基因毒性

摘要： 通过建立HPLC柱前衍生化法对不同厂家的聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛、乙醛进行检测分析,并在不同条件下监测甲醛和乙醛对阿达木单抗聚集的影响,分别从基因毒性杂质控制和对单抗制剂稳定性影响两方面综合考量,初步得出二者的控制限度。HPLC柱前衍生化法采用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)作为衍生化试剂,以乙腈和水为流动相,在C_(8)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱上梯度洗脱进行分离,检测波长为360 nm,用外标法定量。方法学验证结果表明,该方法适用于聚山梨酯80和聚山梨酯20中微量甲醛和乙醛的定量分析。对不同厂家不同批次的聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛或乙醛的检测分析表明二者含量差异较大,聚山梨酯80中甲醛和乙醛含量明显高于聚山梨酯20;用分子排阻色谱法对经甲醛和乙醛处理的阿达木单抗分子聚集体变化进行监测后发现,甲醛对阿达木聚集的影响显著高于乙醛。按照《人用药品注册技术国际协调会议指南:诱变性杂质评估和控制》(ICHM7)的要求从风险评估的角度计算单抗制剂用聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛和乙醛的杂质限度,结合对单抗聚集稳定性的影响,给出其中甲醛和乙醛初步的限度建议为:分别不得过7μg/g和765μg/g。

摘要： 建立了测定硝苯地平中基因毒性杂质2、6和12的超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Orbitrap HRMS)。样品以甲醇为溶剂,提取后直接进样分析。采用ACE EXCEL^(TM)3 C18-AR色谱柱(150 mm×4.6 mm,3μm)分离,流动相为甲醇-0.1%甲酸水(65∶35,v/v),等度洗脱。质谱部分采用电喷雾电离(ESI)源。采用正离子平行反应监测(PRM)扫描模式,质谱分辨率为35000 FWHM,杂质2、6、12的[M+H]^(+)母离子准确质量数分别为m/z 347.1230、361.1026、347.1230,提取[M+H]^(+)碎片离子准确质量数分别为m/z 315.0968、298.1069、315.0968,归一化碰撞能量(NCE)分别为10%、42%、10%,外标法定量。对方法进行了详细的方法学验证,结果表明,该法专属性良好,溶剂对杂质测定无干扰;杂质2、6、12质量浓度与其峰面积在0.2~100 ng/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数(r)均≥0.9998;杂质2、6、12在低、中、高3个水平下的回收率为96.9%~105.0%,RSD为1.21%~5.12%,检出限均为0.05 ng/mL,定量限均为0.2 ng/mL。应用该方法对3批硝苯地平样品中的杂质2、6、12进行测定,3批样品均未检出杂质6,但均检出杂质2和杂质12,其检出量未超过限度。该方法灵敏、快速、准确,操作简便,可为药企对硝苯地平的质量控制提供参考,并为药监部门的监管提供有力的技术支持。

摘要： DCAL是氯羟吡啶中比较容易产生的一种基因毒性杂质,一般在氯羟吡啶中的残留要控制在25×10-6之下,大于31.2×10-6时,DCAL进入动物体内,通过动物粪便排泄,排泄物进入农田后会造成农田土壤板结,导致农作物生长不良.DCAL的合成方法文献报道并不多,如何合成并制得DCAL标准品对氯羟吡啶的质量监控具有重要意义.

摘要： 目的 建立液相-高分辨质谱联用(LC-HRMS)法测定盐酸二甲双胍缓释片中7种亚硝胺杂质的检测方法.方法 以十八烷基键合相硅胶为填料的色谱柱(100 mm×4.6 mm,3μm);以0.1％甲酸-水为流动相A,0.1％甲酸-甲醇为流动相B,线性梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源,平行反应监测模式.结果 7种亚硝胺杂质在1～100 ng/mL范围内线性关系良好;定量限在0.5～1 ng/mL之间;进样精密度RSD值在3.3％～7.4％之间;7种亚硝胺杂质的加样回收率在82.6％～111.4％的范围内.结论 该方法准确度和专属性好、灵敏度高,适用于盐酸二甲双胍缓释片中亚硝胺基因毒性杂质的检查与控制.

摘要： 目的 建立高效液相色谱法同时测定对乙酰氨基酚口服混悬液中有关物质及防腐剂.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱为Hypersil GOLD C18色谱柱,流动相A为0.1％三氟乙酸溶液,流动相B为0.1％三氟乙酸的乙腈溶液,梯度洗脱,流速为每分钟1.0ml,柱温35°C,检测波长为245nm,进样量20μl.结果 有关物质杂质A(对乙酰氨基酚二聚体)、杂质B(对氯乙酰苯胺)以及7个未知杂质,防腐剂苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯均能与主成分及各种辅料完全分离;杂质A、杂质B以及防腐剂苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯的检测质量浓度分别在0.016μg/ml～6.4μg/ml、0.032μg/ml～0.384μg/ml、0.85μg/ml～16.95μg/ml、0.125μg/ml～2.4μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r=1、1、0.9999、1),检测限分别为0.065ng、0.14ng、0.34ng、0.10ng,定量限分别为0.32ng、0.67ng、1.71ng、0.26ng,平均回收率分别为99.0％、95.4％、99.8％、100.0％.结论 该方法灵敏、准确、专属性强、重复性好,可用于对乙酰胺基酚口服混悬液的质量控制.

摘要： 目的建立高效液相色谱法同时测定对乙酰氨基酚口服混悬液中有关物质及防腐剂.方法采用高效液相色谱法.色谱柱为Hypersil GOLD C18色谱柱,流动相A为0.1%三氟乙酸溶液,流动相B为0.1%三氟乙酸的乙腈溶液,梯度洗脱,流速为每分钟1.0ml,柱温35°C,检测波长为245nm,进样量20μl.结果有关物质杂质A(对乙酰氨基酚二聚体)、杂质B(对氯乙酰苯胺)以及7个未知杂质,防腐剂苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯均能与主成分及各种辅料完全分离;杂质A、杂质B以及防腐剂苯甲酸、对羟基苯甲酸丁酯的检测质量浓度分别在0.016μg/ml~6.4μg/ml、0.032μg/ml~0.384μg/ml、0.85μg/ml~16.95μg/ml、0.125μg/ml~2.4μg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r=1、1、0.9999、1),检测限分别为0.065ng、0.14ng、0.34ng、0.10ng,定量限分别为0.32ng、0.67ng、1.71ng、0.26ng,平均回收率分别为99.0%、95.4%、99.8%、100.0%.结论该方法灵敏、准确、专属性强、重复性好,可用于对乙酰胺基酚口服混悬液的质量控制.

摘要： 当DNA受到攻击尤其是发生DNA双链断裂(DSB)后,组蛋白H2AX的139位丝氨酸迅速磷酸化,生成磷酸化H2AX即γ-H2AX.γ-H2AX在DSB位点大量聚集并形成焦点,参与DNA的损伤修复,且γ-H2AX焦点数与DSB数量成正比.目前研究表明,γ-H2AX是表征DNA损伤的特异性生物标志物,可作为基因毒性的特异性效应指标.旨在检测γ-H2AX的试验(简称γ-H2AX试验)已被应用于众多与DNA损伤相关的基础研究和医学诊断中.本文介绍γ-H2AX的生成及生物学意义,论述基于免疫化学技术及质谱技术的γ-H2AX试验在体外基因毒性评价中的应用、γ-H2AX试验与其他基因毒性试验的性能对比及γ-H2AX与其他毒性终点标志物的互补性,并对γ-H2AX试验在基因毒性风险评估中的应用前景予以展望.

摘要： 以含碘水为研究对象,探究了先氯后氨工艺的THM4与I-THMs生成特性,并探究了该工艺的关键影响因子——氯接触时间、溴碘比、pH,同时以CTI与GTI为指标对其进行毒性评价,为水厂工艺调节提供理论依据.其中,先氯后氨工艺的总T H Ms生成量介于氯胺消毒与自由氯消毒之间,并且随着氯接触时间的增加,生成的CHCl3增加了26.5％,而I-THMs减少了58.7％;随着溴碘比的增加,溴代率和生成的THM4呈上升趋势而碘代率和I-THMs呈下降趋势;溴碘共存时,该工艺受pH影响复杂,在pH=6时产生的THMs总量最少.从毒性方面进行评价,先氯后氨工艺的毒性介于氯化和氯胺化消毒之间,30 min为比较合适的氯接触时间,此时与pre-NH2 Cl相比,细胞毒性和基因毒性分别减少了79.0％和53.4％;在溴碘比为3:1时产生的毒性最低.

摘要： 复合树脂具有良好的修复效果,临床上应用广泛。研究表明树脂基材料中未完全反应的残留单体具有严重的细胞毒性和遗传毒性,造成细胞功能不可逆性损伤。但由于复合树脂生物相容性和粘接性良好、美观性好、操作性强、修复时间短,且树脂弹性模量接近牙本质,用树脂充填后,牙齿具有极好的抗折裂性,因此研究其对细胞的生物相容性具有很重要的临床意义,可为其临床应用提供科学依据,并为树脂材料的发展奠定基础。

摘要： 目的:建立高效液相色谱方法测定更昔洛韦缩合物中2种潜在基因毒性杂质对甲苯磺酸甲酯和对甲苯磺酸乙酯.方法:采用Agilent Eclipse plus C18色谱柱(250 mmx4.6 mm,5 μm),以0.1％磷酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B进行等度洗脱用二极管阵列检测器在检测波长225 nm处检测2种目标物.结果:2种目标物在一定质量浓度范围内均与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)分别为15.852,15.848 ng·mL-1;对实际样品进行加标回收试验,所得回收率分别为101.3％～106.0％,103.1％～106.7％.结论:本方法适用于样品更昔洛韦缩合物中对甲基苯磺酸甲酯和对甲基苯磺酸乙酯的检测.

摘要： 为了明确饮用塘水与肝癌的病因学关系,本文采用一组生物学检测技术和实验动物模型,系统地研究了广西某肝癌高发区居民饮用塘水的基因毒性和致癌性,并对茶多酚(GTP)抗癌的效果进行了评价.

摘要： 空气中细颗粒物(PM2.5)已成为影响人类健康的公认因素,本文基于国内外关于PM2.5对人体影响的研究现状,从PM2.5对呼吸系统的影响进行综述.目前，学术界对PM2.5造成呼吸系统损伤机制的研究主要有炎症反应、氧化应激、免疫毒性、基因毒性四个方面。

摘要： 本文采用彗星实验对4种金属离子对THP-1细胞DNA损伤毒性进行了研究，根据DNA损伤程度探讨金属离子对人外周淋巴细胞系的基因毒性。四种金属离子均可引起THP-1细胞DNA损伤。其中THP-1细胞对Hg2+、Cu2+更为敏感，5μmol/L即可导致DNA极显著损伤，而Zn2+、Cd2+暴污组则在10μmol/L时引起细胞DNA极显著损伤。

摘要： 作为新兴污染物,防晒霜在饮用水中的行为引起了广泛关注,特别地,它们在消毒过程中可能产生毒性更强的转化产物.作为一种使用最广泛的防晒霜,oxybenzone(BP-3)的转化行为应予以重视.本文研究了BP-3与氯反应的动力学行为、转化产物以及基因毒性变化.BP-3与氯作用符合伪一级动力学和二级动力学.用LC-MS/MS监测到三种降解产物,其稳定性顺序为三氯甲氧基酚＞二氯代BP-3＞一氯代BP-3.用GC-ECD监测到四种DBPs(氯仿、三氯乙酸、二氯乙酸和水合三氯乙醛),它们在BP-3与氯反应初期很快形成,之后其浓度随反应时间增大但很缓慢,最后保持稳定.四种消毒副产物的最大摩尔产率(DBP/BP-3)分别为12.02％,6.28％,0.90％和0.23％.SOS/umu毒性试验表明,氯化过程产生了基因毒性更强的转化产物,且毒性与三氯甲氧基酚的响应呈显著的正相关关系.可见,BP-3可以被氯很快降解,但在氯降解过程中产生了基因毒性更强的转化产物,对饮用水安全构成威胁.

摘要： 近来，黄酮类被作为抗癌、抗氧化等多功效物质，日益升温。然而，人们往往忽略了过多的摄食黄酮类物质的潜在危险。尽管黄酮表现出有益健康的效果，但一些研究指出了它们的诱变性和遗传毒性。本文通过DNA嵌入剂原理解释了过度摄入黄酮类物质的潜在危害。

摘要： 近来，黄酮类被作为抗癌、抗氧化等多功效物质，日益升温。然而，人们往往忽略了过多的摄食黄酮类物质的潜在危险。尽管黄酮表现出有益健康的效果，但一些研究指出了它们的诱变性和遗传毒性。本文通过DNA嵌入剂原理解释了过度摄入黄酮类物质的潜在危害。

摘要： 近来，黄酮类被作为抗癌、抗氧化等多功效物质，日益升温。然而，人们往往忽略了过多的摄食黄酮类物质的潜在危险。尽管黄酮表现出有益健康的效果，但一些研究指出了它们的诱变性和遗传毒性。本文通过DNA嵌入剂原理解释了过度摄入黄酮类物质的潜在危害。

摘要： 近来，黄酮类被作为抗癌、抗氧化等多功效物质，日益升温。然而，人们往往忽略了过多的摄食黄酮类物质的潜在危险。尽管黄酮表现出有益健康的效果，但一些研究指出了它们的诱变性和遗传毒性。本文通过DNA嵌入剂原理解释了过度摄入黄酮类物质的潜在危害。

摘要： 本发明涉及一种制备非基因毒性二乙酰大黄酸(双醋瑞因)的方法，其包括：i)将粗双醋瑞因(或粗大黄酸)转化为水溶性盐；ii)将盐双醋瑞因(或大黄酸)溶液吸附至疏水性树脂；iii)使用合适的溶剂洗涤以去除杂质(特别是基因毒性杂质)；iv)洗脱以回收双醋瑞因或大黄酸；v)若所述方法应用于大黄酸，通过乙酰化将其转化为双醋瑞因；vi)纯化的双醋瑞因的酸化及其回收，以及干燥。本发明也涉及通过本发明的方法获得的非基因毒性双醋瑞因，其中基因毒性杂质的总含量为1ppm以下，所述非基因毒性双醋瑞因适于制备符合目前卫生局要求的用于人类和兽医用途的药物制剂，特别是胶囊。

摘要： 公开了包含诱导率高于40的SOS调节的启动子的重组核酸序列，所说的启动子被有效地连接到编码报道分子的核酸序列上，所编码的报道分子能产生可以发光形式测定的信号。还公开了包含这样的核酸序列的生物传感器，以及使用这种生物传感器检测基因毒性和多种基因毒性化合物的存在的方法。

摘要： 本发明涉及一种制备非基因毒性二乙酰大黄酸(双醋瑞因)的方法，其包括：i)将粗双醋瑞因(或粗大黄酸)转化为水溶性盐；ii)将盐双醋瑞因(或大黄酸)溶液吸附至疏水性树脂；iii)使用合适的溶剂洗涤以去除杂质(特别是基因毒性杂质)；iv)洗脱以回收双醋瑞因或大黄酸；v)若所述方法应用于大黄酸，通过乙酰化将其转化为双醋瑞因；vi)纯化的双醋瑞因的酸化及其回收，以及干燥。本发明也涉及通过本发明的方法获得的非基因毒性双醋瑞因，其中基因毒性杂质的总含量为1ppm以下，所述非基因毒性双醋瑞因适于制备符合目前卫生局要求的用于人类和兽医用途的药物制剂，特别是胶囊。

摘要： 公开了包含诱导率高于40的SOS调节的启动子的重组核酸序列，所说的启动子被有效地连接到编码报道分子的核酸序列上，所编码的报道分子能产生可以发光形式测定的信号。还公开了包含这样的核酸序列的生物传感器，以及使用这种生物传感器检测基因毒性和多种基因毒性化合物的存在的方法。

摘要： 公开了包含诱导率高于40的SOS调节的启动子的重组核酸序列,所说的启动子被有效地连接到编码报道分子的核酸序列上,所编码的报道分子能产生可以发光形式测定的信号。还公开了包含这样的核酸序列的生物传感器,以及使用这种生物传感器检测基因毒性和多种基因毒性化合物的存在的方法。

摘要： 本发明提供一种依折麦布中基因毒性杂质检测方法，使用高效液相色谱法进行检测，采用外标法计算依折麦布中基因毒性杂质的含量。本发明能够同时检测依折麦布中对氟硝基苯、对氟苯胺、对氯苯胺、对羟基苯甲醛四种基因毒性杂质，该方法具有灵敏度高、专属性强、准确度高、耐用性好等优点，可以快速有效的检测依折麦布中的基因毒性杂质的含量，以便控制依折麦布质量。

摘要： 本发明涉及药物分析技术领域，具体公开一种利福平中基因毒性杂质的检测方法。所述检测方法包括配制空白溶液、对照品溶液和供试品溶液，采用顶空进样‑气相色谱‑质谱联用法进行检测。本发明提供的检测方法，实现对利福平原料药中甲醛的定量和定性分析，该方法专属性强，并具有优异的重复性、准确度、灵敏度和线性关系，此外，该方法还具有较低的检测限，甲醛的检测限为0.026μg/mL，定量限为0.077μg/mL，满足利福平原料药中甲醛的检测要求。

摘要： 本发明公开了一种高效液相色谱法测定利伐沙班中潜在基因毒性杂质的方法，包括：配制对照品溶液、供试品溶液，对对照品溶液、供试品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件为：采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A为8～12mmol/L辛烷磺酸钠溶液，含0.08～0.12％V/V磷酸，流动相B为甲醇和乙腈的体积比为95:5～85:15的混合溶剂，梯度洗脱，流速为0.8～1.2mL/min，检测波长为220～240nm；采用外标法测定利伐沙班中4‑(4‑吗啉基)‑苯胺的含量。本发明方法用于检测利伐沙班中的基因毒性杂质4‑(4‑吗啉基)‑苯胺，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，且检测量更低。

摘要： 本发明属于分析测试技术领域，具体为以2‑Cl‑AAI、(trans)3‑Cl‑AAI、(cis)3‑Cl‑AAI为标准曲线溶液，液相色谱‑质谱联用法检测甲磺酸雷沙吉兰中基因毒性杂质2‑Cl‑AAI、(trans)3‑Cl‑AAI、(cis)3‑Cl‑AAI的含量。本发明具有良好的专属性和系统精密度，溶液在室温条件下12hr稳定，2‑Cl‑AAI在浓度为0.2536～5.0717ng/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好，(trans)3‑Cl‑AAI在浓度为0.2573～5.1459ng/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好，(cis)3‑Cl‑AAI在浓度为0.2518～5.035ng/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好，方法的回收率均在98.5～101.3％之间，重复性、中间精密度均满足要求，且具有较低的检出限(0.25ng/mL、0.26ng/mL、0.076ng/mL)和定量限(0.51ng/mL、0.51ng/mL、0.25ng/mL)。

摘要： 液质联用测定艾司奥美拉唑钠中潜在基因毒性杂质的方法。本发明属于药物检测技术领域，公开了一种液质联用(LC‑MS)测定艾司奥美拉唑钠原料药中7种潜在基因毒性杂质的方法。本发明通过采用特定的梯度洗脱方式，可将7种潜在基因毒性杂质与艾司奥美拉唑钠分离开来；并通过对条件的优化，使得各基因毒性杂质检测的灵敏性及其含量的准确性进一步得到提升。克服了高浓度样品污染质谱且影响杂质定量重复性的技术问题，该方法专属性好、分析速度快、重现性较好。便于对艾司奥美拉唑钠原料质量的检测与监控，方法具有普适性，适于推广与应用。