酶性质

摘要： 研究嗜热拟青霉糖化酶(PtGA15)酶学性质,并探讨了其在黄酒生产中的应用潜力.结果表明,PtGA15的最适pH值为5.5,最适温度70°C,在pH 4.5～6.5范围内、60°C及以下保持较高酶活,对金属离子的敏感性一般,对支链淀粉含量较高的糯米和大米淀粉表现出较高的水解活性.将PtGA15应用于黄酒酿造,发现当糖化温度为50°C,糖化时间3 h时,酶添加量为200 U/g原料时,糖化液中还原糖和干物质含量最高,生产的黄酒酒精度为16.6％vol,相比对照组提高了30.7％,各项理化指标均符合国标的要求.

摘要： 随着大型褐藻生产燃料乙醇以及褐藻寡糖重大药用价值的发现,褐藻胶裂解酶成为国内外多个领域的研究重点.文中对解藻酸弧菌上与褐藻胶降解相关的5个基因分别进行克隆表达,通过SDS-PAGE和酶活性定量测定,发现该基因簇中的4个基因有降解褐藻胶活性.对酶活最高的rAlgV3进行了诱导条件的优化、酶蛋白纯化及酶性质研究,发现优化诱导条件后重组酶rAlgV3的酶活由2.34x 104 U/L上升为1.68× 105 U/L,比优化前提高了7.3倍;对酶性质进行表征发现该酶在4-70°C均有活性,最适反应温度为40°C,在4-20°C酶相对稳定;该酶在pH 6.5-9.0环境下均有较高的酶活,最适pH为8.0;pH稳定性好,在pH 4.5-9.5环境下可以稳定存在;适量的NaC1浓度和Fe2+、Fe3+等离子具有促进酶活的作用,SDS和Cu2+离子可明显抑制酶活力.对该酶的底物特性的研究发现,该酶不仅可以降解褐藻胶中的Poly-M片段,也能降解Poly-G片段,具有广泛底物特性;其降解海藻酸钠主要释放二糖和三糖,是一种内切酶.该酶对于第三代燃料乙醇的发展及褐藻寡糖的生产具有重要作用.

摘要： 采用DEAE-Cellulose DE52阴离子交换柱层析的方法对微生物Absidia sp.GRB3-X8r菌产特异性人参皂苷Rb3木糖苷酶进行分离纯化,分离后该酶在SDS-PAGE上呈现单一蛋白质条带,并对其酶学性质进行研究.研究表明:人参皂苷Rb3木糖苷酶的最适反应pH为3.0,在pH2.2～8.0范围内相对稳定;最适温度为40 °C,在20-60°C范围内具有较好的稳定性;金属离子K+、Na+、Mg2+、Mn2+、Ca2+离子对酶反应无明显作用,Zn2+、Pb2+、Ni2+对酶反应有抑制作用.SDS-PAGE电泳结果表明酶蛋白的相对分子量约为66.7 kDa.反应动力学研究结果显示Km值为65.63 mmol/L,Vmax为2.03 mmol/(h·L).通过对酶的催化特性研究表明,该酶能水解人参皂苷Rb3木糖基,生成人参皂苷Rd.

摘要： The pulchinenoside glycosyl hydrolase Ⅱ (PSGaseⅡ) from Absidia sp.P39r was purified and characterized.Its molecular weight was 56 ku.The optimum pH was at pH 4 and the enzyme was stable at pH 3.0-7.0.The optimum temperature was 40 °C and the enzyme was stable at 20-40 °C.Ions Na+, K+ and Mg2+ had no effects on the enzyme activity of PSGaseⅡ, but Fe3+, Cu2+ and Zn2+ had strong inhibitory effects on the enzyme reaction.Under the optimum conditions, Km was 19.60 mmol/L and the maximum reaction rate was 21.60 mmol/(L·min).Pulchinenoside PSⅠ was enzymatic hydrolyzed to pulchinenoside PSⅡ and then to pulchinenoside A by PSGaseⅡ.%对Absidia sp.P39r所产白头翁皂苷糖基水解Ⅱ型酶(PSGaseⅡ)进行分离纯化,得到电泳纯酶蛋白,对其酶学性质以及该酶对底物的催化反应过程进行了研究.结果表明,该酶蛋白的分子质量为56 ku,最适反应pH为4.0,在pH 3.0~7.0酶活力稳定;最适反应温度为40 °C,在20~40 °C酶活力稳定;金属离子Na+、K+、Mg2+对酶反应无显著影响,而Fe3+、Cu2+、Zn2+对其有较强的抑制作用.酶反应动力学参数Km为19.60 mmol/L,vmax为21.60 mmol/(L·h).PSGaseⅡ对白头翁皂苷PSⅠ的催化反应过程结果表明反应是分步进行的,PSGaseⅡ以白头翁皂苷PSⅠ为底物,先催化降解为中间产物白头翁皂苷PSⅡ,继续催化反应,最终生成白头翁皂苷A.

摘要： 采用分子筛及离子交换法对微生物Absidia sp.R42g所产异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,并研究其酶学性质.结果表明,异槲皮苷-β-葡萄糖苷酶的分子质量为62 ku,最适温度为40°C,最适pH为5.0.在50°C以下,pH 4.0～6.0,相对酶活力较稳定,Na+、K+、Ca2+3种金属离子对相对酶活力无影响;而在Fe3+、Cu2+两种金属离子存在的情况下,相对酶活力为零;酶反应结果显示该酶的最大反应速度和米氏常数分别为6.711 mmol/(L·h)和18.89 mmol/L.

摘要： In this study,xylanase gene (xynAeSC) from Streptomyces chartreusis L1105 without carbohydrate binding domain (CBD) was cloned into expression vector.Recombinant strain (GS115-3-20) was fermented under the optimal condition for enzyme production.The yield of xylanase enzyme was up to 683 ± 9 U/mL.Results showed that recombinant xylanase had the high relative enzyme activity at pH 6.2 ～ 8.6,especially at 7.2.It had the relative activity more than 70％ at 40 ～ 60 °C2.The optimal temperature was around 70 °C.It also showed the highest specific activity towards Oat-speh xylan (equal to 259.7％ ± 10.7％ of relative activity towards Birch xylan).It also showed the lowest activity towards sugar cane pulp xylan (only equal to 16.0％ ± 1.5％ of relative activity towards Birch xylan).Its activity and properties had not significantly affected by removing CBD domain.All these study made this expression system attractive for industrial applications.%将教酒链霉菌L1105第10家族碱性木聚糖酶基因去除纤维素结合域(CBD)后将功能结构域基因xyn-AeSC克隆到毕赤酵母表达载体.经筛选得到重组工程菌GS1153-20,用甲醇诱导后产酶活力达到最高683±9U/mL.结果表明,重组木聚糖酶的最适pH为7.2,且在pH 6.2 ～8.6有较高的相对酶活;其最适温度为70°C,40～ 60°C时相对酶活力都在70％以上;重组酶XynAeSC以燕麦木聚糖为底物时,酶活力最高,相对酶活力为桦木的259.7％±10.7％;对甘蔗渣木聚糖的酶活力最低,只有对桦木木聚糖酶活的16.0％±1.5％.研究表明,碱性木聚糖酶基因成功地在毕赤酵母中表达,且去除CBD域后,其酶学性质并未改变.

摘要： 对Absidia sp.P39r所产白头翁皂苷H3糖苷酶进行了分离纯化,得到了电泳纯的酶蛋白,并对其性质做了进一步研究.结果表明,该酶分子质量约为40 ku;最适反应温度为40°C,最适反应pH为5.0;在pH 4.0～7.0,温度低于40°C条件下具有相对稳定的酶活力;金属离子Na+、K+、Mg2+对酶反应无显著影响,而Fe3+、Cu2+、Zn2+对其有较强的抑制作用;米氏常数为17.01 mmol/L,最大反应速度为0.38 mmol/(L·min).

摘要： 植物叶际有着丰富的生物多样性,是一个复杂的微生态系统,叶际表面微生物通过与宿主植物的互作,改善其栖居环境并促进植物生长.从芹菜叶际生态系统中分离得到吡哆醛还原酶(Pyridoxal Reductase,PLR),采用苯肼衍生方法检测其活性并确定PLR的来源,对叶际表面微生物进行分离、计数,确定储藏过程中芹菜叶片表面微生物的变化情况,并对PLR的基本酶学性质进行初步研究.结果表明,PLR主要来源于真菌,在相同菌浓度下,PLR活性的强弱依次为真菌＞细菌＞放线菌.该酶的最适温度为37°C,最适反应pH值为7.5,并且在NADPH的参与下,其催化活性显著提高.

摘要： 对高活性生淀粉糖化酶菌株F7的归属和酶学性质进行了鉴定和探讨,从菌体形态特征和分子生物学特征方面对F7进行了鉴定,从F7的酶活力、酶对生淀粉的吸附力、最佳的作用温度、pH等方面探讨了F7的生淀粉糖化酶性质.结果表明:菌株F7归属藻菌纲(Ph ycomycetes),毛霉目(Mucorales),毛霉科(Mucoraceae),根霉属(Rhizopus Ehrenberg),米根霉种(Rhizopus oryzae).其酶不仅对生淀粉吸附力大,消化能力强,而且其兼有的强酸性蛋白酶活力低;该酶作用pH范围是3.3～5.3;作用温度是35～45°C,酶活力稳定,在低温条件下酶液能保存较长时间;该酶对大米生淀粉的吸附率高,糖化能力也强.%The attribution of high-active raw starch glucoamylase strain F7 and its enzymatic properties are identified and discussed.The strain F7 is identified from bacteria morphology and molecular biology characteristics,its properties are explored from enzyme activity,absorption of raw starch enzyme,the optimum temperature and pH.The result indicates that the strain F7 belongs to Phycomycetes,Mucorales,Mucoraceae,Rhizopus Ehrenberg,Rhizopus oryzae.Not only is the absorption of raw starch enzyme big and the digestion strong,but also the strong acid protease activity is low.The study of glucoamylase produced by Rhizopus F7 shows that the optimal pH and temperature range for the enzyme reaction are 3.3～5.3 and 35～45 °C respectively.The enzyme is stable and can be stored for a long time at low temperature.The rate of absorption is proved to be high,saccharification ability is also strong.

摘要： 从北大仓酒厂白酒酒醅分离筛选到1株产酸性α-淀粉酶的菌株C6，采用液体发酵，36°C、180 r/min振荡培养48 h后产酶活力达到388．5 U/mL。初步研究了酶性质：C6产生的α-淀粉酶最适反应pH值为4．8，最适反应温度为60°C，是一种中温酸性α-淀粉酶，该酶在pH值3．5～9．0、温度50°C以下能较稳定地存在。

摘要： 对一株分离自深海热液口的古菌(Thermococcus.sp)菌株进行了生长特性和产α-淀粉酶的研究.该菌株是严格厌氧的球菌,直径为1.5～1.75 um.生长温度范围为55-94°C,其最适生长温度88°C.最适生长pH范围为6.5-7.0,低于4.5或高于9.0菌株不生长.生长NaCl浓度范围为1-5％,2％为最适宜NaCl浓度,没有NaCl不生长.该菌株在蛋白质丰富的基质中生长良好;淀粉、麦芽糖、葡萄糖、蔗糖、纤维二糖、乳糖、糖原、明胶促进生长.通过对该菌株产生的α-淀粉酶的性质初步研究表明:该酶最适作用温度为88°C;酶的热稳定性较好,在85°C下保温180min后,剩余酶活为73％左右,在95°C下保温60min仍有65％的剩余酶活,Ca2+在高温下对酶有保护作用.最适pH为5.0;酶在pH值为8.0-9.0时比较稳定.Mg-和Mn2-对酶有一定的促进作用;Ca2+、Na+、Fe3+、Zn2+、pb2-抑制酶活,而K-强烈抑制酶活.IAA、PVSF、SDS对此蛋白酶有强烈的抑制作用,EDTA-Na和2-羟基乙醇对酶活有一定的抑制作用,DTT、Urea对酶活无抑制作用.

摘要： 对一株分离自深海热液口的古菌(Thermococcus.sp)菌株进行了生长特性和产α-淀粉酶的研究.该菌株是严格厌氧的球菌,直径为1.5～1.75 um.生长温度范围为55-94°C,其最适生长温度88°C.最适生长pH范围为6.5-7.0,低于4.5或高于9.0菌株不生长.生长NaCl浓度范围为1-5％,2％为最适宜NaCl浓度,没有NaCl不生长.该菌株在蛋白质丰富的基质中生长良好;淀粉、麦芽糖、葡萄糖、蔗糖、纤维二糖、乳糖、糖原、明胶促进生长.通过对该菌株产生的α-淀粉酶的性质初步研究表明:该酶最适作用温度为88°C;酶的热稳定性较好,在85°C下保温180min后,剩余酶活为73％左右,在95°C下保温60min仍有65％的剩余酶活,Ca2+在高温下对酶有保护作用.最适pH为5.0;酶在pH值为8.0-9.0时比较稳定.Mg-和Mn2-对酶有一定的促进作用;Ca2+、Na+、Fe3+、Zn2+、pb2-抑制酶活,而K-强烈抑制酶活.IAA、PVSF、SDS对此蛋白酶有强烈的抑制作用,EDTA-Na和2-羟基乙醇对酶活有一定的抑制作用,DTT、Urea对酶活无抑制作用.

摘要： 对一株分离自深海热液口的古菌(Thermococcus.sp)菌株进行了生长特性和产α-淀粉酶的研究.该菌株是严格厌氧的球菌,直径为1.5～1.75 um.生长温度范围为55-94°C,其最适生长温度88°C.最适生长pH范围为6.5-7.0,低于4.5或高于9.0菌株不生长.生长NaCl浓度范围为1-5％,2％为最适宜NaCl浓度,没有NaCl不生长.该菌株在蛋白质丰富的基质中生长良好;淀粉、麦芽糖、葡萄糖、蔗糖、纤维二糖、乳糖、糖原、明胶促进生长.通过对该菌株产生的α-淀粉酶的性质初步研究表明:该酶最适作用温度为88°C;酶的热稳定性较好,在85°C下保温180min后,剩余酶活为73％左右,在95°C下保温60min仍有65％的剩余酶活,Ca2+在高温下对酶有保护作用.最适pH为5.0;酶在pH值为8.0-9.0时比较稳定.Mg-和Mn2-对酶有一定的促进作用;Ca2+、Na+、Fe3+、Zn2+、pb2-抑制酶活,而K-强烈抑制酶活.IAA、PVSF、SDS对此蛋白酶有强烈的抑制作用,EDTA-Na和2-羟基乙醇对酶活有一定的抑制作用,DTT、Urea对酶活无抑制作用.

摘要： 本发明属生物技术领域，具体涉及一株高产强稳定性中温中性淀粉酶枯芽胞杆菌(Bacillus subtilis)XLG-1的筛选及此酶的酶学性质的初步研究。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称中国微生物菌种保藏中心)，保藏号CGMCC No.3871。其生物学特性为：形态为长杆状，在淀粉筛选固体培养基上菌落圆形、边缘不齐、菌苔干燥、不透明、乳白色。在37°C摇瓶培养72h，酶活可达22000U/mL，经过紫外线-氯化锂复合诱变后最高产酶达6183U/mL，此酶广泛引用于洗涤剂、啤酒、食品、医药、制革、纺织，造纸业等领域。

摘要： 本发明属生物技术领域，具体涉及一株高产强稳定性中温中性淀粉酶枯芽胞杆菌(Bacillus subtilis)XLG-1的筛选及此酶的酶学性质的初步研究。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称中国微生物菌种保藏中心)，保藏号CGMCC NO.3871。其生物学特性为：形态为长杆状，在淀粉筛选固体培养基上菌落圆形、边缘不齐、菌苔干燥、不透明、乳白色。在37°C摇瓶培养72h，酶活可达2200U/mL，经过紫外线-氯化锂复合诱变后最高产酶达6183U/mL，此酶广泛引用于洗涤剂、啤酒、食品、医药、制革、纺织，造纸业等领域。

摘要： 以大肠杆菌基因组DNA为模板，扩增得到编码苹果酸脱氢酶(MDH)的基因，将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a上，在E.coliBL21(DE3)中用IPTG诱导表达，利用表达载体pET-28a上的6·His-Tag标记选用Ni柱亲和层析法纯化表达具有活性的苹果酸脱氢酶(MDH)。粗酶的比酶活为43U/mg，纯化后比酶活达到112.5U/mg，纯化倍数达2.62倍，回收率为59％。并对该酶的酶学性质进行了初步研究，其中反应最适pH值为6.0，在pH值2.0-6.0的酸性范围内稳定，反应最适温度为37°C，在42°C以下酶的稳定性较好。k+对酶有明显的激活作用，Ni

摘要： 本发明提供了一种黄绿木霉产纤维素酶的酶学性质研究方法。该方法是先将黄绿木酶在液体发酵培养基内进行发酵，将所得的发酵液离心，得到粗酶液。在20°C到70°C的温度范围内、pH＝4.8时测粗酶液的CMC酶活，得到最适酶反应温度。在上述所得的最合适酶反应温度、4.0到8.0的pH范围内测粗酶液的CMC酶活，得到最适酶反应pH。将新鲜酶液在pH＝7.0，10°C到70°C的温度范围内保持，在最合反应温度和pH条件下测CMC酶活，得到黄绿木霉产纤维素酶的最合适保持温度。将新鲜酶液在最合适保持温度，4.0到10.0的pH范围内保持，在最合适反应温度和pH条件下测CMC酶活，得到黄绿木霉产纤维素酶的最合适保持pH。

摘要： 本实用新型公开了一种褐藻胶裂解酶和甘露聚糖酶的酶学性质测定设备，包括实验箱，其特征是：所述实验箱上侧中部设有一排均匀排布的卡接口，若干所述卡接口两侧分别设有安装孔，所述实验箱两端内壁中部分别固定连接承载板的一端，每个所述卡接口内均设置有试管，每个所述试管下侧均贴于所述承载板上侧，两个所述安装孔内分别设置有温度计，两个所述温度计下侧均贴于承载板上侧，所述实验箱上侧固定连通有入水管，所述实验箱侧面下部固定连通水阀，所述实验箱内壁下侧设有U型加热丝，本实用新型涉及实验室设备领域，具体地讲，涉及一种褐藻胶裂解酶和甘露聚糖酶的酶学性质测定设备。本装置可以实现将实验用水通过搅拌使水温均匀。

摘要： 本实用新型提供一种漆酶的酶学性质研究用实验装置，包括遮光盖，箱体，凸起，扣块，恒温板，电热板，导热结构，消毒板和恒温器，所述遮光盖的底端设置有箱体，且箱体的内部底端表面设置有凸起，该凸起的上端外围固定有扣块；所述扣块的上端设置有恒温板，且恒温板的内部设置有电热板，该电热板的表面设置有导热结构；所述恒温板的上表面上方设置有恒温器，且恒温器的一侧设置有消毒板。本实用新型箱体，恒温板和消毒板的设置，通过遮光恒温结构为漆酶研究培养环境提供稳定做工，通过自主散热与主动导热产生辅助做工，为恒温板实现稳定的做工环境结构，减少发热时耗，通过活性结构连接消毒装置，提高便利程度，优化使用体验。

摘要： 本发明公开了一种具有过氧化物模拟酶性质的铁掺杂碳点及其制备方法和应用；所述制备方法包括：(1)将柠檬酸溶液和硝酸铁溶液混合，得到混合溶液；(2)将混合溶液进行水热反应，冷却、离心、透析后得到所述铁掺杂碳点。制得的铁掺杂碳点作为过氧化物模拟酶，不仅具有尺寸优势、强的量子局限和边缘效应，而且还拥有类似于量子点的优良发光性能；同时，该铁掺杂碳点还具备催化并双参数监控过氧化氢氧化TMB显色反应的性能。

摘要： 本发明公开了一种具过氧化物模拟酶性质的MXene量子点及其制备方法和检测谷胱甘肽的方法，该制备方法包括：将Ti

摘要： 本发明涉及一种具有模拟酶性质的MOP‑纳米棒及其制备方法与应用，属于化学技术领域。该MOP‑纳米棒的制备方法是将如式（Ⅰ）所示的5位取代的间苯二甲酸衍生物与硝酸铜三水合物在有机溶剂中于75°C条件下加热反应，将所得产物醇洗后干燥，之后于水中浸泡洗涤，之后烘干，即得；，式（Ⅰ）；其中，‑R为‑H、‑Br、‑NO2、‑OH或‑CH=CH2。与现有的大部分模拟酶相比，本发明合成方法简便，产物易于分离纯化，并且有着更宽的pH应用范围，特别是pH为6‑10时有着较高的催化活性，能进一步丰富模拟酶体系的应用。

摘要： 本发明公开了基于云数据库的腈水解酶酶性质研究比对设备及方法，属于腈水解酶酶性质研究技术领域，包括工作台，所述工作台的侧端设置支撑柱，支撑柱的上方安装检测设备，检测设备的上方连接比对装置，检测设备与比对装置电连接，所述工作台的上设置传输装置，传输装置的上方设置外罩。本发明基于云数据库的腈水解酶酶性质研究比对设备及其使用方法，提高检测效率和速度，便于连续性检测，增加检测的效率，也保证检测的质量，提高质检的准确性，方便进行多组数据比对，提高比对结果的真实性和可靠性，从大数据进行比对，增加腈水解酶液体比对的效率，防止检测烧杯错位，导致检测失败。