薯蓣皂素

摘要： 研究分子印迹聚合物对特定药物的吸附及控制释放具有重要理论和应用价值。本文以硅胶为载体,先对其进行硅烷化修饰,再以薯蓣皂素为模板分子,以甲基丙烯酸(MAA)和N-异丙基丙烯酰胺(NIPAm)为共同功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂、偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,通过表面接枝分子印迹聚合物制备了薯蓣皂素温敏印迹硅胶微球。用傅里叶红外光谱及扫描电镜对聚合物表面化学基团及颗粒形貌进行表征。测试了分子印迹硅胶微球的载药性及在不同环境条件下的药物释放行为。结果表明,温敏印迹硅胶微球对薯蓣皂素具有良好吸附性能,其饱和吸附量为21.6mg/g,也具有较高的控制缓释性能。释放动力学表明,其在12h内控制薯蓣皂素释放率为81.9%,而非印迹硅胶微球不具备缓释性。环境条件对温敏印迹硅胶微球的控制释放具有重要影响。当温度为30°C、溶剂为甲醇、NaCl离子强度为1.5×10^(-4)mol/L时,印迹微球具有最高释放率,达99.28%。

摘要： 薯蓣皂素是一种天然甾体皂苷元,可作为数百种类固醇药物的前体,具有重要药用价值.目前工业生产薯蓣皂素主要依赖化学提取法,因此该法依赖植物材料和耕地且对环境有害.随着代谢工程和合成生物学的发展,生物合成法受到广泛关注.文中综述了生物合成薯蓣皂素的代谢途径和关键酶,并在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中设计其异源合成途径,提出改造策略,以期为全生物合成薯蓣皂素提供有价值的参考.

摘要： 目的 探讨影响山药中薯蓣皂素得率的重要因素,旨在为山药中薯蓣皂素的综合利用,特别是提出过程研究提供科学依据.方法 利用闪氏提取法提取山药中的薯蓣皂素,在提取溶剂单因素实验的基础上,选择料液比、提取时间和次数进行正交实验,并进行优化和验证.结果 采用2次闪式提取法对山药中的薯蓣皂素进行提取,最佳工艺条件为:5％ 硫酸的80％ 乙醇溶液,料液比1:10,闪式提取1次,提取时间2min,加热水解2h,离心,取上清液,回收溶剂,收集残渣,冷却,使用1％ 碳酸钠溶液中和,离心得到滤渣,将滤渣置于干燥皿在80°C烘箱中干燥,所得水解物以石油醚进行提取,此时的料液比为1:10,再次闪式提取1次,提取时间2min.结论 在此条件下,薯蓣皂素得率达到8.14mg/g.闪氏提取法简单、迅速、高效,可用于山药中薯蓣皂素的提取.

摘要： 倍他米松(Betamethasone)属于糖皮质激素类药物,具有抗炎、抗过敏和抑制免疫等多种药理作用.国内外研究报道倍他米松合成主要是基于剑麻皂素、番麻皂素、薯蓣皂素、甾类化合物中间体等原料经过化学或微生物转化合成,文章对主要转化技术及其特点进行了简要论述.

摘要： 以薯蓣皂素合成植物葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)为材料,从中分离了环阿屯醇合酶基因TfCAS,并对其序列特征、基因的表达及其对葫芦巴薯蓣皂素生物合成的影响进行了分析.结果 显示,该基因全长2271 bp,共编码756个氨基酸;其氨基酸序列与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)、豌豆(Pisum sativum L.)及百脉根(Lotus japonicus L.)环阿屯醇合酶氨基酸序列的同源性分别为94％、91％和89％.利用酵母表达系统对TfCAS蛋白的生物化学功能进行了验证,结果表明该蛋白能够催化环阿屯醇的合成.进一步利用葫芦巴发根遗传转化体系在葫芦巴中过量表达TfCAS基因,发现该基因的过量表达大幅提高了TfCAS的表达,且促进了葫芦巴中β-谷甾醇和薯蓣皂素的生物合成,但与对照相比差异不显著.研究结果表明TfCAS基因参与了葫芦巴薯蓣皂素的生物合成,但其并非为该合成途径中的限速酶.

摘要： 以薯蓣皂素合成植物葫芦巴(Trigonella foenum-graecum L.)为材料,从中分离了环阿屯醇合酶基因TfCAS,并对其序列特征、基因的表达及其对葫芦巴薯蓣皂素生物合成的影响进行了分析。结果显示,该基因全长2271 bp,共编码756个氨基酸;其氨基酸序列与蒺藜苜蓿(Medicago truncatula Gaertn.)、豌豆(Pisum sativum L.)及百脉根(Lotus japonicus L.)环阿屯醇合酶氨基酸序列的同源性分别为94%、91%和89%。利用酵母表达系统对TfCAS蛋白的生物化学功能进行了验证,结果表明该蛋白能够催化环阿屯醇的合成。进一步利用葫芦巴发根遗传转化体系在葫芦巴中过量表达TfCAS基因,发现该基因的过量表达大幅提高了TfCAS的表达,且促进了葫芦巴中β-谷甾醇和薯蓣皂素的生物合成,但与对照相比差异不显著。研究结果表明TfCAS基因参与了葫芦巴薯蓣皂素的生物合成,但其并非为该合成途径中的限速酶。

摘要： 探讨超声粉碎技术辅助酸水解制备盾叶薯蓣中薯蓣皂素的工艺.通过单因素及正交实验优化细胞粉碎前处理盾叶薯蓣的工艺,最后进行水解和萃取,液相色谱检测薯蓣皂素,计算得率.超声最优工艺是提取功率60％(570 W),提取时间45 min,提取温度70°C,验证实验取得薯蓣皂素的产率为0.880 2％.萃取的最佳条件:采用90～120°C的石油醚回流萃取6 h时薯蓣皂素得率最高.利用超声粉碎技术辅助酸水解制备薯蓣皂素比直接酸解提高了29.88％的产率,应用潜力大.%To study the technology of ultrasonic comminution to assist the preparation of diosgenin from DioscoreaZingiberensisC.H.Wright by acid hydrolysis.Single factor and orthogonal experiments were applied to optimize the pretreatment process of cell Dioscorea zingiberensis,and then the hydrolysis and extraction were carried out,and the yield of diosgenin was determined by liquid chromatography.The optimal ultrasonic technology is extraction power of 60％(570 W),extraction time 45 min,extraction temperature of 70 degrees centigrade,and the yield of diosgenin is 0.880 2％.The best extraction condition: The yield of diosgenin was the highest when the petroleum ether was refluxed at 90～120 C for 6 h.Compared with the acid hydrolysis,the ultrasonic assisted acid hydrolysis improved the yield of 29.88％and with more application potential.

摘要： [目的]探讨超声辅助酶法水解黄姜生产薯蓣皂素工艺.[方法]通过正交试验优化纤维素酶和蜗牛酶组成的复配酶水解黄姜,建立高效液相色谱法定量薯蓣皂素,计算得率.[结果]酶解温度对薯蓣皂素得率的影响最大;最佳酶水解条件是酶解时间为48 h,酶添加量为物料的8％,酶解pH为6.0,酶解温度为50°C,薯蓣皂素的得率为0.524 9％.采用超声破碎辅助复配酶解法,薯蓣皂素的得率为0.630 9％.[结论]利用超声辅助纤维素酶和蜗牛酶提取黄姜中薯蓣皂素比直接酶解法得率提高了25％,接近酸解法的得率,应用潜力大.%[Objective] The research aimed to explore the preparation technology of diosgenin of Dioscorea zingiberensis by ultrasonic-assisted coenzyme hydrolysis.[Method] The orthogonal experiment was carried out to optimize the cellulase and snail enzyme composition of the enzyme to hydrolyze the turmeric,and established HPLC method to determine the yield of diosgenin.[Result] The key factor affected extraction of diosgenin was enzymolysis temperature.The optimal condition for enzymatic hydrolysis were as follows:enzymolysis time of 48 h,enzyme dosage of 8％,enzymatic hydrolysis of pH 6.0,and enzymolysis temperature of 50 °C.Thus,the yield of diosgenin prepared under those condition was up to 0.524 9％.Interestingly,the yield of diosgenin obtained by ultrasonic assisted co-enzymatic hydrolysis was 0.630 9％.[Conclusion] The yield of diosgenin obtained by ultrasonic assisted co-enzymatic hydrolysis increased by 25％ compared with that obtained by the direct enzymatic hydrolysis,which was close to that obtained by the acidic hydrolysis.Thus,it plays a potential role in preparing diosgenin of Dioscorea zingiberensis.

摘要： 按照JJF 1006——1994《一级标准物质技术规范》的要求,建立薯蓣皂素标准物质的研制方法.采用IR、UV、MS和NMR等方法对薯蓣皂素标准物质进行定性分析,以高效液相色谱方法进行均匀性和稳定性检验,通过8家实验室的联合定值,完成结果的数据分析.结果表明:该标准物质的均匀性和稳定性良好,定值结果为98.9%,置信度为95%的不确定度为0.2%.研制出的标准物质可用于薯蓣产品的检测和质量控制.%The preparation method of Diosgenin reference materials was established according to the technical norm of primary reference material (JJF 1006-1994). Qualitative analysis of Diosgenin was carried out by UV, IR, MS and NMR spectrum and high-performance liquid chromatography was carried out for homogeneity and stability inspection. A cooperative certification was conducted with eight laboratories and the certification data were analyzed. The results showed that the homogeneity and stability of Diosgenin were excellent and the certified value was 98.9%with the expand uncertainty of 0.2% in confidence coefficient of 95%. The reference material of Diosgenin can be used for inspection and quality control of related products.

摘要： 薯蓣皂素是生产甾体激素类药物的前体物质，国际国内市场需求巨大，我国是全球最大的薯蓣皂素生产国和出口国。黄姜作为我国特有的理想薯蓣皂素提取植物，主要分布在以湖北省十堰市为代表的汉江中上游秦巴山区。黄姜种植与皂素加工产业作为当地的支柱产业和农民脱贫致富的重要途径，对当地社会经济发展具有重要意义。但是当前黄姜皂素产业的进一步发展面临着严苛的资源环境约束与极大的国家政策调控风险，整个产业处于不可持续的发展状态中。

摘要： 本文对我国利用甾体药物资源的新进展进行了介绍。文章指出，我国已逐步建立了以薯蓣皂素为主要原料的甾体药物工业,至今各类重要甾体药物已均有生产,除能满足国内防治有关疾病用药外,还大量出口国外换取外汇,已成为甾体药物的生产大国。

摘要： 采用二环己基碳二亚胺(dicyclohexylcarbodiimide，DCC)法和水溶性碳二亚胺[1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide, EDC]法，分别将境拍酸酐化的薯领皂素与牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)偶联，得到不同的免疫原，通过免疫获得兔多克隆抗体，用间接竟争性Dot-ELISA方法分析比较不同免疫原的免疫效果，结果表明，DCC法合成的薯孩皂素免疫原免疫效果优于EDC法。

摘要： 中药穿山龙对哮喘患者具有良好的抗炎、抗过敏作用,动物实验表明穿山龙提取物薯蓣皂素对哮喘模型有平衡调控作用.其具有抑制TH反应,减少IL-4的分泌,与强的松作用相同,薯蓣皂素并能提高TH反应,增加干扰素γ的分泌更有利于纠正TH/ TH失衡,消除气道炎症,治疗支气管哮喘.

摘要： 薯蓣皂素生产工艺及提取薯蓣皂素后盾叶薯蓣的处理方法，以盾叶薯蓣为原料，采用超声波辅助水剂，在表面活性剂的作用下，萃取薯蓣皂苷，经大孔树脂纯化技术得到纯度较高的薯蓣皂苷，在薯蓣皂苷酶的作用下，水解薯蓣皂苷得到薯蓣皂素，萃取薯蓣皂苷后的盾叶薯蓣中还含有40～50％的淀粉，经液化、糖化、酒化的乙醇，实现了薯蓣皂素的清洁生产及盾叶薯蓣的资源化利用。解决薯蓣皂素生产过程中的污染难题。

摘要： 本发明公开了盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关蛋白及编码基因与应用。本发明提供的盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关蛋白为SEQ ID No.9和SEQ ID No.7所示的两个蛋白质。利用本发明所提供的盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关基因，与细胞色素P450还原酶编码基因一起导入能够合成胆固醇的酿酒酵母菌，能够得到能够合成薯蓣皂素的酿酒酵母工程菌株。本发明实现了酿酒酵母薯蓣皂素的生物合成。

摘要： 本发明属于微生物次生代谢产物技术领域，公开一种盾叶薯蓣内生菌发酵制备薯蓣皂素的方法，薯蓣皂素从盾叶薯蓣内生菌的发酵液中分离获得，发酵方法包括下述步骤：1)将盾叶薯蓣内生菌接入种子培养基中进行种子培养，得到发酵菌种；2)将所述发酵菌种接入盛装有发酵培养基的发酵罐中，开启搅拌，设定发酵条件为发酵温度24‑32°C、发酵pH5.5‑8.5、通气量1.0‑5.5L/min；3)酸解发酵液，中和后得到所述薯蓣皂素。本发明建立了5L小罐发酵生产薯蓣皂素的基本工艺，显著提高了薯蓣皂素的产量，克服了现有薯蓣皂素生产产量低、耗能高的技术缺陷，为盾叶薯蓣内生菌的开发利用提供了研究基础。

摘要： 本发明公开了一种由盾叶薯蓣-黄姜经微生物转化生产薯蓣皂素的方法，将黄姜干粉和自来水按质量体积比1：5~12的比例混合，并补入为黄姜干粉质量4.0%的尿素、为黄姜干粉质量1.0%的酵母提取物和为自来水体积0.2%的无机盐，配成转化浆液，接入体积为自来水体积5%的芽孢杆菌属菌株XBT2011种子液，在培养温度40°C,控制pH6.0左右,搅拌速度为300~400rpm，通气条件为2.5~4.0l/min的培养条件下转化56~72hrs，转化浆液经过滤,干燥得到水解物，水解物用一倍体积的120﹟汽油提取12-16hrs,经反复结晶得到薯蓣皂素成品；所述芽孢杆菌属菌株XBT2011的保藏号：CGMCCNo.6301。本发明的水解物干重为所添加黄姜干粉干重28～33%，使薯预总皂苷接近完全转化成薯蓣皂苷元，处理量大，且不含糖分,pH接近于中性，降低了环境污染。

摘要： 薯蓣皂素生产工艺及提取薯蓣皂素后盾叶薯蓣的处理方法，以盾叶薯蓣为原料，采用超声波辅助水剂，在表面活性剂的作用下，萃取薯蓣皂苷，经大孔树脂纯化技术得到纯度较高的薯蓣皂苷，在薯蓣皂苷酶的作用下，水解薯蓣皂苷得到薯蓣皂素，萃取薯蓣皂苷后的盾叶薯蓣中还含有40～50％的淀粉，经液化、糖化、酒化的乙醇，实现了薯蓣皂素的清洁生产及盾叶薯蓣的资源化利用。解决薯蓣皂素生产过程中的污染难题。

摘要： 本发明公开了盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关蛋白及编码基因与应用。本发明提供的盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关蛋白为SEQ ID No.9和SEQ ID No.7所示的两个蛋白质。利用本发明所提供的盾叶薯蓣来源的薯蓣皂素合成相关基因，与细胞色素P450还原酶编码基因一起导入能够合成胆固醇的酿酒酵母菌，能够得到能够合成薯蓣皂素的酿酒酵母工程菌株。本发明实现了酿酒酵母薯蓣皂素的生物合成。

摘要： 本发明属于微生物次生代谢产物技术领域，公开一种盾叶薯蓣内生菌发酵制备薯蓣皂素的方法，薯蓣皂素从盾叶薯蓣内生菌的发酵液中分离获得，发酵方法包括下述步骤：1)将盾叶薯蓣内生菌接入种子培养基中进行种子培养，得到发酵菌种；2)将所述发酵菌种接入盛装有发酵培养基的发酵罐中，开启搅拌，设定发酵条件为发酵温度24‑32°C、发酵pH5.5‑8.5、通气量1.0‑5.5L/min；3)酸解发酵液，中和后得到所述薯蓣皂素。本发明建立了5L小罐发酵生产薯蓣皂素的基本工艺，显著提高了薯蓣皂素的产量，克服了现有薯蓣皂素生产产量低、耗能高的技术缺陷，为盾叶薯蓣内生菌的开发利用提供了研究基础。

摘要： 本发明属于生物工程领域，涉及一种鼠李糖苷酶及其在水解黄姜薯蓣皂苷制备薯蓣皂素中的应用。所述鼠李糖苷酶为α‑L‑鼠李糖酶，基因序列如SEQ ID NO：1所示，制备步骤如下：构建带有α‑L‑鼠李糖苷酶基因的重组载体；重组载体的转化及α‑L‑鼠李糖苷酶的表达；α‑L‑鼠李糖苷酶的纯化。鼠李糖苷酶作为糖苷水解酶，以黄姜薯蓣皂苷为底物，制备葡萄糖基薯蓣皂苷，再用β‑葡萄糖苷酶水解葡萄糖基薯蓣皂苷，制备薯蓣皂素。本发明开发出能特异性水解薯蓣皂苷糖基鼠李糖苷的酶，制备出薯蓣皂素，克服了现有技术所存在的对薯蓣皂苷水解率低，破坏性大、污染严重、目的性差等缺点，具有无污染、目的性强、反应时间断、转化率高的优点。

摘要： 本发明一种薯蓣皂苷水解提取薯蓣皂素方法，以硫酸为水解酸，按絮凝物：浓度为0.6mol/L～1.4mol/L硫酸＝1g:(3～7)mL的比例，在水热反应釜中进行水解，水热反应釜的温度控制在110°C～150°C,时间为3.5h～5.5h，水解结束后，用2mol/L的氢氧化钠调节pH至中性，然后进行真空抽滤，用水洗滤渣至滤液中无SO42-为止，先在50°C～60°C的温度下干燥滤渣8h，再在110°C～120°C的温度下干燥滤渣30min，以石油醚为萃取剂，以干燥后的滤渣为原料，采用索氏萃取法萃取3h-6h，回收部分溶剂，冷却结晶得到薯蓣皂素。本发明有效地回收了淀粉，降低了废水中COD值、BOD值；水解时降低了水解酸的浓度，有效的减少了污染；水解物量的减少降低了薯蓣皂素萃取时有机溶剂的使用量。

摘要： 本发明公开了一种由盾叶薯蓣-黄姜经微生物转化生产薯蓣皂素的方法，将黄姜干粉和自来水按质量体积比1：5~12的比例混合，并补入为黄姜干粉质量4.0%的尿素、为黄姜干粉质量1.0%的酵母提取物和为自来水体积0.2%的无机盐，配成转化浆液，接入体积为自来水体积5%的芽孢杆菌属菌株XBT2011种子液，在培养温度40°C,控制pH6.0左右,搅拌速度为300~400rpm，通气条件为2.5~4.0l/min的培养条件下转化56~72hrs，转化浆液经过滤,干燥得到水解物，水解物用一倍体积的120﹟汽油提取12-16hrs,经反复结晶得到薯蓣皂素成品；所述芽孢杆菌属菌株XBT2011的保藏号：CGMCCNo.6301。本发明的水解物干重为所添加黄姜干粉干重28～33%，使薯预总皂苷接近完全转化成薯蓣皂苷元，处理量大，且不含糖分,pH接近于中性，降低了环境污染。