细胞低氧

摘要： 线粒体是有氧呼吸的主要场所,在缺氧条件下,线粒体的形态及能量代谢会发生一系列的变化去适应有限的氧环境。该研究从目前国内外的研究现状出发,分析了缺氧环境下,心肌细胞、脑细胞、肺动脉平滑肌细胞及骨骼肌细胞的线粒体能量产生异常、线粒体膜电位及膜通透性改变、钙离子超载、活性氧产生过多,引起氧化应激、自噬及凋亡等反应,造成线粒体功能障碍,从而引起机体组织损伤;指出了线粒体在适应缺氧过程中的重要性;最后总结了目前关于缺氧对线粒体影响的研究局限性及未来研究方向。

摘要： 目的探讨环状RNA(circRNA)在缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞焦亡中的作用及其机制。方法将大鼠心肌细胞H9c2分为A~F组,分别进行缺氧0、1、3、6、12、24 h处理后,再进行6 h复氧,采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒及Western blot方法检测H/R处理的H9c2细胞上清液中LDH活性和焦亡相关蛋白表达水平,确定诱导H9c2细胞焦亡的最佳缺氧时间。将H9c2细胞分为对照组和实验组,对照组H9c2细胞置于细胞培养箱中培养12 h,实验组H9c2细胞置于厌氧培养箱进行H/R处理,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测两组H9c2细胞中circRNA的表达水平。将H9c2细胞分为G~I组,G组H9c2细胞置于细胞培养箱中培养12 h,H组转染对照siRNA(NC),I组转染mmu_circ_0000723特异性siRNA(siRNA-mmu_circ_0000723)。转染24 h后,采用RT-qPCR方法检测各组H9c2细胞中mmu_circ_0000723的表达水平。将H9c2细胞分为J~M组,J组H9c2细胞置于细胞培养箱中培养12 h,K组H9c2细胞置于厌氧培养箱进行H/R处理,L组和M组H9c2细胞分别转染对照NC和siRNA-mmu_circ_0000723,并于转染24 h后进行H/R处理。分别采用碘化丙啶(PI)染色、LDH试剂盒和Western blot方法检测J~M组的PI阳性细胞比率、细胞上清液中LDH活性,以及焦亡相关蛋白的表达水平。结果A~F组H9c2细胞上清液中LDH活性和焦亡相关蛋白的表达水平差异有显著性(F=24.86~2153.00,P0.05)。结论mmu_circ_0000723通过调控焦亡相关蛋白的表达,在H/R诱发的H9c2细胞焦亡中发挥重要作用。

摘要： 目的探究低氧处理的人脂肪间充质干细胞(hAMSCs)外泌体对巨噬细胞M1/M2分型的影响及其分子机制。方法提取低氧处理的hAMSCs外泌体与M1巨噬细胞共培养,采用流式细胞术检测共培养后巨噬细胞表型M1/M2比例,实时荧光定量PCR(qPCR)检测炎症相关因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、一氧化氮合酶2(NOS-2)和白细胞介素12(IL-12)的表达,Western blot检测核因子κB(NF-κB)通路中P65和p-P65蛋白的表达。结果加入低氧处理的hAMSCs外泌体后,巨噬细胞M1型比例下降,M2型比例增加(t=3.293、10.242,P<0.05),炎症相关因子TNF-α、IL-1β、NOS-2以及IL-12的表达下调(F=10.820~222.942,P<0.05),p-P65/P65蛋白表达比值下降(F=375.634,P<0.05)。结论低氧处理的hAMSCs外泌体能够通过抑制NF-κB通路使巨噬细胞表型由M1型向M2型转化。

摘要： 目的明确七氟醚后处理对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用,初步阐明其对心肌内质网应激反应的影响及可能靶点。方法取SPF级雄性SD大鼠55只,建模取25只,每组5只,分为对照组(sham)和缺血再灌注组(I/R),每组5只。I/R组分别于缺血30 min之后进行再灌注2、4、6和8 h,制造在体心脏左冠状动脉前降支结扎缺血再灌注动物模型,获取心肌损伤和内质网应激反应最理想模型参数。实验取大鼠30只,随机数字表法分为sham组、I/R组、七氟醚后处理组(sevoP,分为2.5%、3.0%亚组)、4-苯基丁酸(4-PBA)复合七氟醚组(4-PBA+2.5%、3.0%sevoP组)。sevoP组在行微创左冠状动脉前降支结扎后,即刻吸入相应浓度的七氟醚15 min后洗脱,松开结扎线恢复血流至额定时间,观测心肌HE形态,血清的乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白(cTnI),以及组织的GRP78、CHOP mRNA和蛋白表达,sham组只放线不结扎。利用体外H9C2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型(3H/3R),除正常对照组和H/R组外,sevoP组复氧前以2.5%七氟醚处理缺氧箱内H9C2细胞30 min,另两组H9C2细胞分别以小干扰肌浆网Ca^(2+)-ATP酶(siSERCA)和阴性对照(ncSERCA)处理48 h后进行sevoP同样的操作,检测上清液中的上述指标,以及细胞内质网应激蛋白指标。结果与sham组比较,I/R组大鼠心肌缺血0.5 h再灌注2 h后血清LDH[(5.62±0.68)U/L比(3.44±0.54)U/L,P<0.05]、cTnI[(5.64±1.01)ng/mL比(2.72±0.61)ng/mL,P<0.05]浓度的升高,GRP78蛋白表达到缺血0.5 h再灌注6 h后才增高明显[(2.36±0.49)比(0.38±0.18),P<0.05]。与Sham组比较,I/R组大鼠肺组织GRP78、CHOP的mRNA显著高表达(22.22±8.22比1.02±0.27,14.84±2.49比1.01±0.22,P均<0.05),蛋白表达也同样增加(0.59±0.11比2.06±0.36,0.44±0.12比1.97±0.42,P均<0.05)。七氟醚后处理能够有效抑制其高表达,4-PBA能够进一步减弱七氟醚的抑制作用。H9C2细胞的H/R损伤和内质网应激可以引起GRP78和CHOP的4倍高表达和细胞上清液中LDH浓度上升(834.60±93.70比417.60±57.07,P<0.05),以2.5%七氟醚后处理降低过度升高的GRP78和CHOP(1.52±0.38比2.46±0.50,1.32±0.23比2.10±0.43,P均<0.05),siSERCA+sevoP+H/R组基因敲低能够减弱七氟醚的保护作用。结论七氟醚后处理可能能够抑制心肌的缺血再灌注损伤和过度的内质网应激,与心肌细胞Ca^(2+)-ATP酶活性有关。

摘要： 目的探讨低氧环境对椎间盘自发性吸收的影响及其作用机制。方法取SPF级成年日本大耳兔9只,雌雄不限,平均体质量2 kg。将兔处死后取脊柱髓核组织,经消化、分离、培养后获得传代髓核细胞,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液。根据不同时效的低氧环境将细胞分为5组对照组(常氧浓度下培养6 h)、低氧6 h组(2%O2浓度下培养6 h)、低氧12 h组(2%O2浓度下培养12 h)、低氧24 h组(2%O2浓度下培养24 h)和低氧48 h组(2%O2浓度下培养48 h)。采用实时聚合酶链反应法检测缺氧诱导因子(HIF)-1α、3型酸敏感离子通道(ASIC3)及水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达水平,采用流式细胞仪检测各组髓核细胞凋亡情况。采用SPSS 24.0软件对数据进行分析。结果与对照组比较,低氧各组细胞凋亡率均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);与低氧12、24和48 h组比较,低氧6 h组细胞凋亡率最高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与对照组比较,低氧各组细胞HIF-1α和ASIC3 mRNA表达水平均明显上升,AQP3 mRNA表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01);与低氧12、24和48 h组比较,低氧6 h组HIF-1α和ASIC3 mRNA表达水平最高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论短时间低氧环境可以促进髓核细胞凋亡,从而加速椎间盘突出组织自发性吸收进程,其机制可能与HIF-1α和ASIC3的表达增加及AQP3的表达下降有关。

摘要： 目的 探讨低氧环境对椎间盘自发性吸收的影响及其作用机制.方法 取SPF级成年日本大耳兔9只,雌雄不限,平均体质量2 kg.将兔处死后取脊柱髓核组织,经消化、分离、培养后获得传代髓核细胞,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液.根据不同时效的低氧环境将细胞分为5组:对照组(常氧浓度下培养6 h)、低氧6 h组(2％O2浓度下培养6 h)、低氧12 h组(2％O2浓度下培养12 h)、低氧24 h组(2％O2浓度下培养24 h)和低氧48 h组(2％O2浓度下培养48 h).采用实时聚合酶链反应法检测缺氧诱导因子(HIF)-1α、3型酸敏感离子通道(ASIC3)及水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达水平,采用流式细胞仪检测各组髓核细胞凋亡情况.采用SPSS 24.0软件对数据进行分析.结果 与对照组比较,低氧各组细胞凋亡率均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);与低氧12、24和48 h组比较,低氧6 h组细胞凋亡率最高,差异均有统计学意义(均P<0.01).与对照组比较,低氧各组细胞HIF-1α和ASIC3 mRNA表达水平均明显上升,AQP3 mRNA表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01);与低氧12、24和48 h组比较,低氧6 h组HIF-1α和ASIC3 mRNA表达水平最高,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 短时间低氧环境可以促进髓核细胞凋亡,从而加速椎间盘突出组织自发性吸收进程,其机制可能与HIF-1α和ASIC3的表达增加及AQP3的表达下降有关.

摘要： 目的 探讨大黄素对缺氧诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化应激、炎症和凋亡的作用机制.方法 2018年6月至2019年6月,用神经生长因子(NGF)处理构建缺氧PC12细胞;大黄素Emodin(2、4、6μg/mL)处理缺氧PC12细胞,筛选最适浓度4μg/mL;用脂质体法将微小RNA阴性对照(miR-con)、微小RNA-206(miR-206)、4μg/mL Emodin+抗-miR-con(anti-miR-con)、4μg/mL Emodin+抗-miR-206(anti-miR-206)转染至缺氧PC12细胞;流式细胞术、蛋白免疫印迹(Western blotting)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞的凋亡、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase-3)蛋白表达、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、人白细胞介素-1β(IL-1β)、miR-206的含量.结果 与缺氧PC12细胞(37.25±3.75)％相比,大黄素呈浓度依赖性抑制缺氧诱导的PC12细胞凋亡[(30.13±3.15)％、(13.43±1.35)％、(10.36±1.03)％];与缺氧PC12细胞相比,大黄素(4μg/mL)治疗后,细胞氧化应激因子MDA[(1.01±0.10)nmol/mg比(2.56±0.26)nmol/mg]、ROS[(186.28±18.75)比(400.25±40.07)]的表达均明显降低,SOD[(11.75±1.18)U/mg比(2.43±0.24)U/mg]的表达明显升高,炎性因子TNF-α[(4.89±0.50)ng/g比(28.76±2.88)ng/g]、IL-1β[(8.22±0.82)ng/g比(15.72±1.58)ng/g]的表达明显降低,miR-206的表达也出现明显升高(P<0.05).与hypoxia+miR-con组相比,过表达miR-206后,缺氧诱导PC12细胞中MDA[(2.58±0.27)nmol/mg比(1.01±0.10)nmol/mg]、ROS[(196.32±19.65)比(405.76±40.53)]、TNF-α[(4.56±0.50)ng/g比(28.01±2.75)ng/g]、IL-1β[(8.76±0.88)ng/g比(15.50±1.58)ng/g]的表达均显著降低,SOD[(12.04±0.12)U/mg比(2.55±2.56)U/mg]的表达显著升高,细胞凋亡率[(8.96±0.90)％比(36.25±3.63)％]显著降低,而抑制miR-206能够减弱大黄素对缺氧PC12细胞的保护作用.结论 大黄素可抑制缺氧诱导的PC12细胞凋亡,减轻细胞的氧化应激和炎性反应,其机制可能与上调miR-206相关,将可为大黄素的临床应用提供理论支持.

摘要： 目的 探讨低氧条件下B淋巴细胞瘤-2/腺病毒E1B 19 000相互作用蛋白3(BNIP3)对人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)迁移和运动性的影响及其机制.方法 采用实验研究方法 .(1)取HDMEC,采用随机数字表法(下同)分成行常规培养的常氧组及采用体积分数2％氧气低氧处理相应时间点的低氧6、12、24 h组,采用蛋1质印迹法检测细胞中BNIP3及微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3 Ⅱ)的蛋白表达.(2)取HDMEC,分成常氧+空载组、常氧+BNIP3敲减组、低氧+空载组、低氧+BNIP3敲减组,分别转染空载病毒或BNIP3敲减病毒并进行常氧或低氧处理6 h,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色法检测BNIP3的蛋白表达;采用划痕试验检测划痕后24 h的划痕面积,并计算划痕愈合率;在活细胞工作站测算3h内细胞运动的曲线距离,计算运动速度.(3)取HDMEC,同实验(2)分组及处理,采用蛋白质印迹法和免疫荧光染色法检测LC3 Ⅱ的蛋白表达.以上实验样本数均为3.对数据行单因素方差分析及LSD检验.结果 (1)与常氧组比较,低氧6、12、24 h组细胞BNP3及LC3 Ⅱ的蛋白表达量显著增加(P ＜0.01).(2)培养6 h,与低氧+空载组比较,常氧+空载组和低氧+BNIP3敲减组细胞BNIP3的蛋白表达量显著下降(P ＜0.05或P ＜0.01).常氧+空载组和常氧+BNIP3敲减组细胞中表示BNIP3蛋白表达的红色荧光较弱,低氧+空载组细胞红色荧光较强,低氧+BNIP3敲减组细胞中红色荧光较低氧+空载组明显减弱.划痕后24 h,低氧+空载组细胞划痕基本愈合,其他3组细胞剩余划痕面积较大.常氧+空载组、常氧+BNIP3敲减组、低氧+空载组、低氧+BNIP3敲减组细胞划痕愈合率分别为(61 ±4)％、(58 ±4)％、(88 ±4)％、(57 ±4)％.低氧+空载组细胞划痕愈合率明显高于常氧+空载组(P ＜0.01)和低氧+BNIP3敲减组(P ＜0.05).观察3h内,低氧+空载组细胞运动范围较常氧+空载组显著增大,低氧+BNIP3敲减组细胞运动范围较低氧+空载组明显缩小;低氧+空载组细胞曲线运动速度较常氧+空载组和低氧+BNIP3敲减组明显增加(P ＜0.01).(3)培养6 h,与低氧+空载组比较,常氧+空载组和低氧+BNIP3敲减组细胞LC3 Ⅱ的蛋白表达量显著下降(P ＜0.05或P ＜0.01).培养6 h,常氧+空载组和常氧+BNIP3敲减组细胞中表示LC3蛋白表达的红色荧光较弱,低氧+空载组细胞红色荧光明显增强,低氧+BNIP3敲减组细胞红色荧光被显著抑制.结论 低氧条件下BNIP3可促进HDMEC的迁移和运动性,且自噬可能参与BNIP3对HDMEC迁移和运动性的调节.

摘要： 目的 探讨低氧环境对椎间盘自发性吸收的影响及其作用机制.方法 取SPF级成年日本大耳兔9只,雌雄不限,平均体质量2 kg.将兔处死后取脊柱髓核组织,经消化、分离、培养后获得传代髓核细胞,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液.根据不同时效的低氧环境将细胞分为5组:对照组(常氧浓度下培养6 h)、低氧6 h组(2％O2浓度下培养6 h)、低氧12 h组(2％O2浓度下培养12 h)、低氧24 h组(2％O2浓度下培养24 h)和低氧48 h组(2％O2浓度下培养48 h).采用实时聚合酶链反应法检测缺氧诱导因子(HIF)-1α、3型酸敏感离子通道(ASIC3)及水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达水平,采用流式细胞仪检测各组髓核细胞凋亡情况.采用SPSS 24.0软件对数据进行分析.结果 与对照组比较,低氧各组细胞凋亡率均明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01);与低氧12、24和48 h组比较,低氧6 h组细胞凋亡率最高,差异均有统计学意义(均P<0.01).与对照组比较,低氧各组细胞HIF-1α和ASIC3 mRNA表达水平均明显上升,AQP3 mRNA表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.01);与低氧12、24和48 h组比较,低氧6 h组HIF-1α和ASIC3 mRNA表达水平最高,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 短时间低氧环境可以促进髓核细胞凋亡,从而加速椎间盘突出组织自发性吸收进程,其机制可能与HIF-1α和ASIC3的表达增加及AQP3的表达下降有关.

摘要： 目的 探讨不同氧气浓度对毛囊神经嵴干细胞(hfNCSC)的增殖和分化的影响,明确适宜hfNCSC增殖、维持其未分化状态的氧气条件.方法 显微解剖分离SD大鼠触须部的毛囊Bugle区组织,在1％(低氧组)、3％(中度低氧组)、20％(常氧组)3种氧气浓度下进行hfNCSC的原代培养,培养第10、13天时采用CCK-8法分别检测3组细胞的增殖活性;培养第13天时采用免疫荧光染色方法检测神经干细胞标志物Nestin、神经嵴来源干细胞标志物Sox10及神经元标志物β-Ⅲ Tubulin的表达;采用实时定量PCR法检测培养第13天时HIF-2α、Oct4、Nanog、Lin28、Sox2、KLF4、Nestin、Sox10、Slug以及PAX3在hfNCSC中的表达水平;采用蛋白质免疫印迹法检测培养第13天时Oct4、Sox2的表达情况.结果 (1) CCK-8结果显示,培养第10天时,中度低氧组细胞的增殖活性最高(相对吸光度值为1.868±0.147),其与低氧组(1.580±0.107)和常氧组(1.451±0.037)相比,差异均有统计学意义(均P＜0.01);培养第13天时,仍以中度低氧组细胞的增殖活性最高(相对吸光度值为5.322±1.111),其与低氧组(4.117±0.672)相比差异无统计学意义(P =0.088),而与常氧组(1.535±0.119)相比差异有统计学意义(P ＜0.001).(2)免疫荧光染色检测结果显示,不同氧气浓度下,Nestin、Sox10、β-Ⅲ Tubulin均有表达,Nestin、β-Ⅲ Tubulin均定位于细胞质,Sox10定位于细胞核和细胞质.(3)实时定量PCR结果显示,Oct4、Nanog、Lin28、HIF-2α、Sox10、Slug、PAX3在中度低氧组的表达水平最高,且与另外两组的差异均有统计学意义(均P ＜0.05);Nestin、Sox2、KLF4在低氧组表达水平最高,且与另外两组的差异均有统计学意义(均P ＜0.01).(4)蛋白质免疫印迹结果显示,Oct4、Sox2在中度低氧组的表达高于另外两组.结论 低氧有利于提高hfNCSC的增殖能力并维持其未分化状态,其中3％的氧气浓度更适合hfNCSC的增殖以及未分化状态的维持.

摘要： 本发明涉及间充质干细胞技术领域，尤其涉及一种脐带间充质干细胞制备生物凝胶‑细胞聚合体体系的方法及低氧条件的应用，包括以下步骤：S1：人脐带间充质干细胞分离培养及鉴定；S2：脐带间充质干细胞聚合体培养鉴定；S201脐带间充质干细胞聚合体培养；S202脐带间充质干细胞聚合体HE染色；S203脐带间充质干细胞聚合体扫描电镜观察；S204脐带间充质干细胞聚合体免疫组化染色；S3：构建生物凝胶‑脐带间充质干细胞聚合体体系；S301人脐带静脉内皮细胞的分离培养；S302hUVECs的鉴定；S303生物凝胶‑hUCMSCs聚合体体系建立；S304生物凝胶‑hUCMSCs聚合体体系HE染色。通过本发明提供的方法，在低氧条件下，能够高效的、无损的获得缺损肌肉组织功能与外形的完整修复。

摘要： 间歇性低氧训练用常压低氧舱及其调节低氧舱内氧气浓度的方法，设有常压低氧舱，常压低氧舱通过流量控制部件和流量测量部件与氮气源连通，并与抽气装置连接；设有与中央控制单元连接的氧气浓度测量装置，流量测量部件与中央控制单元输入端连接，中央控制单元与流量控制部件电连接；还设有具有气体置换功能的气源舱，常压低氧舱内设有面罩，面罩分别通过吸气管单向阀和通断阀，以及呼气管单向阀和通断阀与气源舱连通，气源舱设有气源输入管和气流输出管，具有结构简单、造价低、安全性好的优点，本发明方法通过控制输入的氮气量与抽气量之间的相对大小调节低氧舱内外的压力差，实现调节常压低氧舱内氧浓度的功能，具有简单易行的优点。

摘要： 本发明提供了一种利用低氧三维环境培养的间充质干细胞富集脐血造血干细胞的方法。包括以下步骤：在表面具有微拓扑结构的细胞培养基底上接种间充质干细胞，在低氧条件下培养；将脐血单个核细胞接种到间充质干细胞共培养，从而富集造血干细胞。本发明利用特定的低氧三维环境使间充质干细胞富集脐血单个核中CD34阳性造血干细胞，通过间充质干细胞与造血干细胞之间的相互作用，直接将脐血单个核细胞中的造血干细胞分离出来。该方法成本低廉，实验步骤简便，且在体外能维持造血干细胞的干性及活性。

摘要： 本发明涉及间充质干细胞技术领域，尤其涉及一种脐带间充质干细胞制备生物凝胶‑细胞聚合体体系的方法及低氧条件的应用，包括以下步骤：S1：人脐带间充质干细胞分离培养及鉴定；S2：脐带间充质干细胞聚合体培养鉴定；S201脐带间充质干细胞聚合体培养；S202脐带间充质干细胞聚合体HE染色；S203脐带间充质干细胞聚合体扫描电镜观察；S204脐带间充质干细胞聚合体免疫组化染色；S3：构建生物凝胶‑脐带间充质干细胞聚合体体系；S301人脐带静脉内皮细胞的分离培养；S302hUVECs的鉴定；S303生物凝胶‑hUCMSCs聚合体体系建立；S304生物凝胶‑hUCMSCs聚合体体系HE染色。通过本发明提供的方法，在低氧条件下，能够高效的、无损的获得缺损肌肉组织功能与外形的完整修复。

摘要： 本发明公开了一种低氧促进小鼠成纤维细胞重编程为心肌细胞的方法，利用重编程因子将小鼠成纤维细胞直接重编程为高效分化的心肌细胞为切入点，研究低氧对直接重编程产生心肌细胞的效率及成纤维细胞重编程为心肌细胞过程中HIF-1表达水平的变化，系统阐述低氧对细胞直接重编程的作用。同时检测了多潜能转录因子和表观遗传调控因子这在低氧刺激下的表达情况。用体细胞直接重编程得到的个体化心肌细胞用于心肌梗死的修复，将为提高临床细胞移植的效率和安全性打下基础。探讨低氧微环境与重编程的关系，为低氧下重编程机制的研究提供新的思路。

摘要： 本发明公开了一种低氧条件下微囊化成骨细胞支持和调控脐血造血干/祖细胞(He)体外扩增的方法，属于生物技术与组织TSPCS程领域。其特征是将人源成骨细胞使用明胶－海藻酸钠－壳聚糖(GAC)微囊包埋作为基质饲养层细胞，在5％的低氧环境中与脐血HSPCs进行共培养，收获HSPCs。本发明使用GAC微囊将人源成骨细胞与脐血HSPCs隔离开，避免了细胞污染和免疫排斥反应。而微囊的孔道又可使微囊内部成骨细胞分泌的造血生长因子扩散到HSPCs聚集处，起到刺激造血干/祖细胞扩增的作用。而微囊材料本身又对生长因子的扩散起到缓释作用，使得微囊表面生长因子浓度梯度增大，这对于生长因子的长期作用很有帮助。并且，微囊化的成骨细胞形成了3D环境，与贴壁培养的成骨细胞共培养模式相比，一方面可以使培养体系中包含更多的成骨细胞，另一方面也使其具有更大的HSPCs－OBs作用面积。此外，在5％的低氧环境中，共培养体系可以更好的模拟人体骨髓的造血微环境杗iche，成骨细胞对造血干/祖细胞的干细胞特性维持和数量扩增作用都更为显著。

摘要： 本发明涉及低氧防火系统和建筑构造物以及用于低氧防火的方法。该低氧防火系统包括：用于低氧气体的中央供应容器；通过连接管道连接到容器的多个隔室；以及至少一个分配器，其被设置在每个隔室中并且被操作性地连接到连接管道以用于分配低氧气体的目的。

摘要： 间歇性低氧训练用常压低氧舱及其调节低氧舱内氧气浓度的方法，设有常压低氧舱，常压低氧舱通过流量控制部件和流量测量部件与氮气源连通，并与抽气装置连接；设有与中央控制单元连接的氧气浓度测量装置，流量测量部件与中央控制单元输入端连接，中央控制单元与流量控制部件电连接；还设有具有气体置换功能的气源舱，常压低氧舱内设有面罩，面罩分别通过吸气管单向阀和通断阀，以及呼气管单向阀和通断阀与气源舱连通，气源舱设有气源输入管和气流输出管，具有结构简单、造价低、安全性好的优点，本发明方法通过控制输入的氮气量与抽气量之间的相对大小调节低氧舱内外的压力差，实现调节常压低氧舱内氧浓度的功能，具有简单易行的优点。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种无血清低氧培养间充质干细胞的方法，包括以下步骤：S1、取原代人脐带间充质干细胞按3000个/mL的细胞密度接种于15cm的培养皿中，再置于饱和湿度培养箱中培养，每隔3d进行全量换液，待原代人脐带间充质干细胞生长至80％融合时，使用重组酶消化后进行传代培养，传至P5代。本发明低氧培养人脐带间充质干细胞的方法对间充质干细胞的培养效果更好，培养后的间充质干细胞的增殖倍数和细胞活率都更优于常氧培养；羧甲基纤维素钠、丝素蛋白，可提高细胞的粘附性，利于细胞固着，促进细胞生长；大豆低聚肽和辅酶Q10具有较好的抗氧化作用，促进细胞代谢，提高细胞内酶的活性。

摘要： 本发明提供了大黄素在减轻急性低氧诱导的鱼类细胞凋亡中的应用。大黄素通过介导鱼类的AMPK/mTOR信号通路，增强鱼类细胞自噬，从而抑制鱼类细胞凋亡，减轻急性低氧条件对鱼类造成的损伤。本发明还提供了一种用于减轻急性低氧诱导的鱼类细胞凋亡的饲料，其包括基础饲料和用于减轻急性低氧诱导的鱼类细胞凋亡的饲料添加剂大黄素；饲料添加剂大黄素通过介导AMPK/mTOR途径减轻急性低氧对鱼类的损伤。所述鱼类为水产淡水经济鱼类。