冷驯化

摘要： 【目的】冷驯化是植物获得抗寒能力的重要生理过程,研究葡萄自然冷驯化对低温的响应过程,对揭示葡萄抗寒力的形成过程及生理机制具有重要意义。【方法】以贺兰山东麓赤霞珠和北红1年生成熟枝条为试验材料,在2020—2021年,通过测定自然冷驯化过程中的生理生化响应指标,包括过冷却点SD、结冰点FP、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、电导率Con、Ca含量、蔗糖Su含量、ABA含量等,构建了抗寒力指数反映葡萄枝条冷驯化过程,运用方差分析、t检验和数值模拟方法,分析葡萄生理生化参数对低温的响应过程,定量评价自然冷驯化过程对葡萄枝条抗寒性的影响。【结果】(1)最低气温是冷驯化过程的主导因子;低温引发葡萄枝条含水率降低,Ca含量增加,改善枝条渗透调节能力;随着冷驯化温度降低,葡萄枝条蔗糖含量增加,抗寒性提高。枝条的ABA含量与日照时间(光周期)存在显著的正相关关系,但与低温关系不显著;降水(灌溉)降低了葡萄枝条抗寒力。(2)北红枝条抗寒力强于赤霞珠,年际间赤霞珠过冷却点SD和电导率Con均存在显著差异,北红过冷却点SD存在显著差异,其他因子差异不显著。(3)葡萄冷驯化过程是渐进累积的,葡萄抗寒力随着冷驯化气温的降低而增强,葡萄抗寒力指数与低温存在典型的Logistic非线性关系,在气温低于18.0°C时,葡萄启动冷驯化过程,抗寒力随温度降低而增强;在气温低于12.0°C后,葡萄抗寒能力迅速增大;在气温低于3.0°C时,葡萄枝条的抗寒力增大趋缓,至埋土前,葡萄抗寒力趋于最大。【结论】随着夏末日照时间缩短,葡萄枝条ABA含量逐步增加;低温在冷驯化过程中起主导作用,随着气温降低,葡萄枝条含水率下降,Ca和蔗糖含量增加。随气温降低,葡萄枝条抗寒力呈Logistic非线性渐进累积增大。

摘要： 为鉴定和评价马铃薯新品种闽薯2号的耐寒性,以闽薯2号和费乌瑞它(CK)为试验材料,采用电导率法和田间自然霜冻法,测定驯化前后离体叶片半致死温度(LT_(50)),霜冻前后植株损伤等级、形态特征和叶片微生物多样性指数。结果表明,闽薯2号冷驯化前、后的LT_(50)均显著低于费乌瑞它;低温霜冻后闽薯2号的损伤等级显著低于费乌瑞它;闽薯2号霜冻后叶片组织的微生物变化比费乌瑞它小。综上,闽薯2号比费乌瑞它具有更强的耐寒性,建议在我国马铃薯南方冬作区推广种植。

摘要： 【目的】对茶树Whirly基因家族成员进行鉴定及表达分析,为进一步探究Whirly基因家族在茶树生长发育和逆境响应的作用机理提供参考。【方法】以茶树品种北茶36、龙井43和大面白的叶片为材料,基于Whirly基因家族的保守结构特征,从茶树基因组鉴定CsWhys基因家族成员,利用生物信息学软件对其进行可视化分析,并对组织特异性和时空表达模式分析。【结果】从舒茶早茶树基因组中鉴定获得2个CsWhy基因,命名为CsWhy1(XP_028085682.1)和CsWhy2(XP_028102803.1)。系统进化树分析结果显示CsWhy1和CsWhy2蛋白分别与已知的定位于叶绿体和线粒体的Whirly蛋白聚为一类。CsWhys基因启动子区域富含激素、胁迫和MYB转录因子结合位点等顺式作用元件,种类呈多样性。组织表达特性分析显示,CsWhy1在茶树叶片和芽中具有较高的表达丰度;CsWhy2则在茶树不同组织中均具有较高的表达丰度。时空表达模式分析结果发现,CsWhys的表达在不同时间点受低温、干旱、ABA、GA和HO处理诱导上调。冷驯化条件下,CsWhy1在抗寒品种龙井43和不抗寒品种大面白中呈现相反的表达模式,而CsWhy2在2个品种中均下调表达。【结论】茶树基因组中2个CsWhys基因具有Whirly基因家族的典型特征,茶树CsWhys基因的表达具有明显的组织特异性,推测CsWhys基因家族在茶树芽叶生长和抗逆过程中起发挥了重要调控作用。

摘要： 冷胁迫是限制植物生长和分布,降低作物产量的重要环境因子.冷驯化是温带植物对抗冷胁迫的有效手段.本研究以具有耐寒能力的高山植物牛皮杜鹃(Rhododendron chrysanthum Pall.)作为研究对象,探究冷驯化前后牛皮杜鹃的基因表达和代谢通路的变化.基于转录组数据的测序结果:常温组和驯化组的总reads分别为103951和113093.将获得的unigene在KEGG、GO、KOG、Nr、Nt、Swissprot和Pfam数据库中进行比对注释,有78.67％的unigene在Nr数据库中获得了注释,比列最高.比较常温组和冷驯化组的差异表达基因为21489,其中上调和下调的基因分别为11213和10276个.GO功能分类表明差异表达基因主要富集在"DNA为模板的转录调控""信号转导""细胞氧化还原稳态""蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶""RNA结合"和"细胞";KEGG路径分析显示:差异表达基因富集在132条通路上.显著性最高的生物学过程包括:光合作用、ABC载体运输、氨基酸代谢和次生代谢物质合成等.结合差异表达分析,特别地关注了脂肪酸代谢及其信号转导通路的磷脂酶基因,筛选到了10个和脂肪酸去饱和有关的基因以及12个和磷脂酶相关的基因.研究结果对揭示牛皮杜鹃的耐寒分子机制有一定的参考意义.

摘要： 以南北不同纬度的4种1 a生楸树嫁接苗(滇楸、灰楸、梓楸、金丝楸)为研究对象,研究自然条件下冷驯化期间4种楸树叶片叶绿素荧光参数变化规律。结果表明,冷驯化期间随着自然温度的降低,4种楸树叶片光系统Ⅱ电子传递量子效率(ΦPSⅡ)下降,光系统Ⅱ最大光化学效率(Fv/Fm)、非光化学猝灭(NPQ)和电子传递速率(ETR)先下降、后上升,最终值偏低,其中Fv/Fm与抗寒性存在较高的一致性,可作为楸树叶片抗寒性强弱的鉴定指标。

摘要： 为探究冷驯化条件下中缅树鼩(Tupaia belangeri)白色脂肪组织(WAT)和褐色脂肪组织(BAT)的差异代谢物变化,本研究采集对照组和冷驯化28天组中缅树鼩的WAT和BAT,采用非靶向代谢组液相色谱—质谱联用检测技术分析其差异代谢物含量变化.结果 表明,冷驯化组较对照组WAT中有7种差异代谢物显著上调;BAT中有25种差异代谢物,其中23种差异代谢物显著上调,2种差异代谢物显著下调,主要参与三羧酸循环、脂类代谢、氨基酸代谢和糖代谢等.以上结果说明中缅树鼩通过利用脂肪组织的不同差异代谢物来抵御低温环境,提高生存率.

摘要： 以南北不同纬度的4种1a生楸树嫁接苗(滇楸、灰楸、梓楸、金丝楸)为研究对象,研究自然条件下冷驯化期间4种楸树叶片叶绿素荧光参数变化规律.结果表明,冷驯化期间随着自然温度的降低,4种楸树叶片光系统Ⅱ电子传递量子效率(ΦPSⅡ)下降,光系统Ⅱ最大光化学效率(Fv/Fm)、非光化学猝灭(NPQ)和电子传递速率(ETR)先下降、后上升,最终值偏低,其中Fv/Fm与抗寒性存在较高的一致性,可作为楸树叶片抗寒性强弱的鉴定指标.

摘要： [目的]研究重大入侵害虫三叶斑潜蝇(Liriomyza trifolii)对快速冷驯化和长时冷驯化的响应以及3个地理种群(湖北省武汉市、海南省海口市和安徽省安庆市)的耐寒性,为明确该虫在我国高纬度地区定殖的潜在可能性提供参考.[方法]将海南三叶斑潜蝇种群蛹和成虫在-12、-14、-16、-18、-20、-22和-24°C低温暴露30 min,选择存活率为15％-30％的温度为识别温度.设置5°C为快速冷驯化的驯化温度,12°C为长时冷驯化的驯化温度,将三叶斑潜蝇蛹和成虫置于5°C下1-6 h或置于12°C下1-6 d,再置于识别温度下30 min检测存活率,未驯化的蛹和成虫也置于识别温度下30 min作为对照,比较其冷驯化后低温存活率的差异.另外,设置5个靶标温度,分别为0、-5、-10、-15和-20°C,将3个地理种群的三叶斑潜蝇蛹在靶标温度下冷暴露2h,比较其存活率差异.最后,利用过冷却点测定仪对3个地理种群蛹的过冷却点(supercooling point,SCP)进行测定.[结果]三叶斑潜蝇蛹和成虫暴露于-20°C下30 min后,其存活率分别为15.0％、19.6％、21.0％(介于15％-30％),因此将-20°C确定为三叶斑潜蝇的冷驯化识别温度.短时间的5°C低温暴露提高了三叶斑潜蝇蛹和成虫的耐寒性,成虫对快速冷驯化的响应更加积极.1h和2h的冷驯化效果最好,随着暴露时间的延长,其驯化效果会逐渐减弱直至消失.在6d内,不同时长的12°C低温暴露均会提高三叶斑潜蝇蛹和成虫的耐寒性且经历不同时长冷驯化后其耐寒性差异较小.在5、0、-5°C的低温暴露下,海南种群与安徽、湖北种群蛹的存活率差异不显著,在-10、-15、-20°C的低温暴露下,海南种群蛹的存活率显著低于安徽和湖北种群.安徽(-22.19°C)和湖北(-22.19°C)种群蛹的过冷却点显著低于海南种群(-21.06°C).[结论]三叶斑潜蝇的耐寒性可以通过快速冷驯化或长时冷驯化获得增强,这可能是三叶斑潜蝇逐步向我国高纬度地区扩散的原因之一.湖北和安徽种群表现出的耐寒性较海南种群强.研究结果有助于预测三叶斑潜蝇在我国的越冬分布区域,指导其监测预警及防控.

摘要： 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PDH,EC1.1.1.49)是戊糖磷酸途径中的关键限速酶,在植物逆境胁迫响应和生长发育中具有重要作用.然而,目前有关G6PDH在茶树中的研究尚处空白.在茶树中克隆到3个CsG6PDHs基因,分别命名为CsG6PDH1(MW025829)、CsG6PDH2(MW025830)、CsG6PDH4(MW025831).聚合进化树结果显示,CsG6PDH1和CsG6PDH4均为质体型蛋白,而CsG6PDH2为胞质型蛋白.表达分析发现,CsG6PDHs在不同组织中均有表达;低温或炭疽菌侵染条件下,CsG6PDH1和CsG6PDH4均被抑制表达;冷驯化期间,CsG6PDH2和CsG6PDH4在不同品种中均上调表达;此外,CsG6PDHs在茶芽休眠和萌发过程中均不同程度上调表达.以上结果表明,CsG6PDHs在茶树生长发育和逆境胁迫响应过程中发挥着重要作用,这为后续深入研究G6PDH在茶树中的功能奠定了理论基础.

摘要： [目的]在低温环境下,昆虫会启用体内的生理调控机制稳定自身代谢,脂肪代谢在昆虫抵御低温的过程中发挥重要作用.本研究旨在探究松墨天牛Monochamus alternatus幼虫脂肪代谢在低温条件下的变化及其对耐寒性的影响.[方法]将室内25°C下饲养的松墨天牛4龄幼虫分别置于25°C(对照)和4°C(冷驯化)恒温培养箱,7d后解剖幼虫,收集其脂肪体,观察冷驯化后脂滴变化,测定脂肪体内脂肪含量;利用气相色谱-质谱分析,检测脂肪体内游离脂肪酸组分及含量;并用RT-qPCR方法检测脂肪体内脂肪酸β-氧化关键酶(CPT1,4KCT,VLCAD,ECH和3HCD-1)基因的相对表达量.[结果]冷驯化(4°C)7 d后松墨天牛4龄幼虫脂肪体中脂滴较对照变小,密度降低,脂肪含量下降;但其脂肪酸组成种类未变,对照组和冷驯化组主要脂肪酸均为C16∶0,C16∶1,C18∶0,C18∶1和C18∶2,其中C18∶2的相对含量在两组中均最高,由未驯化时的31.83％±8.82％降至冷驯化后的25.16％±2.88％.冷驯化后,松墨天牛4龄幼虫脂肪体中C16∶0,C16∶1和C18∶2脂肪酸含量减少,C18∶0与C18∶1的相对含量上升.在5种主要脂肪酸中,冷驯化后各脂肪酸的相对丰度较对照均有所减少,其中C16∶0,C16∶1及C18∶2的相对丰度则显著下降.但冷驯化后松墨天牛4龄幼虫脂肪体中游离脂肪酸的双键指数较对照上升3.88％.且冷驯化组脂肪体中VLCAD基因表达量较对照组显著上调.[结论]低温环境中松墨天牛幼虫通过消耗脂肪维持基本代谢,幼虫脂肪体的脂肪酸分解代谢水平提高;不饱和脂肪酸在松墨天牛的耐寒性中起关键作用.脂代谢调控为松墨天牛应对低温的重要生存策略.

摘要： 结缕草属(Zoysia Wilid.)为重要的暖季型草坪草属之一，广泛分布于太平洋西岸和北岸沿海地区，在非洲和澳洲等温暖地区也有分布。结缕草属植物作为一种草坪草，有耐磨、耐高温、耐寒、耐旱、耐盐碱、耐病虫害以及有一定的耐荫性等优良特性。在结缕草的抗寒性的研究已有不少。目前为止主要集中于抗寒性的鉴定和生理生化基础研究.Beard等对35种暖季型草坪草的抗寒性研究结果表明，结缕草的抗寒性是最强的。Dunn的生长恢复试验结果表明不同种间和基因型存在显著差异，表明结缕草属植物耐寒性存在明显的种间差异，而且与抗寒锻炼有关。很多植物中的可溶性蛋白质与植物的抗寒性关系密切，有许多研究用电泳分析了低温引起蛋白质代谢的变化，Gatschet等研究后发现杂交狗牙根(Cdactylon×Ctransvaalemsis)品种'Midiron'和ifgreen'冷锻炼后，两个品种根颈的LT50均明显降低，并且两个品种的根颈中均增加了数种冷调蛋白(COR)的合成，抗冻性强的'Midiron'中32.37KD和20-26KD的冷调节蛋白含量较抗冻性较差的'Tifgteen'高，并且发现'Midiron'和'Tjfgteen'冷锻炼后合成的低分子重量(LB)(20～28KD)的冷调控蛋白中，两个品种根颈中27-KD的基础冷调节蛋白占主导地位，这个冷调蛋白被命名为COR27，并通过蛋白测序确定为一种几丁质酶。然而结缕草属植物作为暖季型草坪草中最抗寒的暖季型草坪草之一，其抗寒机理至今未见有报道。rn 本研究在对结缕草属植物100余份大量种源抗寒性鉴定的基础上，选择了Z125(抗寒性差，叶片LT50o=-2.2°C)和Z14l(抗寒性强，叶片LT50=-10.4°C)两份极端抗寒性的日本结缕草(Z.japonica)种源作为试验材料，研究了其在正常生长条件下(28°C/22°C(白天/晚上)，10h光照条件)和经过一定时间低温驯化后(8°C/2°C(白天/晚上)，10h光照条件)可溶性蛋白合成，结果发现：低温处理2周后，Z125和Z141的地下茎的可溶性蛋白的合成就有了变化，与对照相比，Z125多了一条44KD左右的条带，而Z141多了一条50KD左右的条带，但少了一条40KD左右的条带；而匍匐茎的可溶性蛋白的合成没有发生变化；Z125的叶片的可溶性蛋白的合成也发生了变化，在66KD附近多了一条带，而Z141的叶片可溶性蛋白没有任何的变化.这说明低温敏感类型在低温胁迫下将短时间内可溶性蛋白成分即会发生较大的变化，相比之下，抗寒性强的种源在低温胁迫下短时间内可溶性蛋白成分没有发生较大的变化.处理4周后，Z125的地下茎的可溶性蛋白低温驯化后与对照相比多了两条带(分子量为50KD左右)，Z141的地下茎也比对照多了2条带，但是多肽的分子量大小不同(分子量为60KD左右)；Z125的匍匐茎的可溶性蛋白的合成还是没有发生变化，而Z141的匍匐茎的可溶性蛋白则比没有受低温驯化的多了两条带(分子量为60KD左右)；Z125的叶片驯化与未驯化的可溶性蛋白的合成没有差异，而抗寒性强的Z141驯化后其叶片的可溶性蛋白电泳条带比未驯化的少了2条带(分别是60KD和20KD左右).rn 由此可见，低温敏感类型在低温胁迫下短时间内叶片和地下茎可溶性蛋白成分即会发生较大的变化，相比之下，抗寒性强的种源在低温胁迫下短时间内可溶性蛋白成分没有发生较大的变化，而在低温驯化较长时间(四周)后，其匍匐茎和地下茎可溶性蛋白的合成代谢的变化很大，Z141在处理4周后，与对照相比(三个器官)，有6条差异带，而Z125与对照只有2条差异带。

摘要： 本发明公开了一种嗜冷产甲烷菌的驯化培养方法，包括步骤：1)向培养装置中填充驯化培养基，充氮去氧后高温灭菌，再加入乙酸钠、甲酸钠、甲醇以及乙酸纤维素、壳聚糖、益生元各0.001g，获得驯化培养装置；2)取出淤泥菌种并打碎，加入活化淀粉，静置后得活化淀粉‑淤泥菌种；3)将步骤2)所得菌种接种到步骤1)的驯化培养装置中，在8°C的条件下培养4～5天；4)检测有气泡产生时，通过控温系统改变温度，进行变温驯化培养；5)当气泡量不再增加时，停止变温并进行补料，补料后气泡继续增加，直到12天时产气量完全稳定，嗜冷产甲烷菌群富集完成。采用本发明的驯化培养嗜冷产甲烷菌，明显加快菌落形成速度，提高富集效果。

摘要： 本发明涉及药用植物组织培养及中药材领域，具体涉及一种提高红大戟组培苗驯化成活率的培养基及其驯化方法，培养基包括：丛生芽诱导培养基、丛生芽增殖培养基和丛生芽生根培养基；培养步骤包括：外植体消毒、丛生芽诱导、丛生芽增殖、丛生芽生根和生根苗驯化。本发明在生根时，使用低浓度的2,4‑D及IBA搭配，可有效促进红大戟的生根，可使生根率接近100％，同时，在生根瓶培养基中添加了2.0～2.4μg/L的硝酸银及0.2～0.3mg/L的MET，能将生根苗的玻化现象完全抑制，能在很大程度上提高驯化成活率。

摘要： 一种适用于低温水体治理用的低温适冷菌驯化培养方法,属于污染水体治理的生物技术领域。本发明公开了一种以细胞膜中不饱和脂肪酸含量在30‑90%之间的革兰氏阴性菌为菌株，通过步骤：1)种子液富集培养；2）发酵液增值培养。对目标菌株进行增值、强化、培养、驯化，通过间断降温，激发微生物自身的结构组成快速发生改变，提高低温活性，可以在短时间内驯化培养出低温高活性的高效菌落。本发明主要用于低温污染水体的微生物治理，能够提高污染水体的治理效果，与常规微生物相比，低温COD去除效果提升23.4%以上，污泥产生量降低35.7%以上。

摘要： 本发明公开了一种嗜冷产甲烷菌的驯化培养方法，包括步骤：1)向培养装置中填充驯化培养基，充氮去氧后高温灭菌，再加入乙酸钠、甲酸钠、甲醇以及乙酸纤维素、壳聚糖、益生元各0.001g，获得驯化培养装置；2)取出淤泥菌种并打碎，加入活化淀粉，静置后得活化淀粉-淤泥菌种；3)将步骤2)所得菌种接种到步骤1)的驯化培养装置中，在8°C的条件下培养4～5天；4)检测有气泡产生时，通过控温系统改变温度，进行变温驯化培养；5)当气泡量不再增加时，停止变温并进行补料，补料后气泡继续增加，直到12天时产气量完全稳定，嗜冷产甲烷菌群富集完成。采用本发明的驯化培养嗜冷产甲烷菌，明显加快菌落形成速度，提高富集效果。

摘要： 本发明公开了一种桂花鱼苗开口驯化饵料及其驯化方法。按质量分数计，包括：配方1：鱼粉50‑60％、酶解蛋白3‑7％、发酵豆粕3‑7％、新鲜鱿鱼7‑13％、面粉12‑18％、鱼油2‑4％、大豆磷脂1‑3％、维生素混合物1‑3％、矿物元素混合物2‑4％；配方2：白鱼粉15‑25％、鸡肉粉25‑35％、鸡蛋粉3‑7％、发酵豆粕14‑20％、啤酒酵母3‑7％、湿卤虫7‑13％、EPA 2‑6％、DHA 2‑4％、微生物制剂3‑7％、诱食剂1‑2％。采用本发明的饵料按照本发明的驯化方法驯化桂花鱼鱼苗，开口率高达98.59％，成活率达86％，增重率为167％‑351％，特定成长率15％‑26％，桂花鱼苗采用东丸鳜鱼苗料和4#料可大大提高鱼苗开口率和成活率，且易消化吸收，肝胆好，肠道健壮，生长速度快，鱼身漂亮。

摘要： 本发明属于生物技术和生物医药技术领域，涉及使用内皮细胞治疗缺血性糖尿病足的方法以及所用的细胞制剂。针对现有ECs移植治疗缺血性DF时细胞不耐受DF高糖、低营养的局部微环境，细胞容易凋亡等问题，本发明提供了一种体外驯化诱导功能增强型内皮细胞的方法和用于治疗缺血性糖尿病足的FE‑ECs制剂，通过人工模拟糖尿病足高糖低营养微环境，同时添加经筛选得到的TGF‑β抑制剂，驯化诱导得到FE‑ECs。与未诱导的内皮细胞相比，FE‑ECs更能耐受高糖、低营养培养环境，保持旺盛的增殖活力和内皮细胞功能。本发明方法操作简便，诱导的细胞易于体外扩增和长期保存，实现了细胞规模化扩增培养，具有很好的研究价值，同时在创伤修复领域具有良好的应用前景。

摘要： 本发明公开一种野生茴鱼驯化方法及系统，该驯化系统包括养殖池、过滤系统和控制系统，所述过滤系统与养殖池管路连接，实现养殖池内水体的净化与循环使用；所述控制系统包括水位调节系统、溶氧量控制系统和温度控制系统，同时经过多次反复尝试，甄选了最佳野生茴鱼的采捕时间、地点、运输方式和养殖系统，并根据茴鱼规格和吃食能力进行分组驯化，从而提高了茴鱼的摄食率和成活率。本发明所述系统及方法养殖野生茴鱼成活率达90％以上，适用于水产养殖技术领域。

摘要： 本发明公开了一种野生银鲳室内养殖驯养与人工饵料快速驯化方法，包括以下步骤：将野生银鲳养殖置于室内水泥池中；在野生银鲳适应一周后，驯食时，将一圆形半透明盘放置在水面上方，用挂钩将粘性饵料团状挂在水面下方，底部用饵料食台接住饵料，鱼先被挂钩的饵料团吸引，之后饵料团自然落入下方食台，银鲳跟随饵料团到食台上摄食；连续驯化一周，撤去白色半透明圆盘，再过一周后可以撤去挂钩直接投喂在食台上；经过三周驯化以及水泥池的适应，野生银鲳可以完全摄食人工饵料；本发明还公开一种驯化装置。本发明中所采用圆形半透明盘会增加银鲳的兴趣，驯饵时采用挂钩挂钩相比放盘子或黏网片，摄食率更好，残饵更少，不易坏水。

摘要： 本发明公开了一种获得耐受高光强集胞藻菌株的定向驯化方法，步骤：确定集胞藻野生型菌株的初始敏感光照强度；在培养基中接种集胞藻野生型菌液使酶标仪测定OD

摘要： 本实用新型提供一种生物菌群耐冷驯化器，用于寒冷地区的热管型MBR生活污水处理系统上，其特征在于，包括：恒温箱，恒温箱的内部设置有培养箱和沉淀箱，培养箱的底部设置有曝气装置，培养箱和沉淀箱之间通过第一管道连接，且培养箱中放置有混合菌群标准液；培养箱通过第二管道与调节池的污水回流口相连接，沉淀箱通过第三管道与调节池的出水口相连接，沉淀箱通过第四管道与MBR膜生物反应器连接，第四管道通过第五管道与第二管道连接。生物菌群耐冷驯化器制备活性污泥的方法在我国北方地区和西部高寒地区使用，节约能源，经济环保。