关键酶

摘要： 为探讨葛根发育过程中淀粉合成关键酶活性与块根产量和淀粉积累的关系,以初步揭示其内在的生理机制。该研究以‘桂葛1号’粉葛和‘桂葛8号’野葛为材料,采取生理测定法对农艺性状、直链和支链淀粉的含量、淀粉合成关键酶活性等进行测定,并对葛根发育过程中淀粉合成关键酶活性、农艺性状和淀粉含量动态变化的关系进行相关性分析。结果表明:(1)块根发育过程中,两品种葛根腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)、可溶性淀粉合成酶(SSS)、束缚性结合淀粉合成酶(GBSS)和淀粉分支酶(SBE)的活性呈现先增大后降低的单峰曲线变化,与直链淀粉、支链淀粉和总淀粉含量由缓慢增长到快速增长后趋于稳定的变化趋势基本一致,即在块根形成期至膨大期逐渐增长,至膨大后期达到最大,之后迅速下降,至成熟期缓慢下降,并维持在较高水平。(2)‘桂葛8号’的淀粉含量和产量显著高于‘桂葛1号’,其酶活性也均显著高于‘桂葛1号’。(3)葛块根的根长、根粗、单株重、干物质含量、产量表现为“缓慢-快速-稳定”的变化趋势,淀粉含量表现出类似变化。(4)相关性分析结果显示,4个淀粉合成关键酶活性与块根直链淀粉、支链淀粉及总淀粉含量、根长均呈显著或极显著正相关,与单株重、产量、干物质含量及根粗呈正相关,但差异不显著。综上认为,淀粉含量增加是葛根生长膨大增粗的结果,提高AGPase、SSS、GBSS和SBE的酶活性和竞争底物的能力,可提高葛根淀粉及其组分的积累,从而提高产量和品质。

摘要： 为了解植物中绿原酸合成代谢途径关键酶的理化性质和进化关系,收集了NCBI数据库中绿原酸代谢途径3个关键酶(Hqt、Hct、C3h)的序列信息,利用在线软件ExPASy-ProtParam分析了它们的理化性质,利用MEGA-7软件比较了它们的序列相似性并建立进化树。理化性质分析结果表明:合成绿原酸的3种关键酶多为亲水性蛋白质,各类基础性质相近,但金银花C3h分子的等电点与其他植物不同。序列相似性分析结果表明:金银花绿原酸代谢途径中的Hqt与桔梗Hqt相似度较高,金银花Hct与烟草Hct的相似度较高。通过研究进一步了解了绿原酸合成代谢途径关键酶的情况。

摘要： 目的系统研究白花前胡香豆素合成途径关键酶基因的蛋白结构特征,并明确关键酶基因在盐胁迫下的表达模式。方法通过白花前胡前期转录组测序,确定前胡香豆素生物合成关键酶基因的序列,利用蛋白质结构分析预测软件对关键酶蛋白进行系统预测分析,并通过qRT-PCR分析盐胁迫下关键酶基因的变化规律。结果关键酶基因编码蛋白都有着各自特殊的保守结构域和三级结构;0.15 mol/L NaCl处理4 h对PAL和4CL基因的表达水平影响最高,比对照组上调1倍;而COMT-S和GXM在不同处理时间下,基因表达水平均明显下降。结论受盐胁迫后上调表达的香豆素合成途径关键酶基因,可以提高植物对逆境胁迫的耐受性。

摘要： 花青素是黄酮类多酚化合物,广泛分布于植物的果实、叶片、花瓣和种子中,使植物花和果实呈现出多种多样的色彩。作为纯天然的食用色素,花青素可以有效清除自由基,在抗氧化、抗衰老方面效果显著,同时,对于抗炎症、预防肥胖、预防慢性代谢性疾病、保护心血管、改善视力等也有良好的功效。近年来,关于花青素生物合成的研究已经成为植物次生代谢领域的热点问题,其中花青素的运输、积累以及体外合成有待深入研究。本文综述了花青素的结构、种类,重点对花青素的生物合成途径及合成关键酶研究进展进行总结,以期为后续进一步研究花青素在植物体内的合成机制及植物的分子改良提供参考。

摘要： 环烯醚萜类化合物广泛存在于自然界之中,是许多中藏药的主要药用成分。研究发现该类化合物具有许多药理活性,如抗炎镇痛作用、保护心血管作用、保肝作用等。结合近年国内外研究,对中藏药中环烯醚萜类生物合成途径及萜类前体、环烯醚萜骨架合成相关的关键酶(HMGR、DXS、DXR、HDR、IDI、GPPS、GES、G10H、10-HGO、IS)与编码基因的研究进行综述,以期为进一步挖掘基因功能,调控活性成分积累,提高药材品质,对中藏药中环烯醚萜类成分进一步开发利用奠定基础。

摘要： 在肝细胞癌(HCC)的治疗中,放射治疗日益成为一种重要的治疗策略。然而,对放射治疗的抵抗是成功治疗的主要障碍之一。因此,该研究旨在阐明放射抵抗的机制,并寻找可靠的生物靶点,以提高HCC放射治疗的疗效。从无标记的定量蛋白质组筛选中,确定转移RNA(tRNA;鸟嘌呤-N[7]-)甲基转移酶1(METTL1)是N7-甲基鸟苷(M7G)tRNA修饰的关键酶,是HCC细胞辐射抗性的重要驱动因素。

摘要： 作为重要的粮油饲兼用作物,大豆为世界膳食提供高达约71%的蛋白质和29%的油脂。随着人口不断增长和大豆消费需求的不断提高,在有限的耕地面积和单产条件下,大豆品质的遗传改良则更具重要意义。该文综述了大豆种子蛋白和油脂含量两个重要品质性状调控的研究进展,总结了调控大豆蛋白和油脂合成的关键酶和转录因子及因子间的相互作用,并根据蛋白和油脂合成代谢调控途径中关键酶和转录因子作用机制,绘制了大豆蛋白和油脂合成代谢的分子调控网络。此外,该文还讨论了当前大豆种子蛋白油脂含量调控研究存在的瓶颈及对策,以期为大豆种子品质的遗传改良和高产品种培育提供参考。

摘要： 黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉等真菌产生的次级代谢产物,主要存在于谷类、花生、玉米等农作物中.在我国尤其是南方省份,受高温高湿环境的影响,黄曲霉毒素在农作物上的污染极易发生,造成巨大的经济损失.利用微生物代谢黄曲霉毒素,具有专一、高效、反应条件温和等诸多优点,是目前公认的理想脱毒方法.本文首先简要介绍了黄曲霉毒素B1的形成过程、结构特征以及毒性基团,接着重点介绍了已报道的能代谢黄曲霉毒素B1的微生物种类、关键酶以及代谢途径,最后列举了应用基础研究的例子.

摘要： 以丛毛红曲菌(Monascus pilosus)MS-1为实验菌株,考察合成培养基中甘油浓度对红曲菌碳源及甘油代谢关键酶酶活的影响。结果表明,发酵过程中各处理发酵液pH均在3.5~7.5之间,且呈先降后升趋势,发酵液体积呈下降趋势。在发酵的前9 d,普遍表现为甘油浓度为1 g/L和40 g/L的处理中甘油及碳源代谢关键酶酶活高于对照及甘油浓度为160 g/L的处理中相关酶活,在发酵后期则普遍出现相反的现象。甘油可影响红曲菌的碳源及甘油代谢关键酶酶活,进而影响红曲菌生长及代谢产物产生。该研究结果可为深入探讨甘油影响红曲菌代谢产物产生的分子机制奠定基础。

摘要： 以丛毛红曲菌(Monascus pilosus)MS-1为实验菌株,考察合成培养基中甘油浓度对红曲菌碳源及甘油代谢关键酶酶活的影响.结果表明,发酵过程中各处理发酵液pH均在3.5～7.5之间,且呈先降后升趋势,发酵液体积呈下降趋势.在发酵的前9 d,普遍表现为甘油浓度为1 g/L和40 g/L的处理中甘油及碳源代谢关键酶酶活高于对照及甘油浓度为160 g/L的处理中相关酶活,在发酵后期则普遍出现相反的现象.甘油可影响红曲菌的碳源及甘油代谢关键酶酶活,进而影响红曲菌生长及代谢产物产生.该研究结果可为深入探讨甘油影响红曲菌代谢产物产生的分子机制奠定基础.

摘要： 木质素是一种植物体内重要的大分子有机物质,其含量仅次于纤维素.在增强植物体机械强度、抵御外界不良环境侵袭以及疏导组织水分运输等方面起着重要作用.木质素的含量及组成对果实品质及抗逆性等有重要的影响,如核桃内果皮中木质素的含量及组成对于核桃的果实品质、内果皮发育、果皮的完整性(露仁)等有直接影响.因此,本文重点对植物木质素生物合成及其关键酶基因的研究进展进行综述,为从木质素合成领域着手改良果实品质奠定理论基础.

摘要： 目的:为了从遗传表达角度解析两种新疆紫草细胞系中紫草素类化合物红色系高产和白色系低产的原因。rn 方法:采用Real-time PCR的方法获得不同生长时期新疆紫草红色高产系和白色低产系紫草素生物合成关键酶基因的表达规律及相对表达量差异。rn 结果:新疆紫草红色高产系和白色低产系在不同生长时期其关键酶基因(HMGR、PAL、4-CL、C4H、GDPS、PGT)的表达水平除个别时间段的个别基因外,红色高产系生长周期内紫草素生物合成关键酶基因的表达量均远大于白色低产系,其中以生长旺盛的第5-17天尤为明显。在不同生长时期其关键酶基因的表达随生长周期时间变化而波动,红色高产系中关键酶基因的表达随时间变化的曲线为倒U型,而白色低产系中此曲线呈U型趋势。rn 结论:新疆紫草白色低产系同样具备有合成紫草素类化合物的潜力,并且白色系紫草素类生物合成途径的障碍发生位置应当在PGT酶促反应的下游。

摘要： 为了探索葡萄果实糖积累与蔗糖代谢相关酶活性间的关系,测定了赤霞珠葡萄果实中葡萄糖、果糖和蔗糖含量以及蔗糖代谢相关酶--可溶性酸性转化酶(SAI)、可溶性中性转化酶(SNI)、细胞壁结合的酸性转化酶(CBAI)、蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性。结果表明:赤霞珠葡萄果实糖分的积累以葡萄糖和果糖为主;果实发育过程中,调控糖分积累的关键酶是转化酶;葡萄糖、果糖的积累丰要受到转化酶的调控,蔗糖的积累主要受到蔗糖合成酶的调控;糖分的积累由各种酶共同作用。

摘要： 本文研究了克雷伯氏杆菌以甘油为底物发酵产1,3-丙二醇三1,3-丙二醇氧化还原酶[EC.1.1.1.202]、甘油脱水酶[EC.4.2.1.30])不同培养条件下的比酶活的变化,并用SDS电泳显示了胞内蛋白在上述条件下的表达差异.结果表明,以甘油为唯一碳源时,厌氧培养甘油脱氢酶1,3-丙二醇氧化还原酶比酶活较高,而有氧条件具有较高的甘油脱水酶酶活.在以葡萄糖为唯一碳源有氧培养时不产生1,3-丙二醇,但具有一定的甘油脱氢酶、甘油脱水酶和1,3-丙二醇氧化还原酶酶活,这些结果为通过控制发酵给氧条件和碳源供给而实现高酶活转化1,3-丙二醇奠定了基础.SDS-PAGE电泳显示不同碳源培养时,有分子量约为40 KD的蛋白条带与发酵条件及产醇呈现明显的相关性,这提示该蛋白可能与克雷伯氏杆菌转化甘油生成1,3-丙二醇在代谢途径方面有重要影响,有必要下一步对其进行蛋白质组学与代谢组学等方面的研究.

摘要： 本发明适用于基因工程技术领域，提供了高等植物ACS双酶活关键位点突变制备单酶活突变体，ACS单酶活性关键位点包括保守域BOX2保守序列F‑Q‑D‑Y‑H‑G‑[LM]‑[PSKL]中的Q位点和保守域BOX4保守序列T‑N‑P‑S‑N‑P‑L‑G‑[TA]‑[TAMVIF]中的[TA]‑[TAMVIF]位点，以及C‑S裂解酶单酶活性关键位点，包括保守域ACS‑motif 5保守序列D‑F‑x(3)‑K‑N‑I‑H‑L‑[IV]‑S‑D‑E‑I‑[YF]‑[SA]‑G‑[TS]‑V‑F中的第13个氨基酸D。在拟南芥ACS7蛋白中，根据其在所有编码氨基酸中的位置，上述位点分别对应Q98、A221和T222，以及D245位点。将上述位点突变为其他氨基酸，会导致突变后的ACS蛋白只具有ACS或C‑S裂解酶单酶活性。本发明为利用基因工程方法控制乙烯参与的多项生命过程如果实成熟等提供了关键靶点，在抗逆作物分子育种中也具有广阔的应用前景和重要的经济价值。

摘要： 本发明适用于基因工程技术领域，提供了高等植物ACS双酶活关键结构域替换制备单酶突变体，包括保守序列为F‑Q‑D‑Y‑H‑G‑[LM]‑[PSKL]的BOX2保守域、保守序列为M‑S‑S‑F‑[GT]‑L‑[VI]‑S‑S‑Q‑T‑Q的BOX6保守域，以及保守序列为T‑N‑P‑S‑N‑P‑L‑G‑[TA]‑[TAMVIF]的BOX4保守域。将这些保守域序列进行重组替换后，ACS重组蛋白只具有ACS或C‑S裂解酶单酶活性。本发明鉴定了影响高等植物ACS蛋白ACS和C‑S裂解酶活性的关键结构域，利用基因工程方法为控制乙烯参与的多项生命过程提供了关键靶点，具有广阔的应用前景和重要的经济价值。

摘要： 本发明公开了一种可消除关键杂质的酶法制备S‑腺苷甲硫氨酸方法。该方法，步骤如下：步骤1，构建一种基因缺失的大肠杆菌：将大肠杆菌BL21(DE3)中的speD基因进行敲除，得到不产生S‑腺苷甲硫氨酸脱羧酶的基因缺失大肠杆菌；步骤2，再将含有目的基因的重组质粒转化该大肠杆菌：利用此基因缺失菌表达S‑腺苷甲硫氨酸合成酶基因metK，经培养和诱导剂诱导，表达后提取的粗酶液可直接用于酶反应生产S‑腺苷甲硫氨酸。本发明具有能够大幅度降低后续SAM纯化成本的效果。

摘要： 一种葡萄脱落酸降解途径关键酶8’‑羟化酶CYP707A蛋白、编码基因及其应用，其特征在于：该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，该编码基因的序列如SEQ ID No.1所示。能填补葡萄果实成熟过程中的调节因子，完善植物果实成熟的机制，填补脱落酸降解途径关键基因CYP707A家族成员的克隆、表达性分析及在新品种“鄞红”葡萄果实中CYP707A蛋白以及编码基因的空白。

摘要： 本发明公开了一种植物花色素苷合成关键酶的编码基因与应用。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且能改变植物花色或叶色的由1)衍生的蛋白质。

摘要： 本发明公开了一种植物花色素苷合成后期关键酶的编码基因。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且能改变植物花色或叶色的由1)衍生的蛋白质。

摘要： 本发明公开了一种植物花色素苷形成关键酶的编码基因。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且能改变植物花色或叶色的由1)衍生的蛋白质。

摘要： 本发明公开了一种植物花色素苷代谢途径中关键酶的编码基因与应用。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且能改变植物花色或叶色的由1)衍生的蛋白质。

摘要： 本发明公开了一种与植物类黄酮代谢途径关键酶的编码基因。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且能改变植物花色或叶色的由1)衍生的蛋白质。

摘要： 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种绿色木霉高温胁迫响应关键酶基因TvHSP70、重组表达载体、工程菌及其应用。所述绿色木霉高温胁迫响应关键酶基因TvHSP70，其特征在于，所述基因的CDS的核苷酸序列为如下(a1)～(a3)任意一种：(a1)如SEQ ID NO.19所示的核苷酸序列；(a2)如SEQ ID NO.19所示的核苷酸序列经一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入形成的序列；(a3)在严格条件下能够与如(a1)或(a2)所述的核苷酸序列杂交并编码相同功能蛋白的核苷酸序列。本发明构建筛选具有较强抗逆性的木霉工程菌株，有效提高了促进木霉的生长性能，提高了抗逆性、对病原菌的拮抗能力，以及木霉对植物的促生能力。