气道上皮细胞

摘要： 哮喘是常见呼吸道疾病,其特点是气道炎症与气道高反应性.多巴胺是人体重要的神经递质,近年来有文献报道多巴胺受体在免疫细胞、Ⅰ型肺泡细胞、气道上皮和气道平滑肌中均有表达,并且影响卵清蛋白(OVA)诱导的动物哮喘,该文将从气道炎症、肺部神经调节、气道上皮和平滑肌异常等方面介绍多巴胺在哮喘发生发展中的作用.

摘要： 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对加速纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调控作用,及对血小板源生长因子(PDGF)诱导的气道上皮细胞转分化(EMT)的影响。方法取人气道上皮细胞株16-HBE,分为对照组、PDGF不同浓度刺激组(5、25、50、100、200 ng/L),用免疫荧光法检测各组细胞EMT标志物波形蛋白(vimentin)阳性表达,选出合适的PDGF诱导浓度。将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组(100 ng/L)、AngⅡ不同浓度组(10^(-7)、10^(-6)、10^(-5) mol/L),用倒置显微镜检测细胞形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白E-粘钙素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin,气道纤维化相关蛋白-纤维连接蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ),Raf/MEK/ERK通路相关蛋白Raf、MEK及磷酸化水平(p-MEK)、ERK及磷酸化水平(p-ERK)、转化生长因子β1(TGF-β1)等蛋白相对表达水平。将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组、AngⅡ组(10^(-6) mol/L)、Raf/MEK/ERK通路抑制剂(sorafenib)组(10μmoL/L)、AngⅡ+sorafenib(10^(-6) mol/L+10μmol/L)组,检测细胞形态及Raf/MEK/ERK通路相关蛋白表达。结果PDGF不同浓度处理下,细胞vimentin阳性表达随浓度升高逐渐升高,并在100~200 ng/L时上升至稳定水平,选取100 ng/L为诱导浓度。AngⅡ不同浓度处理后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,细胞呈长梭形等改变,E-cadherin表达降低(P0.05)。AngⅡ与sorafenib联合应用后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05)。与PDGF诱导组相比,AngⅡ组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达进一步升高(P<0.05),sorafenib组Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05)。AngⅡ+sorafenib组上述指标变化与AngⅡ组相反,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ可通过激活Raf/MEK/ERK通路表达,促进PDGF诱导的气道上皮细胞EMT进程。

摘要： 支气管哮喘是一类异质性疾病,发病机制主要与气道免疫–炎症、气道高反应性、气道重塑等相关。其中气道上皮屏障是呼吸道抵御外界有害物质的首要防线,发挥着化学、物理及免疫屏障的功能,是病理改变的主要部位之一。近年来已有许多研究发现哮喘患者的气道上皮屏障均受到不同程度的损害。气道上皮屏障的损伤与变应原、呼吸道感染、环境污染等因素息息相关,其中各种细胞因子、模式受体、信号通路参与其中。本篇综述主要介绍了气道上皮屏障的结构和分子组成,探讨上皮屏障功能障碍在哮喘发病机制中的作用以及简单介绍目前改善气道上皮屏障的一些治疗方法。

摘要： 目的:探讨miR-543靶向组蛋白脱乙酰酶3(HDAC3)对脂多糖(LPS)诱导的气道上皮细胞损伤的影响。方法:用50μg/ml的LPS诱导气道上皮细胞BEAS-2B,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测miR-543和HDAC3表达。流式细胞术检测细胞凋亡。ELISA试剂盒检测细胞培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量。双荧光素酶报告实验和Western blot确定miR-543对HDAC3的靶向调控关系。将miR-543模拟物、HDAC3小干扰RNA分别转染BEAS-2B细胞,检测过表达miR-543或干扰HDAC3对LPS诱导的BEAS-2B细胞损伤的影响。结果:LPS处理后BEAS-2B细胞miR-543表达降低,HDAC3表达、细胞凋亡率升高,培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.05)。过表达miR-543或干扰HDAC3表达后,LPS诱导的BEAS-2B细胞凋亡率降低,培养液上清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05)。过表达HDAC3能够逆转miR-543过表达对LPS诱导的BEAS-2B细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α水平及凋亡的影响(P<0.05)。miR-543靶向负调控HDAC3表达。结论:miR-543通过靶向HDAC3能够抑制LPS诱导的气道上皮细胞凋亡和炎症反应。

摘要： 支气管哮喘简称哮喘,是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、平滑肌细胞和气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。哮喘疾病临床上并不少见,它是一种气道高反应的典型疾病。哮喘的典型症状为发作性伴有哮鸣音的呼气性呼吸困难。症状可在数分钟内发作,持续数小时至数天,经平喘药物治疗后缓解或自行缓解。

摘要： 该研究通过活性追踪法分离枸杞活性肽(Lycium barbarum L.Bio-active Peptide,LBP),并研究其抗苯并芘(Benzopyrene,BaP)诱导的气道上皮细胞损伤活性及潜在机制。利用CCK-8法检测LBPs细胞毒性;ELISA法检测LBP-1抑制BaP诱导的人支气管上皮16-HBE细胞炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18、NO和PGE2)的分泌;Western Blot法检测LBP-1及BaP对16-HBE细胞COX-2、iNOS及NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果显示,LBP-1能显著减轻BaP暴露导致的16-HBE细胞活力降低,且浓度小于1 mmol/L时无显著细胞毒性;LBP-1降低了由BaP暴露导致的细胞炎症因子分泌增加,TNF-α、IL-1β、IL-18、IL-6、NO和PGE2的浓度分别降低了34.93%、27.41%、31.05%、35.28%、51.15%及27.46%,同时PGE2和NO的关键酶(COX-2、iNOS)的表达分别降低了81.72%及41.70%;Western Blot结果显示,LBP-1可抑制IκBα和p65的磷酸化,降低NLRP3及含有Card的凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated Speck-like Protein containing a CARD,ASC)的表达,从而抑制了NLRP3及NF-κB信号通路的激活。以上结果证实LBP-1可通过调控炎性细胞因子及NLRP3、NF-κB信号通路相关蛋白的表达发挥抗BaP诱导的气道上皮细胞炎性损伤的作用。

摘要： 气道上皮细胞是气道的结构细胞,也是机体对吸入性刺激物、变应原和病原体的第一道防御屏障.气道上皮细胞可以合成和释放多种炎性反应介质和细胞因子,激活先天性和适应性免疫细胞,促进组织的再生和环境因素损害后的修复.气道上皮细胞在气道慢性炎性疾病的发生、发展过程中起着重要作用,已成为气道慢性炎性疾病发病机制及治疗靶标的研究热点.文章对气道上皮细胞在慢性鼻窦炎、变应性鼻炎、哮喘和慢性阻塞性肺疾病中的研究进展进行综述.

摘要： 目的 探讨miR-218-5p通过靶向LIN28B调控慢性阻塞性肺疾病(COPD)时气道上皮细胞凋亡和炎症反应的作用及其机制.方法 将人肺支气管上皮细胞BEAS-2B分为正常对照(NC)组、香烟烟雾提取物(CSE)组、miR-NC+CSE组、miR-218-5p+CSE组、si-NC+CSE组、si-LIN28B+CSE组、miR-218-5p+pcDNA-NC+CSE组和miR-218-5p+pcDNA-LIN28B+CSE组.RT-qPCR检测miR-218-5p的表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素6(IL-6)和转化生长因子-β1(TGF-βl)的表达水平;蛋白质印记(Western blot)检测LIN28B、裂解的天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase-3)的表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-218-5p对LIN28B的靶向作用.结果 与NC组比较,CSE组BEAS-2B细胞miR-218-5p表达降低,细胞凋亡率、LIN28B、Cleaved-caspase-3、IL-6和TGF-β1表达显著增加(均P＜0.05).与miR-NC+CSE组比较,miR-218-5p+CSE组BEAS-2B细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、IL-6和TGF-βl表达显著降低(均P＜0.05).与si-NC+CSE组比较,si-LIN28B+CSE组BEAS-2B 细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、IL-6和TGF-β1表达显著降低(均P＜0.05).与miR-218-5p+pcDNA-NC+CSE组比较,miR-218-5p+pcDNA-LIN28B+CSE组BEAS-2B细胞细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、IL-6和TGF-β1表达显著增加(均P ＜0.05).结论 miR-218-5p通过靶向LIN28B可抑制CSE诱导的气道上皮细胞凋亡和炎症反应.因此,miR-218-5p可能是慢性阻塞性肺疾病的潜在治疗靶点.

摘要： 支气管哮喘(简称哮喘)是一种气道慢性炎症性疾病,其特征包括气道高反应性(airway hy-perresponsiveness,AHR)、嗜酸性粒细胞增多、IgE升高、杯状细胞化生和气道重塑等.气道上皮结构与功能的变化是哮喘的突出特征,哮喘气道上皮对氧化剂引起的损伤和细胞凋亡异常敏感,更易受到浸润性炎症细胞产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)的影响,ROS的蓄积和氧化应激是哮喘发病的关键环节.ROS等氧化剂会干扰上皮细胞的结构,致气道重塑;反之,气道重塑会释放炎性介质加重哮喘.线粒体的主要功能是氧化磷酸化合成ATP,也是ROS的重要来源.线粒体功能障碍包括能量代谢转换障碍、线粒体生物学功能障碍、线粒体自噬及动力学异常、线粒体依赖性信号通路障碍.线粒体功能障碍和细胞缺氧在支气管哮喘的发生发展中发挥了极其重要的作用,该文对近年来哮喘气道中气道上皮细胞的线粒体功能改变作一综述,旨在为以线粒体为靶向的哮喘治疗提供理论依据.

摘要： 气道上皮细胞是肺内环境与外界环境之间的第一道屏障,损伤修复功能是其维持屏障作用、保护内环境稳态的重要因素.目前研究认为,哮喘患者气道上皮细胞损伤修复功能下降,并导致气道炎性反应加重.气道炎性反应过程中分泌的炎性因子也会显著影响上皮细胞损伤修复功能.由于人体内损伤修复研究的局限性,人们探索出多种损伤修复模型,并利于各自的不同特点,寻找改善哮喘患者气道上皮细胞损伤修复功能的方法,为哮喘的治疗寻找新的靶点.

摘要： 目的:探讨柴朴汤含药血清对气道上皮细胞STAT6表达的影响.rn 方法:将48只雄性SD大鼠分为哮喘组、正常对照组及柴朴汤组,制备哮喘血清、正常大鼠血清及柴朴汤含药血清,将气道上皮细胞(RTE)分为哮喘组(A组)、正常对照组(B组)与柴朴汤低剂量组(C组)、柴朴汤中剂量组(D组)、柴朴汤高剂量组(E组)和空白对照组(F组).免疫细胞化学法检测STAT6的蛋白在RTE中的表达;半定量RT-PCR检测RTE中STAT6的mRNA的表达.rn 结果:HE染色显示:正常大鼠气道周围无炎性细胞浸润;哮喘大鼠肺组织支气管及血管周围有大量嗜酸性细胞、淋巴细胞浸润,部分气道上皮脱落,气道平滑肌增厚,基底膜增厚,气道壁增厚,气道管腔狭窄.免疫细胞化学蛋白半定量分析:A组STAT6蛋白的OD值较F组明显增高,B、C、D、E组OD值介于两者之间.各组STAT6的OD值分别为:A组1.35±0.08、B组1.14±0.12、C组0.60±0.08、D组0.51±0.07、E组0.44±0.07、F组0.43±0.04.A组与F组比较,差异有显著性(P＜0.05);A、F组与B组比较,差异有显著性(P＜0.05);A组与C、D、E组相比较,差异有显著性(P＜0.05);C组与D组,D组与E组比较,差异无显著性(P＞0.05);C组与E组相比差异有显著性(P＜0.05).RT-PCR半定量分析:A组STAT6 mRNA的相对灰度值较空白对照组明显增高,B、C、D、E组相对灰度值介于两者之间.各组STAT6的相对灰度值分别为:A组1.32±0.06、B组1.21±0.08、C组0.83±0.03、D组0.54±0.04、E组0.45±0.02、F组0.32±0.02.A组与F组比较,差异有显著性(P＜0.05);A、F组与B组比较,差异有显著性(P＜0.05);A组与C、D、E组相比较,差异有显著性(P＜0.05);C组与E组,C组与D组,D组与E组相比差异有显著性(P＜0.05).rn 结论:柴朴汤含药血清能抑制RTE中STAT6的表达.

摘要： 目的:评估咳喘六味合剂对RSV感染哮喘大鼠气道上皮细胞integrin/FAK信号通路的影响.rn 方法:将50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组15只.PBS组为非OVA致敏和不感染RSV的对照组.OVA/RSV组在应用OVA注射和OVA气道雾化吸入致敏后用RSV滴鼻,复制病毒感染哮喘动物模型.咳喘六味合剂低、中、高各剂量组在造模的基础上咳喘六味合剂灌胃治疗.麻醉处死动物,取大鼠气管,Pronase E和DNase I消化液分离培养气道上皮细胞,RT-PCR检测气道上皮细胞integrin αv、integrin β3及FAK mRNA的表达.rn 结果:与PBS组相比,OVA/RSV组integrin αv、integrin β3、FAKmRNA的表达明显降低(P＜0.05,P＜O.01).各治疗组中,integrin αv mRNA的表达虽较各模型组增高,但无显著性差异(P＞0.05); integrin β3、FAK mRNA的表达均增高(P＜0.01).rn 结论:咳喘六味合剂可通过调控RSV感染哮喘大鼠气道上皮细胞integrin/FAK信号通路来促进细胞的损伤修复抑制病毒感染哮喘的发生,并主要通过调控integrin β3/FAK来修复气道上皮细胞屏障功能.

摘要： 目的:应用仙地合剂治疗哮喘发作豚鼠,探讨其对气道上皮的保护作用.rn 方法:豚鼠建立哮喘模型后随机分组并给以药物治疗,2周后取材通过电子显微镜观察气道上皮和肺泡上皮细胞的超微结构改变.rn 结果:扫描电镜结果显示,正常豚鼠气管纤毛上皮细胞及表面纤毛形态无变化;造模后气管纤毛上皮排列变得不规则,表面纤毛短而少,形态发生改变;经药物治疗后,气管纤毛上皮细胞排列整齐,纤毛形态恢复正常,其中尤以强的松与仙地合剂合用者最为明显.透射电镜也观察到肺泡上皮细胞有类似改变,豚鼠造模后,肺泡上皮细胞形态结构明显发生改变;哮喘豚鼠经过各组药物治疗后,组织形态较不经药物治疗的哮喘模型组趋于正常.rn 结论:仙地合剂具有保护哮喘豚鼠气道上皮细胞的作用,说明肺肾同治、攻补兼施是治疗支气管哮喘急性发作的有效途径之一.

摘要： 呼吸道黏液是气道防御屏障的重要组成部分，但病理情况下粘液高分泌并加重气道阻塞，MUC5AC是气道中最主要的粘蛋白，细菌胞壁成分LPS是感染过程中常见的促粘蛋白表达的因素，最新研究表明，具有磷酸酶活性的抑癌蛋白，10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物蛋白(PTEN)，可以下调香烟烟雾诱导的气道上皮细胞MUC5AC的高表达，由于脂多糖(LPS)与香烟烟雾均通过EGFR－MAPK信号通路上调粘蛋白的表达，所以设想PTEN也在LPS诱导的气道上皮黏蛋白表达中具有重要作用。为此，本研究采用LPS干预NCI-H292细胞，探讨PTEN在LPS诱导的气道上皮黏蛋白表达中的意义。

摘要： 气道慢性炎症和吸烟在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的发生、发展过程中不是相互孤立的，而是相互促进、相互关联的。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，是导致气道慢性炎症的主要物质，而气道上皮细胞MAPKs信号转导通路与LPS作用效应密切相关。Laan等证实：香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract，CSE)可以抑制转录因子AP-1的活性，从而下调细菌病原体诱导的中性粒细胞趋化因子的产生，虽然可导致暂时炎症反应强度降低，但这些作用可以导致细菌的定植，局部炎症持续存在，最终引发慢性肺部疾病。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor GM-CSF)和白细胞介素8(Interleukin8，IL-8)是中性粒细胞重要的调节因子，对中性粒细胞的产生和募集起关键性的作用，是气道慢性炎症疾病的重要因子。基于此，运用免疫印迹(Western blot)方法检测原代培养人体气道上皮细胞不同分组的ERK1/2、p38及JNK磷酸化水平，同时检测下游细胞因子GM-CSF和IL-8的mRNA及表达水平，旨在探讨CSE及LPS对人体气道上皮细胞MAPKs信号转导通路的影响，从而进一步探索CSE及LPS在肺部慢性炎症机制中的作用。

摘要： 吸烟和气道慢性炎症是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的两个重要发病因素。烟草中的焦油、尼古丁和氢氰酸等化学物质，可损伤气道上皮细胞。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，又可激活巨噬细胞、趋化并激活中性粒细胞，释放蛋白酶等细胞毒性物质，从而导致黏液细胞化生形成支气管慢性炎症及肺气肿。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8mRNA水平，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8分泌量，采用LPS后GM-CSF和IL-8的mRNA和分泌量改变，旨在探讨LPS在气道炎症中的作用。

摘要： 慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一种具有气流受限特征的肺部疾病，气流受限不完全可逆，呈进行性发展，其确切的发病机制目前尚不清楚，但认为与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，是导致气道慢性炎症的主要物质，气道上皮细胞MAPKs信号传导通路与LPS作用效应密切相关，且LPS对气道上皮细胞MAPKs信号传导通路的影响迄今为止国内外研究较少，而以原代培养的人体气道上皮细胞为研究对象国内外尚未见报道。基于此，运用免疫印迹(Western blot)方法检测原代培养人体气道上皮细胞不同分组的ERK1/2、p38及JNK磷酸化水平，旨在探讨LPS对人体气道上皮细胞MAPKs信号传导通路的影响，从而进一步探索LPS在COPD发病机制中的作用。

摘要： 目的:观察脂多糖(LPS)及前炎症细胞因子IL-1β、TNF-α诱导人原代气道上皮细胞人β防御素-2(hBD-2)的表达,探索呼吸道的先天性防御病原体机制. 方法:RT-PCR法检测hBD-2mRNA的表达,Westblot和免疫组化法检测hBD-2mRNA蛋白的表达. 结果:正常人原代上皮细胞有微量hBD-2mRNA表达,不同质量浓度的LPS、IL-1β、TNF-α刺激细胞后,hBD-2mRNA表达呈剂量依赖性,与对照组差异显著.0.1μg/ml的LPS、1ng/ml的IL-1β和10ng/ml的TNF-α刺激上皮细胞3h后,细胞均可见hBD-2蛋白表达. 结论:一定剂量的LPS及前炎性细胞因子可诱导人气道上皮细胞hBD-2表达,hBD-2作为宿主气道的最初防御反应的一部分,发挥防御病原微生物的重要作用.

摘要： 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以气流受限为特征的疾病，患者气流受限不完全可逆，并呈进行性发展。COPD发病与有害颗粒和气体导致的肺部炎症反应有关。有关细菌感染在COPD病因学、发病机制和临床进程中的作用长期以来一直存在争议，近年来，绝大多数呼吸病学和感染病学专家已达成共识：感染是COPD始动的成因和加重的诱因。大量的研究证明感染性病原体是慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)最主要的原因，其中不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae，NTHi)、卡他莫拉菌和肺炎链球菌是最主要的致病菌。本文着重对NTHi在COPD中的作用以及NTHi与气道上皮细胞相互作用的分子机制作一综述。

摘要： 本实验将小菌丝片段及灭活孢子与上皮细胞系A549共培养,了解吸入性烟曲霉菌菌丝片段和灭活孢子对上皮细胞的作用以及可能的机制.

摘要： 本发明涉及可以基于从对象的气道导出的上皮细胞样本中的信号传导途径的活性的组合识别具有气道上皮的异常变化和/或处于形成气道癌的增加风险中的对象的模块和方法。信号传导途径包括选自包括以下各项的组的两个或更多个信号传导途径：TGF‑β途径、PI3K‑FOXO途径和Notch途径。

摘要： 本发明提供了一种阴道上皮细胞培养基，其包括基础培养基和添加剂；其中，所述基础培养基为无血清培养基；所述添加剂包括表皮生长因子、牛垂体提取物、胰岛素-转铁蛋白-硒、胎牛血清、青霉素-链霉素和霍乱菌素。本发明还提供了一种阴道上皮细胞培养方法。本发明的阴道上皮细胞培养基成分明确，通过该培养基培养得到的上皮细胞数量多、成纤维细胞数量少、细胞融合状态好。

摘要： 本发明涉及一种气溶胶对呼吸道上皮细胞暴露的气液界面暴露系统及其应用。所述气液界面暴露系统包括生物气溶胶发生单元、输送单元和细胞暴露单元；所述气溶胶发生单元由空气压缩机、高效空气过滤器一、质量流量控制器一、雾化器依次经聚四氟乙烯管和转接头串联组成；所述输送单元包括缓冲瓶、高效空气过滤器二、质量流量控制器二和高效空气过滤器三；所述细胞暴露单元包括干燥管、气溶胶检测仪和细胞处理模块，所述细胞处理模块包括暴露模块和尾气外排模块；所述尾气外排模块包括依次连接的高效空气过滤器四、质量流量控制器三和抽气泵，该气液界面暴露系统能够更真实的模拟气溶胶在人体肺部的呼吸暴露情况，提高了大气气溶胶呼吸暴露风险评估的准确性。

摘要： 本发明涉及人呼吸道上皮细胞病原检测领域，尤其涉及一种人呼吸道上皮细胞病原细胞学检测方法及试剂盒。本发明的方法，包括以下步骤：S1、样品获取：采集人呼吸道上皮细胞，放入细胞保存液中固定；S2、制片：手动或自动将样本添加至载样介质上；S3、孵育：采用免疫细胞化学染色技术和/或显色原位杂交技术孵育样品；S4、阳性样本判断：人工计数识别阳性细胞并输出诊断报告，或者通过计算机扫描后自动计数并输出辅助诊断报告；其克服了现有诊断手段的不足，比如核酸检测中提取样本过程中核酸的损失，提高病毒的检出率，比目前常规使用的核酸检测和CT以及其他正在开发的血清学检测产品更加敏感，特异和高效。

摘要： 本公开提供了促进多能干细胞分化成胸腺上皮细胞或胸腺上皮细胞祖细胞的方法，以及从所述方法获得的细胞，以及包含此类细胞的溶液、组合物和药物组合物。本公开还提供了将胸腺上皮细胞或胸腺上皮细胞祖细胞用于治疗和预防疾病、产生器官以及用于其他用途的方法，以及试剂盒。

摘要： 本发明提供了用于将外源基因导入气道上皮细胞的重组仙台病毒载体，以及利用该载体导入外源基因的方法。所述重组仙台病毒载体能通过与被粘液覆盖的自然状态的气道上皮细胞短暂的接触而将基因有效转移至这些细胞中。此外，所述载体不仅能将基因导入最表层，还可导入至主要表达CFTR的粘膜下腺体中。由此可知所述载体可用于CF(CFTR-缺陷型疾病)的基因治疗。

摘要： 本发明公开了一种治疗支气管哮喘的人体气道上皮细胞的培养方法，属于生物技术领域。本发明首先取人体气管消化收集气道上皮细胞，并用异丙醇溶液洗净放入培养皿中去污，之后采用消化法进行消化后收集消化液，随后将消化液进行离心处理，取上清液并加入胎牛血清和ACDE培养基混合后再次离心处理，得人体起到皮肤细胞培养基，最后将人体气道上皮肤细胞培养基接种在培养板上，培养后得一种治疗支气管哮喘的人体气道上皮细胞。本实例证明，本发明不仅操作简单易行，操作过程中不会有任何污染，而且不会损伤细胞，使得细胞存活率达到90％以上。

摘要： 本发明公开了一种简便快速诱导纤毛分化的气道上皮细胞培养方法，该方法包括从哺乳动物体内分离气道组织、气道组织漂洗、气道组织纵向剪切分离成为气道环、环状气道组织平铺于培养器皿中、培养器皿置于37摄氏度培养箱中培养。本发明采用的技术方法简便快捷，简化了操作流程，缩短了培养周期，同时保证了培养的细胞均能够大量分化纤毛，且一次培养过程可以得到大量的细胞供研究或其它所需。

摘要： 本发明提供一种人原代气道上皮细胞的培养方法，通过清除气道脂肪及纤维组织，切成小块贴在预铺有IV胎盘胶原的24孔培养板中，加入150μl BMGM培养基，待上皮细胞从组织块边缘爬出，密度达70％时将组织块移至新的预铺IV胶原的孔内继续培养，重复5?8次，至细胞增殖80?90％丰度时，用胰酶?EDTA消化；采用差异贴壁法去除成纤维细胞后，加入BEGM培养基重悬上皮细胞，接种于新的预铺IV胎盘胶原的培养皿中，传代比例不大于1:3，每3天换液1次，即完成细胞培养。本发明培养方法设计合理，结果稳定，重复性好，培养的细胞形态均一，生长良好，且具有典型的气道上皮细胞细胞的形态及特点。

摘要： 本发明公开了一种大鼠原代气道上皮细胞的培养方法，包括以下步骤：(1)大鼠气道组织细胞消化；(2)收集大鼠气道上皮细胞：收集步骤(1)消化处理后的消化液以及清洗的大鼠气道内壁的基础培养基，经离心获得大鼠气道上皮细胞；(3)将步骤(2)中收集所得的大鼠气道组织细胞置于铺有胶原蛋白的培养皿中，在37°C、5％CO