荧光染色

摘要： 目的:观察电阻抗法(PLT-I法)和激光染色法(使用荧光染料PLT-O法和使用核酸荧光染料PLT-F法)检测血小板结果准确性。方法:收集广东医科大学附属湛江中心医院2020年3月—2020年7月在门诊及住院患者中使用XN-1000型全自动血细胞分析仪检测显示血小板计数结果异常的90例标本。(其中大血小板组30例,小红细胞组30例,低值血小板组30例),分别用PLT-I法、PLT-O法及PLT-F法对三组标本进行血小板检测,计数结果与人工显微镜法进行比较分析。结果:PLT-I法在大血小板组及小红细胞组的检测结果与显微镜法比较均有明显差别,低值血小板组的检测结果与显微镜法检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PLT-O法及PLT-F法在三组标本的计数结果与显微镜法比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PLT-I法计数结果与显微镜法的相关性较差,PLT-O法及PLT-F法计数结果与显微镜法的相关性均较高。结论:PLT-I法检测血小板受大血小板、小红细胞、红细胞碎片及低值血小板等干扰,计数结果欠准确,可用PLT-O法或PLT-F法进行复检,三种血小板检测方法中PLT-F法计数结果与显微镜法最接近,准确性最高。

摘要： 解剖性肝切除术是以肝段为基本切除单位,在完整切除肿瘤的同时,连同肿瘤所在肝段内的门静脉流域一同切除。已有的研究结果表明,与非解剖性肝切除术相比,解剖性肝切除术有助于改善肝细胞癌患者预后,并减少术后并发症的发生。实时吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)荧光成像技术为肝脏切除术中可视化提供了一种新的工具,可以在肝脏表面和肝实质内部标定肝段界面,实时引导肝实质离断,提高了腹腔镜解剖性肝切除术的精准度。无论是正染还是反染,肝段的成功染色需要外科医师熟练地使用术中超声技术,将术前根据二维影像及术前三维重建确定的手术规划得以顺利实施。横劈Rouviere沟,纵劈尾状突,离断右尾状突肝蒂(G1c)使得寻找右后肝蒂一气呵成,在沿着缺血线劈开肝实质后,除了荧光显影,超声刀及CUSA“双主刀”模式追踪肝静脉技术也是至关重要的。肝静脉主干在肝脏背侧,腹腔镜下能够提供很好的“尾背侧视角”,使手术医师能轻松通过APR三角解剖显露肝右静脉主干,然后再通过尾背侧途径追踪肝静脉,遇到细小的肝静脉分支一定要果断用超声刀离断,以防止分支撕裂后肝静脉上形成愈来愈大的筛孔导致出血。另外,追踪肝静脉时一定要充分运用肝静脉表面的Laennec膜,充分游离静脉分支后上夹切断,尽可能不在肝静脉表面留下肝实质,否则很容易迷失方向,追踪不到主干。腹腔镜解剖性肝脏右后区切除术是难度较大的手术,熟练运用以上术前三维重建技术、术中超声技术、荧光染色技术及肝静脉追踪技术,有助于完成标准的手术。

摘要： 肺动脉瘤临床少见,通常源自于先天性疾病,因后天感染引起的肺动脉瘤更为少见,一般以结核、梅毒为主,真菌感染少见[1-2]。由毛霉感染导致的肺动脉瘤形成在国内外鲜见报道。本文报道1例糖尿病合并酮症酸中毒、继发肺毛霉病和肺动脉瘤患者,其起病隐匿,进展缓慢,经抗真菌治疗有效,但因未行手术治疗最终继发大咯血死亡。现对该案例作一报道,为临床医师早期发现和诊治该疾病提供帮助。

摘要： 目的研究单孔胸腔镜肺段切除术患者术前应用三维重建联合荧光染色法的效果,旨在为单孔胸腔镜肺段切除术提供技术支持,改善患者预后。方法纳入我院收治的66例肺结节患者,根据手术方法不同将患者分为对照组和观察组,每组33例。对照组患者采用传统膨胀萎陷法单孔胸腔镜肺段切除术治疗;观察组患者采用术前三维重建联合荧光染色法单孔胸腔镜肺段切除术治疗。观察2组患者手术情况、术后情况以及并发症发生情况。结果观察组手术时间和段间交界面出现时间短于对照组,术中出血量少于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组术后拔管时间、术后住院时间短于对照组,总引流量少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组并发症发生率仅为6.06%,明显低于对照组的27.27%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用术前三维重建联合荧光染色法进行单孔胸腔镜肺段切除术能快速、清晰地显示肺段间交界面,为手术提供技术支持,可缩短手术时间,减少术中出血量,安全性相对较高,值得临床应用及推广。

摘要： 近年来,肝癌的转化治疗取得显著进展。抗血管生成药物联合免疫治疗与肝动脉灌注化疗或放射治疗等局部治疗手段联合用于晚期或不可切除肝癌的治疗,可获得较高客观缓解率,不仅在缩小肿瘤、控制癌栓方面获得较以往更好的效果,患者生存也得到改善。本例视频精粹带来的就是1例经肝动脉灌注化疗结合靶向和免疫治疗方案转化治疗的中国肝癌分期Ⅲa期肝癌患者。转化治疗成功后,结合患者吲哚氰绿排泄试验、常规影像学及数字化三维技术等全面评估,患者若行右半肝切除,残余肝体积较小,存在较大手术风险,遂决定行荧光腹腔镜解剖性肝S5、S6、S8段定构切除术。对于联合肝段的解剖性切除术,使用吲哚菁绿荧光成像技术可以在肝脏表面和肝实质内部标定肝段界面,通过目标脉管等解剖标志进行定位,同时术中使用超声技术确保肿瘤切缘,从而达到定构切除肿瘤的目的,提高了腹腔镜解剖性肝切除术的精准度及安全性。

摘要： 目的探索小鼠原代肝细胞细胞分离培养的简化方法,并对其生物学特性进行鉴定。方法分离出生2~3 d小鼠肝组织,利用低温下机械剪碎法结合胶原酶消化,分离小鼠原代肝细胞,利用小鼠肝表面抗原CK-19进行荧光染色鉴定。结果成功地从乳鼠体内分离获得肝原代细胞,免疫荧光鉴定属于肝细胞。结论利用简单的机械加酶消化法也可以获得肝组织细胞,且得率较高,细胞活力较好。

摘要： 为探讨乌头碱对小鼠海马神经细胞(hippocampal neuronal cell line,HT22)凋亡的影响,用不同浓度乌头碱处理体外培养的HT22细胞不同时间后,用MTT法检测HT22细胞的存活率,荧光显微镜观察HT22细胞核的形态学变化,流式细胞术检测HT22细胞凋亡率。结果显示,与对照组相比,乌头碱可以极显著降低HT22细胞的存活率(P<0.01);Hoechst 33258荧光染色后,HT22细胞核呈现浓缩、碎裂及新月形,呈现明显细胞凋亡变化;各试验组HT22细胞凋亡率呈明显上升趋势,组间差异显著(P<0.05),且具有明显剂量-效应关系。表明乌头碱能诱导HT22细胞发生凋亡,为后续深入研究乌头碱毒性作用奠定基础。

摘要： 2019年全球约1 000万人罹患结核病,其中中国患者占全球感染总人数的8.4%^([1])。2020年全球结核病报告指出结核病最常见死因是由单一传染源导致的^([2]),结核分枝杆菌是常见的感染菌之一,可感染全身各器官,其中以肺部最易感染^([3-4])。早期诊断对治疗和阻断结核分枝杆菌传播具有重要意义。目前,检测结核分枝杆菌最常用的方法是Ziehl-Neelsen法,但其对处于潜伏期的结核分枝杆菌检出率较低^([5-6])。

摘要： 目的评价荧光染色法在真菌镜检中的应用价值。方法收集216例临床标本,同时进行革兰染色镜检、荧光染色镜检和真菌培养,3种方法中任意一种为阳性认为该标本真菌检测阳性,并以此标准,计算3种方法的真菌检出率,革兰染色法和荧光染色法的灵敏度和阴性预测值的差异,对比革兰染色与荧光染色镜下特点。结果216例临床标本,革兰染色法、荧光染色法和真菌培养法的真菌检出率分别为11.57%、37.50%和42.13%,革兰染色法和荧光染色法灵敏度分别是23.15%和75.00%,阴性预测值分别是56.54%和80.00%,革兰染色法与荧光染色法或真菌培养法比较差异均有统计学意义(P0.05)。荧光染色法比革兰染色法镜下真菌形态更清晰易辨。结论荧光染色法是快捷、准确的真菌检测方法,值得临床推广应用。

摘要： 目的评估真菌荧光染色在侵袭性真菌病诊断中的临床价值。方法选取2018年1月至2021年12月宁波大学医学院附属医院呼吸与危重症科收治的高度怀疑侵袭性肺部真菌感染的住院患者资料170例,回顾性分析患者肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)经真菌荧光染色、氢氧化钾湿片法、革兰染色的检测结果,分别计算3种方法的检出率和阳性率;回顾性分析血清(1,3)-β-D葡聚糖检测(G试验)、肺泡灌洗液半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)试验和肺泡灌洗液隐球菌荚膜多糖抗原检测的敏感度、特异性、阳性和阴性预测值,并与真菌荧光染色进行对比。结果170例患者中,90例被临床诊断为侵袭性肺部真菌感染,80例为非侵袭性肺部真菌感染。真菌荧光染色的检出率和阳性率均高于氢氧化钾湿片法和革兰染色;其中有136例患者同时进行了肺泡灌洗液真菌荧光染色和血清G试验,敏感度分别为51.5%、14.7%,特异性分别为88.2%、92.6%;66例患者同时进行了肺泡灌洗液真菌荧光染色和GM试验,敏感度分别为64.1%、38.5%,特异性分别为85.2%、59.3%;76例患者同时进行了肺泡灌洗液真菌荧光染色和隐球菌荚膜多糖抗原检测,敏感度分别为27.9%、81.4%,特异性分别为97.0%、97.0%。结论真菌荧光染色在侵袭性真菌病的诊断中具有重要的临床价值。

摘要： 神经导航技术是传统立体定向技术与计算机技术、影像技术相结合的产物,近年来被广泛应用于神经外科手术中.弥散张量成像及纤维示踪技术(Diffusion tensor imaging-Fiber tracer technology,DTI-FT),是目前唯一能够在活体上成功绘制人类白质纤微束的方法,在脑功能区病灶切除及其术前计划的制定、术中指导有重要的价值.本科室应用DTI-FT及术中荧光染色结合神经导航技术辅助切除颅内肿瘤病变79例,获得了较好效果。

摘要： 目的：探索荧光染色技术在犬精液品质检测中的应用.rn 方法：将犬精子标记相应的荧光染料，用荧光显微镜观察精子的质膜完整性、线粒体活性与项体完整性.rn 结果：在荧光显微镜下，死精子经PI染色后，其头部核区呈红色;具有活性线粒体的精子，经Rh123染色，其尾部中端线粒体部分呈现绿色荧光;顶体完整的精子，经FITC-PNA染色，精子项体区可见强绿色荧光.rn 结论：PI染色、Rh123染色及FITC-PNA染色分别用于评价精子质膜完整性、线粒体活性和顶体完整性，是评价犬精液质量的有效方法.

摘要： 尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法。与传统方法相比，本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1□5，作用时间为30 min。豚鼠补体最佳稀释度为1□5，两种分染染料H33342和PI的工作浓度均降低至5.3 μg/mL便可着色，染色时间延长至90 min，加大了染料工作液中柠檬酸钠的浓度，并在计数观察前增加压片这一步骤。染色过程中应注意避免血清物质对抗体补体的不良影响以及避光和快速的操作。双重荧光染色后小鼠胚胎内细胞团(ICM)细胞着色为蓝色，滋养层(TE)细胞着色为粉红色，数目清晰可辨。此方法可以作为一种简洁有效的小鼠胚胎质量鉴别参考方法。

摘要： 临床微生物检验学主要任务是明确感染的病原体、通过药物敏感实验为抗感染治疗方案的制定提供依据.详细分析了质谱、分子生物学、血清学、荧光染色几种临床微生物检验学新技术。

摘要： 为了研制与Aβ斑块具有高亲和力和选择性的99mTc标记的小分子探针用于早期诊断AD,本文在查耳酮结构的基础上通过整体设计法设计制备了三个具有不同共轭长度的三羰基环戊二烯基锝、铼配合物(测定了两个铼配合的晶体结构),并对它们进行了较为完整的生物评价.荧光染色结果表明化合物4与5可与AD病人脑内的Aβ斑块特异性结合.竞争结合实验数据显示这三个铼配合物与Aβ1-42聚集体具有一定的亲和力.

摘要： 本文设计并合成了两个具有苯乙烯结构单元的苯并噻唑衍生物.荧光染色实验表明它们均可与AD 双转基因小鼠脑内的Ab 斑块特异性结合.通过竞争结合实验显示它们与Aβ(1-42)聚集体具有一定的亲和性,Ki 值分别是89.7 nM 和15.6 nM,且结合位点与TZDM 相同.初步的实验结果表明这类化合物具有发展成为Ab 斑块显像剂的潜力.

摘要： 通过光镜、电镜、DNA Ladder法、流式细胞术、荧光染色对鸭肿头出血症病毒(DSHDV)诱导鸭胚原代成纤维细胞(DEF)凋亡情况进行检测。结果显示,光镜可见细胞形态学上出现细胞皱缩,染色质浓染边移；电镜观察到细胞胞浆浓缩,细胞核染色质凝聚、部分形成凋亡小体；荧光染色结果显示,在感染后24h有激发绿色荧光的凋亡细胞出现,随着时间的推移,激发红色荧光的死亡细胞数量增多；DNA Ladder检测到感染后24h～144h的DNA样品呈梯形条带；流式细胞术于感染后24h检测到凋亡细胞,其数量在72h～96h达到高峰,144h开始下降。研究结果表明,DSHDV在DEF增殖的过程中具有诱导宿主细胞凋亡的作用。

摘要： 以新鲜精液为对照，比较5种不同渗透压对犬精子冷冻保存的影响.rn 精液与稀释液1：1混合后于4°C平衡1.5h，再转入4°C舍甘油的冷冻液中平衡1.5h，精液最终稀释比为1：2，然后进行冷冻.分别检测冷冻前、后精子的运动度、质膜完整性和项体完整性.结果表明，与新鲜精液相比，冷冻前，接近等渗的稀释液(Ⅲ液)处理精子后，精子的运动度、质膜完整性与顶体完整性未发生显著变化(P>0.05);其它各组各指标均显著低于对照组(P0.05)：冷冻-解冻后，各试验组犬精子的运动度，质膜完整性与顶体完整性均显著低于对照组(P0.05)，Ⅴ液组冷冻效果最差，依次为Ⅰ液和Ⅱ液.说明，等渗和适当低渗的稀释液-冷冻液适合于犬精于冷冻保存.

摘要： 以新鲜精液为对照，比较5种不同渗透压对犬精子冷冻保存的影响.rn 精液与稀释液1：1混合后于4°C平衡1.5h，再转入4°C舍甘油的冷冻液中平衡1.5h，精液最终稀释比为1：2，然后进行冷冻.分别检测冷冻前、后精子的运动度、质膜完整性和项体完整性.结果表明，与新鲜精液相比，冷冻前，接近等渗的稀释液(Ⅲ液)处理精子后，精子的运动度、质膜完整性与顶体完整性未发生显著变化(P>0.05);其它各组各指标均显著低于对照组(P0.05)：冷冻-解冻后，各试验组犬精子的运动度，质膜完整性与顶体完整性均显著低于对照组(P0.05)，Ⅴ液组冷冻效果最差，依次为Ⅰ液和Ⅱ液.说明，等渗和适当低渗的稀释液-冷冻液适合于犬精于冷冻保存.

摘要： 以新鲜精液为对照，比较5种不同渗透压对犬精子冷冻保存的影响.rn 精液与稀释液1：1混合后于4°C平衡1.5h，再转入4°C舍甘油的冷冻液中平衡1.5h，精液最终稀释比为1：2，然后进行冷冻.分别检测冷冻前、后精子的运动度、质膜完整性和项体完整性.结果表明，与新鲜精液相比，冷冻前，接近等渗的稀释液(Ⅲ液)处理精子后，精子的运动度、质膜完整性与顶体完整性未发生显著变化(P>0.05);其它各组各指标均显著低于对照组(P0.05)：冷冻-解冻后，各试验组犬精子的运动度，质膜完整性与顶体完整性均显著低于对照组(P0.05)，Ⅴ液组冷冻效果最差，依次为Ⅰ液和Ⅱ液.说明，等渗和适当低渗的稀释液-冷冻液适合于犬精于冷冻保存.

摘要： 本发明公开一种用于风信子属植物根尖染色体荧光原位杂交染色体制片的处理方法，包括风信子染色体制片和染色体制片处理，重点解决了风信子利用现有荧光原位杂交技术很难检测到清晰杂交信号的缺陷。风信子属植物根尖含有多糖、多酚等次生代谢物，水培风信子根系直径约1.5‑2.0 mm，分生区域被较厚的表皮细胞包裹在根尖中部，因此压片时杂质较多，获得的染色体制片直接用于FISH杂交，很难检测到清晰的杂交信号，本发明通过酶处理染色体制片后再进行FISH杂交能够捕捉到微小但清晰的信号。本方法处理的风信子属根尖染色体制片适用于45S rDNA探针、5S rDNA探针、18S rDNA探针、端粒探针等FISH杂交。

摘要： 本发明公开了一种同时扩增人常染色体和Y染色体STR基因座的荧光标记复合扩增试剂盒及其应用。所述试剂盒可同时检测18个A‑STR、20个Y‑STR及性别(Amel)位点，实现A‑STR和Y‑STR两库同建，可用于个体识别、亲权鉴定、家系排查及家谱构建等，可同时用于案件的快速排查，达到缩短检测时间同时提高排除和确定犯罪嫌疑人的效率，20个Y‑STR基因座对于案件的排查具有很大的地域、姓氏指向性，可最大限度的排除无关家系。本发明可以检测出大量女性DNA样本背景下的微量男性DNA，是检测如强奸犯罪等混合斑检材的有力武器。且在检测父‑子亲权鉴定时，由于Y‑STR数据已包含而无需单独再做Y‑STR实验分析。

摘要： 降解检材分型的人类常染色体与性染色体上64个基因座的复合扩增检测试剂盒及其应用。所述的64个基因座包括常染色体上59个DIP和2个miniSTR基因座、Y染色体2个DIP基因座及1个性别鉴别基因。常染色体59个DIP基因座适用于东亚地区多种群体的鉴定；Y染色体上2个DIP基因座，能够对性别进行更准确的鉴定；2个miniSTR基因座多态性高，在提高整个体系的鉴别效能的同时，也有助于降解检材分型检测。本发明应用六色荧光标记技术一次性实现了对64个基因座的高效、特异、灵敏及均衡扩增，系统鉴别效能高。扩增子长度在200bp以内，适用于法医降解检材的检测。该检测体系在法医学个体识别、亲子鉴定，尤其是降解检材检测方面具有很高的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种荧光染色液的配置方法。将氢氧化钾、二甲基亚砜、氯化钠以及甘油混合生成甲液体，将荧光增白剂溶解于水中以生成乙液，将伊文思蓝溶解于水中以生成丙液，将乙液以及甲液混合生成丁液，将丙液与丁液混合以生成荧光染色液。在保证检出率的基础上有效的解决了现有技术中所存在的操作繁琐、过程耗时长，所需试剂多的问题。

摘要： 本发明公开了一种用于膨胀生物组织共价键荧光染色的染色液及其应用，特点是该染色液为将罗丹明B和EDC溶于pH为7.4的磷酸盐缓冲液，罗丹明B的浓度为7mM，EDC浓度为1M，其染色方法具体步骤如下：将固定后的膨胀生物组织置于水凝胶单体溶液中4°C浸泡1天，然后将水凝胶和组织置于50°C聚合成胶4小时，将成胶后的组织置于蛋白质变性溶液中70°C浸泡24小时，随即置于90°C浸泡24小时后清洗的步骤；室温下将样品浸泡于染色液中振荡48小时，随后将样品置于蛋白质变性溶液中70°C清洗24小时，之后将样品清洗的步骤；最后进行细胞核染色和三维成像，优点是能极大地降低染色成本。

摘要： 本发明公开了一种用于真菌检测的荧光素碳点染色试剂，以质量百分含量计，包括：荧光素碳点材料0.01％～0.1％、水99.90％～99.99％；所述荧光素碳点材料由以下质量百分含量的原料制成：荧光增白剂1％～2％、柠檬酸10％～15％、乙二胺8％～12％、水73％～78％。该试剂含有荧光素碳点材料，所述荧光素碳点材料荧光稳定，荧光强度高，对真菌的成像效果好。本发明还公开了采用上述荧光素碳点染色试剂染色的方法，该方法简单易行，耗时短。以及上述荧光素碳点染色试剂在采用荧光染色法进行真菌检测方面的应用。

摘要： 本发明公开了一种荧光染色纳米生物质炭及其染色方法和浓度分析方法，属于纳米材料技术领域。它包括将4‑氯‑7‑硝基‑2,1,3‑苯并氧杂恶二唑(即NBD‑Cl)在有机溶剂中溶解，得到染色液，再将纳米生物质炭放入染色液中进行染色；所述染色的方法包括：对纳米生物质炭和染色液的混合物震荡并升温至T1，在T1温度保温染色20min以上，再将所述混合物置于温度为T2的环境中染色5min以上；所述T1≥25°C，所述T2≤5°C。本发明能通过染色液对纳米生物质炭样品进行热染色处理，染色效果稳定，速度快，染色流程只需40min左右。

摘要： 本发明涉及医疗试剂技术领域，具体涉及一种阴道分泌物荧光染色液及其染色方法，包括制备阴道分泌物荧光染色液；将分泌物样本加入0.5ml的生理盐水后混匀，得到稀释样本；将稀释样本滴于载玻片上并将稀释样本烤干，得到烤干样本；在烤干样本上加入阴道分泌物荧光染色液进行染色，得到染色样本半成品；将盖玻片盖在染色样本上半成品；使用吸水纸将载玻片与盖玻片之间的阴道分泌物荧光染色液吸出，采用本发明的染色方法，可将细胞和微生物的形态清晰的呈现出来，更利于医师的检验，得到染色样本成品，解决现有的湿法染色容易造成漏检的问题。

摘要： 本发明涉及一种人的染色体探针和荧光染色核型试剂盒的设计及应用方法，利用人类参考基因组序列设计了一批能够用于人类染色体显带的寡核苷酸探针，并基于该寡核苷酸探针，发明了染色体荧光染色核型试剂盒，利用该试剂盒处理后的染色体染色后，可以观察到染色体上出现明显的带型丰富的红绿信号带型，基于染色体信号的分布特征，可区分同源染色体，能够高效的进行染色体核型分析。本发明方法操作简单、快捷、高效、经济，具有带型清晰、多色、容易识别的优点，能够更低成本地完成染色体核型观察实验，为人类染色体异常筛选、临床医学检验提供了有利的帮助，是人类染色体鉴定常用G显带技术潜在的替代技术。

摘要： 本实用新型公开了一种真菌荧光染色液便捷染色装置，包括底座，底座上安装第一螺纹柱，第一螺纹柱上螺纹连接有瓶体，瓶体侧面安装传动装置，瓶体上侧安装气动装置，传动装置包括：固定支架、第一转轴、按压把手、第二转轴、传动杆、活塞和橡胶圈，固定支架固定安装在瓶体上，第一转轴转动连接在固定支架上，按压把手固定安装在第一转轴上，第二转轴转动连接在按压把手上，传动杆一端固定安装在第二转轴上，传动杆远离第二转轴的一端滑动连接在气动装置上，活塞固定安装在传动杆上，多个橡胶圈固定安装在活塞上。本实用新型体积小，便于清洗，方便保存荧光染色液。