诺卡氏菌

摘要： 目的:通过构建H22荷瘤小鼠模型,观察红色诺卡氏菌细胞壁骨架(Nocardia Rubra Cell Wall Skeleton,N-CWS)对H22荷瘤小鼠肝癌细胞生长的抑制效果.方法:复苏并培养H22细胞,将H22细胞以皮下方式接种到小鼠右侧腋部,建立H22荷瘤小鼠肝癌模型,随机分为对照组(生理盐水组)、低浓度N-CWS组(400 μg/mL)与高浓度N-CWS组(800 μg/mL),分别灌胃1次/d,共灌胃14d,最长接种肿瘤15d后处死小鼠,观察肝癌细胞的大小和重量.结果:治疗组小鼠肿瘤质量明显低于对照组(1.46± 0.16)g,且高浓度组小鼠肿瘤质量(0.52± 0.13)g明显低于低浓度组(0.79±0.13)g,组间对比差异有统计学意义(P＜0.05).在治疗第3d起直至结束,治疗组小鼠肿瘤体积均明显低于对照组,从第5d起直至结束,高浓度组小鼠肿瘤体积明显低于低浓度组(P＜0.05).第5d起至结束,治疗组小鼠肿瘤体积增长的变化明显缓于对照组(P＜0.05).高浓度组小鼠肿瘤体积的增长在第5d后明显缓于低浓度组(P＜0.05).对照组在第9d时,增长变化最为显著,较第7d增加约400 mm3.低浓度组变化较稳定.高浓度组肿瘤增长明显变缓,第7d后最为明显,后逐渐趋于缓和.结论:N-CWS可以明显抑制肿瘤生长,且高浓度N-CWS抑制肿瘤生长效果更佳.

摘要： [目的]农用地膜主要成分为聚乙烯(polyethylene,PE),因其难以被降解,其废弃物常造成"白色污染",本研究从常年覆盖农用地膜的土壤中筛选PE降解菌,并探究其对PE制品的降解效能.[方法]采集的土壤样品用PE为唯一碳源的无机盐培养基进行富集,筛选、纯化PE降解菌,分离菌通过形态染色、生理生化特征、16SrRNA基因序列分析进行鉴定,检测其在不同PE浓度(0％、0.05％、0.10％、0.25％、0.50％、1.00％、2.00％、3.00％)的无机盐培养基中的生长曲线,最后通过扫描电镜、光镜观察,检测分离菌对农用地膜的降解效能.[结果]从土壤中筛选获得一株能够降解PE的分离菌株(命名为SW1),初步鉴定其为放线菌的诺卡氏菌属Nocardiasp..SW1的生长对PE具有明显浓度依赖,在含2％PE的无机盐培养基中生长最快,在培养的第48 h菌液浓度开始明显增加,第60h达到最大,而在不含PE的无机盐培养基中未见生长.形态生理学观察表明,35 °C培养15 d后,扫描电镜观察可见有大量菌嵌入膜内或附于膜表面生长,膜表面粗糙,并开始出现破损;培养60 d后,光镜观察可见膜大面积破损,并出现空洞.[结论]从土壤中筛选获得了一株能够有效降解PE制品的放线菌菌株Nocardiasp.SW1.该研究丰富了PE制品降解微生物的菌种资源,为PE塑料废弃物的生物降解提供了科学数据与参考.

摘要： 为更快地处理崆峒岛废弃扇贝壳,改善岛屿的生态环境,本研究从扇贝堆积场取样,经过梯度稀释、平板涂布、平板划线、产酶菌初筛、复筛,分离筛选出蛋白酶产生菌20株,根据透明圈大小挑选出产蛋白酶活力强的8株放线菌菌株(SF1～SF8)进行斜面保藏.经过进一步理化鉴定初步确定SF1为诺卡氏菌,SF2～SF8属于链霉菌属.

摘要： 为更快地处理崆峒岛废弃扇贝壳,改善岛屿的生态环境,本研究从扇贝堆积场取样,经过梯度稀释、平板涂布、平板划线、产酶菌初筛、复筛,分离筛选出蛋白酶产生菌20株,根据透明圈大小挑选出产蛋白酶活力强的8株放线菌菌株(SF1~SF8)进行斜面保藏。经过进一步理化鉴定初步确定SF1为诺卡氏菌,SF2~SF8属于链霉菌属。

摘要： 1病历资料患者男性,65岁,农民,因间断咳嗽、咳痰半个月,喘息10 d于2018年3月9日入院。半月前患者无明显诱因出现咳嗽、咳痰,咳少量白色泡沫痰,无发热,无喘息,自行服用止咳药物(具体药物及剂量不详),咳嗽症状持续加重。10 d前患者出现喘息,夜间为著,平卧受限,于当地诊所静脉滴注药物7 d(具体药物及剂量不详),咳喘未见明显缓解,咳黄色黏痰,易咳出,伴发热,体温最高达38.5°C,无畏寒、寒战,遂就诊于当地医院查胸部CT示双肺多发高密度阴影(图1)。

摘要： cqvip:1病历资料患者男性,65岁,农民,因间断咳嗽、咳痰半个月,喘息10 d于2018年3月9日入院。半月前患者无明显诱因出现咳嗽、咳痰,咳少量白色泡沫痰,无发热,无喘息,自行服用止咳药物(具体药物及剂量不详),咳嗽症状持续加重。10 d前患者出现喘息,夜间为著,平卧受限,于当地诊所静脉滴注药物7 d(具体药物及剂量不详),咳喘未见明显缓解,咳黄色黏痰,易咳出,伴发热,体温最高达38.5°C,无畏寒、寒战,遂就诊于当地医院查胸部CT示双肺多发高密度阴影(图1)。

摘要： 近年来,乌鳢养殖规模和密度逐年增大,加上养殖户技术水平低下等因素,常常疾病来势凶猛复杂,治疗起来颇为棘手。现将本人在山东鱼台老砦镇遇到的一例由车轮虫寄生和诺卡氏菌感染并发引起的乌鳢死亡症的治疗情况介绍如下,以供参考。一、基本情况2018年7月9日,笔者接到山东鱼台老砦镇张老板电话,称其养殖乌鳢的一口池塘出现大量死亡,经过当地渔医治疗,但控制不住。

摘要： 诺卡氏菌(Nocardia seriolae)是近年来海淡水养殖鱼类频发慢性传染病的病原菌.该研究通过引物扩增得到全长1 254 bp、编码417个氨基酸的诺卡氏菌毒力因子mce1A基因的全序列.该基因编码蛋白质的分子量约为43.98 kD,理论等电点5.14,含有161个疏水性氨基酸,疏水性平均值为0.044,为疏水性蛋白,具有α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲3种结构.经预测,Mce1A有MCE、DUF3407区域、OM_asym_MlaD、Mtu_fam_mce、MlaD 5个结构域,彼此交叠,含有公共区域.根据Mce1A氨基酸构建的系统进化树可以发现诺卡氏菌和新星诺卡氏菌的亲缘关系最近.构建pET32a-mce1A重组质粒并转化至大肠埃希菌BL21中,得到的重组蛋白的相对分子量约63 kD.温度、IPTG浓度对重组蛋白表达量没有影响.该研究为进一步研究Mce1A的致病机制奠定了基础.%Nocardia seriolae,a bacterial fish pathogen of marine fish and freshwater fish,causing nocardiosis,can lead to mass loss of fish farming.The full-length(1 254 bp)of mce1A cDNA in N.Seriolae was cloned in this study.The Mce1A molecular weight was 43.98 kD;the theoretical isoelectric point and theoretical hydrophobic were 5.14 and 0.044,respectively.It contained 161 hydrophobic amino acids,as the hydrophobic proteins.The protein mainly consisted of random coil,and almost had no helix and folding.Sequence analysis indicates that it encoded 417 amino acids,and contained five relatively conservative domains(MCE,DUF3407,OM_asym_MlaD,Mtu_fam_mce and MlaD domain).These domains overlaped each other and contained public areas.The study constructs a phylogenetic tree based on Mce1A cDNA which shows that the members of N.seriole are closely related to N.nova.We constructed a recombinant plasmid pET32a-mce1A and then transfered to E.coli BL21(DE3)in order to obtain recombinant protein.The E.coli containing recombinant vector expressed protein of 63 kD after induction by IPTG.The results provide references for further study on pathogenic mechanism.

摘要： 从患内脏结节病的四川眉山地区养殖乌鳢腹水和肝、脾、肾组织中分离并纯化培养、筛选出1株致病菌,经形态结构、染色观察、生理生化实验、16SrRNA基因和特异性序列的PCR检测进行菌株的鉴定,并进行分离菌株的药物敏感性实验。结果发现,该分离株具有与诺卡氏菌Nocardia较一致的形态特征和相似的生化特性。16SrRNA基因的PCR扩增、测序和系统发育分析显示,该菌株与诺卡氏菌属的亲缘关系较近,同源性较高,与诺卡氏菌Nocardia seriolae的16SrRNA基因序列相似性高达99%以上;诺卡氏菌的特异性引物N5F1/N5R1的PCR检测结果表明该菌为诺卡氏菌;药物敏感性结果显示,该菌对四环素、强力霉素、美满霉素、阿奇霉素、磺胺异噁唑和利福平等药物敏感。

摘要： 比较并讨论了重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-NHM 和野生诺卡氏菌腈水合酶的产物耐受性和热稳定性，提出了这两种菌株在研究腈水合酶过程中的应用。通过实验测定一定条件下腈水合酶的失活曲线，考察了腈水合酶在无水合反应条件下的催化稳定性。结果表明，重组大肠杆菌表达的腈水合酶稳定性比较差，与野生诺卡氏菌表达的腈水合酶相比，在相同条件下的失活动力学常数要大两个数量级。因此，野生诺卡氏菌更适合于工业生产丙烯酰胺的应用，而重组大肠杆菌可以作为改造腈水合酶基因的平台。

摘要： 本文在利用生物信息学手段对已知的腈水合酶基因簇序列分析比较的基础上,成功地调取了诺卡氏菌腈水合酶基因簇。序列分析表明:诺卡氏菌腈水合酶基因簇序列与红球菌J1 的基因簇序列相比,两者5,和3,端的序列同源性高达90﹪以上,但中间的序列同源性却较低,不到40﹪。整个序列共找到六个阅读框,分别是nhhC，nhhD，nhhE，nhhB，nhhA，nhhG,分别编码腈水合酶调节子1，调节子2，未知蛋白，腈水合酶β亚基，a 亚基和激活子。

摘要： 本文对大黄鱼病原菌——诺卡氏菌的鉴定及其系统发育进行了研究分析。结果表明，该菌株与诺卡氏菌属的菌株亲缘关系最近,与鱼诺卡氏菌的16SrRNA基因序列相似性达99.9﹪。据此鉴定该菌株为鱼诺卡氏菌。

摘要： 本文对一株诺卡氏菌的腈水解酶的酶学性质进行了研究。以丙烯腈为底物，该腈水解酶的最适催化温度为45 oC，最适催化pH 值为6.5，最适底物浓度为0.1mol/L 。该酶的Km值为21.74 μmol/L，其活性在碱性条件下能够保持相对稳定。

摘要： 本课题组采用生物信息学前沿技术进行腈水合酶的分子模拟与计算机定点突变研究.分别采用生物信息学软件和网络资源实现了底物分子的三维结构计算、腈水合酶的二级和三级结构预测、腈水合酶和底物的分子对接以及腈水合酶的计算机定点突变研究.初步实验结果表明,计算机定点突变技术可以科学、高效地指导蛋白酶的改造过程.

摘要： 为使腈水合酶基因在大肠杆菌中进行表达,将所得基因用EooR1和BamH1双酶切后与核同酶切的puc18,PET32a等质粒连接,筛选得到重组质粒,并进行了诱导表达的初步研究.

摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及鉴别单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的方法。本发明通过对单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的基因组序列进行分析，提供了用于高分辨熔解曲线技术鉴别单核细胞增生李斯特氏菌、伊氏李斯特氏菌和英诺克李斯特氏菌的特异性引物对，其序列如SEQ ID NO.1‑2所示。在此基础上，建立了利用高分辨熔解曲线技术鉴别三种李斯特氏菌的方法，具有较高的灵敏度、特异性和准确性，能够高效检出上述三种李斯特氏菌，具有操作简单、成本低、快速、高通量等优点，可用于临床检测、农业生产、食品安全等领域的李斯特氏菌的鉴别。

摘要： 本发明公开了一种提高红色诺卡氏菌细胞壁骨架乳化液除菌过滤有效成份通过率的方法，包括步骤如下：1、原辅料预混合及分散：红色诺卡氏菌细胞壁骨架原粉及辅料的研磨、均质；2、搅拌磨研磨：研磨转速：3600～3800rpm，设置设备出口最高温度：40°C；采用分级研磨，提高研磨效率。一级研磨得(A液)。用适量的注射用水冲洗研磨腔及管路(B液)，混匀A液、B液，得(AB液)；将AB液一分为二，每个样品各研磨45min；其中蠕动泵泵速第一个10min为10％，第二个10min为20％,最后以25％的泵速研磨至结束。本发明明显将乳化液研磨至超细粒径，大大降低了除菌过滤器对红色诺卡氏菌细胞壁骨架原粉的截留，提高有效成份通过率，继而在保证产品质量、满足产品预定用途的情况下提高了成品收率。

摘要： 本发明涉及一种保护动物对抗由属于具有在动物巨噬细胞内存活能力的诺卡氏菌型放线菌组的细菌感染引起的疾病的药物组合物，其包含诺卡氏菌型放线菌种的活细菌和用于这些活细菌的药物学上可接受的载体，该活细菌通过灭活编码甲基六氢茚满二酮丙酸酯降解中所涉及的蛋白的基因来减毒。

摘要： 本发明提供一种诺卡氏菌感受态细胞的制备方法与诺卡氏菌基因编辑方法。本发明的诺卡氏菌感受态细胞的制备方法采用溶菌酶对诺卡氏菌进行处理，从而降低了诺卡氏菌细胞壁的厚度，最终制备出容易接受外源DNA的诺卡氏菌感受态细胞，该方法操作简便快捷，具有较高的应用价值。本发明的诺卡氏菌基因编辑方法首次将CRISPR/Cas9系统运用到诺卡氏菌中，构建了CRISPR/Cas9基因编辑质粒并将其转化进入诺卡氏菌对目的基因进行编辑，该方法操作简便快捷，具有较高的应用价值，为研究诺卡氏菌基因功能、构建诺卡氏菌基因缺失株以及制备诺卡氏菌基因缺失株疫苗奠定了基础。

摘要： 本发明涉及医药生物工程技术领域，具体涉及替诺福韦与红色诺卡氏菌细胞壁骨架双层片。第一片层为包含作为活性成分的替诺福韦或其药学可接受的盐、以及药学可接受的赋形剂，第二片层包括作为活性成分的红色诺卡氏菌细胞壁骨架、以及药学可接受的赋形剂，本发明具有很强的稳定性和溶出性。

摘要： 本发明公开了一种提高红色诺卡氏菌细胞壁骨架乳化液除菌过滤有效成份通过率的方法，包括步骤如下：1、原辅料预混合及分散：红色诺卡氏菌细胞壁骨架原粉及辅料的研磨、均质；2、搅拌磨研磨：研磨转速：3600～3800rpm，设置设备出口最高温度：40°C；采用分级研磨，提高研磨效率。一级研磨得(A液)。用适量的注射用水冲洗研磨腔及管路(B液)，混匀A液、B液，得(AB液)；将AB液一分为二，每个样品各研磨45min；其中蠕动泵泵速第一个10min为10％，第二个10min为20％,最后以25％的泵速研磨至结束。本发明明显将乳化液研磨至超细粒径，大大降低了除菌过滤器对红色诺卡氏菌细胞壁骨架原粉的截留，提高有效成份通过率，继而在保证产品质量、满足产品预定用途的情况下提高了成品收率。

摘要： 本发明涉及一种保护动物对抗由属于具有在动物巨噬细胞内存活能力的诺卡氏菌型放线菌组的细菌感染引起的疾病的药物组合物，其包含诺卡氏菌型放线菌种的活细菌和用于这些活细菌的药物学上可接受的载体，该活细菌通过灭活编码甲基六氢茚满二酮丙酸酯降解中所涉及的蛋白的基因来减毒。

摘要： 本发明提供了一种诺卡氏菌抑菌组合物，所述组合物对诺卡氏菌抑菌的有效成分包括厚朴提取物，或厚朴提取物与厚朴酚的组合，或厚朴提取物与和厚朴酚的组合，或厚朴提取物与厚朴酚、和厚朴酚的组合。另一种诺卡氏菌抑菌组合物的有效成分包括厚朴酚，或和厚朴酚，或厚朴酚与和厚朴酚的组合。本发明首次揭示了厚朴提取物及其活性成分厚朴酚与和厚朴酚对诺卡氏菌的抑制活性，具有高效、安全无残留、易降解、低耐药等优点，为鱼类(水产动物)诺卡氏菌感染提供了新的治疗方法和途径。

摘要： 本发明公开了一株南非诺卡氏菌噬菌体P69及其应用，属于生物技术领域。本发明公开的一株南非诺卡氏菌噬菌体P69，保藏编号为CGMCC No.23088，其为由诺卡氏菌引起的污泥发泡事件的防控提供一种可选择的基础材料，丰富噬菌体种库；通过对噬菌体P69的分离鉴定和全基因组测序，进一步深入挖掘其功能基因和蛋白，为噬菌体治疗和生物防治提供一种或多种对南非诺卡氏菌具有裂解作用的酶类等，以此扩大宿主谱，提高噬菌体应用的广泛性和有效性；噬菌体P69可快速高效裂解南非诺卡氏菌，可用于污水处理系统中诺卡氏菌过度繁殖导致的污泥发泡事件。

摘要： 本发明公开了一株肉色诺卡氏菌噬菌体P3.2及其应用，属于生物技术领域。本发明公开的一株肉色诺卡氏菌噬菌体P3.2，保藏编号为CGMCC No.23093，其为由诺卡氏菌引起的污泥发泡事件的防控提供一种可选择的基础材料，丰富噬菌体种库；通过对噬菌体P3.2的分离鉴定和全基因组测序，进一步深入挖掘其功能基因和蛋白，为噬菌体治疗和生物防治提供一种或多种对肉色诺卡氏菌具有裂解作用的酶类等，以此扩大宿主谱，提高噬菌体应用的广泛性和有效性；噬菌体P3.2可快速高效裂解肉色诺卡氏菌，可用于污水处理系统中诺卡氏菌过度繁殖导致的污泥发泡事件。