二乙基亚硝胺

摘要： 目的探讨金线莲苷(KS)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠肝损伤的保护作用以及PELP1/ERK通路参与作用的分子机制。方法24只雄性C57BL/6小鼠,随机分为Control组、DEN组和KS组,每组8只。石蜡切片和HE染色检查肝脏组织病理学变化;可见分光光度法检测各组小鼠血清中ALT、AST和ALP的含量;qPCR、Western blot分别检测肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平;EL1SA测定肝脏组织TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度。结果与对照组比较,DEN组小鼠肝脏表面粗糙、颜色变深、质地变硬,肝脏组织正常结构被破坏,血清ALT、AST和ALP含量明显升高(P<0.05),肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均显著升高(P<0.05);与DEN组比较,KS组小鼠肝脏形态及细胞损伤性变化明显减轻,血清ALT、AST和ALP含量明显降低(P<0.05),肝脏组织PELP1、ERK mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均显著降低(P<0.05)。结论金线莲苷对DEN诱导的小鼠肝损伤有显著保护作用,其机制与下调PELP1表达,阻断ERK通路活化,进而抑制炎症反应有关。

摘要： 目的探讨联氨基姜黄素(HZC)对二乙基亚硝胺(DEN)诱导雄性SD大鼠肝癌发生、发展的影响。方法根据实验设计将选取的80只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(10只)、药物对照组(10只)、模型组(30只)、干预组(30只)。正常对照组以80 mg/kg给予生理盐水腹腔注射;药物对照组以80 mg/kg给予HZC腹腔注射;模型组以50 mg/kg给予DEN腹腔注射;干预组以50 mg/kg DEN和80 mg/kg HZC腹腔注射,以上4组给药方法均2次/w,12 w后停药。待24 w实验结束,利用组织学、免疫组化和组织生化等检测方法,观察HZC对DEN诱发大鼠肝癌的影响。结果正常对照组、药物对照组肝组织均未发生癌变。与模型组相比,干预组肝癌发病率低、存活率高、肝脏癌结节小而少,差异具有统计学意义(P<0.05)。干预组体重、肝重、肝指数与模型组比较差异显著(P<0.01)。两个对照组均具有正常肝小叶结构,模型组显示出癌灶;干预组显示癌灶伴片状坏死。免疫组化显示两个对照组无增殖细胞核抗原(PCNA)染色,干预组肝组织PCNA阳性率明显低于模型组(P<0.01)。肝组织血浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、总胆红素水平(TBL)也显著低于模型组(P<0.05)。结论HZC抑制了DEN诱发大鼠肝癌的进程,并具有防护作用,对降低肝癌发生和减少DEN对大鼠肝脏的毒性作用具有显著效果。

摘要： 斑马鱼作为一种模式生物,具有其他动物模型所不具备的高通量等优势,非常适用于疾病模型的构建与药物筛选。采用斑马鱼构建肝癌疾病研究平台:以二乙基亚硝胺(DEN)作为癌症诱导剂按低(50μg/mL)、中(100μg/mL)、高(150μg/mL)3个浓度梯度对斑马鱼进行给药处理,诱导斑马鱼肝脏癌症的发生;同时采用石蜡切片、HE染色的方式观察肝脏细胞的癌变过程,并对其他相应的评价指标进行量化处理。结果表明,DEN能显著诱导斑马鱼肝脏发生脂肪组织病变、腹腔积液、肝脏癌变等病理过程,该模型与现有的模型相比,评价方法更加快速、经济,评价指标更完善。

摘要： 文章为了研究来自粒毛盘菌YM156发酵产生的多酚类化合物对二乙基亚硝胺(NDEA)诱导的急性肝损伤的保护作用,选用粒毛盘菌YM156进行发酵、提取、纯化后得到多酚类化合物;以清洁级昆明小鼠为实验动物,共分为对照组、NDEA模型组、单独LSP156组、低剂量组和高剂量组5组(n=8)。除对照组和NDEA模型组外,每天分别按照不同的剂量对小鼠进行多酚灌胃处理,持续28 d。肝损伤小鼠经NDEA建模12 h后处死。结果表明,LSP156能够有效降低小鼠肝脏中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(AKP)的水平,提高过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,抑制NDEA导致的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的升高。因此,粒毛盘菌YM156对NDEA诱导的肝损伤具有良好的保护作用。

摘要： 目的探讨改良二乙基亚硝胺(DEN)给药法诱导大鼠肝细胞肝癌(HCC)模型及常规超声联合血清甲胎蛋白(AFP)评估HCC模型的可行性。方法将175只无特定病原体级雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组(n=8)、对照组(n=69)和模型组(n=98)。对照组大鼠给予单一剂量DEN(50 mg·kg^(-1))腹腔注射制备HCC模型。模型组大鼠采用改良DEN给药法诱导大鼠HCC,即根据体质量变化动态调整DEN给药剂量:初始剂量50 mg·kg^(-1),然后每周根据体质量变化调整给药剂量,若大鼠体质量未下降或下降幅度小于每周5 g时,按50 mg·kg^(-1)给药;若每周大鼠体质量下降5~20 g,按25 mg·kg^(-1)给药;若大鼠体质量下降超过每周20 g,暂停给药1周。空白对照组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。第1~4周每周给药2次,第5~15周每周给药1次,连续给药15周。造模完成后,记录并比较造模期间3组大鼠死亡率;对存活大鼠行肝脏超声、血清AFP水平检查。随机抽取空白对照组7只大鼠、对照组14只大鼠和模型组14只大鼠,麻醉后处死并解剖,观察肝脏成瘤情况,记录肝脏质量并计算肝脏指数,苏木精-伊红染色观察大鼠肝脏病理学变化。结果造模期间,空白对照组、对照组、模型组大鼠死亡率分别为0.0%(0/8)、34.8%(24/69)、19.4%(19/98);对照组大鼠死亡率显著高于空白对照组(χ^(2)=4.043,P0.05),模型组大鼠死亡率显著低于对照组(χ^(2)=5.019,P0.05)。对照组与模型组大鼠血清AFP水平显著高于空白对照组(t=0.728、0.771,P0.05)。超声对肝脏癌结节诊断的敏感度为62.9%(78/124),血清AFP对肝脏癌结节诊断的敏感度为58.1%(50/86),血清AFP联合超声对肝脏癌结节诊断的敏感度为87.2%(73/86)。超声与血清AFP对肝脏癌结节诊断的敏感度比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.014,P>0.05);血清AFP联合超声检查对肝脏癌结节诊断的敏感度显著高于超声和血清AFP单独检测(χ^(2)=35.342、21.271,P0.05)。空白对照组大鼠肝小叶结构清晰,肝细胞索排列整齐,细胞核明显,未见水肿及炎症细胞浸润;对照组和模型组大鼠肝小叶结构不完整,出现假小叶,癌细胞排列成巢状,可见纤维组织增生,部分区域可见局灶性的细胞坏死,癌细胞核大、深染,偶见双核或多核,具有明显的细胞异形性,部分肿瘤细胞侵犯血管。2组大鼠的成瘤率均为100.0%。结论根据体质量变化动态调整DEN给药剂量诱导HCC大鼠模型,既可保证成瘤率又可降低造模过程中大鼠死亡率,肝脏超声联合血清AFP检测可作为评估大鼠HCC模型的方法。

摘要： 目的:探索肝细胞癌模型鼠肠道微生态特征。方法:将2周龄C57BL/6雄鼠分为正常对照组和肝癌模型组。肝癌模型组在出生后2周给予单次腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN),其中存活小鼠自4周龄起腹腔注射1,4-双[2-(3,5-二氯吡啶氧)]苯,每2周一次,共8次。分别于小鼠出生后第10、18和32周随机处死部分实验动物,取肝脏进行组织病理学检查。其中,在小鼠出生后第32周处死动物前无菌条件下收集两组粪便标本,并进行V3~V4高可变区16S rRNA基因组测序,进而对菌群多样性、物种丰度差异、菌群相关性、表型预测以及功能预测进行分析。结果:α多样性分析结果显示Good’s coverage均已达到最大值1.00,且正常对照组与肝癌模型组肠道菌群Observed features、Chao1指数、Shannon指数和Simpson指数差异均有统计学意义(均P0,标本的组内差异小于组间差异;两组标本的分离趋势明显(P0.5,P<0.05),肝癌模型组肠道优势菌属的相关性网络复杂程度比正常对照组降低,所有优势菌群的相互作用均呈较强的正相关。与正常对照组比较,肝癌模型组肠道菌群革兰阳性菌及移动元件菌基因相对丰度均显著上调(均P<0.05),而革兰阴性菌(P<0.05)及潜在致病性菌基因(P<0.05)相对丰度均显著下调。两组肠道菌群的基因代谢通路差异显著,其中正常对照组富集在能量代谢、细胞分裂及核苷酸代谢等18个代谢通路,而肝癌模型组富集在能量代谢、氨基酸代谢及碳水化合物代谢等12个代谢通路(均P<0.005)。结论:DEN诱导原发性肝癌模型小鼠肠道菌群数减少,菌群构成、菌群相关性、表型和功能均发生改变,其中门水平的拟杆菌门以及属水平的鼠杆菌科未分类属、鼠杆菌属、消化链球菌属、杜氏杆菌属等菌群可能与DEN诱导肝细胞癌的发生有关。

摘要： 目的 评价二乙基亚硝胺(DEN)口服诱导的大鼠肝癌模型的病理学特性及其在经导管动脉化疗栓塞术(TACE)中的应用价值。方法 60只Sprague-Dawley(SD)大鼠口服0.01%DEN诱导原位肝癌,分为肿瘤模型组(n=40)和TACE应用组(n=20)。肿瘤模型组大鼠自诱导后第6周开始每周行肝脏MRI检查,肝脏出现0.2 cm、0.5 cm结节时分别随机处死5只大鼠,行肝脏大体观、苏木精-伊红(HE)及Masson染色检查;其余大鼠继续每周行肝脏MR及每2周肺部CT检查,观察肿瘤生长、转移,并记录大鼠生存时间。TACE应用组大鼠采用开腹经胃十二指肠动脉逆行插管行介入操作,记录技术成功率和死亡率;术后3 d、7 d分别处死大鼠,检测肿瘤坏死。结果 肿瘤模型组大鼠肿瘤结节直径达0.2 cm的中位诱导时间为8(7,10)周,肝脏体积增大,肿瘤呈灰白色微小结节;HE染色显示肝实质炎性细胞浸润,部分假小叶形成,肿瘤细胞核肥大深染;Masson染色显示少量胶原纤维。肿瘤结节直径达0.5 cm的中位诱导时间为11(10,12)周,肝脏体积缩小,表面有大量结节;HE染色可见假小叶形成;Masson染色显示胶原纤维增多。部分大鼠出现肝外转移。中位生存时间为诱导后13(8,20)周。TACE应用组大鼠经DSA证实肿瘤为富血供;TACE技术成功为11/16,手术相关死亡为3/16;术后3 d、7 d肿瘤坏死率分别为(48.16±2.65)%、(50.36±2.92)%。结论 DEN诱导的大鼠原位肝癌较好地模仿了人类肝癌组织病理学特性,可用于TACE操作,是一种理想的介入治疗动物模型。

摘要： 目的 探讨氧化应激反应在二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌过程中的动态变化及意义.方法 雄性SD大鼠36只,随机分为模型组24只和正常组12只.模型组大鼠予以50 mg/kg二乙基亚硝胺腹腔注射,前4周每周2次,后每周1次,持续注射16周;正常组大鼠同模型组方法予以生理盐水腹腔注射.分别于实验第4,8,12,16周末取材,观察2组大鼠体重、肝脏系数、肝脏病理、肝组织中活性氧(ROS)及血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ谷氨酰转肽酶(γ-GT)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的动态变化.结果 模型组大鼠实验第4,8,12,16周的体重均明显低于同期正常组(P均0.05).结论 在二乙基亚硝胺诱导大鼠肝癌的过程中存在严重的氧化应激,并随着诱导时间延长存在明显加重趋势,这种持续的氧化应激状态可能是导致肝癌发生、发展的重要原因.

摘要： 目的 探讨谷氨酸-脯氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)在二乙基亚硝胺(DEN)诱导糖尿病小鼠肝癌形成中的表达及意义.方法 6～8周龄雄性C57BL/6小鼠32只,随机分为4组:正常对照组(Control组),糖尿病组(DM组),二乙基亚硝胺组(DEN组),糖尿病联合二乙基亚硝胺组(DM+ DEN组),每组8只.采用高脂饲料饲养构建糖尿病小鼠模型,并通过DEN诱导糖尿病小鼠肝癌形成.实验末,观察各组小鼠肝脏的大小、颜色、质地以及结节形成状况,记录肝脏质量、肝脏癌变只数和表面癌结节数,计算肝脏指数及癌变率;采用可见分光光度法检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测肝脏PELP1 mRNA转录水平.结果 DEN组和DM+ DEN组小鼠在造模12周后肝脏表面均出现结节.与Control组比较,DM组、DEN组和DM+ DEN组小鼠肝脏指数和血清ALT和AST的含量明显升高(P＜0.05);DM+ DEN组与DM、DEN组比较,小鼠肝脏指数、肝脏癌变率、肝表面癌结节数和血清ALT、AST含量均显著升高(P＜0.05);与Control组比较,DM+ DEN组和DM组小鼠血清TG、TC含量明显升高(P＜0.05).与Control组比较,DM+ DEN、DEN组小鼠肝脏组织中PELP1 mRNA表达显著升高(P＜0.05),且DM+ DEN组与DM、DEN组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 糖尿病小鼠的肝脏功能出现损伤,DEN使糖尿病小鼠的肝功能进一步恶化,并诱发癌变,PELP1可作为肝癌发生的标志因子,在DEN诱导糖尿病小鼠肝癌形成中起重要作用.

摘要： 目的:探讨华蟾素对二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠原发性肝癌抑制作用及抗氧化活力的影响。方法:购置SD大鼠,适应性饲养1周后,完全随机分为空白对照组、模型组、华蟾素低剂量组、华蟾素中剂量组、华蟾素高剂量组,每组各15只。DEN诱导大鼠原发性肝癌后,比较各组大鼠癌变率、肝脏指数及肝表面癌结节数,瘤重及抑瘤率,血清肝功能指标和抗氧化活力指标水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠癌变率、肝脏指数和肝表面癌结节数显著增加,血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性显著降低,丙二醛(MDA)活性显著升高,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,华蟾素处理大鼠癌变率、肝脏指数和肝表面癌结节数显著降低,瘤重显著降低,血清ALT、AST和TBIL水平显著降低,血清SOD、GSH-Px和CAT活性显著升高,MDA活性显著降低,且具有剂量依赖性(P<0.05);抑瘤率随华蟾素剂量增加而增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:华蟾素可能通过提高DEN致原发性肝癌大鼠肝组织抗氧化活力,发挥抗肿瘤作用。

摘要： N-亚硝基化合物(NOCs)广泛存在于环境中.在已被检测的约300种NOCs中,超过90％的NOCs对动物具有致癌毒性.由于人体易于通过饮食、吸烟、职业接触及内源性亚硝化等途径而摄入NOCs,因此NOCs对人类健康具有严重的威胁.二乙基亚硝胺(DEN)是NOCs中重要的一种，在食物中被频繁检出。目前而言，对DEN毒性的研究主要集中于大量高频的暴露方式。然而，人体对DEN的实际暴露一般为微量低频，因此研究微量低频DEN暴露的致肝癌毒性及其致毒机理具有重要意义。研究表明，微量低频DEN暴露会诱发肝癌，致癌历经慢性肝脏损伤、慢性肝炎、脂肪化、肝纤维化等病理过程，最后发展为肝癌。β-catenin的异常激活对肝癌的诱发和促进起着重要作用。因此，微量低频DEN暴露对人体健康的影响需得到更多的关注。

摘要： 目的：观察不同性质肝硬化结节的MR影像学表现,探讨利用DWI及BOLD MRI评价肝硬化结节的诊断及鉴别诊断价值。方法：80只Wistar雄性大鼠随机分为实验组和对照组,实验组64只,对照组16只。实验组大鼠给予浓度为0.01％的二乙基亚硝胺水溶液饮用,隔日更换,到第14周后停药;对照组饮用纯净水,其他饲养条件同实验组。从给药后第5周至20周，每周随机选取4只实验组进行MR扫描，每隔一周抽取2只对照组大鼠行MRI扫描。扫描序列包括横断面和冠状面T2WI平扫、横断面T1WI平扫，DWI及BOLD扫描。结果及结论：正常肝实质、RN,DN及HCC的ADC值呈逐渐降低趋势，利用DWI和ADC值定量分析可以为RN, DN,HCC的鉴别诊断提供重要价值。吸入混合气体前及之后的癌前结节(RN和DN)与HCC的T2值及R2值均有差别，癌前结节周围的肝组织在吸入混合气体前后的R2值大于肝癌，利用T2、R2值可为RN,DN,HCC及结节周围肝组织的鉴别诊断提供有用信息。吸入混合气体后，对照组、RN,DN及HCC之间在吸入混合气体前后的△R2值呈降低趋势，但其差异无统计学意义，但是肝硬化结节周围组织的R2值预测结节恶变可能性。

摘要： 雄性SD大鼠220只，体重100-120g，随机分成6组。组Ⅰ，阴性对照组，不诱癌不加富硒麦芽(SEM)；组Ⅱ，模型组；组Ⅰ和组Ⅱ，日粮中分别添加亚硒酸钠至硒含量达0.1mg/kg；组Ⅲ—组Ⅴ，日粮中分别添加SEM至硒含量为0.3、1.0、3.0 mg/kg；组Ⅵ，日粮中添加亚硒酸钠至硒含量3.0mg/kg。组Ⅱ—组Ⅵ，饮水中添加100mg/L二乙基亚硝胺(Diethylnitrosamine，DEN)诱癌，维持DEN摄入量每天约10mg/kg体重，连续16周，然后改饮普通灭菌水至18周末。组Ⅰ始终以普通灭菌水自由饮用。18周末，处死大鼠。采用生化分析动态观察各组大鼠诱癌过程中肝癌特异性指标谷胱甘肽-硫-转移酶（GST）、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和肝功能丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白（ALB）的变化。结果显示，富硒麦芽组各期血浆γ-GT、GST、ALT、ALP活性低于或显著低于模型组，血浆ALB含量高于或显著高于模型组，而且呈现一定的剂量-效应关系。结果表明，补充一定量的富硒麦芽能减轻DEN所致的肝损伤，延缓和阻滞大鼠肝癌的发生、发展进程。

摘要： 本研究的目的是观察束缚应激对二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠实验性肝癌发生,以及血清γ-谷氨酰转移酶浓度、肝细胞DNA含量及倍体型变化的影响,揭示束缚应激对肿瘤生长的促进作用及其机制.方法:本研究选用雄性Wistar大鼠,随机分成5组,即正常对照组、单纯束缚应激组、二乙基亚硝胺诱发肝癌组、二乙基亚硝胺诱发肝癌叠加束缚应激组、诱癌加束缚应激加中药治疗组.在实验第19周分批将大鼠断头处死,取血分离血清测定大鼠血清γ-谷氨酰转移酶;摘取肝脏,取小块肝组织人20％中性甲醛固定液固定,并取肝组织制备肝细胞悬液.结果:实验结果表明,①束缚应激可加重DEN诱发大鼠实验性肝癌的发生,主要表现外肝小叶结构紊乱,肝细胞核深染、核异型,肝小叶周边纤维化更明显,汇管区炎细胞浸润比单纯DEN诱癌组显著增多;②束缚应激可促进二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠血清γ-GT含量显著升高,与单纯诱癌组比较差异显著;③束缚应激对诱癌大鼠的2倍体肝细胞比单纯诱癌组显著减少,多倍体(包括异倍体)肝细胞显著增加,说明该组大鼠肝细胞DNA干系水平有向异倍体转化的趋势.然而,采用疏肝健脾中药对束缚应激DEN诱癌大鼠肝细胞DNA干系的恶性转化有缓解迹象.结论:束缚应激具有促进二乙基亚硝胺诱发大鼠肝细胞的癌变,以及促进血γ-GT升高、肝细胞失控性增殖和肝细胞增生结节的形成,从而加速大鼠肝癌的发生和发展.而通过给予疏肝健脾中药治疗能有效拮抗束缚应激刺激所加重的症状,为中药临床治疗肝癌提供实验依据.

摘要： 原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率高,预后差,防治工作尤为重要.中药以其安全性好、价格低廉、易于接受等特点在肝癌的药物预防研究中越来越受到重视.补肾方是我院肝科临床治疗慢性肝病的经典方,被证明对二乙基亚硝胺(DEN)诱导大鼠肝癌模型具有一定的保护肝细胞、延缓大鼠肝癌形成的作用[1].本文通过免疫组织化学染色方法检测补肾方对DEN诱导大鼠肝癌过程中PCNA、P53蛋白表达的影响,进一步探讨补肾方干预大鼠肝癌形成的机制.

摘要： 目的:建立家兔移植性肝细胞癌模型,同时进行二乙基亚硝胺(DEN)诱发家兔肝癌研究,并获得家兔肝细胞癌裸鼠移植株,为肝癌研究提供新的实验材料和手段. 方法:①DEN诱发家兔肝癌:40只雄性日本大耳白兔,在1/6肝切除术后,以浓度为0.002％的DEN水溶液代替饮水投喂,4周后浓度降至0.001％,并直至实验结束.实验过程中,定期检测血清GOT、GPT、γ-GT及AFP;定期作超声检查;对存活至23个月的5只动物取直径0.8 cm以上的肿瘤性结节(5个/肝),做H.E染色,核仁组成区嗜银相关蛋白染色,以及C-myc、P53蛋白和AFP免疫组化染色,光镜观察;每例肝脏肿瘤同时做透射电镜检查.②家兔肝癌裸鼠移植瘤的建立:以上5只家兔各取1块肿瘤组织接种裸鼠,成活的移植瘤在裸鼠体内反复传代,在第10代和第15代对肿瘤的生长特性、病理形态进行检测.③家兔体内传代研究:将兔肝癌裸鼠移植瘤在家兔眼前房和肝脏接种,同时皮下注射20 mg/kg/d的环孢霉素A(CsA),观察肿瘤生长情况,成活的肿瘤继续在家兔体内传代,直至肿瘤传代生长性状稳定,进行移植瘤生物学特性鉴定. 结果与结论:本实验用DEN成功地诱发了家兔肝脏肿瘤,每只家兔应用DEN的总剂量约为3300～3800 mg,诱发周期19～20个月,肝癌的发生率为9/11;DEN诱发的家兔肝脏肿瘤均为弥漫性多结节性肿瘤,同一肝脏的不同肿瘤结节性质存在不同;DEN诱发家兔肝癌的发生与c-myc基因和AFP的过表达以及p53基因的突变有关,本研究结果支持在肝细胞癌癌变过程中,c-myc基因的异常表达出现较早,p53基因的突变为肿瘤发展后期事件的观点;本研究获得了一个家兔肝细胞癌裸鼠移植株,该瘤株基本保留着原发瘤的形态学特点,分泌AFP,接种裸鼠的潜伏期8 d左右,成瘤率10/10,生长缓慢,无自发消退;兔肝细胞癌裸鼠移植瘤在应用20 mg/kg/d的CsA条件下,接种同品种家兔眼前房得以成活生长,目前已传代至第5代,CsA的剂量降至10 mg/kg/d.

摘要： 原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病隐匿、恶性程度高、预后差,严重威胁到人类的身心健康.因而探求肝癌的发病机制,寻求有效的治疗方法,一直是基础医务工作者努力的方向. 以往的研究表明,二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌涉及到多基因的改变,为更广泛地揭示DEN诱发大鼠肝癌肝组织基因表达的差异,上海中医药大学与美国科罗拉多大学医学院联合采用AffymetrixRat230AGeneChip进行检测,结果表明,在那些不同治疗方法所显著下调的基因中,大多与肝癌的关系尚不明了,由此,不同治法的下调作用的意义也还难以说明.但是,通过本研究,首次观察到了在DEN诱发大鼠肝癌组织中不同治法与这些基因的关系,这就为今后进一步的研究奠定了初步的基础.而且其中一些基因还可能是不同治法选择性下调的基因,深入研究有望揭示不同治法的分子调节机制和由此阐释相应证侯的分子特征.

摘要： 原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病隐匿、恶性程度高、预后差,严重威胁到人类的身心健康.因而探求肝癌的发病机制,寻求有效的治疗方法,一直是基础医务工作者努力的方向. 以往的研究表明,二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌涉及到多基因的改变[1-8],为更广泛地揭示DEN诱发大鼠肝癌肝组织基因表达的差异,上海中医药大学与美国科罗拉多大学医学院联合采用AffymetrixRat230AGeneChip芯片对大鼠肝组织进行了基因检测,结果可以看出,在以上基因的研究中,有关肝脏与肝癌的研究比较薄弱,这些基因在肝脏生理和病理状态下的具体作用大多还未明朗.尤其是,这些基因的表达多寡与肝癌的证侯关系还没有报道.我们以往的研究表明,肝癌存在的瘀、毒、虚的基本病机,那么这些基因的表达与以上病机存在什么关系,辨证论治对这些基因的调整如何,这是我们今后关注的重点.

摘要： 目的:绿茶多酚是绿茶中活性最高的一种多酚复合物,其抗氧化、抗炎、抗肿瘤等功效已被广泛的研究.茶多酚多酚羟基的结构决定了其极强的抗氧化能力和良好的水溶性,但在油脂体系中很难被吸收利用,其体内血药浓度不超过10μM,故而在很高的剂量仍然无法发挥高效的抗癌抗炎等作用.另一方面由于茶多酚的特殊结构使其自身易氧化,不稳定.因此,脂溶性茶多酚在水溶性茶多酚的基础上改造而来,其具有亲脂性,期望能够提高在体内的吸收利用率从而增强其抗肿瘤作用,本实验意在探讨化学诱导的肝癌模型下两种茶多酚的化学预防作用的差别,并初步研究其机制.rn 方法:研究中动物被随机分成8组，每组25只，包括正常组、模型组(DEN+PB组)、水溶性茶多酚组(DEN+PB+水溶性茶多酚，茶多酚包括0、40、400mg/kg三个剂量)、脂溶性茶多酚组(DEN+PB+脂溶性茶多酚，茶多酚包括0、40、400mg/kg三个剂量)。在建立DENlPB模型前动物分别用GTP和LTP均预处理2周，2周以后单次腹腔注射DEN 150mg/kg，并从注射当日起每日给予含0.05%PB的饮水。连续灌胃给予茶多酚28周，每周5次，两种茶多酚都设0、40、400mg/kg三个剂量。rn 结果:组织病理学观察，发现与模型组相比，水溶性及脂溶性茶多酚均能降肝细胞脂肪变性，同时，电镜观察发现脂溶性茶多酚能缓解肝细胞线粒体及高尔基体损伤;免疫组化检测发现两种茶多酚均能降低GST-P,PCNA，以及8-OHdG的表达;TUNEL结果显示脂溶性茶多酚能降低肝细胞凋亡水平;Western检测结果表明两种茶多酚均降低肝细胞PARP的表达量.rn 结论:油溶剂本身可在模型基础上加重大鼠癌前病变，而高剂量脂溶性茶多酚可明显减少溶剂本身对癌前病变的影响，可能通过减少DNA损伤、减少癌前病变细胞增殖、降低纤维化、减少凋亡等机制实现。

摘要： 目的:绿茶多酚是绿茶中活性最高的一种多酚复合物,其抗氧化、抗炎、抗肿瘤等功效已被广泛的研究.茶多酚多酚羟基的结构决定了其极强的抗氧化能力和良好的水溶性,但在油脂体系中很难被吸收利用,其体内血药浓度不超过10μM,故而在很高的剂量仍然无法发挥高效的抗癌抗炎等作用.另一方面由于茶多酚的特殊结构使其自身易氧化,不稳定.因此,脂溶性茶多酚在水溶性茶多酚的基础上改造而来,其具有亲脂性,期望能够提高在体内的吸收利用率从而增强其抗肿瘤作用,本实验意在探讨化学诱导的肝癌模型下两种茶多酚的化学预防作用的差别,并初步研究其机制.rn 方法:研究中动物被随机分成8组，每组25只，包括正常组、模型组(DEN+PB组)、水溶性茶多酚组(DEN+PB+水溶性茶多酚，茶多酚包括0、40、400mg/kg三个剂量)、脂溶性茶多酚组(DEN+PB+脂溶性茶多酚，茶多酚包括0、40、400mg/kg三个剂量)。在建立DENlPB模型前动物分别用GTP和LTP均预处理2周，2周以后单次腹腔注射DEN 150mg/kg，并从注射当日起每日给予含0.05%PB的饮水。连续灌胃给予茶多酚28周，每周5次，两种茶多酚都设0、40、400mg/kg三个剂量。rn 结果:组织病理学观察，发现与模型组相比，水溶性及脂溶性茶多酚均能降肝细胞脂肪变性，同时，电镜观察发现脂溶性茶多酚能缓解肝细胞线粒体及高尔基体损伤;免疫组化检测发现两种茶多酚均能降低GST-P,PCNA，以及8-OHdG的表达;TUNEL结果显示脂溶性茶多酚能降低肝细胞凋亡水平;Western检测结果表明两种茶多酚均降低肝细胞PARP的表达量.rn 结论:油溶剂本身可在模型基础上加重大鼠癌前病变，而高剂量脂溶性茶多酚可明显减少溶剂本身对癌前病变的影响，可能通过减少DNA损伤、减少癌前病变细胞增殖、降低纤维化、减少凋亡等机制实现。

摘要： 本发明公开了一种负载于纳米TiO2表面Cu2+‑尼古丁‑二乙基氮亚硝胺的复合印迹材料及其制法与用途，称取经表面修改过的纳米TiO2,加入到Cu2+‑尼古丁‑二乙基氮亚硝胺复合物溶液中，加入功能单体4‑VP和交联剂EGDMA和引发剂AIBN，充分混合后，转入圆底烧瓶，超声脱气15 min，通入氩气15 min，封瓶，将圆底烧瓶放入60°C恒温水浴锅中聚合反应再分离、洗涤和干燥即得。本发明得到的复合印迹材料对尼古丁和二乙基氮亚硝胺具有较高的选择吸附能力，平衡吸附量分别为65‑70μg/mg和48‑52μg/mg，可制成固相萃取剂从烟草溶液中分离尼古丁和二乙基氮亚硝胺。

摘要： 1-羟乙基-4-氧乙基羟乙基苯二醚(液体HQEE)与1-羟乙基-3-氧乙基羟乙基苯二醚(液体HER)制造方法。反应釜中加入水，搅拌下加入对或邻苯二酚、碳酸钠，氮气保护下，低于50°C加入环氧乙烷，1MPa，60～120°C，反应6～12h；降温至40～50°C时用盐酸使反应液的pH为7.0，然后减压蒸馏脱水，当水量蒸出95％时，加入3A分子筛，继续蒸馏，待水含量0.1％以下，于80°C进行加压过滤，即得到无色透明的液体产品。发明原料选择、配比、生产工艺步骤均合理、得当，产品收率高、纯度高、质量好可以使得下游聚氨酯产品的生产中方便了操作、降低反应温度、可以调整产品“软硬度”、透明度。

摘要： 本发明涉及式(III)的亚乙基二烷基次膦酸、亚乙基二烷基次膦酸酯和亚乙基二烷基次膦酸盐的用途，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R11、R12、R13、R14相同或不同，并且彼此独立地为尤其是H、C1－C18烷基、C6－C18芳基、C6－C18芳烷基、C6－C18烷基芳基，X为H、C1－C18烷基、C6－C18芳基、C6－C18芳烷基、C6－C18烷基芳基、Mg、Ca、Al、Sb、Sn、Ge、Ti、Fe、Zr、Zn、Ce、Bi、Sr、Mn、Cu、Ni、Li、Na、K和/或质子化的氮碱。

摘要： 本发明涉及一种制备亚乙基二烷基次膦酸、亚乙基二烷基次膦酸酯和亚乙基二烷基次膦酸盐的方法，其特征在于，a)使次膦酸源(I)与烯烃(IV)在催化剂A存在下反应生成烷基亚膦酸、其盐或酯(II)，b)如此生成的烷基亚膦酸、其盐或酯(II)与炔属化合物(V)在催化剂B存在下反应生成亚乙基二烷基次膦酸衍生物(III)，其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R11、R12、R13、R14相同或不同，并且彼此独立地为尤其是H、C1-C18烷基、C6-C18芳基、C6-C18芳烷基、C6-C18烷基芳基，X为H、C1-C18烷基、C6-C18芳基、C6-C18芳烷基、C6-C18烷基芳基、Mg、Ca、Al、Sb、Sn、Ge、Ti、Fe、Zr、Zn、Ce、Bi、Sr、Mn、Cu、Ni、Li、Na、K和/或质子化的氮碱，催化剂A是过渡金属和/或过渡金属化合物和/或催化剂体系，其由过渡金属和/或过渡金属化合物和至少一种配体构成，催化剂B是形成过氧化物的化合物和/或过氧化化合物和/或偶氮化合物。

摘要： 本发明公开了一种二氟乙基亚硝胺类衍生物及其制备方法，以羧酸为催化剂，二氟乙胺、亚硝酸叔丁酯和1‑芳基2‑硝基乙烯三组分，在室温无其它有机溶剂条件下，进行氮杂‑Michael加成/亚硝化串联反应，获得一系列含二氟乙基的亚硝胺衍生物。该类化合物的分子骨架中含有潜在生物活性的二氟乙基和亚硝胺基团，可以为药物发现和成药性评价建立物质基础，具有重要的应用价值。本发明原料易于获得，无需额外有机溶剂，具有反应条件温和、操作简单、产率高、底物普适性好的优点。

摘要： 本发明公开了一种负载于纳米TiO2表面Cu2+-尼古丁-二乙基氮亚硝胺的复合印迹材料及其制法与用途，称取经表面修改过的纳米TiO2,？加入到Cu2+-尼古丁-二乙基氮亚硝胺复合物溶液中，加入功能单体4-VP和交联剂EGDMA和引发剂AIBN，充分混合后，转入圆底烧瓶，超声脱气15？min，通入氩气15？min，封瓶，将圆底烧瓶放入60？°C恒温水浴锅中聚合反应再分离、洗涤和干燥即得。本发明得到的复合印迹材料对尼古丁和二乙基氮亚硝胺具有较高的选择吸附能力，平衡吸附量分别为65-70μg/mg和48-52μg/mg，可制成固相萃取剂从烟草溶液中分离尼古丁和二乙基氮亚硝胺。

摘要： 1－羟乙基－4－氧乙基羟乙基苯二醚(液体HQEE)与1－羟乙基－3－氧乙基羟乙基苯二醚(液体HER)制造方法。反应釜中加入水，搅拌下加入对或邻苯二酚、碳酸钠，氮气保护下，低于50°C加入环氧乙烷，1MPa，60～120°C，反应6～12h；降温至40～50°C时用盐酸使反应液的pH为7.0，然后减压蒸馏脱水，当水量蒸出95％时，加入3A分子筛，继续蒸馏，待水含量0.1％以下，于80°C进行加压过滤，即得到无色透明的液体产品。发明原料选择、配比、生产工艺步骤均合理、得当，产品收率高、纯度高、质量好可以使得下游聚氨酯产品的生产中方便了操作、降低反应温度、可以调整产品“软硬度”、透明度。

摘要： 本发明涉及亚乙基二烷基次膦酸、亚乙基二烷基次膦酸酯和亚乙基二烷基次膦酸盐的制备方法及其作为阻燃剂的用途。所要求保护的方法的特征在于，a)使次膦酸源(I)与烯烃(IV)在催化剂A存在下反应成烷基亚膦酸、其盐或酯(II)，b)使所产生的烷基亚膦酸、其盐或酯(II)与炔属化合物(V)在催化剂B存在下反应成亚乙基二烷基次膦酸衍生物(III)，和催化剂A为过渡金属和/或过渡金属化合物和/或由过渡金属和/或过渡金属化合物和至少一种配体组成的催化剂体系，和催化剂B为电磁辐射。

摘要： 本发明涉及一种顶空进样/气相色谱‑串联质谱测定N‑二甲基亚硝胺和N‑二乙基亚硝胺含量的方法，包括如下步骤：步骤1：样品处理；步骤2：利用顶空进样/气相色谱‑串联质谱进行测定；步骤3：定性分析；步骤4：定量分析。本发明的优点在于：本发明顶空进样可以避免复杂的样品前处理，具有一定的便捷性，同时，相对于液体直接进样而言，可减少难挥发成分对仪器、色谱柱的影响以及对结果的影响，采用气相色谱‑串联质谱多反应监测模式分析能够消除干扰，提高灵敏度。

摘要： 本发明是用二乙基亚硝胺DEN联合藻毒素MC-LR通过腹腔注射到大鼠体内诱发大鼠肝癌模型。从肝重体重比、肝脏外观、肝组织病理学切片、GST-Pi蛋白表达水平等指标清楚地展示了大鼠肝癌发生过程中的肝细胞损伤期，肝细胞增生-肝硬化期和肝细胞癌变期过程，并且发现DEN联合藻毒素MC-LR比DEN单独诱发的肝癌模型在同一时间效果更显著，成瘤时间更短，是一种研究人体肝癌发生的理想模型。该模型的特点是清楚地展示了肝癌发生的各个阶段，有利于对肝癌发生过程机制的研究、癌前病变的检测以及治疗药物的开发。