肝缺血再灌注损伤

摘要： 目的 探讨槲皮素预处理通过AMPK/mTOR信号通路介导的自噬对肝缺血再灌注损伤的保护作用。方法 大鼠使用随机数字表法分为对照组、模型组、槲皮素组、氯喹(自噬抑制剂)组和槲皮素+氯喹组。手术前3 d,槲皮素组大鼠灌胃给予0.1 g/kg槲皮素,氯喹组大鼠腹腔注射0.02 g/kg氯喹,槲皮素+氯喹组灌胃给予槲皮素同时腹腔注射氯喹,对照组和模型组给予等体积溶剂,每天1次。构建肝缺血再灌注大鼠模型并于再灌注6 h后处死大鼠。全自动生化分析仪检测大鼠肝功能指标,包括谷氨酸-丙酮酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸酰基转移酶(AST);苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中炎性因子含量,包括白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β);单磺尸胺染色法(MDC)观察并计算各组大鼠肝组织细胞自噬率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝组织中Beclin1蛋白表达水平及AMPK、mTOR蛋白磷酸化水平。结果 对照组大鼠肝组织结构完整,肝细胞排列整齐,无显著坏死现象。与对照组相比,模型组大鼠肝组织结构紊乱,肝细胞排列疏松,出现坏死,ALT、AST水平、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及mTOR蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05),肝组织细胞自噬率、Beclin1蛋白表达水平及AMPK蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,槲皮素组大鼠肝组织上述病理损伤显著缓解,ALT、AST水平、IL-6、TNF-α、IL-1β含量以及mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),肝组织细胞自噬率、Beclin1蛋白表达水平及AMPK蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05);氯喹组大鼠肝组织上述病理损伤显著加重,ALT、AST水平、IL-6、TNF-α、IL-1β含量以及mTOR蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05),肝组织细胞自噬率、Beclin1蛋白表达水平及AMPK蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05)。与槲皮素组相比,槲皮素+氯喹组大鼠肝组织病理损伤显著加重,ALT、AST水平、IL-6、TNF-α、IL-1β含量以及mTOR蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05),肝组织细胞自噬率、Beclin1蛋白表达水平及AMPK蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05);与氯喹组相比,槲皮素+氯喹组大鼠肝组织病理损伤显著减轻,ALT、AST水平、IL-6、TNF-α、IL-1β含量以及mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),肝组织细胞自噬率、Beclin1蛋白表达水平及AMPK蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结论 槲皮素预处理可能通过激活肝缺血再灌注损伤大鼠肝组织中AMPK/mTOR信号通路介导的自噬,从而减少炎症反应,缓解肝损伤。

摘要： 目的探索骨髓间充质干细胞来源的外泌体(MSCs-exo)在肝缺血再灌注损伤(HIRI)模型中生物学功能。方法从原代培养的人骨髓间充质干细胞中提取外泌体;构建小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型;在体内(invivo)水平,小鼠随机分为对照组、模型组、MSCs-exo组以及MSCs-exo+LY29400两组。通过HE染色、血清AST及ALT水平检测肝脏损伤程度、Tunel及Westernblot检测各组小鼠肝脏组织细胞凋亡水平,以及p-PI3K/PI3K以及p-Akt/Akt蛋白表达水平。在体外(invitro)水平,Tunel以及Westernblot方法检测MSCs-exo的对细胞凋亡的影响及MSCs-exo对PI3K/Akt信号通路的影响。应用LY294002以及MSCs-exo联合处理QSG-7701细胞,检测其对缺氧复氧模型诱导的细胞凋亡的影响。结果Invivo水平,HE染色以及生化检测实验结果指出:MSCs-exo起到保护肝脏组织的效果,这种保护效果是通过抑制缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡实现的,而应用PI3K/Akt抑制剂LY294002能够抑制这种保护效应。Westernblot结果显示在invitro以及invivo水平MSCs-exo能够显著激活PI3K/Akt信号通路;应用PI3K/Akt抑制剂LY294002能够抑制MSCs-exo的保护效应。结论MSCs-exo可通过激活PI3K/Akt信号通路抑制肝脏缺血再灌注损伤,此项研究结果可为临床缓解肝脏缺血再灌注损伤提供新的治疗方向。

摘要： p21活化激酶4(PAK4)是一种致癌蛋白,已成为抗癌药物开发的一个有前景的靶点。PAK4在氧化应激条件下的作用,目前还不清楚。来自韩国全北国立大学医学院生物化学和分子生物学系的Mao等研究了PAK4信号通路在肝缺血再灌注损伤(I/R损伤)中的作用。肝细胞和髓系特异性Pak4敲除小鼠及其同窝对照小鼠受到部分肝I/R损伤。通过基因工程(基因敲除、野生型显性负激酶过表达)或药物抑制剂操纵PAK4的催化活性,并通过核事实红系2相关因子2(Nrf2)活性检测PAK4在肝I/R损伤中的潜在功能。

摘要： 肝缺血再灌注损伤(HIRI)包括缺血损伤和循环恢复后的再灌注损伤两个过程,是肝切除、肝移植等术后发生肝功能障碍甚至肝衰竭的重要原因。血红素加氧酶1(HO-1)是一种重要的内源性细胞保护基因,其能作用于肝脏的实质细胞和非实质细胞(库普弗细胞、肝窦内皮细胞等),并通过复杂的分子信号通路相互交联发挥保护作用。目前针对HIRI治疗的效果尚不理想,随着精准医疗的快速发展,了解HO-1在HIRI中的细胞保护机制对未来的肝细胞靶向治疗极为重要。

摘要： 我刊2022年第62卷第20期刊载的《肝缺血再灌注损伤发生机制及抗缺血再灌注损伤麻醉药物应用进展》一文,第一作者肖梦柔,单位为湖南师范大学附属第一医院(湖南省人民医院)麻醉科。

摘要： 肝缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏手术中常见的肝损伤,可能导致术后肝功能不全、肝衰竭等并发症,严重影响患者预后。HIRI机制复杂,与炎症反应、能量代谢异常、细胞凋亡与自噬、血液循环障碍、细菌移位等有关。越来越多的研究表明,术中使用的部分麻醉药物具有抗炎、抗氧化等效果,可有效减轻HIRI,从而达到肝保护作用。围术期使用的抗HIRI麻醉药物主要有右美托咪定、丙泊酚、瑞芬太尼、吗啡、氟比洛芬酯、七氟烷等。了解各麻醉药物防治HIRI的机制,预防性使用以干预HIRI的发生,有助于提高患者手术疗效和满意度。

摘要： 目的:探索灯盏细辛治疗肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia-reperfusion injury,HIRI)的潜在分子机制。方法:采用中药系统药理数据库与分析平台、Uniprot数据库、GeneCards数据库、Venny在线工具预测灯盏细辛治疗HIRI的潜在活性成分和作用靶点。采用STRING数据库和Cytoscape软件将交集靶点进行相关排序,筛选出最有可能的靶点蛋白。采用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析。将筛选出来的小分子配体与疾病靶点蛋白受体导入AutoDock软件进行分子对接,采用PyMOL软件对对接结果进行验证。结果:共发现槲皮素、山柰酚、木犀草素等9个药物活性成分和111个潜在作用靶点。富集分析提示交集靶点与基因表达的正调控、凋亡过程、炎症反应、线粒体、内质网等生物学过程或分子功能有关,主要调控PI3K-Akt信号通路、AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路等。灯盏细辛中的多个小分子配体均能与HIRI相关蛋白受体结合,其中槲皮素、山柰酚、木犀草素的结合活性更好。结论:灯盏细辛对HIRI的保护作用可能涉及多靶点、多通路,为进一步的机制研究及临床应用提供了方向。

摘要： 目的 探讨Maresin 1(MaR1)对肝缺血再灌注损伤的影响及机制。方法 将24只Wistar大鼠采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)、肝缺血再灌注损伤组(I/R组)、MaR1治疗组(I/R+MaR1组)、抗磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂LY294002组(I/R+MaR1+LY294002组),每组6只。I/R组、I/R+MaR1组及I/R+MaR1+LY294002组大鼠通过阻断肝左叶及中叶血流60 min,再灌注6 h建立肝缺血再灌注损伤模型。Sham组仅开腹和关腹,不阻断血流,I/R+MaR1组在肝缺血再灌注前1 h腹腔注射4 mg/kg MaR1,I/R+MaR1+LY294002组在肝缺血再灌注前30 min腹腔注射LY294002 0.5 mg/kg,其余处理同I/R+MAR1组。检测各组小鼠肝组织病理学改变,血肝功能、炎性反应和氧化应激反应的指标。Western blot法检测肝组织磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达。结果 与Sham组比较,I/R组肝损伤明显,而I/R+MaR1组肝损伤明显减轻。与Sham组比较,I/R组血清中ALT、AST、乳酸脱氢酶(LDH)、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平均升高,肝组织中丙二醛(MDA)水平升高,而超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)水平均降低(均P<0.05)。与I/R组比较,I/R+MaR1组血清中ALT、AST、LDH、TNF-α、IL-1β、IL-6水平均降低(均P<0.05),肝组织MDA水平均降低,而IL-10、SOD、CAT、GSH水平升高(均P<0.05)。与Sham组比较,I/R组p-PI3K、p-Akt、Nrf2、HO-1蛋白表达均升高(均P<0.05),而I/R+MaR1组p-PI3K、p-Akt、Nrf2、HO-1蛋白表达进一步增加(均P<0.05)。然而,上述MaR1的治疗作用被PI3K抑制剂LY294002逆转。结论 MaR1通过上调PI3K/Akt/Nrf2/HO-1通路抑制炎性反应及氧化应激反应,进而减轻肝缺血再灌注损伤。

摘要： 目的探索植物提取物熊果酸(ursolic acid,UA)减轻肝缺血/再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的作用及初步作用机制。方法C57雄性小鼠分为假手术组、假手术组+UA组、HIRI组、HIRI低剂量组和HIRI高剂量组。通过动物实验、网络药理学和分子生物学等方法进行分析验证。结果动物实验显示UA显著降低HIRI小鼠血清中AST、ALT的活性。利用TCMSP、Pharm Mapper、Swiss Target Prediction、GeneCards等数据库获取熊果酸与HIRI对应的靶基因,再利用DAVID、STRING以及Cytoscape得到初步关键靶基因,它们是PPARG(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG)、MAPK3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)及PTGS2(prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2)。最后,根据分子对接得分、受体与配体结合的氢键数目,确定PTGS2为本研究的hub靶基因。后经免疫组化实验验证,与假手术组比较,PTGS2在HIRI组中高表达(P<0.01);与HIRI组比较,PTGS2在HIRI低剂量组及HIRI高剂量组的表达明显降低(P<0.01)。结论熊果酸通过调控PTGS2对小鼠肝缺血/再灌注损伤的保护作用,该研究为临床研制干预HIRI的新药提供了参考。

摘要： 肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injure,HIRI)是在肝移植、肝切除等外科手术中的常见并发症,是引起肝损伤的一个重要原因,可能会导致肝功能衰竭等。目前HIRI相关信号通路与防治措施的实验性研究虽然较多,但临床疗效仍存在争议,因此HIRI的防治依然是巨大挑战。HIRI的相关信号通路作用机制不完全明确,且不断有新的信号通路被发现。笔者从损伤性作用、保护性作用、双向调节、相互串扰四个方面对将HIRI中的信号通路进行归纳阐述,为今后的临床治疗提供新思路。

摘要： 研究肝癌手术过程中肝门阻断缺血再灌注损伤对肝癌患者复发转移的影响.研究表明，PEBP1作为肿瘤转移抑制因子，在肝缺血再灌注损伤中表达降低，有可能因此增加术后患者复发转移的风险。

摘要： 肝缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)在肝脏手术中是一个复杂的过程,常导致术后多种并发症,严重者甚至导致死亡.肝IRI主因是阻断肝的血流,导致氧气和养分供应后续不足.此外,在一些情况下肝缺血的时间可以特别长,例如切除大的肝肿瘤过程、对不同起源的肝创伤的处理、血管重建及供肝的获取等.肝脏IRI中涉及氧自由基的生成和随后激活的各种细胞和级联分子，包括TLR4系统、血红素加氧酶系统和一氧化氮损伤相关分子和初始产生的抗炎和促炎、氧化和抗氧化作用以及细胞凋亡和抗凋亡之间的失衡。药物治疗途径包括抗氧化剂、炎症调节剂和保肝分子在肝IRI的病理生理过程中将成为重要靶向分子并尽量减少其不利影响。

摘要： 肝脏缺血再灌注损伤是一个复杂的、多因素的过程。它包括来两个不同的阶段：早期阶段主要由增多的氧自由基产物所介导;晚期主要由炎症反应所致，并导致肝脏的进一步损害。本综述了最近几年高渗盐对肝缺血再灌注损伤的保护作用，分别从微循环水平、氧化应激、炎症及凋亡方面阐述其机制。

摘要： 本文观察葛根素对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨它的保护机制以及药物剂量与保护效应之间的关系.方法:健康雄性SD大鼠49只随机分成4组:A组(缺血再灌注组),B1组(低剂量组20mg/Kg),B2组(中剂量组40mg/Kg),B3组(高剂量组80mg/Kg).通过建立大鼠全肝缺血再灌注模型,分别比较再灌注结束后各组①血ET-1、NO和ALT水平,②肝组织中MDA、细胞总钙含量和SOD活性,③、肝组织光镜下的形态学改变.结果:①B组血NO含量、肝组织SOD活性明显高于A组(P＜0.01);而血ET-1、ALT含量及肝组织MDA、细胞总钙含量明显低于A组(P＜0.01).②B组的肝组织形态损伤明显减轻.③B3组保护效应好于B2组,B2组好于B1组,各项指标变化均与剂量大小明显相关.结论:1、葛根素对肝缺血再灌注损伤有显著的药物预适应作用.2、葛根素药物预适应的主要药理机制是清除氧自由基、减轻细胞内Ca++超载以及改善微循环.3、葛根素的预适应作用与用药剂量成正相关.

摘要： 通过SD大鼠60只,随机分为4组：假手术组(S组,n=6)、缺血再灌注组(I/R组,缺血各时间段各6只)、异丙酚预处理组(P组,缺血各时间段各6只),TDZD-8预处理组(T组,缺血各时间段各6只).探讨异丙酚预处理对大鼠肝缺血再灌注后氧化应激的影响及GSK-32通路的作用机制.发现异丙酚预处理能清除氧自由基，增强抗氧化能力，抑制脂质过氧化反应而对肝脏缺血再灌注损伤起保护作用。异丙酚的这种保护作用是通过抑制GSK-32活化，增强GSK-32 Ser9磷酸化而实现的。

摘要： @@通过研究缺血后处理(IPO)对大鼠肝缺血再灌注损伤后再灌注挽救激酶途径的影响，探讨肝脏IPO的细胞内信号转导机制。

摘要： 目的:探讨重组人Elafin在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用.rn 方法:建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型,给予不同浓度的重组人Elafin对其进行治疗,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)含量,测定肝组织中髓过氧化物酶(MPO)和一氧化氮(NO)含量.并对肝脏病理组织学改变进行观察.rn 结果:缺血再灌注后大鼠肝组织损害较重,血清ALT、AST及LDH水平明显升高(P<0.001),若手术前给予大鼠一定浓度的重组人Elafin可对肝脏缺血再灌注损伤起到一定的保护作用.rn 结论:重组人Elafin对肝脏缺血再灌注损伤有一定的保护作用.

摘要： 本发明公开了一种全肝缺血诱发缺血再灌注损伤的动物模型的构建方法。本发明所述动物模型设计合理、操作简单、重复性好，符合大鼠原味肝移植无肝期血流改变，术后存活率高。同时在结束后经病理分析，可导致肝外多器官(心脏、胰腺、结肠、小肠、肾脏)损伤。能有效解决现有研究目标必须完整复制肝移植过程，时间久、死亡率高、人员技术要求高等问题。同时可延伸到其他需阻断肝脏血流造成肝外器官缺血再灌注损伤的基础研究。

摘要： 本发明公开了一种全肝缺血诱发缺血再灌注损伤的动物模型的构建方法。本发明所述动物模型设计合理、操作简单、重复性好，符合大鼠原味肝移植无肝期血流改变，术后存活率高。同时在术后经病理分析，可导致肝外多器官(心脏、胰腺、结肠、小肠、肾脏)损伤。能有效解决现有研究目标必须完整复制肝移植过程，时间久、死亡率高、人员技术要求高等问题。同时可延伸到其他需阻断肝脏血流造成肝外器官缺血再灌注损伤的基础研究。

摘要： 公开了一种治疗受试者中肝缺血再灌注(I/R)损伤的方法。在一些方面，该方法包括提供患有肝I/R损伤或有患肝I/R损伤风险的受试者；和向受试者给予一种或多种硫酸乙酰肝素(HS)化合物。在一些方面，一种或多种HS化合物包含约5至约18个糖单元，可选地约12至约18个糖单元。在一些方面，一种或多种HS化合物包含约12个糖单元。

摘要： 本发明涉及生物医药领域，具体涉及NSC 23766在制备防治缺血再灌注损伤药物中的用途。本发明的有益效果在于首次发现并证实了NSC 23766具有防护缺血再灌注损伤的新用途，能够显著减轻缺血再灌注小鼠术后肝损伤，且在防治缺血再灌注导致的肝损伤方面具有突出的效果。

摘要： 本发明公开了一种胱天蛋白酶募集域蛋白6（Card6）在肝缺血再灌注损伤中的应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以肝细胞特异性Card6基因敲除小鼠和Card6转基因小鼠为实验对象，通过肝缺血再灌注损伤模型研究Card6基因的功能，发现Card6具有改善肝缺血再灌注损伤的作用，因此，Card6具有如下应用：Card6作为药物靶标在筛选预防、缓解和/或治疗肝缺血再灌注损伤的药物中的应用，筛选预防、缓解和/或治疗肝缺血再灌注损伤的药物是指筛选够促进Card6表达的药物；Card6在制备预防、缓解和/或治疗肝缺血再灌注损伤的药物中的应用。

摘要： 本发明公开了一种单核细胞趋化蛋白‑1诱导蛋白1（Mcpip1）在肝缺血再灌注损伤中的应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以肝细胞特异性Mcpip1基因敲除小鼠和Mcpip1转基因小鼠为实验对象，通过肝缺血再灌注损伤模型研究Mcpip1基因的功能，发现Mcpip1具有抑制肝缺血再灌注损伤的作用，因此，Mcpip1具有如下应用：Mcpip1作为药物靶标在筛选预防、缓解和/或治疗肝缺血再灌注损伤的药物中的应用，筛选预防、缓解和/或治疗肝缺血再灌注损伤的药物是指筛选够促进Mcpip1表达的药物；Mcpip1在制备预防、缓解和/或治疗肝缺血再灌注损伤的药物中的应用。

摘要： 本发明涉及曲札茋苷用于治疗缺血再灌注引起的肝细胞水肿变性、肝组织内炎性细胞浸润中的应用。实验结果显示，曲札茋苷能显著降低缺血再灌注后血清内谷丙转氨酶（Alanine aminotransferase，ALT）和谷草转氨酶（Aspartate aminotransferase，AST）活性，减少肝窦内淤血扩张，减轻肝组织病理损伤。本发明所述曲札茋苷能有效地治疗肝缺血再灌注损伤，为曲札茋苷在治疗肝缺血再灌注相关疾病中的应用提供依据。

摘要： 本发明提供了熊果酸在制备防治肝缺血再灌注损伤产品中的应用，属于医药技术领域。本发明首次提出熊果酸对肝缺血再灌注损伤有保护作用，能显著降低肝缺血再灌注损伤者血清中AST和ALT的表达。本发明首次运用生物信息网络药理学进一步研究了熊果酸减轻肝缺血再灌注损伤发生的潜在机制，经免疫组化实验验证，表明熊果酸通过降低PTGS2的表达对肝缺血再灌注损伤具有保护作用，为临床研制干预肝缺血再灌注损伤的新药提供了参考。

摘要： 本发明公开了一种miR‑27b‑3p在诊断肝缺血再灌注损伤中的应用。通过实时定量PCR(qRT‑PCR)检测到miR‑27b‑3p在HIRI肝脏中显著上调。生物信息学分析表明SMAD4是miR‑27b‑3p的一个靶基因。qRT‑PCR实验表明miR‑27b‑3p能激活SMAD4的表达。miR‑27b‑3p模拟物转入HIRI小鼠后肝损伤加重，SMAD4表达量上升，Wnt/β‑catenin通路被抑制，细胞凋亡增多，同时细胞增殖升高，加剧缺血再灌注对肝组织的损伤。miR‑27b‑3p模拟物转入缺氧/复氧AML12肝细胞后的结果与体内实验有相同的趋势。因此，本发明阐明了miR‑27b‑3p在HIRI中的作用及机制，为HIRI的预防和治疗提供新靶标、新思路。

摘要： 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种中药提取物及其制备方法和在防治肝缺血再灌注损伤中的应用。药效实验表明，本发明的中药提取物即熟地黄水提物具有明显的可抗炎、抗氧化损伤及抗肝细胞群凋亡，降低血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平及肝组织丙二醛、乳酸脱氢酶和一氧化氮水平，升高超氧化物歧化酶活性，改善肝血窦微环境病理状态从而缓解肝缺血再灌注损伤的作用。可以用于制备防治肝缺血再灌注损伤的药物，较于目前临床上常用的HIRI预处理手段或实验阳性药N‑乙酰半胱氨酸，熟地黄水提物来源广泛、价格低廉、疗效显著，为肝缺血再灌注损伤的防治提供了新方法，具有极大的临床意义。