2型猪链球菌

摘要： 目的构建2型猪链球菌荚膜多糖基因簇中cps2D基因敲除株(Δcps2D),比较野毒株05ZYH33与敲除株Δcps2D基本生物学特性的差异。方法设计合成引物L1/L2、R1/R2、Spc1/Spc2,分别扩增cps2D基因上、下游同源臂L片段、R片段及Spc^(R)抗性基因S片段,将3个片段连接至pUC19线性载体上,构建敲除质粒pUC19::cps2D。将敲除质粒电转导入05ZYH33感受态细胞后,利用Spc^(R)抗性平板筛选敲除株,并通过组合PCR和RT-PCR进一步验证。比较野毒株05ZYH33和敲除株Δcps2D细菌生长特性、溶血活性、革兰染色、细菌链长、荚膜形态等方面的异同。结果L1/L2、R1/R2、Spc1/Spc2三组引物分别扩增出L(1030 bp)、R(1030 bp)以及S(1130 bp)基因片段;通过无缝克隆的方法成功构建出敲除质粒pUC19::cps2D;电转入感受态细胞后获得69个克隆,筛选出26个疑似敲除株;组合PCR以及RT-PCR筛选后获得cps2D基因敲除株Δcps2D;与野毒株05ZYH33相比,Δcps2D对数期生长变缓,链长显著变短,荚膜稀疏变薄。结论成功构建cps2D基因敲除株,为后续进一步研究其调控荚膜合成的作用机制奠定基础。

摘要： 为了探究天然化合物毛蕊花糖苷(verbascoside, VBS)对2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2, SS2)致病性的作用,本研究通过测定最低抑菌浓度、绘制细菌生长曲线及红细胞溶血试验,发现低浓度下的毛蕊花糖苷不影响猪链球菌的正常生长,但对其溶血活性有显著抑制作用;免疫印迹试验表明,毛蕊花糖苷不影响2型猪链球菌分泌溶血素蛋白(suilysin, SLY);通过分子对接预测毛蕊花糖苷可与SLY的2个氨基酸残基(SER-388、GLN-441)形成3条氢键结合从而使毛蕊花糖苷嵌入SLY蛋白的第4结构域,同时体外溶血活性试验进一步证实毛蕊花糖苷可直接抑制SLY介导的溶血活性;最后,小鼠体内试验结果表明,毛蕊花糖苷可明显提高2型猪链球菌感染小鼠的存活率。综上,毛蕊花糖苷在不影响2型猪链球菌生长活性的情况下,可通过抑制溶血素活性来降低2型猪链球菌对小鼠的致病性。

摘要： 试验旨在研究抗菌肽 Temprine-La(S)(T-La(S))、Temprine-La(FS)(T-La(FS))、RGD-T-La(S)和RGD-T-La(FS)对2型猪链球菌(SS2)生物被膜形成的抑制作用.通过结晶紫染色法(CV)检测SS2生物被膜形成能力;微量稀释法测定抗菌肽对SS2生物被膜的最小生物被膜抑菌浓度(MBIC)和最小生物被膜杀菌浓度(MBEC);结晶紫染色法和扫描电镜(SEM)检测抗菌肽对SS2生物被膜形成的影响;XTT法检测抗菌肽对SS2生物被膜代谢活性的影响;苯酚硫酸法检测抗菌肽对SS2生物被膜胞外多糖含量的影响;建立猪链球菌-斑马鱼感染模型,HE染色法观察T-La(FS)对斑马鱼脑组织病理变化的影响;实时荧光定量PCR法分析抗菌肽对SS2生物被膜相关基因及对斑马鱼炎性细胞因子基因转录水平的影响.结果显示,SS2具有良好的生物被膜形成能力;T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)和RGD-T-La(FS)对SS2生物被膜的MBIC分别为31.3、15.6、7.8和15.6 μg/mL;MBEC分别为62.6、31.2、15.6和31.2 μg/mL;结晶紫染色结果表明,抗菌肽对SS2生物被膜的形成有抑制作用;扫描电镜结果显示,抗菌肽使SS2生物被膜中的细菌数量和生物被膜的形态发生明显变化,细胞外基质大量减少;XTT法结果显示,抗菌肽可显著降低SS2生物被膜的代谢活性;苯酚硫酸法结果显示,抗菌肽能有效抑制SS2生物被膜合成胞外多糖;实时荧光定量PCR结果表明,抗菌肽作用后降低了SS2生物被膜基因的转录水平;T-La(FS)作用后TLR2、MyD88及促炎性细胞因子基因的转录水平显著或极显著降低(P＜0.05;P＜0.01),抗炎性细胞因子基因的转录水平显著或极显著升高(P＜0.05;P＜0.01).抗菌肽主要通过影响生物被膜相关基因转录水平和阻断胞外多糖的合成与分泌来抑制SS2生物被膜的形成,其中T-La(FS)可能通过抑制TLR2信号通路中TLR2和MyD88分子表达,抑制炎性细胞因子的释放,减轻脑膜炎的炎性反应.

摘要： 目的 利用E scherichia coli BL21原核表达系统共表达2型猪链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶STK与孤儿调控因子CovR蛋白,通过质谱鉴定CovR蛋白磷酸化位点,探究STK对CovR的磷酸化作用.方法 构建CovR蛋白表达载体pCDF-Duet-1::covR及pCDFDuet-1::covR/stk,重组表达蛋白分别命名为CovR1与CovR2.通过蛋白磷酸化质谱技术检验CovR2蛋白的关键磷酸化位点.分别构建CovR苏氨酸突变体CovRT、丝氨酸突变体CovRS、酪氨酸突变体CovRY及丝/苏/酪氨酸全突变体CovRA,与STK共表达后分析其磷酸化状态,确定CovR磷酸化靶点.结果 在E.coli BL21表达系统中成功表达并纯化CovR1与CovR2蛋白,Western blot分析发现CovR1无磷酸化信号,CovR2可以被磷酸化.进一步对CovR2磷酸化质谱检测发现其第45、148、150、159、168、194、219位苏氨酸,第40、172、215位丝氨酸以及第225位酪氨酸为关键磷酸化位点.对CovRT、CovRS、CovRY及CovRA突变体磷酸化状态检测,结果表明CovR2的丝/苏/酪氨酸均可发生磷酸化.结论 在E.coli BL21中共表达STK与CovR可导致CovR丝/苏/酪氨酸磷酸化,通过质谱技术鉴定了CovR的磷酸化位点,提示CovR可能是STK的磷酸化调控靶点.

摘要： 目的 利用原核表达系统诱导表达2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,S.suis 2)分裂相关因子GpsB重组蛋白,为后续研究奠定基础.方法 以S.suis 2菌株05ZYH33全基因组DNA为模板,经PCR扩增得到目的基因片段.目的基因经双酶切后连接至表达载体pET32a,转化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)DH5α感受态细胞.重组质粒经测序鉴定正确后转化E.coli BL21感受态细胞.获得的重组表达菌经IPTG诱导表达目的蛋白.利用Ni离子亲和层析柱纯化重组蛋白,并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定.利用重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.结果 成功构建出重组表达载体pET32agpsB,并经IPTG诱导表达出目的蛋白.重组蛋白主要存在于表达菌裂解液上清中,分子质量约30 kD,与预期大小一致.Western blot检测发现,该蛋白能被His-Tag单克隆抗体特异性识别.制备的多克隆抗体能特异性识别重组GpsB蛋白(rGpsB).结论 成功表达和纯化了rGpsB并获得了该蛋白的多克隆抗体,为进一步研究该蛋白在S.suis 2分裂过程中的作用鉴定了基础.

摘要： 目的:克隆表达2型猪链球菌葡萄糖胺-6-磷酸脱氨酶(NagB)编码基因,并测定其酶反应体系活性.方法:根据2型猪链球菌05ZYH33基因组序列,全合成nagB基因(ssu05_0195),并将其克隆至pET32a载体,在大肠杆菌中表达;利用Ni亲和层析柱纯化表达产物,获得纯化的NagB蛋白,Western印迹鉴定后测定其酶反应体系活性.结果:在大肠杆菌中高效表达了nagB基因,重组NagB相对分子质量约为56×103;在25°C、pH9.5、底物浓度为15 mmol/L、反应40 min时,NagB酶促反应体系表现出最大活性;在最适条件下,2型猪链球菌中NagB酶促反应体系的体外活性为3.73 U/mL,酶比活为12.43 U/mg.结论:2型猪链球菌05ZYH33中含有编码NagB的nagB基因,在原核系统中表达的NagB蛋白具有酶学活性.

摘要： 目的 表达纯化2型猪链球菌(Streptococcus suis 2,SS2)低分子量酪氨酸磷酸酶(Low molecular weight protein tyrosine phosphatase,LMW-PTP),测定LMW-PTP磷酸酶活性并鉴定其酶活性位点,为后续的功能鉴定奠定基础.方法分别构建野生型LMW-PTP基因表达质粒pET28a:LMW-PTP、突变型LMW-PTP基因表达质粒pET28a:LMW-PTPC33A和pET28a:LMW-PTPR39A,重组质粒转化E coil BL21(DE3),筛选阳性转化子,通过IPTG诱导表达后经SDS-PAGE鉴定表达产物.镍柱亲和层析纯化得到重组蛋白经Western blot鉴定,野生型LMW-PTP免疫新西兰兔制备兔多克隆抗体.以对硝基苯酚二钠六水(PNPP-Na)为底物检测重组蛋白的磷酸酶活性.结果成功构建野生型LMW-PTP基因表达质粒pET28a:LMW-PTP、突变型LMW-PTP基因表达质粒pET28a:LMW-PTPC33A、pET28a:LMW-PTPR39A,在大肠杆菌中野生型和突变型LMW-PTP均以包涵体的形式存在,相对分子量为23 kDa,包涵体经镍柱纯化及透析复性获得纯度较高的野生型和突变型LMW-PTP.制备得到的抗LMW-PTP的兔多克隆抗体的效价为1:102400,且重组蛋白均能与His-Tag单抗和兔多抗血清发生反应.对野生型蛋白进行磷酸酶活性检测显示其具有酶活性,酶活为2.1 nmol/(min·μg),突变型LMW-PTPC33A、LMW-PTPR39A无磷酸酶活性.结论成功表达了具有磷酸酶活性的LMW-PTP,并鉴定出Cys33和Arg39是LMW-PTP的活性位点.为后续寻找LMW-PTP在2型猪链球菌致病过程中毒力相关的靶蛋白奠定了基础.

摘要： 目的 丝/苏氨酸激酶(STK)与丝/苏氨酸磷酸酶(STP)通过对蛋白质的可逆磷酸化调控原核生物的各项生理活动.文中旨在研究2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33中、stk/stp1同时缺失对其生物学特性及致病性的影响.方法 运用同源重组的方法构建2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33的stk/stp1基因敲除突变株 Δstk/stp1,比较分析野毒株05ZYH33与突变株 Δstk/stp1的生物学特性;通过细胞黏附实验、抗吞噬实验以及小鼠感染模型分析stk/stp1缺失对细菌毒力的影响.将30只SPF级BALB/c小鼠,用随机数字表法分成05ZYH33组(注射1 mL野毒株菌液)、Δstk/stp1组(注射1 mL突变株菌液)和THB组(注射1 mL的新鲜THB液体培养基),每组10只.结果 PCR结果显示,stk/stp1基因被壮观霉素抗性基因Spcr替换,突变株构建成功;生物学特性实验表明,05ZYH33和 Δstk/stp1在接种2 h后开始缓慢增殖,在7 h时都到达平台期.突变株进入对数生长期(A600≈0.4)的时间比野毒株推迟1 h左右,到达平台期后的菌体密度比野毒株低(0.8 vs 1.0).05ZYH33和 Δstk/stp1在血平板上均长出灰白色、圆形半透明、湿润、表面光滑的细小菌落.菌落周围有明显的 β-溶血环,菌落形态和溶血活性无明显变化.小鼠致病性实验显示,05ZYH33组小鼠在12 h内全部死亡,Δstk/stp1组小鼠在12 h内死亡9只,24 h内全部死亡,THB组无发病和死亡症状.结论 stk/stp1同时缺失可能主要影响细菌增殖、分裂相关蛋白的调控.%Objective Serine /threonine kinases (STK) and phosphatases (STP) regulate various physiological activities of prokaryotes by reversible phosphorylation of proteins .This paper aimed to study the effects of simultaneous deletion of the stk and stp1 genes on the biological characteristics and pathogenicity of streptococcus suis type 2, the Chinese virulent strain 05ZYH33. Methods The double mutant of the stk and stp1 genes of 05ZYH33 was constructed by homologous recombination .The biological characteristics of the wild strain 05ZYH33 and the mutant strain Δstk/stp1 were compared.The effects of the stk and stp1 deletion on bacterial virulence was analyzed using cell adhesion assay , anti-phagocytosis assay and the mouse model of infection . Results RT-PCR showed that the stk and stp1 genes were replaced by the spectinomycin resistance gene Spc r and the mutant strain was successfully constructed .Experi-ments of biological characterization revealed gradually increased value of 05ZYH33 and Δstk/stp1 at 2 hours after inoculation and a plateau period at 7 hours.The logarithmic phase of the mutant strain (A600≈0.4) was 1 hour later than that of the wild one , and the bacterial den-sity of the former was lower than that of the latter after the plateau pe -riod (0.8 vs 1.0).On the blood plates of 05ZYH33 and Δstk/stp1 were observed greyish, round, semitransparent, wet and smooth-sur-faced tiny bacterial colonies , around which there were hemolysis rings with no significant differences in colony morphology and hemolytic ac -tivity.In the experiment on pathogenicity , the mice of the 05ZYH33 group all died within 12 hours while 9 of the 30 mice in the Δstk/stp1 group died within 12 hours and all died within 24 hours. Conclusion The simultaneous deletion of the stk and stp1 genes may mainly affect the regulation of the proteins associated with bacte -rial proliferation and division.

摘要： 为了解天津地区2型猪链球菌的流行及耐药情况,本研究收集该地区部分规模化养猪场疑似猪链球菌病病料31 7份,通过病原分离培养、染色特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定,并对分离菌进行致病性及药敏试验.结果从样品中分离鉴定出11株2型猪链球菌.对小鼠的致病力试验结果显示,应用0.5×108 CFU/mL的细菌攻击小鼠,11株2型猪链球菌分离株中有6株具有致死性,其中1株致死率较强,5株致死率较弱.药敏试验结果表明,11株分离菌对9种临床常见药物均表现出很强的耐药性,其中对阿米卡星、四环素和强力霉素耐药性最强,耐药率达到100.00％;且所有分离株均呈多重耐药,其中4个分离株为9重耐药,占36.36％(4/11).本试验结果表明,天津地区存在2型猪链球菌感染情况,且对多种抗菌药均产生了耐药性,应引起养殖户的高度重视,在防制猪链球菌病时,应有针对性地合理、科学、规范用药和交替用药.

摘要： 本研究的目的是对某猪场一头病死猪淋巴结、肺和肾中的病原菌分离鉴定并分析其表型.接种环无菌蘸取切开的淋巴结、肺和肾内部,接种血平板后置于37°C培养,长出的细菌通过16S rRNA基因序列分析和特异性基因扩增鉴定,并对分离菌进行了形态学观察、生化试验和药物敏感性试验.结果表明,在3个组织各分离到1株细菌,淋巴结和肺分离菌的16S rRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列相同,肾分离菌的16SrRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列99％相同;所有分离菌都能够扩增出2型猪链球菌特异的cps2J与epf基因.3株分离菌在鲜血平板上形成β溶血;细菌形态为呈链状的革兰阳性球菌;生化特性与2型猪链球菌的生化特性基本一致,但3株菌均各自特异的生化特性;药物敏感性试验显示3株菌对11种药物敏感,对7种药物耐药,对头孢曲松和红霉素耐药情况有差异.因此,本次分离的3株细菌均为2型猪链球菌,但这3株菌来源于不同的克隆,是分别独立感染同一头猪.

摘要： 本研究的目的是对某猪场一头病死猪淋巴结、肺和肾中的病原菌分离鉴定并分析其表型.接种环无菌蘸取切开的淋巴结、肺和肾内部,接种血平板后置于37°C培养,长出的细菌通过16S rRNA基因序列分析和特异性基因扩增鉴定,并对分离菌进行了形态学观察、生化试验和药物敏感性试验.结果表明,在3个组织各分离到1株细菌,淋巴结和肺分离菌的16S rRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列相同,肾分离菌的16SrRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列99％相同;所有分离菌都能够扩增出2型猪链球菌特异的cps2J与epf基因.3株分离菌在鲜血平板上形成β溶血;细菌形态为呈链状的革兰阳性球菌;生化特性与2型猪链球菌的生化特性基本一致,但3株菌均各自特异的生化特性;药物敏感性试验显示3株菌对11种药物敏感,对7种药物耐药,对头孢曲松和红霉素耐药情况有差异.因此,本次分离的3株细菌均为2型猪链球菌,但这3株菌来源于不同的克隆,是分别独立感染同一头猪.

摘要： 本研究的目的是对某猪场一头病死猪淋巴结、肺和肾中的病原菌分离鉴定并分析其表型.接种环无菌蘸取切开的淋巴结、肺和肾内部,接种血平板后置于37°C培养,长出的细菌通过16S rRNA基因序列分析和特异性基因扩增鉴定,并对分离菌进行了形态学观察、生化试验和药物敏感性试验.结果表明,在3个组织各分离到1株细菌,淋巴结和肺分离菌的16S rRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列相同,肾分离菌的16SrRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列99％相同;所有分离菌都能够扩增出2型猪链球菌特异的cps2J与epf基因.3株分离菌在鲜血平板上形成β溶血;细菌形态为呈链状的革兰阳性球菌;生化特性与2型猪链球菌的生化特性基本一致,但3株菌均各自特异的生化特性;药物敏感性试验显示3株菌对11种药物敏感,对7种药物耐药,对头孢曲松和红霉素耐药情况有差异.因此,本次分离的3株细菌均为2型猪链球菌,但这3株菌来源于不同的克隆,是分别独立感染同一头猪.

摘要： 本研究的目的是对某猪场一头病死猪淋巴结、肺和肾中的病原菌分离鉴定并分析其表型.接种环无菌蘸取切开的淋巴结、肺和肾内部,接种血平板后置于37°C培养,长出的细菌通过16S rRNA基因序列分析和特异性基因扩增鉴定,并对分离菌进行了形态学观察、生化试验和药物敏感性试验.结果表明,在3个组织各分离到1株细菌,淋巴结和肺分离菌的16S rRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列相同,肾分离菌的16SrRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列99％相同;所有分离菌都能够扩增出2型猪链球菌特异的cps2J与epf基因.3株分离菌在鲜血平板上形成β溶血;细菌形态为呈链状的革兰阳性球菌;生化特性与2型猪链球菌的生化特性基本一致,但3株菌均各自特异的生化特性;药物敏感性试验显示3株菌对11种药物敏感,对7种药物耐药,对头孢曲松和红霉素耐药情况有差异.因此,本次分离的3株细菌均为2型猪链球菌,但这3株菌来源于不同的克隆,是分别独立感染同一头猪.

摘要： 本研究的目的是对某猪场一头病死猪淋巴结、肺和肾中的病原菌分离鉴定并分析其表型.接种环无菌蘸取切开的淋巴结、肺和肾内部,接种血平板后置于37°C培养,长出的细菌通过16S rRNA基因序列分析和特异性基因扩增鉴定,并对分离菌进行了形态学观察、生化试验和药物敏感性试验.结果表明,在3个组织各分离到1株细菌,淋巴结和肺分离菌的16S rRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列相同,肾分离菌的16SrRNA核苷酸序列与2型猪链球菌16S rRNA核苷酸序列99％相同;所有分离菌都能够扩增出2型猪链球菌特异的cps2J与epf基因.3株分离菌在鲜血平板上形成β溶血;细菌形态为呈链状的革兰阳性球菌;生化特性与2型猪链球菌的生化特性基本一致,但3株菌均各自特异的生化特性;药物敏感性试验显示3株菌对11种药物敏感,对7种药物耐药,对头孢曲松和红霉素耐药情况有差异.因此,本次分离的3株细菌均为2型猪链球菌,但这3株菌来源于不同的克隆,是分别独立感染同一头猪.

摘要： 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是重要人兽共患病病原菌,可使猪或人感染引发多种疾病.其中2型猪链球菌(S.suis2,SS2)致病性最强,可使人感染患脑膜炎、败血症、心内膜炎甚至中毒性休克综合征.病原菌在宿主体内分裂增殖是其致病基础,其中细胞分裂蛋白DivIVA是控制细胞分裂的端部锚定蛋白,参与细胞分裂位点的选择与新生肽聚糖的合成.在肺炎链球菌中DivIVA蛋白功能的缺失导致细胞分裂缺陷,致病性减弱;在S.suis2中尚无细胞分裂机制相关研究报道.

摘要： 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是重要人兽共患病病原菌,可使猪或人感染引发多种疾病.其中2型猪链球菌(S.suis2,SS2)致病性最强,可使人感染患脑膜炎、败血症、心内膜炎甚至中毒性休克综合征.病原菌在宿主体内分裂增殖是其致病基础,其中细胞分裂蛋白DivIVA是控制细胞分裂的端部锚定蛋白,参与细胞分裂位点的选择与新生肽聚糖的合成.在肺炎链球菌中DivIVA蛋白功能的缺失导致细胞分裂缺陷,致病性减弱;在S.suis2中尚无细胞分裂机制相关研究报道.

摘要： 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是重要人兽共患病病原菌,可使猪或人感染引发多种疾病.其中2型猪链球菌(S.suis2,SS2)致病性最强,可使人感染患脑膜炎、败血症、心内膜炎甚至中毒性休克综合征.病原菌在宿主体内分裂增殖是其致病基础,其中细胞分裂蛋白DivIVA是控制细胞分裂的端部锚定蛋白,参与细胞分裂位点的选择与新生肽聚糖的合成.在肺炎链球菌中DivIVA蛋白功能的缺失导致细胞分裂缺陷,致病性减弱;在S.suis2中尚无细胞分裂机制相关研究报道.

摘要： 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是重要人兽共患病病原菌,可使猪或人感染引发多种疾病.其中2型猪链球菌(S.suis2,SS2)致病性最强,可使人感染患脑膜炎、败血症、心内膜炎甚至中毒性休克综合征.病原菌在宿主体内分裂增殖是其致病基础,其中细胞分裂蛋白DivIVA是控制细胞分裂的端部锚定蛋白,参与细胞分裂位点的选择与新生肽聚糖的合成.在肺炎链球菌中DivIVA蛋白功能的缺失导致细胞分裂缺陷,致病性减弱;在S.suis2中尚无细胞分裂机制相关研究报道.

摘要： 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是重要人兽共患病病原菌,可使猪或人感染引发多种疾病.其中2型猪链球菌(S.suis2,SS2)致病性最强,可使人感染患脑膜炎、败血症、心内膜炎甚至中毒性休克综合征.病原菌在宿主体内分裂增殖是其致病基础,其中细胞分裂蛋白DivIVA是控制细胞分裂的端部锚定蛋白,参与细胞分裂位点的选择与新生肽聚糖的合成.在肺炎链球菌中DivIVA蛋白功能的缺失导致细胞分裂缺陷,致病性减弱;在S.suis2中尚无细胞分裂机制相关研究报道.

摘要： 本发明公开了一种同时检测猪链球菌通用型和猪链球菌2型双重荧光定量PCR引物、试剂盒及方法。本发明突破了普通PCR方法的限制，可实时定量样品中细菌含量，灵敏度高，最低检测极限达到每个反应5个拷贝数；特异性强，可特异性识别猪链球菌和猪链球菌2型，对其他细菌无反应；重复性好，重复检测的变异系数小于1.19%；而且临床诊断效果明显，非常适合大量临床样品的检测和猪链球菌的常规疫情监测，具有极高的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种辅助鉴定猪链球菌2型与猪链球菌7型的专用引物及其应用。本发明提供的专用引物，由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。本发明提供的专用引物可以辅助鉴定和鉴别猪链球菌2型和猪链球菌7型，应用本发明提供的专用引物进行检测，具有特异、灵敏、快速等优点，可以防患于未然，对人和动物感染猪链球菌的防控具有重要意义。

摘要： 一种辅助鉴定猪链球菌2型、猪链球菌7型和猪链球菌9型的引物组及其应用，该引物组由如下引物对组成：由如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.2所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌2型的引物对；由如SEQIDNO.3所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.4所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌7型的引物对；由如SEQIDNO.5所示的核苷酸序列和如SEQIDNO.6所示的核苷酸序列组成的用于辅助鉴定猪链球菌9型的引物对。本发明将引物组制备成试剂盒，建立了猪链球菌2、7、9型PCR定型方法，实现了1次PCR同时检测3个血清型，大大缩短了工作内容。

摘要： 本发明公开了一种同时检测猪链球菌通用型和猪链球菌2型的多重免疫荧光分析的引物、试剂盒及其方法；旨在对同一样本中的多种不同目的分子同时进行检测，样本用量少，操作简单、快速，可大大降低检测成本，灵活性好，可以根据需要在此基础上加减检测病原种类的检测引物、试剂盒及其方法；所述引物组，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所述；所述猪链球菌2型引物核苷酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所述；属于核酸检验领域。

摘要： 本发明公开了一种同时检测猪链球菌通用型和猪链球菌2型双重荧光定量PCR引物、试剂盒及方法。本发明突破了普通PCR方法的限制，可实时定量样品中细菌含量，灵敏度高，最低检测极限达到每个反应5个拷贝数；特异性强，可特异性识别猪链球菌和猪链球菌2型，对其他细菌无反应；重复性好，重复检测的变异系数小于1.19%；而且临床诊断效果明显，非常适合大量临床样品的检测和猪链球菌的常规疫情监测，具有极高的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种辅助鉴定猪链球菌2型与猪链球菌7型的专用引物及其应用。本发明提供的专用引物，由序列表的序列1所示DNA、序列表的序列2所示DNA、序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成。本发明提供的专用引物可以辅助鉴定和鉴别猪链球菌2型和猪链球菌7型，应用本发明提供的专用引物进行检测，具有特异、灵敏、快速等优点，可以防患于未然，对人和动物感染猪链球菌的防控具有重要意义。

摘要： 本发明涉及一种猪链球菌血清3型aroC基因功能缺陷的突变链球菌菌株SS3ST3ΔaroC及其制备方法和应用。有助于控制病原体感染。本发明是使用基因工程技术构建了一种芳香簇氨基酸合成缺失突变菌株SS3ST3ΔaroC，该突变株由于aroC基因的功能缺失而不能正常合成芳香簇氨基酸。SS3ST3ΔaroC突变菌作为一种活疫苗，在小鼠体内表现为弱毒性，并有100％的免疫保护能力。本发明的弱毒疫苗，用于预防猪链球菌血清3型感染，安全性强、保护效果好、易大规模生产、具备推广使用的潜力。

摘要： 本发明公开了一种猪链球菌的反向筛选标记、含有该反向筛选标记的猪链球菌及其应用。所述的反向筛选标记为突变后的编码猪链球菌苯丙氨酸tRNA合成酶α亚基的pheS基因，突变后的pheS基因导致了编码的猪链球菌苯丙氨酸tRNA合成酶α亚基发生了T261S和A315G双取代突变，PheS突变体通过与菌株自身的野生PheS蛋白竞争，翻译过程中将p‑Cl‑Phe错误地掺入到合成的蛋白质中，从而在p‑Cl‑Phe存在条件下，表达PheS突变体的菌株死亡，不表达PheS突变体的菌株生存。利用这一高效反向筛选标记，本发明还建立了高效的猪链球菌无痕基因操作方法，用于实现猪链球菌的无痕基因缺失、基因融合和基因突变等无痕基因操作，在研究猪链球菌生理和病理机制、制备疫苗株方面具有很好的应用前景。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离出的长尾噬菌体科噬菌体Str‑SUP‑3(保藏号：KCTC 13516BP)，其特征在于具有杀死猪链球菌的能力，并且具有由SEQ ID NO:1表示的基因组，本发明还涉及一种用于使用包含所述长尾噬菌体科噬菌体Str‑SUP‑3作为活性成分的组合物来预防和治疗由猪链球菌引起的疾病的方法。

摘要： 本发明涉及一种从自然界分离出的长尾噬菌体科噬菌体Str‑SUP‑2(保藏号：KCTC 13515BP)，其特征在于具有杀死猪链球菌的能力，并且具有由SEQ ID NO:1表示的基因组，本发明还涉及一种用于使用包含所述长尾噬菌体科噬菌体Str‑SUP‑2作为活性成分的组合物来预防和治疗由猪链球菌引起的疾病的方法。