完全抗原

摘要： 为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定后,通过免疫新西兰大白兔获得抗ZIL多抗血清,并对抗体效价、半数抑制浓度(IC_(50))和特异性进行鉴定。HPLC-MS检测结果显示,改造后的主产物分子质量为348.21 u,约占整个反应体系产物的92.23%,与ZIL-丁酸盐分子质量完全相符;SDS-PAGE电泳结果显示,BSA/OVA在电泳中的迁移速率明显大于偶联产物;UV结果显示,相比载体蛋白,偶联产物ZIL-BSA/OVA的特征吸收峰均发生了明显变化;ELISA效价检测结果表明,ZIL多抗血清效价在1∶6400以上,通过建立标准曲线测得IC_(50)分别为0.38 ng/mL和1.13 ng/mL,并且与沙丁胺醇(SAL)、特布他林(TBL)、溴布特罗(BRO)、西马特罗(CIM)、克仑特罗(CLB)、盐酸多巴胺(DH)、莱克多巴胺(RAC)、达氟沙星(DAN)、泰乐菌素(TYL)均不存在任何交叉反应。成功制备了ZIL完全抗原ZIL-BSA/OVA,获得了一种高灵敏度和高特异性的抗ZIL pAb,为后续建立ZIL免疫学快速检测方法奠定了基础。

摘要： 【目的】探究石房蛤毒素(STX)完全抗原制备方法和STX多克隆抗体免疫方案。【方法】通过碳二亚胺法(EDC)和高碘酸盐法(periodate reaction)2种交联方法,将小分子石房蛤毒素与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)和孔血蓝蛋白(KLH)分别进行交联,制备了6种形式STX完全抗原,并对交联物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定和紫外吸收峰迁移变化鉴定。分别将EDC法和高碘酸盐法交联的STX-BSA、STX-KLH 4种完全抗原作为免疫原,对Balb/c小鼠进行免疫,获得STX多克隆抗体。通过间接ELISA法,对不同方法制备的多克隆抗体进行分析比较。【结果】在石房蛤毒素完全抗原的制备中,在交联方法的选择上,EDC法较高碘酸盐法更具优势;而在免疫原的选择上,STX-BSA完全抗原效果最好。【结论】本研究探究了2种制备STX完全抗原的方法,为今后多克隆抗体生产以及特异性单克隆抗体筛选提供数据支撑。

摘要： 为了快速安全地检测动物性食品中是否含有过高浓度雌激素,本研究将半抗原雌二醇(Estradiol,E_(2))合成为雌二醇-3-羧甲基醚(E_(2)-3-CME),再通过碳二亚胺(EDC)法与牛血清白蛋白(BSA)结合,合成完全抗原(E_(2)-BSA).将1 mg/只的E_(2)-BSA免疫雌性家兔,制备出抗雌激素的抗体.通过用酶联免疫吸附(Elisa)实验对产生的抗体进行效价鉴定.实验结果表明,第三次免疫后E_(2)-BSA产生的抗体光密度值(OD)最高,且与对照组,免疫一次和两次产生的抗体的OD值均具有明显差异,显示通过抗原免疫三次的家兔产生的抗体效价最高,可为后期通过此方法制备抗体和Elisa试剂盒奠定基础.

摘要： 目的:制备高效价SDMA血清多克隆抗体。方法:先由鸟氨酸合成乙胺基丙胺,再与SDMA合成SDMA半抗原,再用戊二醛法将SDMA半抗原与载体蛋白BSA(或OVA)偶联,合成SDMA完全抗原。完全抗原用弗氏佐剂乳化,免疫2只新西兰大耳白兔,隔两周免疫一次,第五次免疫一周后,心脏取血,分离血清,ELISA法检测血清中抗体的滴度,用竞争ELISA法检测小分子的抑制作用。结果:两只兔免疫获得的抗SDMA抗体血清滴度分别为1∶128000和1∶56000;小分子竞争后两只兔血清吸光度值均接近阴性血清吸光度值,说明小分子抑制作用均良好。结论:血清中抗体滴度达1∶104以上,小分子抑制作用良好,初步说明SDMA兔血清抗体制备成功。

摘要： 为制备达氟沙星(DAN)多克隆抗体,建立检测DAN残留的间接竞争ELISA(ic-ELISA)方法,采用混合酸酐法制备免疫原DAN-BSA和包被原DAN-OVA,用DAN-BSA免疫新西兰大白兔获得DAN多抗血清,建立检测DAN的ic-ELISA检测方法。结果显示,成功合成了DAN-BSA和DAN-OVA,并获得DAN的多克隆抗体;用该抗体建立的ic-ELISA检测方法的半数抑制浓度为0.39μg/L,最低检测限为0.04μg/L,检测范围为0.09μg/L~6.16μg/L。结果表明,成功制备了抗DAN的多克隆抗体,并建立了检测DAN的ic-ELISA方法,为进一步开发DAN快速检测试剂盒奠定了基础。

摘要： 制备重金属铅完全抗原,进而制备和纯化重金属铅的多克隆抗体.使用双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA、Pb2+标准溶液和牛血清白蛋白(BSA)制备重金属铅的完全抗原Pb-DTPA-BSA;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法判断完全抗原Pb-DTPA-BSA是否合成成功,并应用紫外分光光度计测定免疫抗原Pb-DTPA-BSA的浓度;取0.5 mg免疫抗原Pb-DTPA-BSA加入弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备抗重金属铅多克隆抗体,并运用凝胶柱层析法纯化抗重金属铅多克隆抗体,SDS-PAGE方法判定抗重金属铅多克隆抗体的纯化结果.SDS-PAGE结果显示成功制备重金属铅的完全抗原Pb-DTPA-BSA,其浓度为3.4mg/mL;应用免疫抗原Pb-DTPA-BSA免疫家兔,成功制备抗重金属铅多克隆抗体:应用凝胶柱层析法纯化获得高纯度抗重金属铅多克隆抗体.成功制备重金属铅的完全抗原Pb-DTPA-BSA,并成功制备和纯化抗重金属铅的多克隆抗体.

摘要： 雷公藤甲素是雷公藤植物中含有的环氧二萜内酯化合物,散养蜂群所产的蜂蜜中页有可能含有雷公藤甲素.本研究制备雷公藤甲素抗体的目的是用免疫检测的方法检测雷公藤甲素.以雷公藤甲素为小分子半抗原,对其14位-OH进行修饰,获得GTP,采用碳二亚胺(EDC)法,将其与牛血清蛋白(BSA)载体蛋白偶联,制备免疫抗原(GTP-BSA),用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪测定GTP和BSA的偶联产物.结果表明偶联终产物的出峰时间比牛血清白蛋白出峰时间晚,偶联终产物分子量比牛血清白蛋白分子量大,说明偶联成功.

摘要： 镉是生物毒性最强的重金属之一,动物性食品中的重金属镉残留给人类健康带来了巨大危害,建立高效、快速的重金属镉免疫学检测技术对保障食品安全和人类健康具有十分重要的意义.本研究运用双功能螯合剂DTPA、镉离子标准溶液和牛血清白蛋白(BSA)制备重金属镉的完全抗原Cd-DTPA-BSA,以其为免疫抗原加入弗氏佐剂乳化后免疫家兔,制备抗重金属镉多克隆抗体,并运用凝胶柱层析法纯化抗重金属镉多克隆抗体,SDS-PAGE结果显示多克隆抗体的纯化效果较好,Dot-ELISA测定纯化后多克隆抗体的效价达到1∶1600.该研究为动物性食品中重金属铅ELISA检测方法的建立奠定了基础.

摘要： 西马特罗(Cimaterol)为β-肾上腺素受体类兴奋剂.本课题针对畜产食品中的西马特罗等威胁食品安全的卜肾上腺素受体类兴奋剂检侧问题，研究以免疫学为基础的高效灵敏的生物学检测技术，建立以免疫亲和柱层析净化技术为核心的样品前处理方法。主要对西马特罗单克隆抗体的筛选制备、西马特罗免疫亲和柱的研发和制备、免疫亲和柱前处理技术指标的比较研究进行了分析，其中西马特罗完全抗原的人工合成与鉴定是本课题关键的基础工作。

摘要： 文章研究了免疫学快速检测吡虫啉残留的方法，采用HPLC-MS、IR、UV和NMR技术,对通过化学修饰合成的吡虫啉(IMI)人工半抗原及EDC法合成的IMI完全抗原进行了结构表征,证明IMI人工半抗原和完全抗原合成成功,且完全抗原中半抗原与载体蛋白的偶连比为18.5:1.

摘要： 桔霉素(citrinin，简称CIT)是一种真菌的次级代谢产物，自然界中多种青霉和曲霉都可以产生。它常发生在受污染的玉米、小麦等食品及饲料中，能直接或者间接进入食品链，威胁人或动物的健康和生命安全。由于桔霉素的危害难以消除，因此建立一种快速、灵敏的桔霉素的筛查方法显得尤为重要。

摘要： 以Cd与ITCBE反应,生成Cd-ITCBE复合物作为半抗原。利用该半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到人工完全抗原,并以紫外扫描对完全抗原进行分析鉴定。同时,采用原子吸收测定完全抗原重金属镉的含量。分析结果表明,本实验成功合成了重金属镉的完全抗原。

摘要： 为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷，利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计，以重氮化反应将CLB和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联工艺进行优化，分析各因索对偶联反应的影响机理，并在得出的最佳条件下合成高偶联率的免疫抗原BSA-CLB和包被抗原OVA-CLB。rn 继而以BSA-CLB免疫日本人耳白家兔，以OVA-CLB包被酶标板，采用间接非竞争酶联免疫吸附实验检测血清效价，以鉴定合成抗原的生物学活性。结果表明，OVA-CLB和BSA-CLB的偶联率分别为29:1和52.3:1，获得的抗血清效价高达1:640000，ELISA检测灵敏度0.013μg/mL。

摘要： 为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷，利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计，以重氮化反应将CLB和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联工艺进行优化，分析各因索对偶联反应的影响机理，并在得出的最佳条件下合成高偶联率的免疫抗原BSA-CLB和包被抗原OVA-CLB。rn 继而以BSA-CLB免疫日本人耳白家兔，以OVA-CLB包被酶标板，采用间接非竞争酶联免疫吸附实验检测血清效价，以鉴定合成抗原的生物学活性。结果表明，OVA-CLB和BSA-CLB的偶联率分别为29:1和52.3:1，获得的抗血清效价高达1:640000，ELISA检测灵敏度0.013μg/mL。

摘要： 为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷，利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计，以重氮化反应将CLB和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联工艺进行优化，分析各因索对偶联反应的影响机理，并在得出的最佳条件下合成高偶联率的免疫抗原BSA-CLB和包被抗原OVA-CLB。rn 继而以BSA-CLB免疫日本人耳白家兔，以OVA-CLB包被酶标板，采用间接非竞争酶联免疫吸附实验检测血清效价，以鉴定合成抗原的生物学活性。结果表明，OVA-CLB和BSA-CLB的偶联率分别为29:1和52.3:1，获得的抗血清效价高达1:640000，ELISA检测灵敏度0.013μg/mL。

摘要： 为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷，利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计，以重氮化反应将CLB和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联工艺进行优化，分析各因索对偶联反应的影响机理，并在得出的最佳条件下合成高偶联率的免疫抗原BSA-CLB和包被抗原OVA-CLB。rn 继而以BSA-CLB免疫日本人耳白家兔，以OVA-CLB包被酶标板，采用间接非竞争酶联免疫吸附实验检测血清效价，以鉴定合成抗原的生物学活性。结果表明，OVA-CLB和BSA-CLB的偶联率分别为29:1和52.3:1，获得的抗血清效价高达1:640000，ELISA检测灵敏度0.013μg/mL。

摘要： 为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷，利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计，以重氮化反应将CLB和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联工艺进行优化，分析各因索对偶联反应的影响机理，并在得出的最佳条件下合成高偶联率的免疫抗原BSA-CLB和包被抗原OVA-CLB。rn 继而以BSA-CLB免疫日本人耳白家兔，以OVA-CLB包被酶标板，采用间接非竞争酶联免疫吸附实验检测血清效价，以鉴定合成抗原的生物学活性。结果表明，OVA-CLB和BSA-CLB的偶联率分别为29:1和52.3:1，获得的抗血清效价高达1:640000，ELISA检测灵敏度0.013μg/mL。

摘要： 本发明提供了莠去津半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用，属于莠去津免疫分析技术领域。本发明提供的莠去津半抗原能够充分暴露莠去津结构的活性部位，且溶解性以及稳定性好，经与载体蛋白偶联得到莠去津完全抗原，利用该莠去津完全抗原制备的抗莠去津抗体效价高，特异性好，灵敏度高，并且其与其它三嗪类农药交叉反应率低，可以用于建立莠去津免疫学检测方法，具有广阔应用前景。

摘要： 本发明提供一种啶虫脒半抗原、完全抗原的合成与应用，包括一种啶虫脒半抗原。本发明涉及一种啶虫脒半抗原，该啶虫脒半抗原是以氯甲基烟酸甲酯为原料所合成的一种新的啶虫脒半抗原，该啶虫脒半抗原保留了啶虫脒的主要结构；本发明还涉及该啶虫脒半抗原的合成方法，该合成方法保留了啶虫脒的主要结构，相比于现有技术能够节约啶虫脒半抗原的合成成本，提高啶虫脒半抗原的合成效率。

摘要： 本发明提供一种吡虫啉半抗原、完全抗原及其合成与应用，包括一种吡虫啉半抗原。本发明涉及一种吡虫啉半抗原及其合成方法，该吡虫啉半抗原的合成方法简单高效，相比于现有技术能够节约吡虫啉半抗原的合成成本，提高吡虫啉半抗原的合成效率；本发明还涉及一种吡虫啉完全抗原及两种合成方法，该吡虫啉完全抗原基本保留了吡虫啉的特征结构。

摘要： 本发明公开了一种苯醚甲环唑半抗原、完全抗原、抗体及其制备方法和应用，属于食品安全免疫检测领域。本发明的苯醚甲环唑半抗原的结构式如式1所示，该半抗原用于制备苯醚甲环唑完全抗原，再以该完全抗原免疫小鼠获得苯醚甲环唑单克隆抗体，该抗体对苯醚甲环唑具有更好的亲和力和很高的灵敏度，基于该抗体制备的检测主体对苯醚甲环唑的50％抑制浓度IC50为0.09ng/mL，最低检测限为0.015ng/mL，线性范围为0.023～0.35ng/mL。表明本发明制备的苯醚甲环唑完全抗原具有较高的免疫原性，可用于制备苯醚甲环唑的免疫检测试剂盒以及胶体金试纸条，为食品中苯醚甲环唑的残留检测提供有效的检测手段。

摘要： 本发明公开了利福平半抗原、完全抗原及其合成与应用。利福平半抗原的结构如式所示。本发明提供的利福平完全抗原能充分暴露利福平的抗原决定簇，并保持利福平的空间构象，具有较好的免疫原性。本发明提供的利福平单克隆抗体以利福平完全抗原为免疫原制备得到，具有特异性强、灵敏度高等特点，可作为酶联免疫检测和胶体金免疫检测的原料。式。

摘要： 本发明属于免疫分析技术领域，具体涉及乙嘧酚半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用。本发明提供的乙嘧酚半抗原，具有式I所示结构，式I中的R1为能够与载体蛋白直接偶联的活性基团。本发明提供的乙嘧酚半抗原在保留乙嘧酚基本结构的基础上，以乙嘧酚原有的‑CH2‑CH2‑CH2‑CH2‑结构作为连接臂，在连接臂上远离乙嘧酚的特征结构的位点上引入能够与载体蛋白直接偶联的活性基团R1，有效避免外接连接臂带来的非特异性结合，引入的活性基团偶联载体蛋白后能够充分暴露乙嘧酚本体分子的特征结构，制备得到的乙嘧酚完全抗原具有免疫原性，制备的抗乙嘧酚抗体特异性好，灵敏度高，其可以用于建立乙嘧酚免疫学检测方法或检测试剂，具有广阔应用前景。

摘要： 本发明提供了一种扑草净半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用，属于扑草净免疫分析技术领域。本发明提供的扑草净半抗原纯度高，溶解性和稳定性好，与载体蛋白偶联得到的扑草净完全抗原具有抗原性。采用所述扑草净完全抗原免疫宿主动物得到的抗血清或抗体，能够特异性识别扑草净。本发明制备的扑草净完全抗原免疫宿主动物后，能够刺激宿主动物机体产生高灵敏度和特异性好的扑草净抗体。使用本发明提供的扑草净半抗原、完全抗原、抗体及制备方法，可为扑草净的免疫应用提供技术基础，所制备的抗体可用于建立扑草净免疫学检测方法，具有广阔的应用前景。

摘要： 一种大麻二酚半抗原与完全抗原的制备方法及应用，大麻二酚半抗原是由3,5‑二甲氧基苯甲醛与三乙基‑4‑磷化物反应生成（2E，4E）‑5‑（3,5‑二甲氧基苯基）‑2,4‑戊二烯酸乙酯，随后经PdC/H2还原，HBr/HoAc脱甲基和皂化反应得到5‑（3,5‑二羟苯基）戊酸，最后再与(1S,4R)‑1‑甲基‑4‑(1‑甲基乙烯基)‑2‑环己烯‑1‑醇反应得到大麻二酚半抗原；大麻二酚完全抗原由大麻二酚半抗原与载体蛋白偶联得到。本发明制备的抗原呈现出特异性的大麻二酚抗原决定簇，使得筛选出高特异性的大麻二酚单克隆抗体成为可能。产生的抗体特异性高、灵敏度高，对大麻及其衍生物均无明显的交叉反应，可用于建立酶联免疫分析方法和胶体金、荧光快速检测试纸法，实现对样品中大麻二酚的快速检测。

摘要： 本发明属于药物监测技术领域，具体涉及阿司匹林半抗原、完全抗原、抗体及制备方法和应用。本发明提供一种阿司匹林半抗原衍生物，具有式1所示结构。本发明提供的阿司匹林半抗原衍生物的衍生位点位于阿司匹林的乙酰基结构上，该结构区域是阿司匹林与活性代谢物水杨酸的非共同的特征结构，本发明通过式1所示阿司匹林半抗原衍生物制备阿司匹林完全抗原时，通过载体蛋白屏蔽上述非共同的特征结构，因此由本发明提供的阿司匹林半抗原衍生物得到的阿司匹林完全抗原制备得到的抗体具有能够高灵敏度等效识别阿司匹林和活性代谢物水杨酸的能力。

摘要： 本发明属于药物监测技术领域，具体涉及利福平半抗原衍生物、利福平完全抗原、利福平抗体及应用。本发明提供的利福平半抗原衍生物，具有式1所示结构。本发明提供的利福平半抗原衍生物将利福平羟基上的H取代为‑CH2‑CH2‑CH2‑COOH结构，得到的利福平半抗原衍生物中的羧基衍生位点不仅具有同时接近利福平和利福平活性代谢物25‑DESACETYL RIFAMPICIN共同结构特征的特点，且以‑CH2‑CH2‑CH2‑COOH作为偶联臂偶联蛋白得到的利福平完全抗原能够准确获得同时对利福平和利福平活性代谢物25‑DESACETYL RIFAMPICIN特异性结合能力的利福平抗体。式1。