在此基础上进行了杂交溶液的配方以及配比的确定。通过使用该溶液可以提高细菌杂交过程中的效率，使我们可以获得更多的重组体。

摘要： 一种基于供水管网生长环的铜绿假单胞菌和少动鞘氨醇单胞菌的灭活方法，它涉及饮用水中两种致病菌铜绿假单胞菌和少动鞘氨醇单胞菌的灭活方法。它要解决现有饮用水中铜绿假单胞菌和少动鞘氨醇单胞菌灭活效果差的问题。方法：在城市供水厂的清水池中投加α-FeOOH和H