上皮型钙黏蛋白

摘要： 目的探讨二磷酸腺苷核糖基化因子6(ARF6)对甲状腺乳头状癌细胞B-CPAP增殖和转移的影响及相关机制。方法在B-CPAP细胞中构建ARF6沉默细胞系及瞬时转染外源3×Flag-ARF6;利用EdU、CCK-8实验检测ARF6对B-CPAP细胞增殖的影响;利用Transwell实验检测ARF6对B-CPAP细胞转移的影响;利用蛋白质印迹法(Westernblotting)检测沉默及过表达ARF6对细胞外调节激酶1/2(ERK1/2)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达的影响。结果与对照组相比,沉默ARF6后B-CPAP细胞的增殖、侵袭和迁移的能力明显下降[ARF6沉默组及其对照组EdU阳性细胞的比例分别为(33.75±1.50)%和(39.65±2.21)%,第5天OD值分别为(0.66±0.03)和(0.83±0.03),细胞侵袭数量分别为(614.66±18.52)和(898.34±38.94)个,细胞迁移数量分别为(588.67±18.02)和(922.32±34.91)个,均P<0.05]。与对照组相比,过表达ARF6后B-CPAP细胞的增殖、侵袭和迁移的能力明显提升[ARF6过表达组及其对照组EdU阳性细胞的比例分别为(46.53±4.09)%和(36.89±2.27)%,第5天OD值分别为(1.06±0.03)和(0.81±0.02),细胞侵袭数量分别为(943.68±24.69)和(758.42±10.78)个,细胞迁移数量分别为(974.68±23.68)和(726.32±27.04)个,均P<0.05]。沉默ARF6可上调B-CPAP细胞中p-ERK1/2和MMP-9的表达、下调E-cadherin的表达,过表达ARF6时则相反,均P<0.05。结论ARF6可能通过调控p-ERK1/2、MMP-9及E-cadherin的蛋白表达,从而促进甲状腺乳头状癌细胞B-CPAP的增殖和转移。

摘要： 目的探讨血清上皮型钙黏蛋白(E-Cad)、胃泌素-17(G-17)水平和肿瘤组织中人类表皮生长因子受体2(HER-2)表达与胃癌患者术后复发风险的相关性。方法选取行胃癌根治术治疗的胃癌患者92例,检测术前血清E-Cad、G-17水平和肿瘤组织HER-2的表达。对所有患者随访5年,以胃癌复发或随访满5年为随访终点。以胃良性病变患者92例作为对照组。收集所有胃癌患者的临床资料(性别、年龄、临床分期、分化程度、复发情况等)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标判断胃癌复发的效能。采用Cox回归分析评估影响胃癌患者复发的危险因素。采用Kaplan-Meier生存曲线评估胃癌患者的5年复发情况。结果胃癌组血清G-17水平和肿瘤组织HER-2阳性率均显著高于对照组(P=0.000),血清E-Cad水平显著低于对照组(P=0.000)。血清E-Cad、G-17水平及肿瘤组织HER-2阳性率与胃癌的TNM分期、分化情况及是否复发有关(P0.05)。ROC曲线分析结果显示,E-Cad、G-17、HER-2单项检测与联合检测判断胃癌复发的曲线下面积(AUC)分别为0.775、0.822、0.603、0.950。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,胃癌复发患者E-Cad低表达组复发率高于高表达组(P<0.05),而G-17低表达组、HER-2低表达组复发率低于G-17高表达组、HER-2高表达组(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,E-Cad水平降低、G-17水平升高、HER-2表达升高均是胃癌复发的危险因素[风险比(HR)分别为0.835、1.568、3.981,95%可信区间(CI)分别为0.767~0.909、1.292~1.904、1.504~10.538]。结论E-Cad、G-17、HER-2在预测胃癌患者根治术后复发中均有重要价值。

摘要： 目的 探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)和上皮型钙黏蛋白(E-Cad)在乳腺癌组织中的表达及其在患者预后评估中的价值。方法 收集80例乳腺癌患者的癌组织样本及对应的癌旁组织(距癌组织≤3 cm)样本。采用免疫组化法和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测癌组织和癌旁组织中ZEB2和E-Cad蛋白及mRNA的表达。收集所有患者的临床病历资料。对所有患者随访5年,记录生存情况。采用Kaplan-Meier生存曲线分析ZEB2、E-Cad表达与乳腺癌患者生存率之间的关系。采用Cox比例风险模型分析乳腺癌患者5年生存率的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ZEB2和E-Cad判断乳腺癌预后的效能。结果 癌组织ZEB2阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05),E-Cad阳性率显著低于癌旁组织(P<0.05)。乳腺癌组织ZEB2表达与E-Cad表达呈负相关(r=-0.265,P=0.018)。癌组织ZEB2 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.05),E-Cad mRNA相对表达量显著低于癌旁组织(P<0.05)。ZEB2表达与肿瘤直径、淋巴结转移、TNM分期、人表皮生长因子受体2(HER-2)表达有关(P<0.05),E-Cad表达与淋巴结转移、TNM分期、雌激素受体(ER)表达、孕激素受体(PR)表达、HER-2表达有关(P<0.05)。癌组织ZEB2阴性乳腺癌患者的5年总生存率显著高于阳性患者(P<0.05),E-Cad阳性乳腺癌患者的5年总生存率高于阴性患者(P<0.05)。Cox比例风险模型分析结果显示,淋巴结转移、TNM分期、ZEB2表达、E-Cad表达是影响乳腺癌患者预后的因素[风险比(HR)分别为3.47、6.49、2.35、0.15]。ROC曲线分析结果显示,ZEB2、E-Cad单项检测和联合检测判断乳腺癌患者5年生存的曲线下面积分别为0.618、0.638、0.827。结论 乳腺癌组织ZEB2和E-Cad蛋白表达异常,或可作为乳腺癌预后评估的指标。

摘要： 目的 分析上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、环氧化酶-2(COX-2)及抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)与原发性骨巨细胞瘤患者复发的关系.方法 选取2018年1月至2018年12月本院病理科65例原发性骨巨细胞瘤患者的肿瘤组织及肿瘤旁正常骨组织分别作为癌组织组、癌旁正常组织组,另选取同期在本院体检的73例健康者设为对照组.比较各组E-cadherin、COX-2及TRACP5b的表达,分析E-cadherin、COX-2及TRACP5b与原发性骨巨细胞瘤患者各病理参数的相关性,采用多元Logistic回归分析影响原发性骨巨细胞瘤患者复发的危险因素.结果 E-cadherin及COX-2在癌组织中阳性表达率显著高于癌旁正常组织,原发性骨巨细胞瘤患者TRACP5b水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).肿瘤越大、临床分期及Jaffe分级越高的原发性骨巨细胞瘤患者其TRACP5b、E-cadherin及COX-2蛋白的阳性表达率均越高(P<0.05).患者复发率为32.30％(21/65).肿瘤≥5 cm、JaffeⅢ级、手术方式:单纯刮除、E-cadherin蛋白阳性、COX-2蛋白阳性、TRACP5b水平异常升高者复发率高(P<0.05).Jaffe分级为Ⅲ级、手术方式为单纯刮除、E-cadherin蛋白阳性、COX-2蛋白阳性、TRACP5b水平异常升高为影响原发性骨巨细胞瘤患者复发的危险因素(P<0.05).结论 E-cadherin、COX-2蛋白及TRACP5b水平在原发性骨巨细胞瘤患者中呈高表达状态,且其水平变化与患者复发密切相关,临床上检测其水平对监测患者复发具有重要意义.

摘要： 目的:分析错配修复(MMR)蛋白缺失型子宫内膜癌患者临床病理特征与上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)表达之间的相关性.方法:选择2016年1月至2018年6月在宁夏医科大学总医院手术治疗,术后病理确诊为子宫内膜癌伴MMR缺失即MMR(-)的子宫内膜癌患者40例,另选择同期MMR表达正常即MMR(+)的子宫内膜癌患者40例为对照组,E-cadherin、N-cadherin单克隆抗体行石蜡组织切片免疫组化染色,对比性分析其表达与临床病理特征的相关性.结果:MMR(-)型与MMR(+)型子宫内膜癌对比,在年龄、子宫肌层浸润深度、肿瘤累及子宫下段、阴道断端及宫旁软组织浸润、淋巴结转移中,差异无统计学意义(P＞0.05),在病理类型、国际妇产科联盟(Federation of Obstetrics and Gynaecology,FIGO)分期、组织学分化程度和淋巴脉管浸润(lymph-vascular space invasion,LVSI)中,差异有统计学意义(P＜0.05);MMR(-)型子宫内膜癌组织中,E-cadherin阳性率、总染色强度、阳性细胞数均低于MMR(+)型,而N-cadherin表达呈相反趋势,差异有统计学意义(P＜0.01);MMR(-)型子宫内膜癌组织中,E-cadherin、N-cadherin表达呈负相关(r=-0.678,P＜0.01).结论:MMR(-)型子宫内膜癌与MMR(+)型子宫内膜癌组织E-cadherin/N-cadherin表达趋势不同,具有不同的上皮间质转化水平,可能导致临床病理特征差异的形成.

摘要： 目的 研究苦参碱对肝癌细胞侵袭迁移能力及上皮型钙黏蛋白(E-cad-herin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达的影响.方法 体外培养肝癌SMMC-7721细胞,取对数期肝癌SMMC-7721细胞分为低、中、高剂量实验组及对照组,分别以0.25,0.50,1.00 mg·mL-1苦参碱与等量生理盐水处理,各组均干预12,24,48 h.用Transwell小室实验及Wound Healing法分别检测肝癌SMMC-7721细胞侵袭与迁移能力;用噻唑蓝(MTT)法检测肝癌SMMC-7721细胞增殖情况;用蛋白质印迹(Wb)法检测肝癌SMMC-7721细胞E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达水平.结果 干预48 h时,对照组与低、中、高剂量实验组肝癌SMMC-7721细胞侵袭率分别为(70.02±3.41)％,(55.37±2.98)％,(32.51±3.43)％,(16.93±4.21)％;划痕愈合率分别为(60.22±3.89)％,(48.56±4.35)％,(29.64±3.96)％,(13.02±4.11)％.随苦参碱作用浓度增大,低、中、高剂量实验组肝癌SMMC-7721细胞增殖抑制率逐渐升高(P<0.05);与对照组比较,低、中、高剂量实验组肝癌SMMC-7721细胞侵袭率、划痕愈合率及N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量均显著降低,而E-cadherin蛋白相对表达量显著升高,且均呈剂量依赖性(均P<0.05).结论 苦参碱可有效抑制肝癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与下调肝癌SMMC-7721细胞N-cadherin、Vimentin蛋白表达,同时上调E-cadherin蛋白表达相关.

摘要： 目的 探讨宫颈癌患者血清上皮型钙黏蛋白(E-cad)、干扰素γ(IFN-γ)、转化生长因子β(TGF-β)表达意义及对预后的影响.方法 选取本院2015年4月至2016年4月宫颈癌患者60例(宫颈癌组)、宫颈鳞状上皮内病变(CIN)患者35例(CIN组)、宫颈炎患者42例(宫颈炎组),比较3组、不同病理特征患者血清E-cad、IFN-γ、TGF-β水平,分析各血清指标对宫颈癌的诊断价值.随访3年,比较不同血清E-cad、IFN-γ、TGF-β水平患者预后情况.结果 宫颈癌组血清E-cad、TGF-β高于CIN组、宫颈炎组,IFN-γ低于CIN组、宫颈炎组(P单一诊断;血清E-cad、TGF-β与临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移呈正相关,与分化程度呈负相关,IFN-γ与临床分期、肿瘤直径、淋巴结转移呈负相关,与分化程度呈正相关(P<0.05);随访3年,E-cad、TGF-β、IFN-γ高危组、低危组生存曲线对比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 血清E-cad、IFN-γ、TGF-β水平在宫颈癌患者中呈异常表达,并与宫颈癌患者病理特征存在一定相关性,可作为诊断宫颈病变类型、评估宫颈癌患者预后的潜在有效因子.

摘要： 目的:探索miR-10b在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及相关机制.方法:选取20例确诊胃癌患者,取胃癌组织标本及其癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-10b和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin);利用Lip2000转染试剂盒说明书,将miR-10b转染至对数生长期的人胃癌细胞系,miR-NC作为空白对照组,qRT-PCR检测胃癌组织和细胞中miR-10b以及E-cadherin表达的变化;Western blot检测胃癌组织和细胞中E-cadherin和凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)表达变化;噻唑蓝(MTT)法检测MKN-45细胞增殖能力的改变.结果:qRT-PCR结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-10b的表达升高,而E-cadherin的表达降低(P<0.05);与空白对照组比较,低分化胃癌组织和MKN-45癌细胞miR-10b表达增高,E-cadherin表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,转染miR-10b siRNA后,E-cadherin和Bax表达增加,Bcl2表达和细胞生长增殖抑制率降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,GES-1细胞转染miR-10b mimics后,细胞内E-cadherin和Bax表达下降,Bcl2表达和细胞生长增殖抑制率增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:miR-10b能促进胃癌细胞增殖并抑制癌细胞的凋亡,其机制可能与调控E-cadherin有关.

摘要： 目的 检测结肠癌组织中多配体蛋白聚糖1(SDC1)蛋白的表达,分析SDC1蛋白表达与患者临床病理特征及上皮间质转化标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和预后的关系.方法 收集130例结肠癌患者癌组织和癌旁正常组织的石蜡样本,采用免疫组化法检测组织样本中SDC1、E-cadherin、N-cad-herin蛋白表达;分析癌组织中SDC1蛋白表达与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存模型分析SDC1蛋白表达对患者预后的影响;Spearman等级相关分析SDC1蛋白表达与E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的相关性.结果 结肠癌组织与癌旁正常组织中SDC1蛋白阳性表达率分别为22.31％(29/130)、91.54％(119/130),二者比较差异有统计学意义(P<0.05).结肠癌组织中SDC1蛋白表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关(P均<0.05).Log-rank检验结果显示,SDC1蛋白阴性表达者术后5年总生存率低于SDC1蛋白阳性表达者(P<0.05).Spearman相关检验结果显示,结肠癌组织中,SDC1蛋白表达与E-cadherin蛋白表达呈正相关(rs=0.753,P=0.016),SDC1蛋白表达与N-cadherin蛋白表达呈负相关(rs=-0.682,P=0.028).结论 结肠癌组织中SDC1蛋白呈低表达,且与患者病情恶性进展、预后不良有关;SDC1蛋白表达下降可降低E-cadherin蛋白表达、增加N-cadherin蛋白表达,诱发上皮间充质转化过程,进而促进侵袭和转移.

摘要： 目的:探索miR-10b在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法:选取20例确诊胃癌患者,取胃癌组织标本及其癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-10b和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin);利用Lip2000转染试剂盒说明书,将miR-10b转染至对数生长期的人胃癌细胞系,miR-NC作为空白对照组,qRT-PCR检测胃癌组织和细胞中miR-10b以及E-cadherin表达的变化;Western blot检测胃癌组织和细胞中E-cadherin和凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(Bax)表达变化;噻唑蓝(MTT)法检测MKN-45细胞增殖能力的改变。结果:qRT-PCR结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-10b的表达升高,而E-cadherin的表达降低(P<0.05);与空白对照组比较,低分化胃癌组织和MKN-45癌细胞miR-10b表达增高,E-cadherin表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,转染miR-10b siRNA后,E-cadherin和Bax表达增加,Bcl2表达和细胞生长增殖抑制率降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,GES-1细胞转染miR-10b mimics后,细胞内E-cadherin和Bax表达下降,Bcl2表达和细胞生长增殖抑制率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-10b能促进胃癌细胞增殖并抑制癌细胞的凋亡,其机制可能与调控E-cadherin有关。

摘要： 本发明涉及CDH1基因pre-mRNA选择性剪接检测试剂盒及其用途。试剂盒的主要成分包括：（1）CDH1基因cDNAPCR扩增引物7对；（2）RT-PCR试剂；（3）PCR扩增用试剂。通过本试剂盒得到的PCR扩增产物，可通过琼脂糖凝胶电泳结合DNA序列分析检测mRNA表达。本试剂盒具有高效的cDNA检出作用。用于CDH1基因pre-mRNA选择性剪接检测。

摘要： 本发明涉及CDH1基因突变检测试剂盒及其用途。试剂盒的主要成分包括：（1）CDH1基因PCR扩增与测序引物19对；（2）PCR扩增用试剂。通过本试剂盒得到的PCR扩增产物，可通过高分辨率溶解曲线法筛查基因微小突变，或者是进行限制性片段长度多态性分析。本试剂盒具有高效的突变检出与功能评估作用。用于CDH1基因突变检测。

摘要： 本发明涉及分子生物学及免疫学技术领域，尤其涉及血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。本发明提供了血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。该抗原表位氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，位于CDH5蛋白的N端，具有更高的保守性。本发明提供的表位是中和性表位，能够特异性的识别肿瘤血管并抑制其生成。本发明通过试验证实，该表位能够特异性识别肿瘤血管中的血管内皮钙黏蛋白，从而起到抑制肿瘤血管生成的作用。

摘要： 本发明涉及

摘要： 本发明涉及CDH1基因突变检测试剂盒及其用途。试剂盒的主要成分包括：(1)CDH1基因PCR扩增与测序引物19对；(2)PCR扩增用试剂。通过本试剂盒得到的PCR扩增产物，可通过高分辨率溶解曲线法筛查基因微小突变，或者是进行限制性片段长度多态性分析。本试剂盒具有高效的突变检出与功能评估作用。用于CDH1基因突变检测。

摘要： 本发明涉及上皮钙黏素特异性抗体以及其在诊断和治疗诸如癌症等疾病中的用途。

摘要： 本发明公开了一种角蛋白和磷酸钙低聚物增强大豆胶黏剂及其制备方法，胶黏剂包括以下原料制备而成：主剂、分散介质水、增强剂、环氧类交联剂和填料，所述主剂为大豆蛋白粉，所述增强剂为角蛋白粉，所述填料为磷酸钙。本发明中角蛋白上的巯基与大豆蛋白分子的巯基交叉聚合形成新的二硫键共价交联网络，磷酸钙填料的磷酸根离子与大豆蛋白上的氨基反应，钙离子与羧基反应，融合到交联结构中形成矿化结构，通过应力传导和分散进一步提高胶黏剂耐水胶接性能，制备得到的胶黏剂交联密度高、耐水胶接性能好、流动性好，能够满足胶合板胶黏剂的耐水与施胶工艺要求，且成本低，可以推广与应用。

摘要： 本发明公开了昆虫钙黏蛋白含量酶联免疫定量检测试剂盒及其使用方法，属于生物技术领域。本发明通过原核表达获得钙黏蛋白重组蛋白，将重组蛋白免疫小鼠，并通过筛选得到特异性的单克隆抗体，将钙黏蛋白重组蛋白免疫兔，得到特异性的多克隆抗体，最终开发出定量检测钙黏蛋白含量的酶联免疫定量检测试剂盒，通过检测钙黏蛋白含量来确定昆虫对Bt蛋白的抗性。该试剂盒可准确、可靠地进行钙黏蛋白的定量检测，并通过对钙黏蛋白的含量检测，来判断昆虫对Bt蛋白的抗性强弱。该试剂盒检测方便、快捷、稳定性好。

摘要： 基于亚硫酸氢盐测序法的钙黏蛋白甲基化检测方法，包括：步骤1，选用6‑7周龄大鼠，收集处死后大鼠的肾脏，剪除结缔组织，取肾皮质剪碎成50‑100mg组织小块，采用液氮速冻并保存于‑80°C冰箱中；步骤2，采用基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA；步骤3，用核酸定量仪测量基因组DNA的浓度和纯度，通过0.5％‑1.0％的琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA完整性，并将检测合格的DNA样本置于‑20°C至‑80°C的冰箱备用；步骤4，采用甲基化转化试剂盒修饰基因组DNA，用核酸定量仪确定修饰好的基因组DNA浓度；步骤5，在多种不同的实验条件下进行PCR扩增；步骤6，从步骤5中选定后续步骤所用的样本。本发明提高了钙黏蛋白甲基化实验的成功率。

摘要： 本发明涉及分子生物学及免疫学技术领域，尤其涉及血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。本发明提供了血管内皮钙黏蛋白抗原表位、抗体及其应用。该抗原表位氨基酸序列如SEQ？ID？NO:1所示，位于CDH5蛋白的N端，具有更高的保守性。本发明提供的表位是中和性表位，能够特异性的识别肿瘤血管并抑制其生成。本发明通过试验证实，该表位能够特异性识别肿瘤血管中的血管内皮钙黏蛋白，从而起到抑制肿瘤血管生成的作用。