GM-CSF

摘要： 目的探究孟鲁司特钠联合阿奇霉素对小儿支原体肺炎白介素水平及血清可溶性B7-H3(sB7-H3)、γ干扰素(IFN-γ)、粒细胞巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)表达的影响。方法选取本院2019年12月至2020年12月收治的80例小儿支原体肺炎患者作为研究对象,随机分为研究组与对照组,每组40例。对照组给予阿奇霉素治疗,研究组在对照组基础上联合孟鲁司特纳治疗。比较两组白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)水平及血清sB7-H3、IFN-γ、GM-CSF水平变化。结果治疗前,两组IL-4、IL-6、IL-8、IL-10水平比较差异无统计学意义;治疗后,两组IL-4、IL-6、IL-8、IL-10水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清sB7-H3、IFN-γ、GM-CSF均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论孟鲁司特钠联合阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎效果显著,能有效改善患者肺功能,缓解炎症症状,值得临床推广应用。

摘要： 肝损伤(liver injury)是指基因遗传或外部原因诱发的肝脏功能异常性疾病。临床表现为食欲不振、乏力、恶心、黄疸、疲乏等,严重者将出现肝功能衰竭,致死风险极高。在交通肇事、暴力犯罪及意外事件中,肝由于体积大、位置固定、质地脆弱、血运丰富等原因,往往是最容易发生损伤的器官之一,肝损伤后的死亡率可高达10.5%~25%;。随着时间的变化,肝损伤的程度、病理改变、GM-CSF等相关细胞因子及CBS等相关酶的表达水平也会进一步变化。肝损伤后,由于肝内部环境稳态的破坏,器官的状态、结构、各种蛋白的转录水平、蛋白及细胞因子的表达变化水平也会发生一定程度的改变。因此定性定量地分析这些变化,找到时间相关性强的特异性指标,对于指导法医学的实践具有重要的作用。因此在法医学鉴定中,通过肝脏损伤及病变程度的改变,明确肝损伤病变与死亡时间的关系有利于判断事件或案件性质,并有助于进一步对责任方的认定。

摘要： 肺泡蛋白沉积症(pulmonary alveolar proteinosis,PAP)是一种罕见肺部疾病,最早于1958年由Rosen和Castleman首次报道[1]。主要因肺泡腔及终末呼吸性细支气管内表面活性物质异常沉积导致气体交换障碍,最终导致呼吸衰竭[2-3]。该病起病隐匿,发病率低,100万人中的发病率不到0.0005‰[4]。临床主要表现为进行性呼吸困难、咳嗽和低氧血症。由于临床表现缺乏特异性,容易漏诊或误诊。CT上呈典型“地图”或“铺路石”样改变,肺泡灌洗液呈现特征性外观以及涂片经PAS染色阳性可以确诊[5]。现将浙江大学医学院附属杭州市胸科医院1例确诊为PAP的患者分别就其临床表现、影像学改变、病理特征及治疗预后进行分析,并结合相关文献复习以提高对该病的认识。

摘要： 目的研究关节镜下小切口联合补阳还五汤对肩袖损伤患者的治疗效果。方法选取2020年1月至2021年1月在浙江中医药大学第二临床医学院就诊的肩袖损伤患者80例,随机分为对照组40例,联合组40例。对照组患者给予关节镜下小切口修补术和依托考昔治疗,联合组在对照组的基础上给予补阳还五汤治疗。比较两组的GM-CSF水平、肩关节外旋、外展、内旋活动度、VAS评分及治疗总有效率。结果联合组手术后GM-CSF水平低于对照组(P<0.05)。联合组患者肩关节外旋、外展、内旋活动度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组手术后AESE、UCLA、Constant-Murely评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后两组患者VAS评分均低于术前(P<0.05);联合组手术后VAS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论关节镜下小切口联合补阳还五汤能够有效降低患者的GM-CSF水平,提高治疗有效率,促进患者恢复。

摘要： 为探究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和大肠杆菌鞭毛蛋白(FliC)对口蹄疫(FMD)灭活疫苗免疫效果的影响,通过大肠杆菌表达系统成功表达了重组猪GM-CSF蛋白和重组FliC蛋白,之后进行了重组蛋白的纯化与复性。将制备好的重组蛋白与口蹄疫灭活疫苗混合后免疫小鼠,免疫后第4、7、10、14天采集小鼠血清,用间接ELISA检测VP1结构蛋白抗体水平,第14天无菌分离小鼠脾用qPCR检测脾细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的相对表达量。ELISA检测结果表明,免疫后第7、10、14天,GM-CSF佐剂组和FliC佐剂组的抗体水平明显高于FMD疫苗组,复合佐剂的抗体水平高于FMD疫苗组和其他佐剂组。q PCR结果显示,GM-CSF佐剂组、FliC佐剂组与复合佐剂组中IL-2、IL-4、IL-10的相对表达量显著高于疫苗组和PBS组。由此可见,重组FliC蛋白和重组猪GM-CSF蛋白可以提高FMD灭活疫苗的免疫应答水平,且重组蛋白联合使用的效果更佳。

摘要： 全世界范围内大肠癌的发病率及死亡率均不断提升,综合治疗目前为大肠癌治疗的主要方法,免疫治疗逐渐成为其中重要的一环。随着对大肠癌免疫机制的不断探究,免疫佐剂在免疫治疗中扮演着重要的辅助作用。粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子作为一种强效免疫佐剂,不仅提高了大肠癌的免疫治疗效果,并且极大地丰富了治疗大肠癌的各种方案。因此,本文就大肠癌的治疗现状、GM-CSF作为免疫佐剂的相关作用机制以及GM-CSF在大肠癌治疗中的应用现状和进展进行综述,希望为大肠癌患者提高治疗效果、延长生存期提供更多方案。

摘要： 目的:探讨类风湿性关节炎(RA)患者血清GM-CSF含量检测及其与炎性介质、抗体水平的相关性。方法:收集2018年9月-2021年2月在本院接受住院治疗的类风湿性关节炎患者98例作为观察组,另选取同期在本院进行体检的健康志愿者50例作为正常对照组。检测两组对象血清中粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、炎症介质、抗体等水平,进一步采用Pearson检验判断RA患者血清中GM-CSF的含量与炎症介质、抗体水平的相关性。结果:入院即刻,观察组患者血清中GM-CSF的含量显著高于正常对照组;血清中炎症介质IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22的含量均显著高于正常对照组;血清中抗RA33抗体、抗CCP抗体、AKA的水平均显著高于正常对照组(P<0.05)。经Pearson检验发现,RA患者血清中GM-CSF的含量与炎症介质、抗体水平直接相关。结论:RA患者血清GM-CSF含量异常增高,且其增高程度与机体炎症反应程度、抗体水平异常程度直接相关,可作为早期诊断RA并判断病情严重程度的可靠指标。

摘要： 目的:分析支原体肺炎患儿应用C反应蛋白(CRP)、干扰素-γ(IFN-γ)、粒细胞单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)检查的效果,以及和病情严重程度的相关性。方法:选取2019年12月—2021年11月在本院接受治疗的60例支原体肺炎患儿作为支原体肺炎组,同期体检的健康儿童30例纳入参照组,所有患儿均进行CRP、IFN-γ、GM-CSF检查,对比两组CRP、IFN-γ、GM-CSF;分析不同病情与不同累及肺段的支原体肺炎患儿的CRP、IFN-γ、GM-CSF水平与小儿危重病例评分(PCIS);并分析重症组、累及>2/3肺段支原体肺炎患儿的PCIS评分和CRP、IFN-γ、GM-CSF的相关性。结果:支原体肺炎组的CRP、IFN-γ、GM-CSF均高于参照组,差异具有统计学意义(P2/3肺段支原体肺炎患儿CRP、IFN-γ、GM-CSF均高于累及1/3~2/3肺段和累及2/3肺段支原体肺炎患儿的PCIS评分和CRP、IFN-γ、GM-CSF水平呈负相关性。结论:支原体肺炎患儿CRP、IFN-γ、GM-CSF水平高于健康儿童,累及肺段越多则CRP、IFN-γ、GM-CSF水平越高,且和患儿病情的严重程度呈正相关。

摘要： 目的:探讨红景天苷(Sal)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)炎症因子的作用。方法:将36只SD大鼠随机分成6组,分别为生理盐水对照组(NS组)、5 mg/kg LPS损伤组(LPS组)、不同浓度的Sal处理组(10 mg/mL、40 mg/mL、80 mg/mL)、阳性对照组(5 mg/kg地塞米松组(DEX组)),每组6只。大鼠腹腔注射LPS构建急性肺损伤模型。造模6 h后观察大鼠一般活动状况,然后处死大鼠;取右下肺叶计算肺湿重和干重质量比值变化(W/D);右肺上叶做组织匀浆,其余肺组织放在−80度冰箱冻存备用;BCA法测定肺组织中的总蛋白含量;酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α、IL-6、GM-CSF、ACE2的含量。结果:Sal处理后的大鼠一般活动状况明显改善;Sal处理后的大鼠肺W/D比值相比LPS组明显降低(P < 0.05);Sal处理后的大鼠总蛋白含量的水平相比LPS组明显降低(P < 0.05);Sal处理后的大鼠相比LPS组肺组织炎症因子(TNF-α、IL-6、GM-CSF)含量明显降低(P < 0.01);Sal处理后的大鼠相比LPS组肺组织中ACE2的含量升高(P < 0.01)。结论:Sal通过抑制炎症因子的产生和提高ACE2的含量而对ALI具有治疗作用。

摘要： 目的 观察皂芥二陈汤联合来氟米特治疗痰瘀痹阻证类风湿关节炎的疗效及对血清白细胞介素-33(IL-33)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、中性粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平的影响.方法 选择武汉市第一医院2018年1月—2019年6月收治的120例类风湿关节炎患者,随机分为对照组和观察组各60例.对照组患者给予来氟米特片口服,观察组患者在对照组基础上给予皂芥二陈汤内服,2组均以4周为1个疗程,连续治疗3个疗程.观察2组患者治疗前后晨僵时间、压痛关节数、肿胀关节数、痛感程度、疾病活动性(DAS28)评分、凝血功能指标、血清中相关因子水平的变化,评价治疗效果及用药的安全性.结果 与治疗前比较,2组治疗后晨僵时间明显缩短,压痛关节数、肿胀关节数明显减少(P均0.05),血浆纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)水平明显降低(P均<0.05),且观察组FIB、DD水平显著低于对照组(P均<0.05).与治疗前比较,2组患者治疗后血清中红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)、白细胞介素-33(IL-33)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、中性粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平均明显降低(P均<0.05),且观察组显著低于对照组(P均<0.05).观察组总有效率为93％(52/56),显著高于对照组的73％(41/56)(P<0.05);观察组患者不良反应率为7％(4/56),显著低于对照组的14％(8/56)(P<0.05).结论 皂芥二陈汤联合来氟米特利于缓解痰瘀痹阻证类风湿关节炎患者的临床症状,改善患者的凝血功能异常,控制病情进展,可能与下调血清中IL-33、BMP-2、GM-CSF水平以减轻炎症损伤、调控骨重建过程有一定相关性,且用药安全性高.

摘要： 肺部感染是呼吸系统常见病，重症肺部感染常迅速出现呼吸衰竭，需要机械通气治疗。此类患者常面临着感染控制困难，易发生呼吸机相关肺炎及治疗费用高等问题。粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating facto，GM-CSF)是维持和调节中性粒细胞、肺泡巨噬细胞数量及功能的重要细胞因子。GM-CSF具有较强的保护肺泡上皮细胞及限制其死亡的作用。目前，临床应用GM-CSF主要在于治疗各种原因所导致的粒细胞减少。基于此，本试验通过在重症肺部感染患者机械通气时应用GM-CSF，探讨其在此类病情中的作用及临床意义。

摘要： 肺部感染是呼吸系统常见病，重症肺部感染常迅速出现呼吸衰竭，需要机械通气治疗。此类患者常面临着感染控制困难，易发生呼吸机相关肺炎及治疗费用高等问题。粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating facto，GM-CSF)是维持和调节中性粒细胞、肺泡巨噬细胞数量及功能的重要细胞因子。GM-CSF具有较强的保护肺泡上皮细胞及限制其死亡的作用。目前，临床应用GM-CSF主要在于治疗各种原因所导致的粒细胞减少。基于此，本试验通过在重症肺部感染患者机械通气时应用GM-CSF，探讨其在此类病情中的作用及临床意义。

摘要： 肺部感染是呼吸系统常见病，重症肺部感染常迅速出现呼吸衰竭，需要机械通气治疗。此类患者常面临着感染控制困难，易发生呼吸机相关肺炎及治疗费用高等问题。粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating facto，GM-CSF)是维持和调节中性粒细胞、肺泡巨噬细胞数量及功能的重要细胞因子。GM-CSF具有较强的保护肺泡上皮细胞及限制其死亡的作用。目前，临床应用GM-CSF主要在于治疗各种原因所导致的粒细胞减少。基于此，本试验通过在重症肺部感染患者机械通气时应用GM-CSF，探讨其在此类病情中的作用及临床意义。

摘要： 肺部感染是呼吸系统常见病，重症肺部感染常迅速出现呼吸衰竭，需要机械通气治疗。此类患者常面临着感染控制困难，易发生呼吸机相关肺炎及治疗费用高等问题。粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulating facto，GM-CSF)是维持和调节中性粒细胞、肺泡巨噬细胞数量及功能的重要细胞因子。GM-CSF具有较强的保护肺泡上皮细胞及限制其死亡的作用。目前，临床应用GM-CSF主要在于治疗各种原因所导致的粒细胞减少。基于此，本试验通过在重症肺部感染患者机械通气时应用GM-CSF，探讨其在此类病情中的作用及临床意义。

摘要： 吸烟和气道慢性炎症是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的两个重要发病因素。烟草中的焦油、尼古丁和氢氰酸等化学物质，可损伤气道上皮细胞。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，又可激活巨噬细胞、趋化并激活中性粒细胞，释放蛋白酶等细胞毒性物质，从而导致黏液细胞化生形成支气管慢性炎症及肺气肿。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8mRNA水平，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8分泌量，采用LPS后GM-CSF和IL-8的mRNA和分泌量改变，旨在探讨LPS在气道炎症中的作用。

摘要： 吸烟和气道慢性炎症是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的两个重要发病因素。烟草中的焦油、尼古丁和氢氰酸等化学物质，可损伤气道上皮细胞。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，又可激活巨噬细胞、趋化并激活中性粒细胞，释放蛋白酶等细胞毒性物质，从而导致黏液细胞化生形成支气管慢性炎症及肺气肿。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8mRNA水平，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8分泌量，采用LPS后GM-CSF和IL-8的mRNA和分泌量改变，旨在探讨LPS在气道炎症中的作用。

摘要： 吸烟和气道慢性炎症是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的两个重要发病因素。烟草中的焦油、尼古丁和氢氰酸等化学物质，可损伤气道上皮细胞。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，又可激活巨噬细胞、趋化并激活中性粒细胞，释放蛋白酶等细胞毒性物质，从而导致黏液细胞化生形成支气管慢性炎症及肺气肿。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8mRNA水平，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8分泌量，采用LPS后GM-CSF和IL-8的mRNA和分泌量改变，旨在探讨LPS在气道炎症中的作用。

摘要： 吸烟和气道慢性炎症是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的两个重要发病因素。烟草中的焦油、尼古丁和氢氰酸等化学物质，可损伤气道上皮细胞。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，又可激活巨噬细胞、趋化并激活中性粒细胞，释放蛋白酶等细胞毒性物质，从而导致黏液细胞化生形成支气管慢性炎症及肺气肿。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8mRNA水平，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8分泌量，采用LPS后GM-CSF和IL-8的mRNA和分泌量改变，旨在探讨LPS在气道炎症中的作用。

摘要： 吸烟和气道慢性炎症是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的两个重要发病因素。烟草中的焦油、尼古丁和氢氰酸等化学物质，可损伤气道上皮细胞。细菌脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)为革兰阴性菌的外层结构，可直接引起呼吸道上皮损伤，又可激活巨噬细胞、趋化并激活中性粒细胞，释放蛋白酶等细胞毒性物质，从而导致黏液细胞化生形成支气管慢性炎症及肺气肿。本实验采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8mRNA水平，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测原代培养人体气道上皮细胞GM-CSF和IL-8分泌量，采用LPS后GM-CSF和IL-8的mRNA和分泌量改变，旨在探讨LPS在气道炎症中的作用。

摘要： 40只小鼠分为4组,分别注射抑制素质粒pCISI、pCISI+细菌DNA、pCISI+pGM-CSF和生理盐水.免疫剂量为20μg,2周后加强免疫一次,佐剂按等量混合.结果细菌DNA佐剂组诱导77.8％(7/9)的个体产生了抑制素阳性抗体,产生的抗体以IgG2α型为主,GM-CSF佐剂组产生的抗体以IgG1型为主;基因佐剂联合抑制素基因免疫激发的淋巴细胞增殖能力显著高于抑制素基因单独免疫组(P＜0.05);细菌DNA佐剂组阳性鼠的动情期血浆雌二醇高于阴性鼠(P＜0.05),免疫对动情期孕酮水平无显著影响(P＞0.05).这些结果表明,细菌DNA和GM-CSF能增强抑制素基因免疫的作用效果.

摘要： 本发明涉及一种重组马GMCSF的制备方法，将经过密码子优化的编码马GMCSF的核苷酸序列构建入原核细胞诱导表达载体中，然后转入原核细胞进行培养后诱导表达，并进行纯化，从而获得重组马GMCSF，较佳地，原核细胞诱导表达载体是非分泌表达载体，在诱导表达后，裂解培养得到的原核细胞，断裂DNA和分离包涵体，包涵体中含有重组马GMCSF，将包涵体溶于变性缓冲液得到变性溶液，然后使变性溶液中的蛋白复性得到复性溶液，再进行纯化，重组马GMCSF最好带有标签，采用相关亲和层析柱层析纯化，本发明设计巧妙，从而可以高表达、高纯度地获得具有生物学活性的重组马GMCSF，进而可以作为免疫马匹时的佐剂，以增强动物的免疫反应，提高抗体的滴度，适于大规模推广应用。

摘要： 新型支链PEG-GCSF和PEG-GMCSF结合物，其特征是：它们分别是分子量为10000-60000道尔顿的聚乙二醇(PEG)修饰的GCSF和GMCSF，具有如下结构式，式中，mPEG是聚乙二醇链，W是一种粒细胞集落刺激因子(GCSF)或粒巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)。本发明的PEG-GCSF和PEG-GMCSF结合物的抗病毒活性高，在体内保留时间长，血浆半衰期达到40～100小时。

摘要： 本发明涉及一种重组马GMCSF的制备方法，将经过密码子优化的编码马GMCSF的核苷酸序列构建入原核细胞诱导表达载体中，然后转入原核细胞进行培养后诱导表达，并进行纯化，从而获得重组马GMCSF，较佳地，原核细胞诱导表达载体是非分泌表达载体，在诱导表达后，裂解培养得到的原核细胞，断裂DNA和分离包涵体，包涵体中含有重组马GMCSF，将包涵体溶于变性缓冲液得到变性溶液，然后使变性溶液中的蛋白复性得到复性溶液，再进行纯化，重组马GMCSF最好带有标签，采用相关亲和层析柱层析纯化，本发明设计巧妙，从而可以高表达、高纯度地获得具有生物学活性的重组马GMCSF，进而可以作为免疫马匹时的佐剂，以增强动物的免疫反应，提高抗体的滴度，适于大规模推广应用。

摘要： 本发明公开的是一种携带有猪GMCSF分子佐剂的猪支原体肺炎基因工程亚单位疫苗制备方法及其应用，采用杆状病毒表达系统表达猪肺炎支原体P97R1、P46和P42嵌合抗原蛋白(P97R1P46P42)，以及融合了分子佐剂GMCSF的重组抗原蛋白(P97R1P46P42‑GMCSF)，其中融合了分子佐剂的重组蛋白可以诱导产生更高的的体液免疫和细胞免疫水平，所以，GMCSF可以作为猪肺炎支原体相关疫苗产品的佐剂或免疫增强剂，有望为养猪业提供安全有效且操作简便的疫苗产品。

摘要： 本发明公开了一种EGFRvIII‑PDL1‑GMCSF肿瘤疫苗及其制备方法和应用，其中，EGFRvIII‑PDL1‑GMCSF肿瘤疫苗中的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的融合蛋白可与DC负载作为肿瘤疫苗可以提高肿瘤特异性抗原的免疫原性，抗肿瘤免疫耐受性，抗肿瘤免疫逃逸，为高度表达PD‑L1的肿瘤免疫治疗提供了一种新的有效策略，具有良好的安全性和可观的前景，同时也促进以EGFRvIII为靶点的药物开发，为癌症的治疗带来了新的希望。

摘要： 本发明公开了一种IL7‑Fc‑GMCSF融合蛋白及其应用，所述融合蛋白为二聚体蛋白，包括二聚化的第一条多肽链和第二条多肽链，第一条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，第二条多肽链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过IL7和GMCSF刺激外周血淋巴细胞增殖的作用进行外周血淋巴细胞的体外培养。

摘要： 本发明涉及一种猪CD40L/GMCSF/PCV2 Cap重组腺病毒的构建、扩增及纯化方法，步骤如下：S1依次将CD40L、GM‑CSF和Cap连接到载体pUC57，命名为pUC‑CD40L‑Cap‑GMCSF；S2将CD40L、Cap和GM‑CSF连到pShuttle‑CMV，转化DH5a，挑菌、摇菌、提质粒，命名为PS‑CD40L‑Cap‑GMCSF；S3将构建好的PS‑CD40L‑Cap‑GMCSF线性化后与骨架质粒pAdEasy‑1电转BJ5183，挑菌、摇菌、提质粒，单酶切鉴定；S4鉴定正确后使用试剂盒提取质粒，转染HEK293A细胞，当细胞病变出现时，收细胞，离心后将沉淀重悬于高压灭菌PBS；S5反复冻融后，离心取上清，此病毒即为重组腺病毒；S6将得到的重组腺病毒进行扩增；S7纯化重组腺病毒。本发明首次将猪肿瘤坏死因子相关激活蛋白基因和猪粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子基因同时加入到腺病毒载体中提高表达PCV2 Cap重组腺病毒免疫原性。

摘要： 本发明涉及重组病毒疫苗领域，本发明公开了一种含有编码犬粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的基因的重组犬瘟热病毒，更具体地，重组犬瘟热病毒是rCDV-GMCSF。本发明还公开了该重组犬瘟热病毒的制备方法。本发明运用反向遗传学操作技术，将犬GMCSF基因插入犬瘟热病毒的基因组内，构建了含有犬GMCSF基因的重组基因组全长cDNA克隆pCI-CDV-GMCSF，经RT-PCR、间接免疫荧光试验、电镜观察证实成功救获了表达GMCSF蛋白的重组犬瘟热病毒rCDV-GMCSF，且该重组犬瘟热病毒的生长滴度与野生型犬瘟热病毒无明显差异，为进一步研究GMCSF作为佐剂应用于犬瘟热弱毒疫苗株的免疫奠定了物质基础。

摘要： 新型支链PEG－GCSF和PEG－GMCSF结合物，其特征是：它们分别是分子量为10000－60000道尔顿的聚乙二醇(PEG)修饰的GCSF和GMCSF，具有如下结构式，式中，mPEG是聚乙二醇链，W是一种粒细胞集落刺激因子(GCSF)或粒巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)。本发明的PEG－GCSF和PEG－GMCSF结合物的抗病毒活性高，在体内保留时间长，血浆半衰期达到40～100小时。