摘要：[目的]制备荷斯坦奶牛X染色体特异性荧光原位杂交探针，以期建立一种独立评估分离精子纯度的手段和进一步完善牛早期胚胎的性别鉴定技术。[方法]采用显微操作仪显微分离奶牛的X染色体，应用DOP-PCR(degenerate oligonu-cleotideprimer-PCR)进行体外扩增和荧光标记以制备牛X染色体特异性荧光原位杂交探针。标记后的探针与牛中期染色体进行荧光原位杂交。[结果]DOP-PCR扩增的片段大小主要集中在200-1200BP之间;酶切标记后的探针大小介于200-500BP之间。标记后的X染色体探针与其中期染色体杂交，X染色体有明显的杂交信号。这说明采用显微操作仪分离的X染色体能有效的制备牛X染色体特异性荧光原位杂交探针，并且所制备的探针也具有特异性。[结论]本试验首次利用显微操作仪成功分离了荷斯坦奶牛的X染色体，并且制备了具有检测有效性的牛X染色体荧光原位杂交探针，该方法的成功建立为进一步完善牛早期胚胎的性别鉴定技术和独立评估牛分离精子的纯度奠定了基础。
