程序性细胞死亡因子4

摘要： 背景 急性脑梗死(ACI)发病率、致残率均较高,威胁患者健康,故早期诊断ACI对于针对性治疗方案的制定及患者预后的改善具有积极意义.微小RNA-145(miR-145)靶向下调程序性细胞死亡因子4(PDCD4)水平可缓解ACI引起的炎性反应,二者可能与ACI的发生有关.目的 分析ACI患者血清miR-145、PDCD4 mRNA水平变化及诊断价值.方法 选择2019年1月至2020年6月衡水市人民医院神经内科收治的ACI患者185例为ACI组.根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将ACI患者进一步分为轻度损伤亚组(NIHSS评分≤15分,72例)、中度损伤亚组(NIHSS评分为16～29分,64例)、重度损伤亚组(NIHSS评分≥30分,49例).根据ACI患者脑梗死体积大小,将其进一步分为小体积亚组(脑梗死体积10 cm3,54例).同期选择在本院体检的健康者150例为对照组.收集所有受试者一般资料,并检测其血清miR-145、PDCD4 mRNA水平.采用Pearson相关分析探讨ACI患者血清miR-145水平与血清PDCD4 mRNA水平间的相关性;采用多因素Logistic回归分析探讨ACI的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析胱抑素C及血清miR-145、PDCD4 mRNA水平对ACI的诊断价值.结果 ACI组有高血压史者所占比例、收缩压、舒张压、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、同型半胱氨酸、胱抑素C高于对照组(P<0.05).ACI组血清miR-145水平低于对照组,血清PDCD4 mRNA水平高于对照组(P<0.05).中度损伤亚组、重度损伤亚组血清miR-145水平低于轻度损伤亚组,血清PDCD4 mRNA水平高于轻度损伤亚组(P<0.05);重度损伤亚组血清miR-145水平低于中度损伤亚组,血清PDCD4 mRNA水平高于中度损伤亚组(P<0.05).中等体积亚组、大体积亚组血清miR-145水平低于小体积亚组,血清PDCD4 mRNA水平高于小体积亚组(P<0.05);大体积亚组血清miR-145水平低于中等体积亚组,血清PDCD4 mRNA水平高于中等体积亚组(P<0.05).Pearson相关分析结果显示,ACI患者血清miR-145水平与血清PDCD4 mRNA水平呈负相关(r=-0.327,P<0.001).多因素Logistic回归分析结果显示,胱抑素C〔OR=1.869,95％CI(1.181,2.957)〕及血清miR-145〔OR=2.008,95％CI(1.315,3.066)〕、PDCD4 mRNA水平〔OR=1.843,95％CI(1.308,2.597)〕是ACI的影响因素(P<0.05).ROC曲线分析结果显示,血清miR-145水平联合血清PDCD4 mRNA水平诊断ACI的曲线下面积(AUC)大于胱抑素C、血清miR-145水平、血清PDCD4 mRNA水平单独诊断ACI的AUC(P<0.05).结论 ACI患者血清miR-145水平下降、血清PDCD4 mRNA水平升高,其均与患者神经功能缺损程度和脑梗死体积有关,且二者联合对ACI具有较高的诊断价值,其可能是临床上早期诊断ACI的潜在生物标志物.

摘要： 目的探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)LINC00472对脂多糖(LPS)诱导肾小管上皮细胞损伤的影响及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞系HK-2(以下称HK-2细胞),随机分为对照组、LPS组、LPS+si-LINC00472组、LPS+si-NC组、LPS+miR-136-3p组、LPS+miR-NC组、LPS+si-LINC00472+anti-miR-136-3p组和LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组。LPS+si-LINC00472组转染si-LINC00472,LPS+si-NC组转染si-NC,LPS+miR-136-3p组转染miR-136-3p,LPS+miR-NC组转染miR-NC,LPS+si-LINC00472+anti-miR-136-3p组转染si-LINC00472、anti-miR-136-3p,LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组转染si-LINC00472、anti-miR-NC,转染6 h后给予1μg/mL LPS刺激24 h。LPS组不予转染,仅给予1μg/mL LPS刺激24 h。对照组常规培养,不予转染和LPS刺激。收集各组干预后细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA LINC00472、miR-136-3p表达,采用MTT法检测再培养48 h细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用ELISA法检测培养上清液IL-6、IL-8,采用Western blotting法检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4)蛋白表达。通过LncBase Predicted v.2在线预测网站、starBase数据库预测lncRNA LINC00472与miR-136-3p、miR-136-3p与PDCD4的结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA LINC00472与miR-136-3p、miR-136-3p与PDCD4的靶向调控关系。结果LPS组lncRNA LINC00472相对表达量明显高于对照组,miR-136-3p相对表达量明显低于对照组,细胞增殖活性亦明显低于对照组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平均明显高于对照组(P均<0.05)。LPS+si-LINC00472组lncRNA LINC00472相对表达量明显低于LPS+si-NC组,miR-136-3p相对表达量明显高于LPS+si-NC组,细胞增殖活性亦明显高于LPS+si-NC组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平均明显低于对照组(P均<0.05)。LPS+miR-136-3p组miR-136-3p相对表达量和细胞增殖活性均明显高于LPS+miR-NC组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平和PDCD4蛋白相对表达量均明显低于LPS+miR-NC组(P均<0.05)。LPS+si-LINC00472+anti-miR-136-3p组miR-136-3p相对表达量和细胞增殖活性均明显低于LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平和PDCD4蛋白相对表达量均明显高于LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组(P均<0.05)。经LncBase Predicted v.2在线预测网站和starBase数据库预测并经双荧光素酶报告基因实验验证,lncRNA LINC00472与miR-136-3p存在靶向结合位点,miR-136-3p与PDCD4存在靶向结合位点。结论沉默lncRNA LINC00472可通过促进miR-136-3p表达、抑制PDCD4表达,减轻LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤。

摘要： 目的:分析牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染及程序性细胞死亡因子4(PDCD4)低表达对食管癌细胞KYSE30紫杉醇(PTX)化疗的影响。方法:制备PDCD4敲降的食管癌细胞KYSE30-P。实验分为4组,KYSE30组、KYSE30-P组、KYSE30+Pg组、KYSE30-P+Pg组。采用Western blot法及流式细胞术检测细胞中PDCD4、干细胞标记物乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白表达量及肿瘤干细胞(CSC)百分比,采用CCK-8法检测PTX处理细胞24 h的IC_(50)。24只裸鼠均分为4组,按以上分组接种细胞,成瘤后每3 d尾静脉注射一次PTX(10 mg/kg),共给药6次。末次给药后第3天观察成瘤能力,检测瘤体组织中PDCD4、ALDH1表达量及CSC百分比。结果:Pg感染与PDCD4敲降均可降低KYSE30细胞中PDCD4蛋白表达量,增高ALDH1蛋白表达量、CSC百分比及PTX处理24 h的IC_(50),二者存在协同作用(P均<0.05)。Pg感染与PDCD4敲降均可引起裸鼠瘤体对PTX敏感性减弱,瘤体增重,瘤体内PDCD4蛋白表达量降低,而ALDH1蛋白表达量及CSC百分比增高,二者存在协同作用(P均<0.05)。结论:有效清除Pg并激活PDCD4可能为食管癌治疗的新策略。

摘要： 目的探讨微小RNA-21(miR-21)、程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)肺泡巨噬细胞(AM)中的表达水平及意义。方法选取135例COPD患者进行研究(COPD组),依据患者病情分为COPD稳定组62例、COPD急性加重期(AECOPD)组73例;并选取同期因喉部异物感等原因做纤支镜检查的健康者73例进行对照研究(正常组)。比较COPD组与正常组一般资料;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BALF AM中miR-21、PDCD4 mRNA相对表达量;Pearson法分析COPD患者BALF AM中miR-21、PDCD4 mRNA表达水平与肺功能指标,miR-21表达水平与PDCD4 mRNA的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)评估BALF AM中miR-21、PDCD4 mRNA表达水平对COPD的诊断价值。结果与正常组相比,COPD组患者第1秒用力呼气容积(FEV_(1))占预计值百分比(FEV_(1)%)及FEV_(1)/用力肺活量(FVC)水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与正常组相比,COPD稳定组、AECOPD组患者BALF AM中miR-21表达水平均升高,PDCD4 mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与COPD稳定组相比,AECOPD组患者BALF AM中miR-21表达水平升高,PDCD4 mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);COPD患者BALF AM中miR-21表达水平与PDCD4 mRNA水平、FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均呈负相关(P<0.05),PDCD4 mRNA表达水平与FEV_(1)%、FEV_(1)/FVC均呈正相关(P<0.05);BALF AM中miR-21、PDCD4 mRNA对COPD诊断的曲线下面积(AUC)为0.844、0.849,相应截断值分别为1.54、0.70,灵敏度分别为70.4%、77.8%,特异度分别为86.3%、80.8%;两者联合诊断COPD的AUC为0.903,其灵敏度、特异度分别为90.4%、84.9%。结论COPD患者BALF AM中miR-21表达升高,PDCD4表达降低,miR-21可能与PDCD4相互影响,进而协同影响COPD病变过程,两者水平有助于临床筛查COPD患者及评估患者病情。

摘要： 目的 了解缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke,CIS)患者血清微小RNA-155(micro RNA-155,mi R-155)、程序性细胞死亡因子4(programmed cell death factor 4,PDCD4)信使RNA(messenger RNA,m RNA)表达水平与颈动脉支架成形术(carotid artery stenting,CAS)后再狭窄的相关性。方法 选择2016年2月~2020年7月在凉山彝族自治州第二人民医院确诊的CIS患者120例作为CIS组,同期选取健康体检者125例为对照组。实时荧光定量PCR法测定CIS组术前和术后24 h,对照组体检时血清mi R-155和PDCD4 mRNA表达水平;术后180天对CIS患者进行脑多普勒超声检查和颈动脉彩超检查,观察CIS患者颈动脉狭窄程度、不稳定斑块数量、斑块长度及斑块厚度,测定患者血浆粘度、全血黏度、红细胞比容和纤维蛋白原水平;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清mi R-155和PDCD4 mRNA表达水平对CIS患者行CAS术后再狭窄的诊断价值。结果与对照组相比,CIS组术前血清mi R-155表达水平显著降低(0.31±0.06 vs 1.01±0.20)(q=45.189,P=0.000),CIS组术前(2.23±0.45 vs 1.03±0.20)和术后24 h(1.19±0.29 vs 1.03±0.20)血清PDCD4 mRNA表达水平均显著升高(q=40.422,5.390,均P=0.000),差异均有统计学意义;与CIS组术前相比,CIS组术后24 h血清mi R-155表达水平显著升高(0.97±0.21 vs 0.31±0.06)(q=42.179,P=0.000),血清PDCD4 mRNA表达水平显著降低(1.19±0.23 vs2.23±0.45)(q=34.680,P=0.000),差异均有统计学意义;与未狭窄组相比,再狭窄组颈动脉狭窄程度(21.31±5.33vs 9.11±2.52)、术后24 h血清PDCD4 mRNA表达水平(2.18±0.54 vs 1.06±0.26)、不稳定斑块数量(5.51±1.27 vs2.87±0.71)、斑块长度(7.60±1.90mm vs 3.16±0.79mm)、斑块厚度(4.60±1.15mm vs 2.84±0.71mm)、血浆黏度(15.03±3.85m Pa·s vs 11.01±2.75m Pa·s)、全血粘度(5.84±1.46m Pa·s vs 3.71±0.92m Pa·s)、红细胞比容(58.98%±17.74%vs 46.51%±11.62%)和纤维蛋白原(4.93±1.23g/L vs 3.01±0.75g/L)显著升高,差异均有统计学意义(t=4.277~17.874,均P<0.05),术后24 h血清mi R-155表达水平显著降低(0.36±0.09 vs 1.03±0.25),差异有统计学意义(t=9.074,P=0.000)。ROC曲线结果表明,术后24 h血清mi R-155和PDCD4 mRNA表达水平诊断CAS术后再狭窄的AUC分别为0.778(95%CI为0.692~0.864)和0.838(95%CI为0.749~0.926)。结论 血清mi R-155和PDCD4 mRNA的异常表达与CIS病情及CAS术后再狭窄联系密切,对CAS术后再狭窄具有一定的诊断价值。

摘要： 目的:研究miR-21靶向CC趋化因子配体20(CCL20)及程序性细胞死亡因子4(PDCD4)对脓毒症大鼠心肌中细胞凋亡及炎症反应的调节作用。方法:成年雄性SD大鼠随机分为对照组、脓毒症组、脓毒症+NC组、脓毒症+miR-21组,后三组采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型,尾静脉注射NC mimic或miR-21 mimic进行干预,48 h后检测血清中肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量、心肌HE染色、细胞凋亡率、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及IL-1β含量、CCL20及PDCD4表达;培养心肌H9c2细胞,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与CCL20及PDCD4基因mRNA 3’UTR的靶向关系。结果:与对照组相比,脓毒症组大鼠心肌中miR-21表达明显减少,血清cTnⅠ、CK-MB含量及心肌中细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β含量、CCL20、PDCD4表达均明显提高(P<0.05);与脓毒症组相比,脓毒症+miR-21组心肌中miR-21表达明显增加,血清cTnⅠ、CK-MB含量及心肌中细胞凋亡率、TNF-α、IL-1β含量、CCL20、PDCD4表达均明显降低(P<0.05)。miR-21组H9c2细胞CCL20、PDCD4表达及CCL20、PDCD4双荧光素酶报告基因荧光活力均明显低于NC组(P<0.05)。结论:miR-21可抑制脓毒症大鼠心肌中细胞凋亡及炎症反应,其分子机制可能为靶向抑制CCL2及PDCD4表达。

摘要： 目的探讨circ_0007897通过调控程序性细胞死亡因子4(PDCD4)介导缺血性心肌损伤的机制。方法分离原代C57小鼠心肌细胞,并分为空白组、缺氧复氧组、缺氧复氧+circ_con组、缺氧复氧+circ_0007897组。检测各组细胞活力、细胞凋亡、细胞乳酸脱氢酶(LDH)水平及细胞内丙二醛(MDA)含量、circ_0007897表达情况及PDCD4蛋白表达情况。结果与空白组相比,缺氧复氧组的细胞活力明显下降,细胞凋亡明显升高,LDH水平及细胞内MDA明显升高,circ_0007897表达水平明显下降,PDCD4的表达明显升高,差异具有统计学意义(q分别=13.86、40.78、14.45、8.12、8.91、9.70,P均<0.05);与缺氧复氧组相比,缺氧复氧+circ_0007897组的细胞活力明显升高,细胞凋亡明显下降,LDH水平及细胞内MDA明显下降,circ_0007897表达水平明显升高,PDCD4表达水平明显下降,差异具有统计学意义(q分别=9.68、20.96、9.13、8.18、14.84、6.51,P均<0.05)。结论circ_0007897对心肌细胞有明显的保护作用,而这种保护作用是通过下调PDCD4来进行调控的。

摘要： 目的:研究非小细胞肺癌A549和H520细胞PDCD4和AP-1 (JunB和c-Fos)表达及其与细胞迁移的关系。方法:体外培养非小细胞肺癌肺腺癌细胞A549和肺鳞癌细胞H520,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,western blot方法检测细胞PDCD4和AP-1 (JunB和c-Fos)表达情况,比较肺腺癌细胞A549和肺鳞癌细胞H520中PDCD4和AP-1 (JunB和c-Fos)表达差异以及细胞迁移能力的差异。结果:肺腺癌细胞A549中PDCD4蛋白表达明显低于肺鳞癌细胞H520,而AP-1 (JunB和c-Fos)蛋白表达明显高于肺鳞癌细胞H520,且肺腺癌细胞A549的迁移能力明显高于肺鳞癌细胞H520,差异有统计学意义(P < 0.05)。结论:肺腺癌细胞PDCD4蛋白表达低于肺鳞癌细胞,AP-1 (JunB和c-Fos)蛋白表达高于肺鳞癌细胞,细胞迁移能力与PDCD4表达呈负相关,与AP-1表达呈正相关。

摘要： 目的探究呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎婴幼儿外周血miR-155与程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达的关系。方法选取106例RSV毛细支气管炎婴幼儿为研究组,根据病情严重程度分为轻症组36例、中症组41例和重症组29例。选择健康体检婴幼儿65例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测婴幼儿外周血血清miR-155水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PDCD4、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;Pearson相关分析RSV毛细支气管炎婴幼儿血清miR-155和PDCD4的关系,以及两者与炎性因子的相关性。结果与对照组相比,研究组患儿血清miR-155水平升高,PDCD4水平降低(P<0.05)。且随着RSV毛细支气管炎严重程度的加重,血清miR-155水平上升,PDCD4水平下降(P<0.05)。与对照组相比,研究组的血清炎性因子hs-CRP、IL-6、IL-10、TNF-α水平均上升(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-155和PDCD4呈负相关(r=-0.790,P<0.01)。且miR-155与hs-CRP、IL-6、IL-10、TNF-α均呈正相关,PDCD4与hs-CRP、IL-6、IL-10、TNF-α均呈负相关(均P<0.01)。结论RSV毛细支气管炎婴幼儿血清miR-155、PDCD4水平异常表达,两者呈负相关关系,且其水平与炎性因子密切相关。

摘要： 目的 探究炎症性肠病(IBD)患者肠黏膜组织中miR-129与程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达关系及临床意义。方法 选择2017年7月至2020年1月万宁市人民医院收治的176例活动期IBD患者设为IBD组,其中94例为溃疡性结肠炎(UC)患者(设为UC组),82例为克罗恩病(CD)患者(设为CD组);另选择同期在该院就诊的100例结肠息肉患者设为对照组。在IBD组患者行肠镜检查时取肠黏膜病变组织,在对照组患者行肠镜下息肉切除术时取距息肉>5 cm的回肠或结肠黏膜活体组织。采用实时荧光定量PCR法检测肠黏膜组织中miR-129和PDCD4的表达水平,并分析两者的相关性,以及其与患者疾病活动度的关系。采用ROC曲线评估肠黏膜组织中mi R-129和PDCD4诊断IBD的效能。结果 IBD组肠黏膜组织中miR-129、PDCD4的相对表达量分别为0.82±0.23、0.67±0.19,均低于对照组(1.36±0.35、1.02±0.27),2组的差异均有统计学意义(P均<0.05)。轻度UC组、中度UC组、重度UC组的miR-129和PDCD4表达水平依次降低,轻度CD组、中度CD组、重度CD组的miR-129和PDCD4表达水平也依次降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。UC组的miR-129和PDCD4表达水平均与改良Mayo评分呈负相关(r=-0.580、r=-0.595,P均=0.000),CD组的miR-129和PDCD4表达水平均与CD活动指数呈负相关(r=-0.508、r=-0.498,P均=0.000)。IBD组患者肠黏膜组织中miR-129与PDCD4的表达水平呈正相关(r=0.735,P=0.000)。IBD组患者肠黏膜组织中mi R-129和PDCD4诊断IBD的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.759(95%CI:0.703~0.816)和0.867(95%CI:0.821~0.913),两者联合诊断的AUC为0.911(95%CI:0.874~0.947)。结论 IBD患者肠黏膜组织中miR-129和PDCD4的表达水平降低,且两者呈正相关。miR-129和PDCD4的表达水平与UC及CD患者的疾病活动度相关,有望作为诊断IBD的生物标志物。

摘要： 本发明公开了一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白‑1及其生产方法和用途，该蛋白含有一个附加的半胱氨酸标签用于功能性分子的标记，含有一个组氨酸标签用于蛋白的纯化，编码该蛋白的基因具有针对原核细胞表达优化的序列；生产方法为先将hPD‑1细胞外氨基酸的基因进行优化，利用PCR将优化的hPD‑1基因扩增后克隆到蛋白表达质粒，构建了hPD‑1原核表达载体；在大肠杆菌细胞内表达hPD‑1并利用组氨酸标签进行纯化，最后使用变性剂进行溶解，透析以对其进行复性，获得重组hPD‑1蛋白质，利用酶联免疫吸附试验验证蛋白质的活性。本发明所公开的hPD‑1生产方法工艺简单易行，所生产的hPD‑1蛋白质成本低，将为hPD‑1单克隆抗体的开发及进一步研发免疫检测技术和抗体医药提供重要工具。

摘要： 本发明公开了一种植物细胞程序性死亡的调控因子花生类

摘要： 编码植物脱氧海普赖氨酸合成酶的DNA，植物真核起始因子5A，转基因植物和控制植物衰老和程序性细胞死亡的方法通过将编码衰老诱导的脱氧海普赖氨酸合成酶、衰老诱导的eIF-5A的基因或基因片段或它们二者沿反义方向整合到植物基因组中，实现了对植物程序性细胞死亡的表达，包括衰老的调控。鉴定了编码衰老诱导脱氧海普赖氨酸合成酶和衰老诱导的eIF-5A的植物基因，并将每一种基因的核苷酸序列单独和组合用于改变转基因植物的衰老。

摘要： 通过将编码衰老诱导的脱氧海普赖氨酸合成酶、衰老诱导的eIF-5A的基因或基因片段或它们二者沿反义方向整合到植物基因组中，实现了对植物程序性细胞死亡的表达，包括衰老的调控。鉴定了编码衰老诱导脱氧海普赖氨酸合成酶和衰老诱导的eIF-5A的植物基因，并将每一种基因的核苷酸序列单独和组合用于改变转基因植物的衰老。

摘要： 本发明涉及包含遗传材料的、用于制备治疗恶性疾病的组合物的载体的用途,所述载体一旦施用给患恶性疾病的对象,就通过降低恶性细胞中Rb蛋白水平与细胞程序性死亡诱导蛋白水平的比率,通过降低pRb水平并提高细胞程序性死亡诱导蛋白水平,在通过此处诱导pRb蛋白磷酸化的抑制首次实现所述恶性细胞的生长停滞之后,诱导恶性细胞中细胞程序性死亡。本发明进一步涉及用于有效转移的特异载体。

摘要： 本发明涉及TSP‑1 C末端结合结构域的环肽模拟物。本发明还涉及这些环肽作为CD47激动剂的用途，及其能够触发程序性细胞死亡(PCD)的能力。本发明还涉及药物组合物用于治疗PCD缺陷相关疾病的用途，比如癌症和免疫失调(包括慢性炎症)，所述药物组合物包含至少一种根据本发明的环肽。

摘要： 本发明公开了一种人源程序性细胞死亡因子受体蛋白‑1及其生产方法和用途，该蛋白含有一个附加的半胱氨酸标签用于功能性分子的标记，含有一个组氨酸标签用于蛋白的纯化，编码该蛋白的基因具有针对原核细胞表达优化的序列；生产方法为先将hPD‑1细胞外氨基酸的基因进行优化，利用PCR将优化的hPD‑1基因扩增后克隆到蛋白表达质粒，构建了hPD‑1原核表达载体；在大肠杆菌细胞内表达hPD‑1并利用组氨酸标签进行纯化，最后使用变性剂进行溶解，透析以对其进行复性，获得重组hPD‑1蛋白质，利用酶联免疫吸附试验验证蛋白质的活性。本发明所公开的hPD‑1生产方法工艺简单易行，所生产的hPD‑1蛋白质成本低，将为hPD‑1单克隆抗体的开发及进一步研发免疫检测技术和抗体医药提供重要工具。

摘要： 本发明公开了一种植物细胞程序性死亡的调控因子花生类caspase-3基因及编码序列。在铝诱导花生根尖发生PCD过程中，研究各类caspase的活性变化，证实花生中存在花生类caspase，并确定其中与铝诱导PCD发生关系最密切的为花生类caspase-3（caspase-3-like）。从花生根尖提取RNA，克隆到花生Ahcas-3，其ORF为编码序列1068bp，编码355aa的cDNA序列。

摘要： 通过将编码衰老诱导性脱氧8－羟－2，7，10－三氨基癸酸合酶、衰老诱导性e1F－5A或二者的基因或基因片段以反义方向整合入植物基因组，可在所述植物中实现调节程序性细胞死亡(包括衰老)表达。鉴定编码衰老诱导性脱氧8－羟－2，7，10－三氨基癸酸合酶和衰老诱导性e1F－5A的植物基因，在转基因植物中单独或组合使用每种所述核苷酸序列减缓衰老。

摘要： 通过将编码衰老诱导的脱氧海普赖氨酸合成酶、衰老诱导的eIF－5A的基因或基因片段或它们二者沿反义方向整合到植物基因组中，实现了对植物程序性细胞死亡的表达，包括衰老的调控。鉴定了编码衰老诱导脱氧海普赖氨酸合成酶和衰老诱导的eIF－5A的植物基因，并将每一种基因的核苷酸序列单独和组合用于改变转基因植物的衰老。