微管相关蛋白

摘要： 目的 初步了解重组人tau441(P301S)蛋白体外聚集、抗原性及免疫原性等生物学性质.方法 原核表达带His标签的tau441(P301S)重组质粒,镍亲和层析纯化重组蛋白,BCA测定蛋白浓度,SDS-PAGE凝胶考马斯亮蓝染色确定蛋白的纯度;采用Western blot(WB)和负染透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)鉴定;间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测所得蛋白的抗原性;以重组蛋白免疫小鼠,检测免疫血清特异性抗体滴度来分析其免疫原性.结果 所得重组人tau441(P301S)纯度为70％,WB显示在相对分子质量(Mr.×103)64和更高相对分子质量处有特异性条带.TEM显示,tau441(P301S)呈絮状团块聚集,团状面积显著大于tau441野生型蛋白(t=6.439,P=0.003);4°C孵育9 d后,tau441(P301S)形成明显的纤维状结构.间接ELISA结果显示,tau441(P301S)能被tau单抗HT7(1∶80 000)识别;小鼠免疫血清tau特异性抗体滴度达到1∶128 000,且WB显示,免疫后血清识别阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)转基因小鼠脑裂解抽提物.结论 重组人tau441(P301S)蛋白具有体外聚集性增强的特性但其抗原性和免疫原性未改变.

摘要： 目的:观察艾灸对血管性痴呆(VD)大鼠炎性因子及神经元再生标志物微管相关蛋白(DCX)表达的影响,探讨艾灸抑制炎性反应,促进神经元修复,改善VD的作用机制.方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、艾灸组、西药组,每组15只.用双侧颈总动脉缺血再灌注法建立V D大鼠模型.艾灸组给予悬灸"关元""命门""大椎"治疗,每穴15 min,每日1次,每周休息1 d,连续治疗4周;西药组给予尼莫地平灌胃治疗,每日3次,连续治疗4周.应用Morris水迷宫实验检测大鼠逃避潜伏期,HE染色法检测大鼠海马组织病理形态,免疫荧光双标记法检测大鼠海马DG区DCX与NeuN共表达强度,用免疫组织化学法检测DG区DCX阳性表达,Western blot法检测大鼠海马组织DCX、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达.结果:造模后模型组大鼠逃避潜伏期较正常组与假手术组延长(P<0.01),治疗后艾灸组与西药组大鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短(P<0.01,P<0.05).模型组海马组织神经元较正常组、假手术组排列紊乱,可见大量坏死神经元及少量淋巴细胞浸润;艾灸组与西药组细胞形态接近正常.免疫荧光双标记检测显示,与正常组、假手术组比较,模型组大鼠DCX/NeuN共表达细胞数显著增加(P<0.01);与模型组比较,艾灸组与西药组DCX/NeuN共表达细胞数均显著增加(P<0.05,P<0.01),艾灸组DCX/NeuN共表达细胞少于西药组(P<0.05).免疫组织化学染色结果显示,模型组DCX阳性表达高于正常组与假手术组(P<0.01,P<0.05),艾灸组、西药组高于模型组(P<0.01),艾灸组略低于西药组(P<0.05).模型组海马组织促炎因子TNF-α、MPO、NF-κB p65、IL-6、IL-1β及DCX蛋白相对表达量明显高于正常组和假手术组(P<0.01);与模型组比较,艾灸组和西药组大鼠各炎性因子表达明显下降(P<0.01),DCX相对表达量显著增加(P<0.01);与西药组比较,艾灸组大鼠海马组织中促炎因子表达下降(P<0.05,P<0.01),DCX相对表达量下降(P<0.01).结论:艾灸可通过抑制炎性损伤,促进神经细胞修复再生,改善VD大鼠记忆与学习能力.

摘要： 肌萎缩侧索硬化症是一种以脊髓前角和大脑皮层运动神经元死亡为病理特征,表现为上、下运动神经元损害症状的运动神经元病.Tau蛋白是脑内非常重要的微管相关蛋白,其异常磷酸化在神经退行性疾病中起重要的作用.过度磷酸化的Tau蛋白不但影响Tau蛋白与微管的结合能力,而且还能影响其他微管集合蛋白与微管的结合能力,进而导致神经元和皮质轴突的病理性改变,发生神经元退变.已有研究表明,在肌萎缩侧索硬化症的病理过程中,Tau蛋白的过度磷酸化可能是疾病过程的关键事件.对Tau蛋白的相关功能及调控机制进行深入的研究可能为ALS的发病机制增加新的理论基础,为该病的治疗提供新的靶点.

摘要： 目的 探讨β淀粉样蛋白(A31-42)、微管相关蛋白(Tau)和磷酸化微管相关蛋白(P-tau)在阿尔茨海默症(AD)与血管性痴呆(VD)鉴别诊断中的应用价值.方法 选取AD患者及VD患者各58例,收集患者的脑脊液,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定Aβ1-42、Tau和P-tau的含量.结果 AD组脑脊液Aβ1-42含量低于VD组(P＜0.05),而Tau和P-tau含量高于VD组(P＜0.05).结论 脑脊液中Aβ1-42、Tau、P-tau含量的变化,对鉴别诊断AD与VD具有较高的诊断价值,有待进一步的研究验证.

摘要： 微管相关蛋白和微管蛋白共同控制微管的组装和稳定性,进而调控一些重要的生理过程,例如:调节细胞物质运输,维持细胞形态,细胞分裂分化,肿瘤的发生及自噬的发生.本综述将重点关注于微管相关蛋白与自噬之间的联系.

摘要： 微管相关蛋白和微管蛋白共同控制微管的组装和稳定性,进而调控一些重要的生理过程,例如：调节细胞物质运输,维持细胞形态,细胞分裂分化,肿瘤的发生及自噬的发生。本综述将重点关注于微管相关蛋白与自噬之间的联系。

摘要： Microtubules are dynamic hollow tubes mainly found in the cytoplasm of eukaryotic cells.Tubulin heterodimers,the basic structures of microtubules,are assembled by α/β-tubulin subunits from head-to-tail and spirally.Microtubules are cytoskeletal structures that play an essential role in maintaining cell physiological function,including cell shape maintaining,intracellular transport,formation of mitotic spindle,modulating cell polarity,formation of flagellum and so forth.Moreover,the stability of microtubule structure is modulated by tubulin modifications and microtubule-associated proteins,and the dynamic modulation plays a fundamental role in myocardial hypertrophy,Duchenne muscular dystrophy (DMD)and diabetic cardiomyopathy.However,the molecular mechanism of microtubule in the pathogenesis of cardiomyopathy remains unclear.Here,the latest research and the molecular mechanism are reviewed.%微管是由微管蛋白二聚体构成的中空管状结构.微管蛋白二聚体是微管的基本结构,由α、β-微管蛋白亚基头尾相连交替螺旋状排列而形成.微管大量存在于真核细胞的胞质中.微管作为一种细胞骨架的重要组成成份,参与细胞的多种活动,包括细胞形态的维持、胞内转运、纺锤体的形成、调节细胞的极性和参与鞭毛形成等.有多篇文献报道微管蛋白的修饰异常及微管相关蛋白调节异常均会引起微管的稳定性失衡.有文献报道微管稳定性的改变可能与心肌肥大、杜兴肌营养不良性心肌病、糖尿病心肌病的发生有关,但微管异常导致心肌病发生的具体机制尚不清楚.该文结合最新的研究成果,对微管异常导致心肌病的发生机制作一综述.

摘要： 目的:观察冈田酸诱导大鼠海马神经元(HT22细胞)损伤时神经元微管相关蛋白(Tau蛋白)和凋亡相关因子的变化,探讨鹿茸多肽对神经细胞损伤的保护作用,阐明其相关作用机制.方法:大鼠HT22细胞体外传代培养,冈田酸诱导HT22细胞损伤.HT22细胞分为正常对照组、DMSO对照组、冈田酸损伤模型组和不同浓度鹿茸多肽组(终浓度分别为50、500及1 000 mg·L-1),37°C、5％CO2孵育24 h.采用免疫细胞化学染色法、Western blotting法和RT-PCR法检测各组细胞中Tau蛋白磷酸化水平及凋亡相关因子Bcl-2和Caspase-3的表达.结果:免疫细胞化学染色法染色,磷酸化Tau蛋白的表达呈棕黄色颗粒,与正常对照组比较,冈田酸损伤模型组细胞中棕黄色颗粒明显增多;与冈田酸损伤模型组比较,500和1 000mg·L-1鹿茸多肽组细胞中棕黄色颗粒明显减少.Western blotting法检测,与冈田酸损伤模型组比较,各浓度鹿茸多肽组细胞中Tau蛋白表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),1 000 mg·L-1鹿茸多肽组细胞中Bcl-2表达水平明显升高(P＜0.05),各浓度鹿茸多肽组细胞中Caspase-3表达水平均无明显变化(P＞0.05).RT-PCR法检测,与冈田酸损伤模型组比较,各浓度鹿茸多肽组细胞中Tau mRNA表达水平明显降低、Bcl-2 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01),500和1 000 mg·L-1鹿茸多肽组细胞中Caspase-3 mRNA表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:鹿茸多肽可能通过抑制Tau过度磷酸化及抑制细胞凋亡调控机制,对冈田酸诱导的神经细胞损伤起到保护作用.

摘要： 目的 观察母婴分离(maternal separation,MS)对青年期小鼠海马和前额叶皮质糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)和微管相关蛋白(doublecortin,DCX)表达的影响.方法 将15只怀孕小鼠随机分为5组:对照组,母婴分离3d、7d、14d、21d组,每组3只孕鼠.对照组新生鼠出生后与母鼠同笼喂养不做任何处理,实验组新生鼠自出生后每天与母鼠分离3 h,所有仔鼠于出生后23 d断乳,雌雄分笼,雄性小鼠喂养至42 d处死取脑.用免疫组织化学染色法和Image J图像分析技术检测海马和前额叶皮质区GR和DCX的表达和分布.结果 母婴分离3 d、7 d、14 d、21 d组小鼠海马GR阳性细胞平均光密度值、前额叶皮质GR阳性细胞平均光密度值和海马齿状回颗粒下层DCX阳性细胞平均光密度值[海马GR:3 d(0.332±0.054)OD/μm2,7 d(0.258±0.045)OD/μm2,14 d(0.197±0.043)OD/μm2,21 d(0.164±0.053)OD/μm2;前额叶皮质GR:3 d(0.356±0.043)OD/μm2,7 d(0.278±0.041)OD/μm2,14 d(0.220±0.039)OD/μm2,21 d(0.157±0.034)OD/μm2;海马齿状回DCX:3 d(0.193±0.020)OD/μm2,7 d(0.146±0.033)OD/μm2,14 d(0.110±0.032)OD/μm2,21 d(0.060±0.017)OD/μm2]均低于对照组,且随分离重复时间的增长呈递减的趋势,其中7 d、14 d、21 d组小鼠平均光密度值明显低于对照组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);实验各组之间平均光密度值比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 MS会引起青年期小鼠海马和前额叶皮质GR降低,海马齿状回颗粒下层神经发生减少,且分离重复时间越长,对下丘脑-垂体-肾上腺轴和神经发生影响越大.%Objective To observe the effect of maternal separation( MS) on the expression of glu-cocorticoid receptor ( GR ) and doublecortin ( DCX ) in hippocampus and prefrontal cortex of young mice. Methods Fifteen pregnant mice were randomly divided into 5 groups:the experimental group ( 3 d, 7 d, 14 d,21 d) and the control group, n=3 in each group. Neonatal mice in experimental group were separated from mother for 3 h once a day,and the mice in control group were caged with mother without any processing after birth. All mice were weaned in postanal day 23. Separating female and male mice,and the male mice were killed and the brains were taken in postanal day 42. The expression and distribution of GR and DCX in hippocampus and prefrontal cortex were determined by immunohistochemical staining and Image J image a-nalysis technique. Results The average optical density values of GR positive cells in hippocampus and pre-frontal cortex,the average optical density values of DCX positive cells in hippocampal dentate gyrus subgran-ular zone in 3 d,7 d,14 d and 21 d group were(GR in hippocampus:3 d((0.332±0.054)OD/μm2,7 d (0.258±0.045)OD/μm2,14 d(0.197±0.043)OD/μm2,21 d(0.164±0.053)OD/μm2),(GR in prefrontal cortex:3 d(0.356±0.043)OD/μm2,7 d(0.278±0.041)OD/μm2,14 d(0.220±0.039)OD/μm2,21 d(0.157 ±0.034)OD/μm2)and(DCX in hippocampus:3 d(0.193±0.020)OD/μm2,7 d(0.146±0.033)OD/μm2, 14 d(0.110±0.032)OD/μm2,21 d(0.060±0.017)OD/μm2)were lower than those in control group,which showed a decreasing trend with the increase of seperation time,and the average optical density values in 7 d, 14 d and 21 d group were obviously lower than those in control group(P<0.05) . The average optical density values had statistical significance among the experimental groups(P<0.05) . Conclusion MS can cause the decrease of GR in hippocampus and prefrontal cortex and reduce neurogenesis in the hippocampal dentate gy-rus subgranular zone in young mice. It shows that the longer the seperation time,the greater the effect on hy-pothalamic-pituitary-adrenal( HPA) axis and neurogenesis.

摘要： 目的:探讨山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对微管相关蛋白tau过度磷酸化的抑制作用及其药理机制.方法:细胞模型:实验分为空白对照,CIG空白给药组(200mg/L),CIG小剂量组(50mg/L),CIG中剂量组(100mg/L),CIG大剂量组(200mg/L).MTT法检测神经细胞存活率,相差显微镜观察细胞形态,western blotting方法检测tau蛋白不同位点磷酸化水平,GSK-3β,GSK-3β-ser9、GSK-3β-Y216,Akt、p-Akt-ser473,PP2A、DM-PP2A的表达.动物模型,健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,CIG(60mg/kg)给药组,大鼠侧脑室注射WT和GFX制备拟老年性痴呆(AD)模型,假手术组注射等量生理盐水.CIG(60mg/kg)灌胃2周,其余组给予等量双蒸水灌胃;通过水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力;western blotting方法检测各组大鼠皮层及海马tau蛋白不同位点磷酸化水平,GSK-3β,GSK-3β-ser9、GSK-3β-Y216,Akt、p-Akt-ser473,PP2A、DM-PP2A的表达.结果:(1)WT/GFX模型组细胞Akt-ser473和p-GSK-3β-ser9的表达明显降低,从而引起GSK-3β活性增高;WT/GFX模型组细胞PP2A表达无明显改变,但DM-PP2A表达水平显著增高;tau蛋白磷酸化水平在多个位点显著增高.CIG中剂量和大剂量组能够明显降低模型细胞tau蛋白在Thr212,Ser214,Ser396/Ser404,Thr217,Thr205位点的磷酸化水平.(2)OA模型组细胞变圆,突起断裂,细胞存活率显著降低.;GSK-3β表达降低,p-GSK-3β-ser9表达增高;tau蛋白磷酸化水平在多个位点显著增高.CIG给药组Ser199/202、Thr205、Thr212、Thr214、Thr217和Ser396位点磷酸化tau蛋白的表达随药物剂量增加而降低,具有明显的剂量依赖性;CIG给药组PP2A的表达明显升高,DM-PP2A表达显著降低,GSK-3β与p-GSK-3β-ser9表达无明显影响.(3)WT/GFX模型组大鼠水迷宫游出时间延长,GSK-3β-ser9和p-Akt-ser473的表达明显抑制,tau蛋白磷酸化水平在多个位点显著增高.CIG可以缩短模型大鼠寻找平台时间,改善空间记忆能力;降低大鼠脑内tau蛋白在Thr212,Thr205位点的磷酸化水平,增加GSK-3β-ser9、p-Akt-ser473和PP2A的表达,降低DM-PP2A的表达.结论:CIG拮抗tau蛋白在多个位点的过度磷酸化,其主要机制为增加PP2A表达,增强PP2A甲基化修饰,从而提高磷酸酯酶PP2A的活性,促进tau蛋白去磷酸化.CIG通过对tau蛋白过度磷酸化的抑制作用,可明显改善模型动物学习记忆能力,对神经细胞的形态及存活率也有明显改善,在AD治疗中可能具有较好的应用前景.

摘要： 目的：探讨自噬基因Beclin-1及微管相关蛋白LC3在大鼠阿霉素(ADR)心肌病中的表达及其意义，初步证实自体吞噬参与了大鼠阿霉素心肌病的发病，并探讨其机制，为临床阿霉素心肌病的防治提供理论依据。方法:雄性SD大鼠45只，随机分为3组，ADR组(N=15),ADR+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(N=15)，对照组(N=15)。ADR组:第二天起腹腔注射阿霉素4 mg/kg，每周一次;ADR+3-MA组:第二天起腹腔注射同等剂量的ADR，在注射前半小时腹腔注射3-MA 500 nmol;对照组:腹腔注射等量的生理盐水。第六周末大鼠称重并心脏彩超测量左室收缩功能，分光光度法检测血浆中丙二醛(MDA)及全血中还原型谷胱甘肽(GSH)含量，取左心室心肌标本，HE染色观察心肌病理改变，电镜观察自噬体形态及数量，免疫印迹法检测心肌组织中自噬基因Beclin-1的含量，免疫组化S-P法测定心肌细胞LC3含量。结果:1. ADR组大鼠左室收缩功能较对照组下降，具统计学意义;ADR组大鼠心脏重量指数较对照组增高，具统计学意义;2. ADR组血浆MDA含量较对照组增高，具统计学意义，ADR组全血GSH含量较对照组减低,具统计学意义;3.免疫印迹法显示:ADR组心肌组织中Beclin-1水平较对照组及ADR+3-MA组增高，具统计学意义;4.免疫组织化学染色显示:ADR组心肌组织中LC3含量较对照组及ADR+3-MA组增高，具统计学意义;5.直线相关分析:自噬基因Beclin-1水平与LC3含量呈显著正相关。结论:1.阿霉素可引起大鼠心肌组织中自噬基因Beclin-1水平上调，从而诱导心肌自噬性程序性细胞死亡，导致心肌病变的发生。2.阿霉素心肌病大鼠心肌细胞中LC3含量明显增高，且与自噬基因Beclin-1水平呈显著正相关。3.自噬性程序性细胞死亡作为除坏死及调亡以外的另一种程序性细胞死亡方式(PCD)参与了阿霉素心肌病的发病，并可被3-MA抑制。

摘要： tau蛋白基因位于17号染色体(17p21.11)，是一种微管相关蛋白,对维持细胞的骨架起关键作用。tau蛋白基因型的异常改变被认为能影响一些神经变性疾病的发展，本文就tau蛋白的异常改变与神经系统变性疾病的关系进行了论述。

摘要： 神经细胞通常是由多个由接受刺激(信号)的冲突、细胞体和一根传导刺激的轴突及突触组成的在形态和功能上高度分化的细胞.在这样一个极性化的细胞的形态发生过程中,细胞骨架,特别是微管结构体系、起着非常重要的作用.研究表明,细胞层构造混乱是神经细胞的迁移减慢所致.而因为MAPs的缺失,神经细胞突起的生长锥内微管的形成微管束的能力降低,从而导致神经突起的伸长发生障碍是导致纤维束异常的重要原因.在MAP2、MAP1B双缺失小鼠,神经突起内微管间的距离显著缩短,然而这种微管束结构的变化似乎并没有对轴突运输产生任何影响.

摘要： 目的：最近在脑外伤动物模型中发现溶酶体蛋白酶抑制剂CBI能够减轻外伤性脑兴奋毒性损伤。本研究在前期工作基础上继续探讨CBI在三氟乙醚敏新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路，为临床干预提供依据。rn 方法：90只生后6d(用P6表示，下同)的健康Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为三组，每组30只：对照组、反复惊厥组及CBI组。反复惊厥组(用RS表示，下同)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min。连续9天;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组于惊厥前腹腔注射cathepsin B(2μl,0.5 g/μl)，同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥发作。各组分别于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h四个时间点(n=6/每点/每组)取海马及大脑皮层组织，采用免疫印迹技术(Western blot)检测自噬标记蛋白LC3和Beclinl的表达及可塑性相关基因-1(PRG—1)的表达;分别于生后6 d～15 d通过平面翻正试验，悬崖回避试验，空中翻正反射试验评价其神经行为发育，1月龄时行Morris水迷宫行为以及旷场实验，检测认知功能及探索行为，实验结束取其海马及大脑皮层组织，免疫印迹检测LC3、Beclinl及PBG-1的表达。rn 结果：免疫印迹法显示：(1)RS组于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Bedinl的表达较对照组显著升高(P0.05);CBI组PRG-1的值与RS组比较亦无明显差异(P>0.05)。(3)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Beclinl的表达较对照组无统计学差异(P>0.05);CBI组与RS组比亦无明显差异(P>0.05)。(4)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层PRG-1蛋白水平较对照组显著增高(PRS组悬崖回避时间较对照组和CBi组有明显延迟(P<0.01)，提示RS组神经反射发育延迟。(2)Morris水迷宫实验显示：RS组逃避潜伏期较对照组和CBI组显著延长(P<0.01)，CBI组与对照组无统计学意义。(3)旷场行为测试：水平运动RS组较对照组明显减少(P<0.05)，CBI组较RS组无差异;垂直运动RS组较对照组显著减少(P<0.01)，CBI组较RS组明显增多(P<0.05)。rn 结论：⑴新生期三氟乙醚诱导反复惊厥使早期海马及大脑皮层自噬标记蛋白LC3、Bedim表达明显上调，自噬激活;同时造成远期学习能力损害和神经行为发育异常。并可能与前脑PRG—1表达上调有关。⑵惊厥发作前应μ用自噬抑制剂CBI能显著抑制惊厥所致海马及大脑皮层LC3、Bedinl的表达，减轻惊厥所致的远期学习能力损害和神经行为损伤，并下调前脑PRG—1表达。⑶本研究表明。CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致远期脑损伤及基因表达异常。

摘要： 目的：最近在脑外伤动物模型中发现溶酶体蛋白酶抑制剂CBI能够减轻外伤性脑兴奋毒性损伤。本研究在前期工作基础上继续探讨CBI在三氟乙醚敏新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路，为临床干预提供依据。rn 方法：90只生后6d(用P6表示，下同)的健康Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为三组，每组30只：对照组、反复惊厥组及CBI组。反复惊厥组(用RS表示，下同)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min。连续9天;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组于惊厥前腹腔注射cathepsin B(2μl,0.5 g/μl)，同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥发作。各组分别于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h四个时间点(n=6/每点/每组)取海马及大脑皮层组织，采用免疫印迹技术(Western blot)检测自噬标记蛋白LC3和Beclinl的表达及可塑性相关基因-1(PRG—1)的表达;分别于生后6 d～15 d通过平面翻正试验，悬崖回避试验，空中翻正反射试验评价其神经行为发育，1月龄时行Morris水迷宫行为以及旷场实验，检测认知功能及探索行为，实验结束取其海马及大脑皮层组织，免疫印迹检测LC3、Beclinl及PBG-1的表达。rn 结果：免疫印迹法显示：(1)RS组于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Bedinl的表达较对照组显著升高(P0.05);CBI组PRG-1的值与RS组比较亦无明显差异(P>0.05)。(3)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Beclinl的表达较对照组无统计学差异(P>0.05);CBI组与RS组比亦无明显差异(P>0.05)。(4)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层PRG-1蛋白水平较对照组显著增高(PRS组悬崖回避时间较对照组和CBi组有明显延迟(P<0.01)，提示RS组神经反射发育延迟。(2)Morris水迷宫实验显示：RS组逃避潜伏期较对照组和CBI组显著延长(P<0.01)，CBI组与对照组无统计学意义。(3)旷场行为测试：水平运动RS组较对照组明显减少(P<0.05)，CBI组较RS组无差异;垂直运动RS组较对照组显著减少(P<0.01)，CBI组较RS组明显增多(P<0.05)。rn 结论：⑴新生期三氟乙醚诱导反复惊厥使早期海马及大脑皮层自噬标记蛋白LC3、Bedim表达明显上调，自噬激活;同时造成远期学习能力损害和神经行为发育异常。并可能与前脑PRG—1表达上调有关。⑵惊厥发作前应μ用自噬抑制剂CBI能显著抑制惊厥所致海马及大脑皮层LC3、Bedinl的表达，减轻惊厥所致的远期学习能力损害和神经行为损伤，并下调前脑PRG—1表达。⑶本研究表明。CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致远期脑损伤及基因表达异常。

摘要： 目的：最近在脑外伤动物模型中发现溶酶体蛋白酶抑制剂CBI能够减轻外伤性脑兴奋毒性损伤。本研究在前期工作基础上继续探讨CBI在三氟乙醚敏新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路，为临床干预提供依据。rn 方法：90只生后6d(用P6表示，下同)的健康Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为三组，每组30只：对照组、反复惊厥组及CBI组。反复惊厥组(用RS表示，下同)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min。连续9天;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组于惊厥前腹腔注射cathepsin B(2μl,0.5 g/μl)，同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥发作。各组分别于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h四个时间点(n=6/每点/每组)取海马及大脑皮层组织，采用免疫印迹技术(Western blot)检测自噬标记蛋白LC3和Beclinl的表达及可塑性相关基因-1(PRG—1)的表达;分别于生后6 d～15 d通过平面翻正试验，悬崖回避试验，空中翻正反射试验评价其神经行为发育，1月龄时行Morris水迷宫行为以及旷场实验，检测认知功能及探索行为，实验结束取其海马及大脑皮层组织，免疫印迹检测LC3、Beclinl及PBG-1的表达。rn 结果：免疫印迹法显示：(1)RS组于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Bedinl的表达较对照组显著升高(P0.05);CBI组PRG-1的值与RS组比较亦无明显差异(P>0.05)。(3)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Beclinl的表达较对照组无统计学差异(P>0.05);CBI组与RS组比亦无明显差异(P>0.05)。(4)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层PRG-1蛋白水平较对照组显著增高(PRS组悬崖回避时间较对照组和CBi组有明显延迟(P<0.01)，提示RS组神经反射发育延迟。(2)Morris水迷宫实验显示：RS组逃避潜伏期较对照组和CBI组显著延长(P<0.01)，CBI组与对照组无统计学意义。(3)旷场行为测试：水平运动RS组较对照组明显减少(P<0.05)，CBI组较RS组无差异;垂直运动RS组较对照组显著减少(P<0.01)，CBI组较RS组明显增多(P<0.05)。rn 结论：⑴新生期三氟乙醚诱导反复惊厥使早期海马及大脑皮层自噬标记蛋白LC3、Bedim表达明显上调，自噬激活;同时造成远期学习能力损害和神经行为发育异常。并可能与前脑PRG—1表达上调有关。⑵惊厥发作前应μ用自噬抑制剂CBI能显著抑制惊厥所致海马及大脑皮层LC3、Bedinl的表达，减轻惊厥所致的远期学习能力损害和神经行为损伤，并下调前脑PRG—1表达。⑶本研究表明。CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致远期脑损伤及基因表达异常。

摘要： 目的：最近在脑外伤动物模型中发现溶酶体蛋白酶抑制剂CBI能够减轻外伤性脑兴奋毒性损伤。本研究在前期工作基础上继续探讨CBI在三氟乙醚敏新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路，为临床干预提供依据。rn 方法：90只生后6d(用P6表示，下同)的健康Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为三组，每组30只：对照组、反复惊厥组及CBI组。反复惊厥组(用RS表示，下同)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min。连续9天;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组于惊厥前腹腔注射cathepsin B(2μl,0.5 g/μl)，同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥发作。各组分别于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h四个时间点(n=6/每点/每组)取海马及大脑皮层组织，采用免疫印迹技术(Western blot)检测自噬标记蛋白LC3和Beclinl的表达及可塑性相关基因-1(PRG—1)的表达;分别于生后6 d～15 d通过平面翻正试验，悬崖回避试验，空中翻正反射试验评价其神经行为发育，1月龄时行Morris水迷宫行为以及旷场实验，检测认知功能及探索行为，实验结束取其海马及大脑皮层组织，免疫印迹检测LC3、Beclinl及PBG-1的表达。rn 结果：免疫印迹法显示：(1)RS组于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Bedinl的表达较对照组显著升高(P0.05);CBI组PRG-1的值与RS组比较亦无明显差异(P>0.05)。(3)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Beclinl的表达较对照组无统计学差异(P>0.05);CBI组与RS组比亦无明显差异(P>0.05)。(4)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层PRG-1蛋白水平较对照组显著增高(PRS组悬崖回避时间较对照组和CBi组有明显延迟(P<0.01)，提示RS组神经反射发育延迟。(2)Morris水迷宫实验显示：RS组逃避潜伏期较对照组和CBI组显著延长(P<0.01)，CBI组与对照组无统计学意义。(3)旷场行为测试：水平运动RS组较对照组明显减少(P<0.05)，CBI组较RS组无差异;垂直运动RS组较对照组显著减少(P<0.01)，CBI组较RS组明显增多(P<0.05)。rn 结论：⑴新生期三氟乙醚诱导反复惊厥使早期海马及大脑皮层自噬标记蛋白LC3、Bedim表达明显上调，自噬激活;同时造成远期学习能力损害和神经行为发育异常。并可能与前脑PRG—1表达上调有关。⑵惊厥发作前应μ用自噬抑制剂CBI能显著抑制惊厥所致海马及大脑皮层LC3、Bedinl的表达，减轻惊厥所致的远期学习能力损害和神经行为损伤，并下调前脑PRG—1表达。⑶本研究表明。CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致远期脑损伤及基因表达异常。

摘要： 目的：最近在脑外伤动物模型中发现溶酶体蛋白酶抑制剂CBI能够减轻外伤性脑兴奋毒性损伤。本研究在前期工作基础上继续探讨CBI在三氟乙醚敏新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路，为临床干预提供依据。rn 方法：90只生后6d(用P6表示，下同)的健康Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分为三组，每组30只：对照组、反复惊厥组及CBI组。反复惊厥组(用RS表示，下同)每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min。连续9天;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组于惊厥前腹腔注射cathepsin B(2μl,0.5 g/μl)，同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥发作。各组分别于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h四个时间点(n=6/每点/每组)取海马及大脑皮层组织，采用免疫印迹技术(Western blot)检测自噬标记蛋白LC3和Beclinl的表达及可塑性相关基因-1(PRG—1)的表达;分别于生后6 d～15 d通过平面翻正试验，悬崖回避试验，空中翻正反射试验评价其神经行为发育，1月龄时行Morris水迷宫行为以及旷场实验，检测认知功能及探索行为，实验结束取其海马及大脑皮层组织，免疫印迹检测LC3、Beclinl及PBG-1的表达。rn 结果：免疫印迹法显示：(1)RS组于末次惊厥后1.5h、3h、6h、24h海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Bedinl的表达较对照组显著升高(P0.05);CBI组PRG-1的值与RS组比较亦无明显差异(P>0.05)。(3)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层LC3II/LC3I比值及Beclinl的表达较对照组无统计学差异(P>0.05);CBI组与RS组比亦无明显差异(P>0.05)。(4)RS组于行为能力测定之后海马及大脑皮层PRG-1蛋白水平较对照组显著增高(PRS组悬崖回避时间较对照组和CBi组有明显延迟(P<0.01)，提示RS组神经反射发育延迟。(2)Morris水迷宫实验显示：RS组逃避潜伏期较对照组和CBI组显著延长(P<0.01)，CBI组与对照组无统计学意义。(3)旷场行为测试：水平运动RS组较对照组明显减少(P<0.05)，CBI组较RS组无差异;垂直运动RS组较对照组显著减少(P<0.01)，CBI组较RS组明显增多(P<0.05)。rn 结论：⑴新生期三氟乙醚诱导反复惊厥使早期海马及大脑皮层自噬标记蛋白LC3、Bedim表达明显上调，自噬激活;同时造成远期学习能力损害和神经行为发育异常。并可能与前脑PRG—1表达上调有关。⑵惊厥发作前应μ用自噬抑制剂CBI能显著抑制惊厥所致海马及大脑皮层LC3、Bedinl的表达，减轻惊厥所致的远期学习能力损害和神经行为损伤，并下调前脑PRG—1表达。⑶本研究表明。CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致远期脑损伤及基因表达异常。

摘要： 本发明公开了培育荧光蛋白mCherry标记微管蛋白的转基因植物的方法及其相关生物材料。该方法包括向受体植物中导入P

摘要： 本发明涉及裂殖壶菌α‑微管蛋白相关序列及其应用，具体涉及SEQ ID NO:1所示的裂殖壶菌α‑微管蛋白基因序列、SEQ ID NO:2所示的裂殖壶菌α‑微管蛋白序列和SEQ ID NO:3所示的裂殖壶菌α‑微管蛋白基因3’端非编码区序列。本发明还涉及这些基因序列的片段，含有所述基因序列或其片段的重组核酸分子，这些重组核酸分子在同源重组中的应用，以及应用这些重组核酸分子进行基因功能分析的方法。

摘要： 本发明公开了一种检测微管蛋白抑制剂(3Z,6Z)‑3‑((E)‑3‑(5‑叔丁基)‑1H‑咪唑基‑4‑基)亚甲基)‑6‑((E)‑3‑(3‑氟苯基)‑2‑丙烯亚基)哌嗪‑2,5‑二酮的高效液相色谱法。本发明方法可快速准确的检测出微管蛋白抑制剂(3Z,6Z)‑3‑((E)‑3‑(5‑叔丁基)‑1H‑咪唑基‑4‑基)亚甲基)‑6‑((E)‑3‑(3‑氟苯基)‑2‑丙烯亚基)哌嗪‑2,5‑二酮及其光降解产物等杂质，操作简单，重现性好，灵敏度高，可较好地控制微管蛋白抑制剂产品质量，为合成和制剂工艺优化提供了保证。

摘要： 本发明公开了培育荧光蛋白mCherry标记微管蛋白的转基因植物的方法及其相关生物材料。该方法包括向受体植物中导入P

摘要： 通过使用有效的独特的不可逆抑制剂的化学蛋白质组学，发明人发现主要脑微管蛋白羧肽酶(TCP)是血管抑制素‑1(VASH1)与小血管抑制素结合蛋白(SVBP)的复合物。当与SVBP复合时，VASH1及其同源物血管抑制素2(VASH2)在微管上表现出稳健而特异的Tyr/Phe羧肽酶活性。因此，发明人首次鉴定了血管抑制素和血管抑制素/SVBP复合物的酶活性。敲减培养的神经元中的血管抑制素或SVBP导致酪氨酸化的α‑微管蛋白水平显著降低，并出现严重的分化缺陷。此外，敲减血管抑制素破坏发育中的小鼠新皮层中的神经元迁移。这些结果将血管抑制素/SVBP复合物鉴定为TCP酶。因此，本发明涉及使用血管抑制素或血管抑制素/SVBP复合物活性或表达的抑制剂来治疗微管蛋白羧肽酶(TCP)相关的疾病如神经疾患和心血管疾病的方法和药物组合物。

摘要： 本发明公开了一种判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，属于细胞成像技术领域。该方法是观测荧光蛋白偶联的微管相关蛋白1轻链3蛋白（FP-LC3）斑点，与哺乳动物细胞胞浆中的FP-LC3是否存在完全、快速的交换行为。如果存在，则表明FP-LC3斑点的类型为蛋白聚集体；若FP-LC3与哺乳动物细胞胞浆中的FP-LC3存在少量或者不存在交换行为，则表明FP-LC3斑点的类型为自吞噬结构。利用该方法可以准确、快速判定LC3斑点类型。

摘要： 本发明涉及特异性结合微管相关蛋白tau的抗体和抗原结合片段。本发明还涉及使用抗tau抗体的诊断、预防以及治疗方法。

摘要： 本发明涉及特异性结合微管相关蛋白tau的抗体和抗原结合片段。本发明还涉及使用抗tau抗体的诊断、预防以及治疗方法。

摘要： 本发明公开了一种判定微管相关蛋白1轻链3蛋白斑点类型的方法，属于细胞成像技术领域。该方法是观测荧光蛋白偶联的微管相关蛋白1轻链3蛋白（FP-LC3）斑点，与哺乳动物细胞胞浆中的FP-LC3是否存在完全、快速的交换行为。如果存在，则表明FP-LC3斑点的类型为蛋白聚集体；若FP-LC3与哺乳动物细胞胞浆中的FP-LC3存在少量或者不存在交换行为，则表明FP-LC3斑点的类型为自吞噬结构。利用该方法可以准确、快速判定LC3斑点类型。

摘要： 本发明提供一种微管相关蛋白CAMSAP1L1及其多肽片段在尿液中的应用，具体为尿液微管相关蛋白CAMSAP1L1及其多肽片段在前列腺增生和前列腺癌疾病诊断、鉴别诊断及机理研究中的应用。前列腺增生是常见泌尿系统良性疾病，前列腺癌是常见的泌尿系恶性肿瘤,两种疾病的鉴别是早期诊断前列腺癌的关键。本发明通过研究证实，与前列腺增生相比，微管相关蛋白CAMSAP1L1及其多肽片段在前列腺癌患者尿液中高表达，在前列腺癌患者尿液外泌体中低表达，可用于前列腺癌疾病的诊断、鉴别诊断及为机理研究提供依据。本发明发挥尿液获取无创、可重复取样的优势，利用尿液检测尿液微管相关蛋白CAMSAP1L1及其多肽片段。