异位成骨

摘要： 目的 初步探讨多孔复合材料HAPw-ZnO的体内生物学性能.方法 选用树鼩15只,雌雄不限,每只背部肌肉均植入多孔复合材料HAPw-ZnO、Bio-Oss骨粉、ATLANTIK人工骨、国产金世植骨灵人工骨,多孔复合材料HAPw-ZnO为实验组,其余为对照组.术后进行动物大体观察及手术部位观察,4周、8周、12周每次随机抽取4只动物处死,进行埋植部位肌肉组织病理学观察、碱性磷酸酶活性(ALP)及钙含量测定.结果 HE染色显示实验HAPw-ZnO组与各对照组肌间质内均可见钙化灶,实验组肌肉可见炎症细胞明显聚集;Masson染色显示实验组与各对照组植入材料周边均可见绿染的胶原纤维;碱性磷酸酶活性及钙含量测定实验组与金世植骨灵组及Bio-Oss骨粉组的差异有统计学意义,金世植骨灵组及Bio-Oss骨粉组优于实验组,与ATLANTIK人工骨组差异无统计学意义.结论 多孔复合材料HAPw-ZnO在植入树鼩背部肌肉后有成骨活性但未异位成骨,且引起炎症反应.

摘要： 背景:聚乳酸-羟基乙酸共聚物是被批准用于实验及临床的少数生物材料之一,其具有良好的生物相容性和生物降解性及优异的机械性能,是一种良好的组织工程支架载体.目的:验证聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米三维多孔支架材料与人骨髓间充质干细胞的体外生物相容性及体内异位成骨能力.方法:①运用静电纺丝技术将150 g/L的聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶液电纺成纳米纤维膜,将第3代人骨髓间充质干细胞(人骨髓标本获取已经获得贵州医科大学附属医院伦理委员会批准)种植于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,采用成骨诱导液培养7 d,DAPI荧光染色、吖啶橙荧光染色及扫描电镜观察细胞-支架复合物的生长情况;②将第3代人骨髓间充质干细胞种植于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,使用成骨诱导液诱导培养的作为实验组,不使用成骨诱导液诱导培养的作为对照组,两组培养14 d后分别植入裸鼠皮下,术后12周取出植入材料标本,行苏木精-伊红染色、茜素红染色、碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色观察植入物体内异位成骨情况.动物实验获得贵州医科大学实验动物伦理委员会批准,批准号:NO1759999.结果与结论:①DAPI荧光染色与吖啶橙荧光染色显示细胞黏附于聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上,生长良好;②扫描电镜显示,成骨诱导培养的人骨髓间充质干细胞在聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维支架上生长良好,细胞产生丰富的细胞外基质并覆盖于纳米纤维支架表面;③植入12周后,两组茜素红染色、碱性磷酸酶染色和Ⅰ型胶原染色呈阳性,其中实验组各染色阳性表达强于对照组;苏木精-伊红染色显示实验组有较多成骨细胞和典型的骨陷窝,对照组仅有少量骨组织形成;④研究表明,聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米纤维膜具有良好的生物相容性及体内异位成骨能力,可作为骨组织工程支架材料.

摘要： 目的 研究负载淫羊藿苷(icariin,ICA)去蛋白牛骨无机材料(deproteinized bovine bone,DBB)的异位成骨能力. 方法 使用仿生磷酸钙涂层技术制备负载ICA的改性DBB材料.6只雄性SD大鼠麻醉后,每只大鼠背部皮下分别植入3种材料:DBB组(未经处理的DBB),CaP组(CaP涂层改性的DBB),ICA-CaP组(CaP涂层内含有ICA的DBB).8周后取材,HE和Masson染色并对样本进行组织学观察. 结果 组织学观察结果显示,DBB组材料的周围被纤维组织包绕,少量新生骨形成;CaP组的材料表面可见散在分布的新生骨;ICA-CaP组的材料表面可见多处新生骨生成.半定量分析结果表明ICA-CaP组的新生骨面积百分比显著高于DBB组和CaP组,各组间差异均具有统计学意义(P＜0.05). 结论 通过仿生磷酸钙涂层技术负载ICA的改性DBB材料具有较好的异位骨诱导能力.

摘要： Objective To investigate the feasibility of ectopic osteogenic compound repairing radial bone defects in New Zealand white rabbits.Methods Thirteen healthy New Zealand white rabbits (4 weeks old,1.5 kg) were selected as experimental animals.Bone marrow -derived mesenchymal stromal cells (BMSC) were isolated.Two weeks after osteoinduction of BMSC,alkaline phosphatase (ALP) staining were undertaken to evaluate the bone formation.After osteoinduction,BMSC suspension was added to the biological ceramic containing β-tricalcium phosphate (β-TCP) for co culture for 3 days before they were implanted besides the femoral periosteum.The ectopic osteogenic compound was harvested at 8 weeks,and examined under microscope.Eight New Zealand white rabbits were used to established radial bone defect models and randomly divided into the experimental group (ectopic osteogenic compound,n =4) and the control group (β-TCP,n =4),respectively.The X-ray examination was carried out at 4,8 and 12 weeks.The regenerated tissue was harvested for examination at 12 weeks.Results The ectopic osteogenic compound was harvested successfully at 8 weeks after implantation,and its cellular structure was similar to the normal one of the adjacent femur shaft.In terms of the repair outcome of bone defects,the X-ray demonstrated that the experimental group was significantly superior to the control group;at 12 weeks,the regenerated bone in the experimental group was integrated better with the adjacent normal bone,with higher bone density and more blood vessels,compared with the control group.Conclusion The ectopic osteogenic compound can be used to repair radial bone defects in New Zealand white rabbits.%目的 探索异位成骨材料修复新西兰兔桡骨干骨缺损的可行性.方法 13只新西兰白兔(4周龄,体质量1.5 kg)作为实验动物.取新西兰白兔骨髓间充质干细胞进行成骨诱导,2周后予碱性磷酸酶染色确认其成骨活性.取诱导后的间充质干细胞悬液与β-磷酸三钙生物陶瓷共培养,3天后植入4只新西兰白兔股骨骨膜旁.于植入后第8周收取异位成骨材料,行骨组织切片检查.取8只新西兰兔,制作桡骨干骨缺损动物模型,并将其均分为实验组(4只)和对照组(4只),分别植入异位成骨材料和β-磷酸三钙生物陶瓷修复骨缺损,于术后4、8、12周行手术侧X线摄片,术后12周取修复处骨,行组织切片检查.结果 异位成骨植入第8周见植入物成骨完整,获取的成骨材料组织切片显示与股骨干骨细胞结构相似.骨缺损修复动物实验术后X线摄片显示,实验组修复效果显著优于对照组;术后12周修复处骨组织切片显示,实验组新生骨与周边骨组织边界消失,融合度好,骨小梁密度高,新生血管较多.结论 异位成骨材料可用于兔桡骨干骨缺损修复.

摘要： 目的:探讨多孔羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)支架作为人工骨替代材料的异位成骨效果.方法:将人胚胎间充质干细胞与多孔HA支架混合培养7 d,取出细胞支架复合体移植入比格犬背肌内为实验组,同时植入未与细胞共培养的多孔HA支架于比格犬背肌内为对照组,在植入第12周时取出体内异位成骨组织进行成骨效果检测.结果:植入第12周时的异位成骨组织内均有新生血管形成,新生骨组织实验组明显多于对照组.结论:多孔HA支架在体内有很好的异位成骨能力,人胚胎间充质干细胞能促进新骨的形成.%Objective:To explore the ectopic osteogenesis effect of the porous hydroxyapatite (HA) scaffolds as the artificial bone substitute materials.Methods:Cultured human placenta derived mesenchymal stem cells with porous HA scaffolds for 7 d,cell-scaffold composite were taken out to implanted in the beagle's back muscles as the experimental group,and implanted blanket porous HA scaffolds in the beagle's back muscles as the control group,respectively remove the ectopic osteogenesis organization at 12 weeks after implantation,then detected the osteogenesis effect of the ectopic ossification organizations.Results:Implanted at 12 weeks there had new blood supply in the ectopic ossification organizations,and the experimental group new bone tissue significantly greater than the control group.Conclusions:Porous HA ceramic scaffolds have good ectopic bone formation in vivo,and human placenta mesenchymal stem cells can promote the formation of new bone.

摘要： 目的:探讨脂肪干细胞异位成骨修复上颌骨大面积缺损的临床效果.方法:建立兔上颌缺损模型,取自体脂肪干细胞进行异位成骨修复,活体检查及影像学检查观察修复效果.结果:活检结果显示,实验动物新生骨组织血管化良好,为成熟骨组织结构.重建术后2个月,腹直肌基本上完全萎缩,上皮化良好.丙烯酸固定桥修复成功,修复功能良好率为95.0％.术后6周,常规下颌CT扫描,并进行三维重建.实验动物新生骨量明显,缺损边缘及中央均有明显新骨生成,术后8周,缺损已经完全修复.结论:脂肪干细胞异位成骨修复兔上颌骨大面积缺损无明显排斥反应,值得临床广泛推广.

摘要： 植骨材料已不仅仅是简单的支架材料,还应具备使细胞生长分化成为成骨细胞的潜能,也就是骨诱导性能.拥有良好骨诱导性能的材料不仅能加速骨缺损的愈合,还能成功修复更大面积的骨缺损.目前,对使材料拥有骨诱导潜能的研究层出不穷,如何最大限度提高材料的骨诱导潜力,从而最大限度地利用生物材料以生产出更优质的下一代创新生物材料是目前应解决的问题.本文针对目前研究中的几类骨替代材料骨诱导性能做一综述.%Bone graft material is not only a simple scaffold frame, but also a material with the potential to induce cells grow and differentiate into osteoblasts. The material with excellent bone induction properties can accelerate the healing of bone defect, thus repair the large area of bone defect successfully. Currently, plenty of researches regarding the bone induction in bone graft material have been reported, how to maximize the material osteoinductive potential, and to take advantage of these biological materials to produce the next generation of innovative biological material, is the current concerns. In this paper, a review is made on the bone induction properties of several kinds of bone substitutes.

摘要： 植骨材料已不仅仅是简单的支架材料,还应具备使细胞生长分化成为成骨细胞的潜能,也就是骨诱导性能。拥有良好骨诱导性能的材料不仅能加速骨缺损的愈合,还能成功修复更大面积的骨缺损。目前,对使材料拥有骨诱导潜能的研究层出不穷,如何最大限度提高材料的骨诱导潜力,从而最大限度地利用生物材料以生产出更优质的下一代创新生物材料是目前应解决的问题。本文针对目前研究中的几类骨替代材料骨诱导性能做一综述。

摘要： 目的探讨超声造影(Contrast Enhanced Ultrasound,CEUS)在骨再生过程中骨移植材料早期血管化的应用价值,为临床骨再生不良提供早期诊断信息。方法将25只斯泼累格·多雷(Sprague Dawley,SD)级雄性大鼠,于左侧后肢近股骨头处肌间隙内植入磷酸钙骨水泥/重组人骨形态蛋白2(Calcium Phosphate Cement/recombination huaman Bone Morphogenetic Protein-2,CPC/rh BMP-2),建立大鼠肌内异位成骨模型。在术后3、7、14、21、28 d分别进行高频超声、CEUS及病理学检测。观察不同时间CPC/rh BMP-2内的血流灌注情况及骨生成情况,并与病理结果进行对照。结果 CEUS显示,术后3 d,支架外周见少许星点状造影剂灌注,随着时间的增加,造影剂逐步向中央填充,且时间-强度曲线定量分析显示,峰值强度(Peak Intensity,PI)及曲线下面积(Area Under the Curve,AUC)逐渐上升;术后14确d,PI和AUC均达到最大值,术后21、28 d造影剂的PI、AUC降低。各组间差异具有统计学意义(p0.05)。苏木精伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色显示,术后3、7、14、21、28 d支架内可见不同程度的新生血管形成,术后14 d为显著,与CEUS检查相符。结论 CEUS可早期显示CPC/rh BMP-2的新生血管形成情况,为骨移植的生长评估及骨再生不良提供诊断依据。

摘要： 脱细胞松质骨/BMP-2具有诱导成骨能力，并可在听泡空腔特殊部位诱导成骨，是一种很好的异位诱导成骨方法。本研究制备脱细胞松质骨作为骨形态发生蛋白-2(BMP-2)载体,观察其异位成骨状况。

摘要： 用动物实验的方法评价自行研制合成的BMP2活性多肽生物因子与可降解支架材料PLGA-[ASP-PEG]复合物的异位诱导成骨能力。rn 方法：将BMP2活性多肽P24通过交联剂共价结合于PLGA-[ASP-PEG]材料上作为实验组，以未加BMP2活性多肽的单纯PLGA-[ASP-PEG]材料为对照组。分别于Wistar大鼠背部两侧骶棘肌下包埋植入。术后1、4、8和12周取材。经组织学观察和CT三维成像比较成骨情况，westernblot检测I型胶原(Col-I)及骨桥蛋白(OPN)的蛋白表达。rn 结论：BMP2活性多肽P24能启动软骨化骨过程，具有较强的异位诱导成骨能力。具有与天然BMP2类似的骨诱导活性，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种成骨诱导剂及在脂肪间充质干细胞成骨诱导分化中的应用。RUNX2是成骨分化过程中关键的调控因子，能够调控众多基因的转录，RUNX2缺失会导致成骨细胞的分化完全被抑制。本发明发现，川白芷素可显著提高脂肪间充质干细胞成骨分化调控因子RUNX2的表达水平，为有效的RUNX2表达激活剂；将川白芷素作用于脂肪间充质干细胞，茜素红染色结果发现川白芷素可以显著提高细胞钙矿化结节程度，表明川白芷素对ADSCs成骨分化具有显著的诱导作用。

摘要： 一种基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法，其成骨诱导分化培养基含有弓形虫外分泌蛋白。成骨诱导分化培养基还含有地塞米松、L‑抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠和完全培养基。含量如下：弓形虫外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L‑抗坏血酸：30mM～80mM；β‑甘油磷酸钠：3mM～15mM。本发明的弓形虫外分泌蛋白作为成骨诱导培养基添加成分可大幅提高间充质干细胞成骨分化效果。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，特别涉及一种脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物及其成骨诱导方法。本发明脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物包括钙粘附蛋白‑11和富血小板血浆，该脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物可显著提高脂肪间充质干细胞的成骨诱导分化能力，采用PRP代替动物血清，减少了其应用的风险和免疫原性，并且可应用于临床。

摘要： 本发明公开一种调控细胞成骨分化的转录因子及成骨分化细胞，转录因子为Zfp260，细胞为Krt14阳性细胞或Krt14/Ctsk双阳性细胞，成骨分化细胞的方法包括以下步骤：S1、筛选Krt14阳性细胞或Krt14/Ctsk双阳性细胞作为骨分化细胞；S2、将步骤S1筛选的骨分化细胞植入支持载体的内部；S3、在所述支持载体的内部培养骨分化细胞，最终形成骨骼；综上所述，本发明提供了促进骨分化、再生的因子和方法。

摘要： 一种基于弓形虫外分泌蛋白的成骨诱导分化培养基、制备方法及成骨诱导分化方法，其成骨诱导分化培养基含有弓形虫外分泌蛋白。成骨诱导分化培养基还含有地塞米松、L‑抗坏血酸、β‑甘油磷酸钠和完全培养基。含量如下：弓形虫外分泌蛋白：0.5mg/mL～15mg/mL；地塞米松：80nM～120nM；L‑抗坏血酸：30mM～80mM；β‑甘油磷酸钠：3mM～15mM。本发明的弓形虫外分泌蛋白作为成骨诱导培养基添加成分可大幅提高间充质干细胞成骨分化效果。

摘要： 本发明公开了一种脂肪间充质干细胞成骨诱导组合物，由以下原料组成：基础培养基、β‑甘油磷酸二钠、磷酸铁锂、纳米硒化铋、泡桐素、成纤维细胞生长因子、重组胰岛素。本发明提供的组合物添加磷酸铁锂、纳米硒化铋以及泡桐素等成分，能有效提高细胞的成骨增殖分化效率。其中添加的磷酸铁锂、纳米硒化铋提高了脂肪间充质干细胞成骨分化信号活性，能有效促进细胞的成骨分化。泡桐素和成纤维细胞生长因子、重组胰岛素一起促进成骨细胞增殖，缩短细胞分化时间。本发明还提供一种脂肪间充质干细胞成骨诱导方法，采用本发明提供的组合物可以高效稳定的对脂肪间充质干细胞进行成骨诱导分化，保障了脂肪间充质干细胞在骨组织工程中的应用。

摘要： 本发明公开了一种成骨诱导剂及在脂肪间充质干细胞成骨诱导分化中的应用。RUNX2是成骨分化过程中关键的调控因子，能够调控众多基因的转录，RUNX2缺失会导致成骨细胞的分化完全被抑制。本发明发现，川白芷素可显著提高脂肪间充质干细胞成骨分化调控因子RUNX2的表达水平，为有效的RUNX2表达激活剂；将川白芷素作用于脂肪间充质干细胞，茜素红染色结果发现川白芷素可以显著提高细胞钙矿化结节程度，表明川白芷素对ADSCs成骨分化具有显著的诱导作用。

摘要： 本发明公开了一种用于大段骨缺损治疗的辅助体内异位成骨装置，其包括主体部，所述主体部包括顶板、侧板及底板，所述侧板搭接于顶板与底板之间，所述侧板为向一侧弯曲的构件，顶板、侧板及底板围成单侧开口的空腔；所述用于大段骨缺损治疗的辅助体内异位成骨装置的装置还包括输液管，所述输液管与所述空腔可拆卸的连通以为异位成骨的形成输送营养液。本发明提供的一种用于大段骨缺损治疗的辅助体内异位成骨装置，适用于异位成骨治疗大段骨缺损，其结构合理，设计巧妙，在空腔的单侧设置开口用于设置组织工程支架、同种异体骨料，同时在形成空腔的侧板设置多个微孔，有效保证了物质交换，提高大段骨缺损的治疗效果。

摘要： 本发明公开了一种植骨材料皮下异位成骨动物模型的构建、评估方法及应用。本发明将自体血和植骨材料混合，待自体血凝固后，将自体血和植骨材料的混合物植入大鼠皮下，构建植骨材料皮下异位成骨动物模型；通过多种成骨性能表征方法对植骨材料皮下异位成骨动物模型进行评估，鉴定植骨材料的成骨性能。本发明将植骨材料与自体血混合后植入皮下异位成骨模型，一方面自体血能够稳定植骨材料，防止移位；另一方面皮下环境缺乏成骨相关的细胞因子和干细胞，往往需要额外添加，且价格昂贵，操作复杂，而自体血可为皮下植骨材料带入自体来源的细胞因子及干细胞，使得皮下异位成骨模型可更好地用于评估植骨材料的成骨性能。

摘要： 本实用新型公开了一种用于大段骨缺损治疗的辅助体内异位成骨装置，其包括主体部，所述主体部包括顶板、侧板及底板，所述侧板搭接于顶板与底板之间，所述侧板为向一侧弯曲的构件，顶板、侧板及底板围成单侧开口的空腔；所述用于大段骨缺损治疗的辅助体内异位成骨装置的装置还包括输液管，所述输液管与所述空腔可拆卸的连通以为异位成骨的形成输送营养液。本实用新型提供的一种用于大段骨缺损治疗的辅助体内异位成骨装置，适用于异位成骨治疗大段骨缺损，其结构合理，设计巧妙，在空腔的单侧设置开口用于设置组织工程支架、同种异体骨料，同时在形成空腔的侧板设置多个微孔，有效保证了物质交换，提高大段骨缺损的治疗效果。