肝脏缺血再灌注损伤

摘要： 目的:研究右美托咪定对肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠的干预效果及对PI3K/AKT/CREB信号通路的影响。方法:80只SPF级SD大鼠夹闭肝脏左侧和中侧门脉三合体夹闭肝脏左侧和中侧门脉三合体30min制备肝脏缺血再灌注损伤模型,后随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、右美托咪定低剂量组(Dex-L)、右美托咪定高剂量组(Dex-H);每组再灌注6h和12h分别各处死10只。假手术组仅麻醉后开腹不阻断肝脏血流。Dex-H组腹腔注射100μg/kg右美托咪定,Dex-L组腹腔注射50μg/kg右美托咪定,假手术组和模型组仅注射溶剂。全自动血液生化分析仪检测大鼠血清谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)水平;HE染色观察肝脏病理变化;生化试剂盒检测血清中谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)的含量或活性;Western Blot法检测PI3K,pAKT,AKT,CREB蛋白的表达水平;PCR检测BAX和Bcl2基因表达水平。结果:与Sham组相比,Model组大鼠血清ALT和AST水平在不同时间点均显著增高(P<0.05),与模型组相比,不同剂量的右美托咪定干预后ALT和AST水平均显著降低(P<0.05)。Model组的肝脏细胞出现明显肿胀变性,肝小叶结构紊乱;不同剂量的右美托咪定干预6和12h后,肝脏病理均有不同程度的改善,且肝脏MDA水平较Model组显著下降,SOD和GSH水平显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,与模型组相比,不同剂量的右美托咪定干预6和12h后,模型组PI3K、AKT的蛋白磷酸化、CREB水平显著增高(P<0.05),PCR结果显示与模型组相比不同剂量的右美托咪定干预6和12h后,BAX表达量显著下降(P<0.05),Bcl2表达量显著升高(P<0.05)。结论:右美托咪定可显著改善肝脏缺血再灌注损伤模型大鼠的肝脏病理学和血清学指标,抑制氧化应激反应和凋亡标记物,其作用机制可能与激活PI3K/AKT/CREB信号通路有关。

摘要： 原位肝移植(OLT)、手术、急性缺血性创伤、休克、药物性肝损伤以及血管栓塞等多种疾病均可造成肝脏缺血再灌注损伤。尤其是原位肝移植,目前被认为是终末期肝病的标准治疗方法,但在移植过程中的冷藏和热缺血再灌注损伤易造成原发性移植肝无功能,导致手术失败[1]。肝缺血再灌注损伤(IRI)介导的损伤机制多样且复杂,涉及肝细胞,肝窦内皮细胞,枯否氏细胞,肝星状细胞(HSC)以及浸润的嗜中性粒细胞,巨噬细胞和血小板,进一步引起肝损伤及肝纤维化的发生[2]。

摘要： 目的:探究橄榄苦苷对肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的保护作用。方法:采用肝蒂夹紧60min再灌注90min的方式制作大鼠HIRI模型,随机分成假手术组(A组)、对照组(B组)、围术期橄榄苦苷治疗组(C组)、术前橄榄苦苷治疗组(D组),C组和D组分别在术前2h和术前10d予橄榄苦苷40mg·kg-1·d-1。收集各组大鼠血液和肝组织样本,进行肝功能指标、氧化应激水平、炎症因子和免疫指标比较以及组织病理学的评估。结果:C组和D组的肝功能、组织氧化应激参数、炎症因子和免疫指标均显著低于B组(P<0.05);此外,C组和D组中组织病理学损伤显著降低。结论:橄榄苦苷能够减轻HIRI的氧化应激和炎症反应,提高免疫功能,具有明显的肝脏保护作用。

摘要： 本刊2022年第4期398~400页发表了上海交通大学附属第一人民医院肝胆外科宋方彬、曹婉悦、徐军明撰写的论文《嗜酸性粒细胞在肝脏缺血再灌注损伤中的作用》。经核实,该文已在本刊2022年第1期17~19页发表。现第4期重复发表,故予以撤稿,并向作者和读者致歉。

摘要： 肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝切除术、肝移植等术后不可避免的病理现象,是制约患者医治效果的重要因素。大量研究表明,影响HIRI的因素非常多且复杂,主要包括氧化应激、线粒体功能障碍、炎症反应、细胞凋亡等方面,但是尚未找到具体的分子机制。因此,HIRI仍是目前医学研究的热点和难点。研究发现5-羟色胺(5-HT)可通过调控细胞周期、细胞凋亡等通路影响细胞的损伤与修复,本文就HIRI及其机制、5-HT的生物学特性以及5-HT在HIRI中的作用及调控机制进行综述,以期为开发新的药物来预防和治疗HIRI提供思路。

摘要： 肝脏手术后发生肝脏衰竭的最主要原因是发生了缺血再灌注损伤。丙泊酚是目前最为常用的静脉麻醉药,其具有苏醒快,发挥作用快,作用时间短等优点。大多数的研究显示,丙泊酚对缺血再灌注引起的多脏器功能损伤有保护作用。随着国外和国内对此研究不断地深入和完善,丙泊酚对于心脏、肝脏、肾脏、肺脏等器官的损伤保护作用和机制不断被展现出来。基于此,下文就肝脏缺血再灌注损伤引起的的病理生理变化的一些相关机制及丙泊酚对其起到保护作用的相关机制进行了概述。

摘要： 目的探讨右美托咪定(Dex)对原位肝移植(SOLT)大鼠血管内皮生长因子受体(VEGFR)-3/血管内皮生长因子(VEGF)-C通路及肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法取SD大鼠50只,用随机数字表法分为假手术(Sham)组、自体原位肝移植模型(SOLT)组、Dex低(25μg/kg)、中(50μg/kg)、高(100μg/kg)剂量组,每组10只;除Sham组只暴露肝脏不做任何处理外,其余各组均采用自体肝脏原位移植法建立大鼠SOLT模型。Sham组和SOLT组于术前24 h和术前1 h经尾静脉注射给予等量生理盐水,Dex低、中、高剂量组于术前24 h和术前1 h经尾静脉注射给予相应剂量Dex。各组大鼠均于术后24 h处死,取下腔静脉血和肝组织标本,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)及肝组织炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肝组织VEGFR-3 mRNA、VEGF-C mRNA相对水平;Western印迹检测肝组织VEGFR-3、VEGF-C蛋白及促细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)1和磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK)3β、Toll样受体(TLR)4相对表达水平。结果与Sham组相比,SOLT组肝组织出现空泡样变性及炎性损伤,血清ALT及TBIL含量、肝组织TNF-α及IL-6含量、VEGFR-3 mRNA及蛋白、VEGF-C mRNA及蛋白、SOCS1、p-GSK3β、TLR4蛋白水平均显著增高(P<0.05);Dex低、中、高剂量组与SOLT组相比,肝组织损伤显著减轻,肝脏组织VEGFR-3 mRNA及蛋白、VEGF-C mRNA及蛋白、SOCS1、p-GSK3β蛋白表达均显著升高(P<0.05),血清ALT及TBIL含量、肝组织TNF-α及IL-6含量、TLR4表达均显著下降(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论Dex可激活SOLT大鼠肝组织VEGF-C/VEGFR-3通路蛋白表达,减轻肝组织炎症,改善肝移植IRI。

摘要： 目的:通过研究异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤小鼠肝脏中caspase-1/caspase-11表达的影响,探究异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤保护作用的机制.方法:建立肝脏缺血再灌注损伤模型.将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组、异氟醚预处理组和手术组.异氟醚预处理组小鼠吸入1.4％异氟醚30min后,间隔30min进行手术.对组织HE染色切片进行观察及病理评分,检测小鼠血清中ALT/AST水平用以评估异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.用Western Blot检测肝脏组织中caspase-1/caspase-11的表达.结果:(1)肝脏组织切片HE染色:对3组小鼠肝脏HE染色切片进行Suzuki's病理评分,得出手术组评分较对照组明显增高(P<0.05),异氟醚预处理组较手术组明显降低(P<0.05);(2)血清ALT/AST:手术组血清中ALT/AST均较对照组明显增高(P<0.05),异氟醚预处理组较手术组明显降低(P<0.05);(3)Western Blot:手术组小鼠肝脏中caspase-1/caspase-11的表达均显著高于对照组,而异氟醚预处理后caspase-1/caspase-11的表达均较手术组显著降低.结论:异氟醚预处理对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制肝脏caspase-1/caspase-11的表达,从而抑制肝脏与细胞焦亡相关的炎症反应有关.

摘要： 目的 探讨3,3′4′7-四羟基黄酮(Fisetin)减轻缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)肝脏氧化应激性损伤的作用及可能机制.方法 18只C57BL/6雄性小鼠随机分为Sham组、I/R组和I/R+Fisetin组,各6只.I/R组和I/R+Fisetin组小鼠建立肝脏I/R模型,Sham组仅进行开关腹手术.I/R+Fisetin组小鼠经腹腔注射Fisetin 50 mg·kg-1提前1 h预处理;Sham组和I/R组小鼠术前不进行药物干预.检测3组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察3组小鼠肝脏组织病理学变化;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(2,7-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针法检测3组小鼠肝脏细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平;试剂盒检测3组小鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 小鼠肝脏再灌注6 h后,I/R+Fisetin组小鼠ALT、AST水平较I/R组下降[(108.85±25.73)IU·L-1 vs(213.45±49.51)IU·L-1;(194.72±45.32)IU·L-1 vs(422.55±99.30)IU·L-1],差异有统计学意义(P<0.05).I/R+Fisetin组小鼠肝脏组织内中性粒细胞浸润和肝脏坏死面积明显减少.I/R+Fisetin组肝脏组织细胞ROS水平(74158±17035)RFU·mgprot-1,低于I/R组(153096±35287)RFU·mgprot-1,差异有统计学意义(P<0.05).I/R+Fisetin组小鼠肝脏组织MDA含量(6.287±1.444)nmol·mgprot-1,低于I/R组(12.781±3.086)nmol·mgprot-1,差异有统计学意义(P<0.05).I/R+Fisetin组小鼠肝脏组织SOD和GSH-Px活性均较I/R组增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Fisetin对I/R肝脏氧化应激性损伤的保护作用可能是通过诱导SOD、GSH-Px活性增加,降低ROS水平和MDA含量实现的.

摘要： 目的探讨3,3′4′7-四羟基黄酮(Fisetin)减轻缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)肝脏氧化应激性损伤的作用及可能机制。方法18只C57BL/6雄性小鼠随机分为Sham组、I/R组和I/R+Fisetin组,各6只。I/R组和I/R+Fisetin组小鼠建立肝脏I/R模型,Sham组仅进行开关腹手术。I/R+Fisetin组小鼠经腹腔注射Fisetin 50 mg·kg-1提前1 h预处理;Sham组和I/R组小鼠术前不进行药物干预。检测3组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察3组小鼠肝脏组织病理学变化;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(2,7-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针法检测3组小鼠肝脏细胞活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平;试剂盒检测3组小鼠肝脏组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果小鼠肝脏再灌注6 h后,I/R+Fisetin组小鼠ALT、AST水平较I/R组下降[(108.85±25.73)IU·L^(-1) vs(213.45±49.51)IU·L^(-1);(194.72±45.32)IU·L^(-1) vs(422.55±99.30)IU·L^(-1)],差异有统计学意义(P<0.05)。I/R+Fisetin组小鼠肝脏组织内中性粒细胞浸润和肝脏坏死面积明显减少。I/R+Fisetin组肝脏组织细胞ROS水平(74158±17035)RFU·mgprot^(-1),低于I/R组(153096±35287)RFU·mgprot^(-1),差异有统计学意义(P<0.05)。I/R+Fisetin组小鼠肝脏组织MDA含量(6.287±1.444)nmol·mgprot^(-1),低于I/R组(12.781±3.086)nmol·mgprot^(-1),差异有统计学意义(P<0.05)。I/R+Fisetin组小鼠肝脏组织SOD和GSH-Px活性均较I/R组增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Fisetin对I/R肝脏氧化应激性损伤的保护作用可能是通过诱导SOD、GSH-Px活性增加,降低ROS水平和MDA含量实现的。

摘要： 目的：观察黄芩甙对肝脏缺血再灌注损伤大鼠受损肝组织形态学改变、肝细胞凋亡情况、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)及核转录因子(NF-κB)mRNA表达水平的变化、半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平的影响.rn 方法：清洁级SD大鼠60只,随机分为3组：假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、黄芩甙处理组(B组：黄芩甙200mg/kg处理),采用Pringle’s法复制肝脏缺血再灌注模型,术前半小时经大鼠尾静脉注射黄芩甙注射液,于缺血再灌注6小时后取材.常规病理观察大鼠受损肝脏组织形态学变化,末端标记法(TUNEL法)检测肝细胞凋亡指数(AI),RT-PCR法检测组织中iNOS与NF-κB mRNA水平表达情况的变化,Western-Blot法检测Caspase-3蛋白水平表达情况的变化.rn 结果：大鼠肝脏缺血再灌注6小时后,黄芩甙处理组(B组)及IR组iNOS、NF-κB mRNA水平及Caspase-3蛋白水平均较S组高,IR组最高,差异均有统计学意义(P＜0.05),B组与IR组比较差异有统计学意义(P＜0.05);黄芩甙处理组及IR组肝细胞凋亡指数均较S组高,IR组最高,差异均有统计学意义(P＜0.01),B组与IR组比较差异有统计学意义(P＜0.05);黄芩甙处理组及IR组肝组织病理学损害均重于S组,IR组肝细胞损害最重,B组肝细胞损害明显改善.rn 结论：黄芩甙可下调受损肝组织中iNOS与NF-κB的表达,抑制Caspase-3介导的细胞凋亡过程,通过抗炎和抗凋亡作用,发挥对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.

摘要： 目的:探讨参附注射液预处理联合控制性低中心静脉压用于肝脏部分切除术中对肝脏缺血再灌注损伤的影响及可能的作用机制.方法:择期行肝脏部分切除的肝胆管结石或原发性肝癌患者60例,ASAⅠ～Ⅱ级肝胆管结石或原发性肝癌患者,随机分为两组:参附注射液预处理联合控制性低中心静脉压组(SL组)和对照组(C组),每组30例.C组则仅维持中心静脉压在6～12cmH2O之间,SL组控制中心静脉压于1～5cmH2O,并于麻醉诱导后肝血管阻断前静滴参附注射液100ml,静滴时间30分钟.分别于肝门阻断10min(T1),肝门开放后5min(T2)、6h(T3)、24h(T4)时点经颈内静脉抽血检测患者血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)浓度水平.结果:两组的SOD在肝门阻断前保持最高水平,从T2开始下降直到T4,两组的自T2至T4时点SOD浓度水平与T1相比具有显著差异性,而SL组自T2时点至T4时点SOD浓度水平显著高于C组(P＜0.05).两组血清ALT、AST、MDA水平在肝门阻断前最低,T2开始升高至T4,两组自T2到T4时点ALT、AST、MDA浓度水平与T1相比具有显著差异(P＜0.01).且SL组的ALT、AST、MDA平均水平自T2到T4各时点均显著低于C组(P＜0.05).结论:参附注射液预处理联合控制性低中心静脉压技术用于肝脏部分切除术中,可以触发机体组织产生内源性抗损伤机制阻断导致缺血再灌注损伤的多重因素从而达到肝脏保护作用.

摘要： 目的: 研究丙泊酚对肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠胰岛素受体及其底物表达和磷酸化的影响。rn 方法: 选用健康Wistar大鼠60只，随机分为丙泊酚组(P组)和缺血再灌注组(I/R组)，每组30只。建立HIRI大鼠模型(肝门阻断30min后再灌注2h),P组从肝门阻断前20min以10mg.kg-1·h-1注入丙泊酚直到再灌注2h结束,I/R组以等量速度注入等量生理盐水。分别测定肝门阻断前(T1)及肝门阻断30min后冉灌注2h后(T2)血糖值。检测两组大鼠肝组织胰岛素受体β亚单位(Irβ)、胰岛素受体底物2(IRS-2)蛋白及其酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平。rn 结果: 与T1比较,两组大鼠T2点血糖均明显升高,但I/R组更为明显。与P组比较,I/R组大鼠肝组织Irβ、IRS-2蛋白表达无明显差异(P>0.05)：但其酪氨酸磷酸化蛋白表达水平分别减少了22.8％(P<0.01)和24.1％(P<0.01)。rn 结论: 与I/R组比较,丙泊酚改善了Irβ、IRS-2蛋白的酪氨酸磷酸化表达水平,从而减轻了HIRI导致的血糖升高。

摘要： 缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤是指缺血后的再灌注不仅不能使组织器官功能恢复,反而加重组织器官的功能障碍和结构损伤.其中肝脏缺血再灌注损伤即是一种常见的临床病理生理过程,休克、感染、肝脏外伤、肝叶切除及肝移植所致的肝脏功能损害、衰竭都与之有关.总之，阿片类镇痛药和麻醉药已广泛应用于临床多年，其参与脏器保护现象是近些年的新发现。作为一种内源性脏器防御作用，该效应越来越受到临床医生的关注。大量的动物实验结果表明，阿片受体激动剂和吸入麻醉药能模拟IPC的效应，通过预处理的作用机制发挥脏器保护作用，使脏器对随后的长时间缺血和缺血再灌注损伤产生一定的耐受性。

摘要： 目的：探讨甲状腺素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤后HSP70表达的影响及其对肝脏的保护作用机制.rn 方法：建立大鼠肝脏缺血再灌注模型(缺血30min,再灌注48h),将雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、对照组、处理组3组,处理方法为缺血前48小时于腹腔注射0.1mg/Kg的T3.再灌注后检测肝组织丙二醛(MDA)含量,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)浓度,Western Blotting技术检测肝组织热休克蛋白70 (HSP70)表达情况.rn 结果：与假手术组比较,对照组血中ALT、AST、TNF-α和MDA水平均显著升高(P＜0.05).与对照组比较,处理组各指标水平均显著降低,但较假手术组较高(P＜0.05).假手术组有少量HSP70表达,处理组HSP70表达高于对照组.rn 结论：甲状腺素可能通过诱导多量HSP70表达在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中发挥细胞保护的作用.

摘要： 肝脏缺血再灌注损伤是肝脏外科疾病中常见的病理生理过程,地塞米松通过直接抑制中性粒细胞的氢过氧化物生成和中性粒细胞游出,阻止磷脂酶A2和花生四烯酸代谢,从而抑制中性粒细胞介导的缺血再灌注损伤。本实验探讨GILZ是否可通过促进腹腔巨噬细胞转变为M2型巨噬细胞来降低肝脏缺血再灌注损伤。

摘要： 缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury IRI)是指组织器官缺血后再灌注不仅不能改善组织器官功能恢复，反而加重组织器官的功能障碍和结构损伤。在心肌缺血、脑卒中、创伤等疾病病理过程中都可发生IRI。本文研究Notch信号通路在肝脏IRI中的作用，通过细胞生物学基础及分子机制，探索肝脏IRI新的分子调控机制，概述了相应的研究方法及结果，得到了Notch信号通路在肝脏IRI中发挥重要作用，Notch信号缺失会引起肝脏IRI加重等结论，为肝脏IRI的预防和治疗提供了新的理论依据。

摘要： 肝脏缺血再灌注(ischemia reperfusion，I/R)损伤是临床常见的问题，是肝脏手术患者术后恢复慢甚至手术失败的重要原因之一。近年来的一些研究发现，缺血预处理(ischemic preconditioning，IPC)可以减轻肝脏I/R 损伤；但是这些研究的实验动物、实验方法等存在差别，IPC的方案不尽相同。本文通过比较不同方案的IPC 对C57BL/6 小鼠肝脏I/R 损伤的影响，为寻找合理有效的IPC 方案提供依据。

摘要： 目的:观察异甘草酸镁(MgIG)对大鼠肝细胞模拟缺血再灌注损伤的细胞凋亡影响及其机制.rn 方法:分离、培养、鉴定大鼠肝细胞,将对数生长期肝细胞,随机分为模拟缺血再灌注损伤模型组和MgIG低浓度组(0.1mg/ml)、中浓度组(1mg/ml)、高浓度组(10mg/ml)预处理24h后,模拟缺氧6h、复氧4h,进行以下实验观察:①应用光镜观察细胞的形态改变;②应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MgIG对肝细胞活力的影响;③应用吖啶橙/嗅化乙啶(AO/EB)染色观察细胞的凋亡情况,计算细胞凋亡率;④应用RT-qPCR法检测各组各组bcl-2、Bax基因的表达量.对所得数据用SPSS17.0软件进分析,两样本均数比较采用t检验,多个样本的比较采用单因素方差分析.rn 结果:①MTT法结果表明,与模型组比较,一定浓度的MgIG(0.1、1、10 mg/ml)能提高缺氧-复氧损伤的肝细胞A值(0.285±0.017、0.320±0.008、0.341±0.019),差异有统计学意义(P＜0.01);②AO/EB染色结果显示,低、中、高浓度组细胞凋亡率(0.5763±0.0405、0.2866±0.0619、0.1261±0.0439)分别低于对照组(0.7124±0.0581),差异有统计学意义(P＜0.05);③RT-qPCR结果显示低、中、高浓度组bcl-2基因mRNA的表达量(3.350±0.151、9.279±0.350、15.290±0.756)分别高于对照组(0.928±0.068),差异有统计学意义(P＜0.01),低、中、高浓度组Bax mRNA的表达量(0.743±0.035、0.265±0.065、0.119±0.019)低于对照组(0.945±0.063)差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论:MgIG能提高缺血再灌注损伤的肝细胞活力和降低肝细胞凋亡,作用机制可能通过提高bcl-2的mRNA表达、降低bax mRNA的表达有关.

摘要： 目的:观察异甘草酸镁(MgIG)对大鼠肝细胞模拟缺血再灌注损伤的细胞凋亡影响及其机制.rn 方法:分离、培养、鉴定大鼠肝细胞,将对数生长期肝细胞,随机分为模拟缺血再灌注损伤模型组和MgIG低浓度组(0.1mg/ml)、中浓度组(1mg/ml)、高浓度组(10mg/ml)预处理24h后,模拟缺氧6h、复氧4h,进行以下实验观察:①应用光镜观察细胞的形态改变;②应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MgIG对肝细胞活力的影响;③应用吖啶橙/嗅化乙啶(AO/EB)染色观察细胞的凋亡情况,计算细胞凋亡率;④应用RT-qPCR法检测各组各组bcl-2、Bax基因的表达量.对所得数据用SPSS17.0软件进分析,两样本均数比较采用t检验,多个样本的比较采用单因素方差分析.rn 结果:①MTT法结果表明,与模型组比较,一定浓度的MgIG(0.1、1、10 mg/ml)能提高缺氧-复氧损伤的肝细胞A值(0.285±0.017、0.320±0.008、0.341±0.019),差异有统计学意义(P＜0.01);②AO/EB染色结果显示,低、中、高浓度组细胞凋亡率(0.5763±0.0405、0.2866±0.0619、0.1261±0.0439)分别低于对照组(0.7124±0.0581),差异有统计学意义(P＜0.05);③RT-qPCR结果显示低、中、高浓度组bcl-2基因mRNA的表达量(3.350±0.151、9.279±0.350、15.290±0.756)分别高于对照组(0.928±0.068),差异有统计学意义(P＜0.01),低、中、高浓度组Bax mRNA的表达量(0.743±0.035、0.265±0.065、0.119±0.019)低于对照组(0.945±0.063)差异有统计学意义(P＜0.01).rn 结论:MgIG能提高缺血再灌注损伤的肝细胞活力和降低肝细胞凋亡,作用机制可能通过提高bcl-2的mRNA表达、降低bax mRNA的表达有关.

摘要： 本发明公开热休克因子2结合蛋白(HSF2BP)在肝脏缺血再灌注损伤、药物性肝损伤中的应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以肝脏特异性HSF2BP基因过表达和敲除小鼠为实验对象，通过肝脏缺血再灌注损伤、药物性肝损伤模型，结果表明与野生型C57小鼠对比，HSF2BP基因过表达小鼠在两种模型中肝脏损伤明显被抑制，肝功能明显好转，而HSF2BP基因敲除小鼠在两种模型中肝脏损伤则明显增加，肝功能明显恶化。因此HSF2BP基因具有保护肝脏损伤的作用，特别具有保护缺血再灌注诱导的肝脏损伤、药物性诱导的肝损伤的作用。针对HSF2BP的上述功能，可通过其特异性激动剂促进HSF2BP基因表达来对肝脏缺血再灌注损伤、药物性肝损伤进行干预。

摘要： 本发明公开了一种肝移植术后肝脏缺血再灌注损伤预警检测试剂盒，包括线粒体DNA质粒标准品、小鼠线粒体扩增引物及探针、人线粒体扩增引物及探针；线粒体DNA质粒标准品为含有小鼠线粒体DNA片段Mouse‑MT的重组载体；小鼠线粒体扩增引物上游序列如SEQ ID No.1所示；下游序列如SEQ ID No.2所示；小鼠线粒体探针序列如SEQ ID No.3所示；人线粒体扩增引物上游序列如SEQ ID No.4所示；下游序列如SEQ ID No.5所示；人线粒体探针序列如SEQ ID No.6所示。本发明所提供的试剂盒检测肝移植术后缺血再灌注损伤灵敏度高，可以早期预警，检测窗口期较现有技术可提前2～4小时，为患者缺血再灌注损伤治疗争取了宝贵时间。

摘要： 本发明公开了一种ABIN3在制备预防、缓解和/或治疗肝脏缺血再灌注损伤药物中的应用。本发明以ABIN3肝脏特异性转基因小鼠及野生型小鼠为实验对象，构建肝脏缺血再灌注损伤模型，结果表明与野生型小鼠对比，肝脏特异性ABIN3转基因小鼠的肝脏坏死则明显被抑制。此外，本发明还构建了ABIN3过表达和敲低的原代肝细胞，建立缺氧复氧模型，结果表明与对照组病毒对比，ABIN3蛋白敲低可显著促进炎症因子及凋亡因子的表达，促进缺氧复氧导致的肝细胞损伤；而ABIN3蛋白过表达可显著抑制炎症因子及凋亡因子的表达，进而减轻肝细胞的损伤。本发明方案提供ABIN3作为药物靶标筛选治疗肝脏缺血再灌注损伤的药物，ABIN3及其激动剂可用于制备治疗肝脏缺血再灌注损伤的药物。

摘要： 本发明公开热休克因子2结合蛋白(HSF2BP)在肝脏缺血再灌注损伤、药物性肝损伤中的应用，属于基因的功能与应用领域。本发明以肝脏特异性HSF2BP基因过表达和敲除小鼠为实验对象，通过肝脏缺血再灌注损伤、药物性肝损伤模型，结果表明与野生型C57小鼠对比，HSF2BP基因过表达小鼠在两种模型中肝脏损伤明显被抑制，肝功能明显好转，而HSF2BP基因敲除小鼠在两种模型中肝脏损伤则明显增加，肝功能明显恶化。因此HSF2BP基因具有保护肝脏损伤的作用，特别具有保护缺血再灌注诱导的肝脏损伤、药物性诱导的肝损伤的作用。针对HSF2BP的上述功能，可通过其特异性激动剂促进HSF2BP基因表达来对肝脏缺血再灌注损伤、药物性肝损伤进行干预。

摘要： 本发明提供广谱抗生素在制备减轻肝脏缺血再灌注损伤药物中的应用，广谱抗生素通过激活肝脏FXR减轻肝脏IRI实现治疗。广谱抗生素能够重塑肠道菌群，并且作用于肝脏IRI病理过程，符合当今研制治疗肝脏IRI中药物的需求。广谱抗生素预处理能够减轻肝脏IRI中肝细胞损伤、炎症反应、细胞凋亡水平及浸润巨噬细胞募集，并且能够通过激活FXR信号从而实现肝脏保护作用，本发明给肝脏IRI治疗提供了新的思路，具有临床实际意义。

摘要： 本发明涉及去泛素化酶OTUD1在治疗肝脏缺血再灌注损伤中的应用。本发明通过深入解析肝脏缺血再灌注过程中去泛素化酶OTUD1的表达变化，及其与肝脏切除手术或肝移植手术所带来的缺血再灌注损伤之间的相关性，进一步阐明缺血再灌注过程中HIF1A促进去泛素化酶OTUD1的转录，增多的去泛素化酶OTUD1通过抑制NRF2的泛素化降解进而减轻肝细胞损伤的分子机制，为临床治疗肝脏缺血再灌注损伤提供了新的治疗策略。

摘要： 本发明公开了一种USP10在肝脏缺血再灌注损伤中的应用。本发明选择USP10基因敲除小鼠和C57BL/6野生型小鼠为实验对象，分别构建小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型，研究USP10在肝脏缺血再灌注损伤中的功能，发现了USP10基因在肝脏缺血再灌注损伤中的新功能，USP10过表达可通过抑制炎症和细胞凋亡减轻肝脏缺血再灌注损伤，因此可将USP10应用于制备预防/治疗肝脏缺血再灌注损伤的药物中，为肝脏缺血再灌注损伤提供新的药物靶点。

摘要： 本发明公开了一种人sDR5‑Fc重组融合蛋白在制备防治肝脏缺血再灌注损伤药物中的应用，其中编码sDR5‑Fc重组融合蛋白的核苷酸序列具有：a)SEQ ID NO：1所示的碱基序列；或b)与SEQ ID NO：1的互补配对序列；或c)与a或b的核苷酸序列编码相同序列的蛋白质，但因遗传密码的简并性而与a或b的核苷酸序列不同的序列；或sDR5‑Fc重组融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，或氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，且有一个或多个氨基酸被取代，但生物活性不改变的sDR5‑Fc重组融合蛋白；或sDR5‑Fc重组融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、或SEQ ID NO：6所示。

摘要： 本发明公开了一种DUSP12在肝脏缺血再灌注损伤中的应用。本发明选择肝细胞特异性DUSP12基因敲除小鼠和肝细胞特异性DUSP12转基因小鼠为试验对象，分别构建小鼠肝IRI损伤模型，然后进行原代肝细胞的分离培养和肝细胞体外缺氧/复氧的构建，研究DUSP12在IRI损伤中的功能；发现了DUSP12基因在肝I/R损伤中的新功能，DUSP12过表达可通过抑制炎症和细胞凋亡减轻肝脏缺血再灌注损伤，因此可将DUSP12应用于筛选或制备预防/治疗肝缺血再灌注损伤的药物中，为肝I/R损伤提供新的药物靶点。

摘要： 本发明公开了L‑苹果酸在制备防治肝脏缺血再灌注损伤药物中的应用，具体的，本发明公不了L‑苹果酸作为唯一的活性成分在制备预防或治疗肝脏缺血再灌注损伤的药物或保健品中的应用。本发明经小鼠体内实验论证，L‑苹果酸能够显著降低肝脏缺血再灌注引起的血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和乳酸脱氢酶等肝损伤标志物的增加，减小肝脏坏死面积，同时抑制缺血再灌注导致的肝脏组织脂质过氧化和细胞铁死亡，进而减轻肝损伤。本发明为肝脏缺血再灌注损伤相关疾病的治疗提供了理论依据，具有临床应用价值。