半抗原

摘要： 为制备齐帕特罗(ZIL)完全抗原,获得抗ZIL多克隆抗体(pAb),将ZIL与4-溴丁酸乙酯反应后,采用EDC/NHS方法使ZIL-丁酸盐中间体与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别用紫外全波长扫描(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定后,通过免疫新西兰大白兔获得抗ZIL多抗血清,并对抗体效价、半数抑制浓度(IC_(50))和特异性进行鉴定。HPLC-MS检测结果显示,改造后的主产物分子质量为348.21 u,约占整个反应体系产物的92.23%,与ZIL-丁酸盐分子质量完全相符;SDS-PAGE电泳结果显示,BSA/OVA在电泳中的迁移速率明显大于偶联产物;UV结果显示,相比载体蛋白,偶联产物ZIL-BSA/OVA的特征吸收峰均发生了明显变化;ELISA效价检测结果表明,ZIL多抗血清效价在1∶6400以上,通过建立标准曲线测得IC_(50)分别为0.38 ng/mL和1.13 ng/mL,并且与沙丁胺醇(SAL)、特布他林(TBL)、溴布特罗(BRO)、西马特罗(CIM)、克仑特罗(CLB)、盐酸多巴胺(DH)、莱克多巴胺(RAC)、达氟沙星(DAN)、泰乐菌素(TYL)均不存在任何交叉反应。成功制备了ZIL完全抗原ZIL-BSA/OVA,获得了一种高灵敏度和高特异性的抗ZIL pAb,为后续建立ZIL免疫学快速检测方法奠定了基础。

摘要： 以2-氨基-5-氯二苯甲酮和氯乙酰氯为原料,经酰胺化、六亚甲基四胺关环、硫酸二甲酯甲基化、引入丁酸叔丁酯和三氟乙酸水解等5步反应,设计并合成了一种地西泮半抗原衍生物,其结构经^(1)H NMR,^(13)C NMR和MS(ESI)表征。

摘要： 为了快速安全地检测动物性食品中是否含有过高浓度雌激素,本研究将半抗原雌二醇(Estradiol,E_(2))合成为雌二醇-3-羧甲基醚(E_(2)-3-CME),再通过碳二亚胺(EDC)法与牛血清白蛋白(BSA)结合,合成完全抗原(E_(2)-BSA).将1 mg/只的E_(2)-BSA免疫雌性家兔,制备出抗雌激素的抗体.通过用酶联免疫吸附(Elisa)实验对产生的抗体进行效价鉴定.实验结果表明,第三次免疫后E_(2)-BSA产生的抗体光密度值(OD)最高,且与对照组,免疫一次和两次产生的抗体的OD值均具有明显差异,显示通过抗原免疫三次的家兔产生的抗体效价最高,可为后期通过此方法制备抗体和Elisa试剂盒奠定基础.

摘要： 作为一种应用较为广泛的有机磷农药,毒死蜱长期大量的不合理使用而带来的残留问题越来越受到人们的关注。总结了专利申请中涉及毒死蜱特异性或通用型半抗原的结构及其抗体,以及毒死蜱的免疫分析技术,如酶联免疫分析、荧光免疫分析、化学发光免疫技术、SERS标记免疫分析、免疫层析技术、免疫芯片、生物条形码免疫分析和免疫传感器等,并展望了其发展前景。

摘要： 为建立检测水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的酶联免疫吸附检测方法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),以亚甲基蓝代谢物天青C(azure C)为亚甲基蓝的半抗原,采用戊二醛法,将azure C上的氨基与蛋白上的羧基进行偶联,制备免疫原azure C-BSA和包被原azure C-OVA.利用紫外扫描(UV)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对免疫原和包被原进行鉴定.以azure C-BSA为免疫原,按0.2 mg·只-1的剂量免疫BALB/c小鼠,对获得的多克隆抗体的效价、灵敏度和特异性进行测定.实验结果表明:制备的人工抗原azure C-BSA和azure C-OVA偶联成功,偶联比约为31:1和52:1.经过ELISA测定,多克隆抗体效价均在16000以上,其中2号小鼠抗体效价最高,半数抑制浓度(IC50)为43.9 ng·mL-1,该抗体与亚甲基蓝代谢物天青A、天青B和天青C存在交叉反应,交叉反应率分别为127.6％、84.7％和138.1％,与其他常见染料不存在交叉反应,说明该抗体特异性良好.实验成功合成亚甲基蓝人工抗原并获得免疫学特性良好的鼠源多抗血清,为后期单克隆抗体的制备及开发免疫学快速检测方法奠定了基础.

摘要： 该研究采用活泼酯法制备了人工抗原,通过动物免疫获得了针对2,4-二氯苯氧乙酸的特异性抗体.通过试验条件优化,建立了微孔侧流免疫层析方法,用于水果和蔬菜中2,4-二氯苯氧乙酸残留的快速检测.该方法的检测限:2,4-二氯苯氧乙酸为0.05μg/mL,4-氯苯氧乙酸为0.2μg/mL,2,4,5-三氯苯氧乙酸为0.5μg/mL.实际样品的检测中,其结果与HPLC的结果相一致率为100％.检测方法前处理简单、快速灵敏,且能够同时检测2,4-二氯苯氧乙酸及其结构类似物,适用于水果蔬菜中2,4-二氯苯氧乙酸残留的快速筛选.

摘要： 拟除虫菊酯类农药由于具有较高的杀虫活性和低的哺乳动物毒性,被广泛应用在农业、林业、畜牧业及家庭卫生中.尽管拟除虫菊酯类农药对于人类相对安全,若拟除虫菊酯类农药大量使用,则会引起对人类免疫系统的危害,因此建立一种灵敏、快速和有选择性的拟除虫菊酯类农药残留检测方法十分必要.

摘要： 以4-碘吡唑和亚磷酸二乙酯为初始原料,经3步反应合成了新型的磷酰化组氨酸结构类似物,并以其为半抗原制备了磷酰化组氨酸特异性抗体(Anti-pHis).采用酶联免疫吸附(ELISA)、 斑点印迹(Dot blot)和免疫印迹(Western blot)实验等方法对Anti-pHis的特异性进行了检测.结果表明,Anti-pHis对组氨酸磷酰化蛋白表现出优异的亲和力和选择性识别能力,并可应用于微生物细胞裂解液中组氨酸磷酰化蛋白的检测.

摘要： 半抗原是指与目标分析物结构相同或相似、并具有反应活性基团的低分子量有机物.半抗原的结构是否合理,并以此能否制备稳定并有良好免疫原性的人工抗原是免疫分析法建立的重要环节.综述了国内外脲类除草剂人工抗原合成过程中半抗原的设计原则、合成方法及影响因素等方面的研究进展.

摘要： 用ＡＲＳ（对氨基苯砷酸）标记抗体时常用偶氮化，将其结合到对羟基苯亚氨盐的苯环上，造成半抗原偶氮酰胺化酯，再直接与蛋白氨基酰氨胺化。以蛋白质等为半抗原载体可以结合任何半抗原、并用以免疫动物产生半抗原抗体，利用半抗原标记抗体或分子探针，可以大大提高敏感性，有广泛的应用价值。用半抗原标记抗体，再用标记荧光素、酶或金等的抗半抗原抗体与半抗原反应，或以半抗原抗体作桥，与半抗原化的ＰＡＰ结合，则更进一步提高敏感性。亦可做双标记免疫组织化学和ＥＬＩＳＡ免疫定量检测。汞化核酸探针与半抗原巯基配体结合，进而用抗半抗原抗体把与分子探针相结合的同源序列显示出来，或用定量检测技术作定量研究。

摘要： 本文将苯巴比妥(PB)经硝化和还原两步化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基，合成具有半抗原结构特征的对氨基苯巴比妥(pAPB);用重氮化法将pAPB偶联于载体蛋白BSA和OVA，合成人工免疫原BSA-pAPB和包被抗原OVA-pAPB，用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE进行鉴定，推算分子结合比;用BSA-pAPB免疫新西兰白兔和SPF雏鸡，间接ELISA测定多克隆抗体(pAb)效价，阻断ELISA鉴定其敏感性，WestGold层析实验和交叉反应实验鉴定其特异性。结果表明，BSA-pAPB偶联成功，分子结合比为1:19，获得了高价、敏感、特异的pAb，为PB残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。

摘要： 以二溴菊酸和4-[(4-硝基苯)氧基]苯甲醛为原料经4步反应合成了溴氰菊酯半抗原1-氰基[4-(4-氨基苯)苯基]甲基-2，2-二甲基3-(2',2'-二溴乙烯基)环丙烷羧酸酯；用重氮化法将溴氰菊酯半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)相偶联制备免疫抗原和包被抗原，紫外吸收法估算偶联比分别为11∶1和8∶1；以BSA偶联物作免疫抗原制备溴氰菊酯抗体，间接非竞争ELISA法测定两个重复的抗体效价分别为100 000和80 000，间接竞争ELISA法测定抗体特异性结果表明所制备的抗体测定溴氰菊酯的IC50值为0.16 mg/L，与其他供试农药的交叉反应率均≤1％。本文制备的溴氰菊酯抗体为研究建立溴氰菊酯农残免疫快速测定方法奠定了基础。

摘要： 本文以杀虫剂毒死蜱为起始原料,在碱性条件下与3-羟基丙酸反应,合成了半抗原O,O-二乙基-O-[3,5-二氯-6-(2-羧乙基)硫代-2-吡啶基]硫逐磷酸酯(简称AR),然后分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA),经过碳二亚胺法和混合酸酐法偶联反应得到了免疫原和包被抗原,其结合比。

摘要： 半抗原结合到蛋白质分子上的数目,常常影响抗体产生.过去有的作者认为接到蛋白质分子上的半抗原要尽可能的多.实验结果表明过多的半抗原并不能得到预期的结果.过多或过少均可能降低诱发产生抗体的能力.1分子大蛋白联合8至20半抗原较为适宜.为了观察和研究抗体产生的规律,需要对半抗原结合的水平进行测定,比较常用的有下列3种方法:紫外分光度法、标记抗原示踪法、飞行质谱方法,本文采用飞行质谱方法对以BSA为载体蛋白与半抗原吗啡-3-琥珀酸脂结合物进行了分子个数比的测定.

摘要： 本发明提供一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法及其半抗原的应用，包括如下步骤：4‑甲酰基苯硼酸和丙烯酸在铑催化下偶联，得到3‑（4‑甲酰基‑苯基）‑丙酸，该化合物在氯化锌存在下与N，N‑二甲基苯胺反应，得到隐性孔雀石绿半抗原，在通过四氯对苯醌氧化得到显性孔雀石绿半抗原，该半抗原与载体蛋白偶联即得到显性孔雀石绿人工抗原。实验结果表明，采用本发明的抗原免疫动物产生的抗体特异性高，灵敏度高，得到抗血清效价可达106，检测限为0.1ug/L。

摘要： 本发明涉及使用半抗原和与其结合的抗体作为参照抗体的免疫测量方法，以及使用所述参照抗体的免疫测量装置。根据本发明，周围环境被反映在例如对结果值的修正中，其中被外部因素(例如样品和装置的温度、所述样品的输入体积和成分，以及所述装置的变异性)改变的测试区的数值被反映在参照区中并被改变，以便可用在免疫测定中。此外，由于不可能发生与所述样品中的物质的非特异性反应，因此可以使分析误差最小化。

摘要： 本发明公开了一种毒死蜱人工半抗原和抗原，分子结构式分别为：其中的n＝1～10。本发明还公开了以此抗原制备的抗体，半抗原的合成方法，和半抗原、抗体的用途。本发明最终制成的抗体检测灵敏度高、特异性强。

摘要： 本发明提供一种显性孔雀石绿半抗原的合成方法及其半抗原的应用，包括如下步骤：4‑甲酰基苯硼酸和丙烯酸在铑催化下偶联，得到3‑（4‑甲酰基‑苯基）‑丙酸，该化合物在氯化锌存在下与N，N‑二甲基苯胺反应，得到隐性孔雀石绿半抗原，在通过四氯对苯醌氧化得到显性孔雀石绿半抗原，该半抗原与载体蛋白偶联即得到显性孔雀石绿人工抗原。实验结果表明，采用本发明的抗原免疫动物产生的抗体特异性高，灵敏度高，得到抗血清效价可达106，检测限为0.1ug/L。

摘要： 本发明涉及分离的肿瘤细胞膜、其组合物、制备该膜和组合物的方法、和治疗癌症的方法。本发明的组合物包括由半抗原修饰的肿瘤细胞制备的组合物。本发明的肿瘤细胞膜和组合物具有下列性质:当向患有与所述肿瘤细胞相同类型的恶性肿瘤的哺乳动物施用时,能引发浸润哺乳动物肿瘤的T淋巴细胞,引发对哺乳动物肿瘤的炎性免疫应答,引发对哺乳动物肿瘤的迟发型过敏反应。本发明的膜和组合物也能在体外刺激T细胞。本发明的方法涉及治疗癌症,包括施用一种治疗有效量的肿瘤细胞膜。本发明也涉及一种制备半抗原修饰的肿瘤细胞膜的方法和含有该膜的剂型。

摘要： 本发明公开了一种苯醚甲环唑半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。所述苯醚甲环唑半抗原的结构式如式I所示，通过在苯醚甲环唑的三唑上连接戊酸手臂制成，该半抗原未改变苯醚甲环唑骨架结构和原有侧链，与苯醚甲环唑结构高度一致，有利于高特异性抗体的诱导。基于该半抗原制备人工抗原，再以人工抗原免疫动物制备获得针对苯醚甲环唑的高质量单克隆抗体，基于该抗体所建立的检测苯醚甲环唑的免疫分析方法，其IC50为1.38ng/mL，最低检测限为0.32ng/mL，线性范围为0.49～3.90ng/mL，与其它结构与功能类似物交叉反应率均小于0.2％，特异性较高，可以有效检测食品中的苯醚甲环唑。表明本发明制备的人工抗原具有良好的免疫原性，可以用于制备苯醚甲环唑多克隆抗体、单链抗体和纳米抗体并建立相对应免疫分析法。

摘要： 本发明提供了一种芬氟拉明半抗原、人工抗原、抗体及其制备方法和应用，本发明制备得到了两种半抗原，半抗原FB和半抗原FN，应用半抗原FB偶联载体蛋白LF得到人工抗原FB‑LF，并进一步制备得到用于检测芬氟拉明的特异性抗体，应用人工抗原FN‑OVA作为包被原，该抗体对芬氟拉明具有良好的灵敏度和特异性，半抑制浓度为10.22ng/mL，最低检测限为0.63ng/mL，定量检测范围为1.76～59.13ng/mL，对芬氟拉明类似物无交叉反应，可特异性检测芬氟拉明；本发明建立了芬氟拉明的免疫分析方法，实现了快速准确检测芬氟拉明的目的。

摘要： 本发明公开了一种洛克沙胂半抗原改造、修饰及人工抗原制备的方法；S1、选取实验耗材；S2、半抗原的改造，制备化合物A；S3、制备化合物B；S4、洛克沙胂人工抗原的合成；S5、人工抗原鉴定与多克隆抗体制备；S6、间接ELISA方法的建立；本发明以4‑羟基苯胂酸作为半抗原修饰物，在第3位和第4位上分别引入硝基和羧基，合成了与ROX结构相似的衍生物，并采用碳二亚胺法将ROX衍生物与BSA、OA偶联，成功制备了ROX的人工抗原，经生物质谱鉴定，ROX‑BSA、ROX‑OA的偶联比分别为4.2:1、12.6:1，免疫新西兰白兔获得的多克隆抗体最大效价可达1.28×105，对ROX的IC50为41.08ng/mL，该抗体特异性较强。

摘要： 本发明公开了龙葵素半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用，本发明提供的龙葵素半抗原最大程度保留了龙葵素的特征结构，又引入三碳链羧基基团，使得龙葵素半抗原的免疫原性明显增强；用龙葵素半抗原与载体蛋白偶联后得到的龙葵素人工抗原去免疫动物，更有利于刺激动物免疫应答产生特异性更强、灵敏度更高的抗体，经间接竞争酶联免疫法检测，龙葵素抗体对α‑茄碱的灵敏度为1μg/L，与α‑卡茄碱的交叉反应率为87％，为后续建立龙葵素的各种免疫分析方法提供了基础。

摘要： 本发明涉及药物免疫检测合成技术领域，具体公开了一种敌百虫半抗原、敌百虫半抗原中间体及其合成方法、基于该敌百虫半抗原的敌百虫抗原、特异性针对该敌百虫抗原的敌百虫抗体、其应用等。在将本发明的敌百虫抗原和抗体应用于敌百虫胶体金层析检测装置时，其灵敏度可达到100μg/kg。