周细胞

摘要： 目的构建不同培养模式的血脑屏障(BBB)体外细胞模型并进行结构和功能的比较和分析。方法用人脑微血管内皮细胞系(hCMEC/D3)、人脑星形胶质母细胞瘤细胞系(U87MG)和人脑血管周细胞系(HBVP)3种细胞在Transwell装置中构建细胞模型。根据细胞种类和细胞位置的不同,将模型分为单培养、双培养(hCMEC/D3+U87MG或HBVP)、不接触共培养、半接触共培养和全接触共培养5种血脑屏障体外细胞模型。检测模型的通透性和渗透性以及相关蛋白和基因的表达,比较不同模型的结构和功能特点并分析。结果与单培养和双培养模型相比,共培养模型的渗透性降低,紧密性升高,血脑屏障相关的基因和蛋白的表达也升高(P<0.05)。在共培养模型中,半接触和全接触培养模型具有更低的渗透性(P<0.001),全接触细胞培养模型的紧密性更高(P<0.01),部分血脑屏障相关蛋白和基因的表达也更高(P<0.05)。结论全接触共培养细胞模型具有更优的血脑屏障相关性质,更适用于血脑屏障研究。

摘要： 周细胞是与内皮细胞接触并部分包埋于血管基底膜的间充质细胞。周细胞具有分化能力,其表面标志物根据不同组织、不同发育阶段、不同病理生理环境而发生变化。研究表明,周细胞是肾脏肌成纤维细胞的主要来源,多种信号通路参与了周细胞/成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞的过程。本文综述了周细胞在肾间质纤维化发病机制中的研究进展,提出了周细胞作为靶点治疗肾间质纤维化的价值。

摘要： 神经炎症是一种发生在大脑中的炎症过程,参与许多神经系统疾病的发生和发展,这一炎症反应伴随着血-脑屏障的改变,同时血-脑屏障也是临床治疗中枢神经系统疾病干预的目标,致力于改善其通透性、降低药物无效运输以提高生物利用度仍是神经治疗学发展中的一大挑战。本文综述了神经炎症与血脑屏障的相关性研究,以期对中枢神经系统疾病的诊断和治疗提供帮助。

摘要： 络脉是中医重要理论基础之一,对其机制进行的研究取得了丰硕的成果。神经、内分泌、免疫和微循环构成的网络对组织细胞的微环境进行统筹调整,与络脉的功能和结构相似。符合生物-心理-社会医学模式,也符合中医“天人相应”的整体观。周细胞作为微血管调控核心成员,具备多种能力,参与并适应微环境的调整。周细胞现象,具有中医理论“阴阳”、“化”、“调和”等哲学特色,是中西医结合的一个切入点。在中医哲学智慧的指导下,将络脉理论与现代生物医学技术相结合,从周细胞的角度解析络脉功能及在病理生理过程中的作用,将有望对络脉相关疾病做出新的阐释,也为“通络”治疗的环节和靶点提供依据和思路。

摘要： 新生血管性眼病以病理性新生血管形成为病理特征,是威胁眼健康的主要疾病。近年来,各种新生血管性眼病发病率逐年提高,已成为严重的公共卫生问题,引起了广泛关注。病理性新生血管是多种细胞成分、多种病理因素互相包含、交互影响下形成的,单独干预其中一种因素往往很难达到理想治疗效果,因此需要更深入地研究新生血管的病理过程,探究新的调控新生血管的因子,以发现更有效的治疗方法。近年来研究发现,周细胞在多种新生血管性眼病的发生发展中起重要作用,针对周细胞采取干预措施将影响这些疾病的病理过程。本文将对新生血管性眼病中周细胞的具体作用以及调控周细胞的因素作出综述,为新生血管性眼病的治疗提供新的思路和方向。

摘要： 周细胞是位于毛细血管外表面的特殊壁细胞,参与血管形成,维护血管稳定。近年来,随着对周细胞生物学功能的深入探索,其在眼部血管性疾病中的作用受到极大的关注。糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病常见的并发症之一,其主要病理特点是微血管功能紊乱,其中周细胞丢失是DR的早期标志。研究发现,多种西药及中药可在糖尿病应激条件下保护周细胞,调节周细胞功能,对DR的早期病变及预后方面具有潜在的治疗作用。本文就眼部周细胞的基本概况、DR中周细胞的药物治疗研究进展两方面进行系统性综述。

摘要： 自体脂肪移植临床应用由来已久,可追溯至1893年,从Neuber完成第一例自体脂肪移植手术至今已经有一百多年的历史,用于因疾病、创伤、先天性缺陷或自然衰老过程引起的软组织缺损的修复治疗。随着对脂肪组织的深入研究,2001年脂肪来源的干细胞首次被鉴定,发现脂肪来源的干细胞具有与间充质干细胞相似的特征,具有多向分化潜能,被称为脂肪来源干细胞。2013年,国际脂肪治疗与科学联合会(IFATS)和国际细胞治疗学会(ISCT)定义:从脂肪组织经酶分离、未培养的,包括前脂肪细胞,成纤维细胞,周细胞,巨噬细胞和血细胞、内皮祖细胞和间充质干细胞等异质细胞群称为基质血管组分(stromalvascular fraction,SVF)。SVF用于损伤组织或慢性疾病的功能恢复,癌症手术后的重建,软骨、骨组织修复,心血管损伤,免疫性疾病,骨关节退化性疾病,肛周和直肠阴道瘘,克罗恩病,周围血管疾病后遗症,放射损伤后遗症,溃疡,纤维化、鼻黏膜功能障碍,空鼻综合征等疾病治疗并取得良好临床治疗效果;对脂肪移植,可提高移植的成活率,明显减少移植脂肪的钙化、液化、囊肿等并发症的发生。《自体脂肪基质血管组分制备质量管理规范》标准制订依据了我国相关法规,充分考虑了我国现有的自体脂肪来源的SVF临床应用现状,也充分考虑了SVF制备技术未来发展的可能与临床应用的趋势。从源头保证脂肪基质血管组分技术临床应用的规范性和安全性,也使行业监管和评估有标准可依,更为广大生物医药从业人员和临床医务工作者提供可共同遵照执行的技术规范和质量控制要求,推进脂肪基质血管组分技术在组织修复与重建中的临床应用。该标准的编写过程遵循了GB/T 1.1-2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的有关要求,从草案、征求意见稿、送审稿至最后形成终稿历时近1年。在制订过程中得到了多领域许多专家的支持。在此,对所有参与该标准编写的机构和相关人员以及咨询专家,表示诚挚地感谢。

摘要： 最近越来越多的研究者提出神经血管单元的概念,将对缺血性脑卒中(IS)的治疗从以神经元为中心的观点转移到微血管系统,而周细胞(pericytes)作为微循环系统的重要组成部分,在IS发病机制中起着重要作用。本文就周细胞的来源和特性及其在IS中的作用和机制的现有证据展开综述,为治疗IS提出新的可能处理对策。

摘要： 近年研究表明,周细胞(PCs)与肿瘤微环境(TME)内的各类细胞成分(如癌细胞、基质细胞、免疫细胞)存在紧密的相互作用关系,可通过异常的旁分泌通路介导肿瘤偏好性的肿瘤血管新生及失能,形成免疫抑制性TME并促进肿瘤进展。结合最新的非小细胞肺癌研究进展,本文就PCs在TME中的潜在功能与作用进行了综述,并讨论了靶向PCs的肿瘤抗血管治疗及肿瘤血管正常化治疗在重塑TME中的潜在价值,即通过靶向PCs肿瘤血管正常化而突破现阶段联合抗血管治疗实体瘤的困境,该理念或将成为改善化疗、小分子抑制剂靶向治疗及免疫检查点抑制剂治疗等联合抗肿瘤治疗的新策略。

摘要： 目的:分析慢性脑缺血模型大鼠学习记忆行为改变与其胼胝体、海马脑区的白质神经纤维和周细胞进行性退变的相关性,探讨慢性脑缺血所致学习记忆障碍的相关机制,为血管性认知障碍提供可能的预测靶标。方法:选择24只SPF级SD雄性大鼠,按照随机数字表法分为假手术组、术后28 d组、术后56 d组,每组8只。假手术组大鼠只分离双侧颈总动脉但不结扎,术后28 d组和术后56 d组大鼠用双侧颈总动脉结扎的方法制备慢性脑缺血大鼠模型。分别于造模后28、56 d采用Morris水迷宫空间探索实验评估学习记忆能力;采用弥散张量成像(DTI)观察胼胝体和海马脑区白质神经纤维变化的各向异性分数(FA)和平均弥散率(MD);采用坚牢蓝(LFB)染色法观察大鼠胼胝体髓鞘脱失情况;采用免疫印迹法检测胼胝体和海马脑区的髓鞘碱性蛋白(MBP)和周细胞标志物血小板衍生生长因子受体β(PDGFR-β)蛋白表达情况。结果:(1)学习记忆能力:与假手术组比较,术后28 d组第2~4天逃避潜伏期均明显延长,术后56 d组第3天逃避潜伏期明显延长,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与假手术组比较,术后28 d组和术后56 d组大鼠穿越平台次数、目标象限时间占比均明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)胼胝体和海马脑区白质神经纤维变化:与假手术组比较,术后28 d组、术后56 d组左、右侧胼胝体和左、右侧海马脑区白质神经纤维变化的MD值均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)大鼠胼胝体、海马脑区MD值与学习记忆能力的相关性分析:大鼠胼胝体、海马脑区MD值均与穿越平台次数呈正相关关系(r=0.832,P<0.01;r=0.777,P<0.01)。(4)大鼠胼胝体神经纤维形态:与假手术组比较,术后28 d组、术后56 d组大鼠胼胝体部位发生髓鞘结构紊乱以及脱失现象,术后28 d组和术后56 d组髓鞘紊乱分级均明显升高(P<0.05)。(5)胼胝体和海马脑区MBP和PDGFR-β蛋白表达:与假手术组比较,术后28 d组、术后56 d组大鼠胼胝体、海马脑区的髓鞘碱性蛋白MBP蛋白表达水平均明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);术后28 d组胼胝体PDGFR-β表达水平明显升高(P<0.05),术后28 d组、术后56 d组海马脑区PDGFR-β表达水平均明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与术后28 d组比较,术后56 d组胼胝体PDGFR-β表达水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性脑缺血所致学习记忆障碍与胼胝体和海马脑区白质神经纤维结构损伤密切相关,其中胼胝体PDGFR-β变化可能是预测慢性脑缺血所致白质神经纤维损伤的关键靶标之一。

摘要： 目的：研究PDGFβ受体通路在创面修复特别是对周细胞的调控在肉芽组织血管生成中的意义。rn 方法：采用大体观测、组织学及CD34/SMA免疫组化结合形态定量分析方法，研究经PDGFRβ受体拮抗剂-甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate，75mg/kg)阻断PDGFβ受体通路后(1～27d)，小鼠皮肤全层切割伤模型(背部中线两侧等距直径约6mm大小创面，共4个)创面愈合情况(创面大小、创面愈合率、创面愈合时间)的变化，并着重观测早期1-9d肉芽组织血管生成过程中微血管形态、密度，周细胞标记指数状况，分析周细胞变化与血管生成、创面愈合之间的关系以及与创面修复改变的联系与规律。rn 结论：PDGFβ及其受体通路在创面修复中具有重要作用，其对创面修复的重要组分(新生微血管、成纤维细胞与胶原形成等)具有显著的影响，而在血管生成过程中其与促进周细胞参与血管生成，调控微血管密度、形态等相关，提示周细胞是血管生成的重要组分之一，而PDGFβ及其受体对周细胞具有特异的调控作用。

摘要： 确定早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管细胞凋亡并观测凋亡相关基因(Bax,Bcl-2)在早期糖尿病大鼠视网膜的表达.选择健康成年Wistar大鼠40只,随机分成正常对照(CON)、糖尿病1个月(DM1)、3个月(DM3)及6个月(DM6)组.腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病.制备大鼠视网膜血管铺片及切片分别进行TUNEL法和免疫组化ABC法染色,并对ABC法染色结果进行计算机图像分析.TUNEL法标记的阳性周细胞核出现于DM3和DM6组,而内皮细胞见于DM6组,CON和DM1组未见阳性反应.TUNEL阳性反应细胞核染色质分布不均,表现为环形核、新月形核等典型的凋亡细胞特征.ABC法染色:于CON及DM各组,Bax和Bcl-2二基因的蛋白均在视网膜血管表达.随病程进展,其阳性反应强度逐渐增加,此外,Bcl-2阳性反应在DM3组于色素上皮细胞出现,在DM6组,再进一步扩大到视杆内节和节细胞.而Bax在DM6亦出现于节细胞.早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管周细胞失的性质为凋亡,内皮细胞亦存在凋亡:Bax和Bcl-2在早期糖尿病大鼠视网膜的表达增强.

摘要： 本发明公开了一种来自多能干细胞的神经嵴谱系周细胞及其诱导分化方法，其是解离多能干细胞制备成单细胞悬液，接种在基质胶包被的孔板中，以NCN2培养基每天换液；培养一定时间后消化收集细胞；贴壁培养收集的细胞，并将培养液更换为周细胞诱导培养液，传代培养后检测周细胞的细胞表型，即得。本发明解决人脑血管周细胞来源受限及其他非限定诱导途径多能干细胞来源的周细胞异质性与混杂的缺点，获得的神经嵴谱系周细胞具有很强的维持血管稳定能力与收缩能力；标准化诱导分化程序可保证不同批次间获得的细胞群具有良好的一致性。

摘要： 本发明公开了一种用于研究管形成的内皮细胞和周细胞共培养模型的构建方法。该方法包括如下步骤：(1)将脐静脉内皮细胞用胰蛋白酶进行消化，得到脐静脉内皮单细胞；(2)将周细胞用胰蛋白酶消化为周细胞的单细胞，然后加入终浓度为2～10μmol/L的CFSE染料进行染色，得到染色后的周细胞；(3)将脐静脉内皮单细胞与染色后的周细胞按细胞个数比为5～20：1的比例混合均匀后用支气管上皮细胞培养基进行培养，然后在荧光显微镜观察管形成情况。本发明方法可通过荧光显微镜动态地观察到周细胞对内皮细胞管形成的影响，通过体外实验反映人体肿瘤内周细胞与对肿瘤血管作用，具有良好的社会及经济价值。

摘要： 本发明公开了一种动物神经系统周细胞单细胞悬液的制备方法，属于生物技术领域。该方法包括：将切碎后的新鲜神经组织与细胞解离消化液混合培养后，离心，加入总细胞培养液，过滤后得到细胞混合物A；将所述细胞混合物A首先与内皮细胞梯度分离液混合，纯化分离得到含有周细胞的内皮细胞层。随后利用碘克沙醇溶液进一步分离得到纯的周细胞，该方法操作简便、成本低、效率高，且无需借助特定的仪器、适合工业化生产，通过该方法制备得到的神经周细胞单细胞可用来进行单细胞测序或者其他分析，有利于深入研究神经周细胞的特性。

摘要： 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种真皮微血管周细胞的纯化、鉴定方法及纯化得到的细胞。纯化方法包括：取皮肤组织，修剪保留真皮组织；将修剪后的皮肤组织采用中性蛋白酶水解，分离表皮和真皮；将真皮使用胶原酶消化；过滤，收获细胞悬液，离心，使用周细胞培养基培养细胞；当培养皿中细胞密度达80％～90％，弃去周细胞培养基，洗涤，吹打培养皿，得到细胞悬液，离心，保留细胞沉淀，用周细胞培养基重悬细胞，再次接种到培养皿中；重复纯化一次，获得真皮微血管周细胞。本发明提出了一种分离效果好、操作简单的真皮微血管周细胞的纯化方法，本方法可以提供数量充足、来源可靠、质量稳定的真皮微血管周细胞。

摘要： 本发明提供一种小鼠脑微血管内皮细胞与周细胞联合提取培养方法，该方法新颖而简单，采用“两步酶解法”可从小鼠中枢神经系统中分离和培养大量内皮细胞与周细胞，该方法易于建立，并在较短时间内提供大量高纯度的内皮细胞和周细胞，进而用于多种下游应用，包括体外和体内实验，转录组学、蛋白质组学、代谢组学、表观基因组学和单细胞分析。

摘要： 本发明公开了一种用于研究管形成的内皮细胞和周细胞共培养模型的构建方法。该方法包括如下步骤：(1)将脐静脉内皮细胞用胰蛋白酶进行消化，得到脐静脉内皮单细胞；(2)将周细胞用胰蛋白酶消化为周细胞的单细胞，然后加入终浓度为2～10μmol/L的CFSE染料进行染色，得到染色后的周细胞；(3)将脐静脉内皮单细胞与染色后的周细胞按细胞个数比为5～20：1的比例混合均匀后用支气管上皮细胞培养基进行培养，然后在荧光显微镜观察管形成情况。本发明方法可通过荧光显微镜动态地观察到周细胞对内皮细胞管形成的影响，通过体外实验反映人体肿瘤内周细胞与对肿瘤血管作用，具有良好的社会及经济价值。

摘要： 本发明公开了一种来自多能干细胞的神经嵴谱系周细胞及其诱导分化方法，其是解离多能干细胞制备成单细胞悬液，接种在基质胶包被的孔板中，以NCN2培养基每天换液；培养一定时间后消化收集细胞；贴壁培养收集的细胞，并将培养液更换为周细胞诱导培养液，传代培养后检测周细胞的细胞表型，即得。本发明解决人脑血管周细胞来源受限及其他非限定诱导途径多能干细胞来源的周细胞异质性与混杂的缺点，获得的神经嵴谱系周细胞具有很强的维持血管稳定能力与收缩能力；标准化诱导分化程序可保证不同批次间获得的细胞群具有良好的一致性。

摘要： 本发明公开了一种肿瘤血管周细胞及其分离方法与应用，属于生物技术领域。本发明提供的方法是从新鲜的实体肿瘤组织样本中剥离得到肿瘤血管，将肿瘤血管剪切成环状片段，然后将环状片段的肿瘤血管置于预铺基质胶的孔板中，用周细胞培养基培养，最后从基质胶中回收肿瘤血管周细胞。本发明提供的肿瘤血管周细胞高表达FAPα、NG2、PDGFRβ和CD146四个阳性分子标记物，不表达CD31、MYH11两个阴性分子标记物。利用本发明肿瘤血管周细胞，实现了永生化人结直肠癌血管周细胞模型构建零的突破。本发明可以为研究实体肿瘤血管周细胞生物学功能和药物靶标提供了来源可靠、数量充足、质量稳定的原始材料，具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种肿瘤相关性血管周细胞亚群及制备方法与应用，所述肿瘤相关性血管周细胞亚群表达GJB2。本发明利用高维单细胞测序技术对浸润性肺腺癌患者的原发灶、转移阳性淋巴结和非转移淋巴结进行单细胞转录组分析并下游细胞功能学验证，首次揭示浸润性肺腺癌肿瘤微环境中存在独立的肿瘤相关性血管周细胞亚群，特异性表达PDGFRb+GJB2+CSPG4‑为“身份标签”，后经特征抗体流式纯化及免疫荧光鉴定，成功分选并扩增、保种该亚群，进一步细胞功能学验证其可显著促进肺癌细胞的侵袭能力，并具有幼稚化、畸形的血管形成能力，是领域内研究肺癌肿瘤血管异常机制和靶向血管正常化药物的理想细胞工具。

摘要： 本实用新型提供了一种综合性眼周细胞赋活针，涉及医疗器械技术领域，包括针筒和针头，所述针筒内滑动连接有针头活动柱塞，所述针头的针梗部固定在所述针头活动柱塞上并与所述针筒内部连通；本实用新型通过在针筒内滑动连接针头活动柱塞，且将针头固定在针头活动柱塞上，能够使针头随针头活动柱塞伸出或缩回针筒，从而自由调节针头伸出针筒的长度，实现长针头注射器和短针头注射器的兼容使用，较传统眼周细胞注射针体的适用范围更广，且由于针头可以预先全部缩回针筒内，所以也不需要另外设置保护套对针头进行保护，有效降低了生产成本，减少了不易降解的医疗垃圾产量，兼具环保效果。