解毒酶

摘要： 为探究草地贪夜蛾对毒害物质的反防御策略。以添加0.5%烟碱、0.05%黄酮、0.5%棉酚、0.01%水杨酸、0.1%香豆素5种植物次生代谢物质的人工饲料进行饲养草地贪夜蛾5龄幼虫,48 h后分别测定草地贪夜蛾中肠和脂肪体的谷胱甘肽-S-转移酶等4种酶的活性,同时采用半定量RT-PCR方法检测CYP4L13、CYP4M14基因在中肠和脂肪体中的表达水平。其中取食烟碱、黄酮、棉酚、香豆素和水杨酸均能诱导中肠GSTs活性增强,棉酚、香豆素和水杨酸在脂肪体中可显著诱导GSTs的活性增强6倍以上。取食棉酚可诱导草地贪夜蛾中肠CarE活性增强1.57倍,而取食烟碱可诱导脂肪体CarE的活性显著增加。与对照相比,取食烟碱、黄酮、棉酚、香豆素后,草地贪夜蛾头部AchE活性分别提高1.34、0.50、0.82、0.68倍。草地贪夜蛾中肠和脂肪体中CYPM14、CYPL13可被不同植物次生代谢物质诱导表达增强,同时增加P450含量。与对照相比,取食黄酮、棉酚、水杨酸后,其中肠P450的含量分别增加3.14、2.43、3.93倍。草地贪夜蛾的解毒能力可通过植物次生代谢物质诱导增强,从而提高其对有毒物质的抵抗力。

摘要： 为探究不同虫害诱导抗性烟草(Nicotiana tabacum L.)对斜纹夜蛾(Spodoptera litura Fabricius)取食和解毒生理的影响,本研究以烤烟品种雄性不育K326为供试材料,观察斜纹夜蛾幼虫对棉铃虫[Helicoverpa armigera(Hübner)]诱导烟草、斜纹夜蛾诱导烟草、烟蚜[Myzus persicae(Sulzer)]诱导烟草的取食选择,以机械处理(打孔、针刺)和未作任何处理的烟草作为阳性和阴性对照,检测分析了取食各虫害处理烟草后斜纹夜蛾体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、多功能氧化酶(MFO)等酶活性的变化。结果表明,斜纹夜蛾初孵幼虫喜食阳性对照打孔和烟蚜诱导处理后的烟叶,而相对避免取食同种昆虫诱导后的烟叶,3龄幼虫亦喜食阳性对照打孔诱导烟叶。取食各虫害处理烟叶后斜纹夜蛾体内的AchE活性均被诱导升高,其中烟蚜处理的AchE活性最高,在48 h时较CK升高了65.17%。棉铃虫、斜纹夜蛾和烟蚜处理在48、48和4 h时分别诱导CarE、MFO、GST活性较CK升高14.38%、72.22%和47.47%,而三种处理对应的MFO和GST,CarE、MFO分别在12和48,48、4 h时升高后与CK没有显著差异(P>0.05),斜纹夜蛾处理的GST活性和烟蚜处理的CarE活性均在48 h时被明显抑制,仅为CK的55.67%和81.05%。说明斜纹夜蛾对不同抗性烟草存在取食差异,取食抗性烟草均可激活斜纹夜蛾AchE活性,不同抗性处理下其他酶活性随着时间呈现特异性变化。本研究可为斜纹夜蛾在烟田中的综合防治研究提供思路和研究基础。

摘要： 本研究通过测定豌豆蚜在取食“抗”“感”2个紫花苜蓿品种(高抗品种‘甘农5号’和感虫品种‘猎人河’)之后的存活率、体内酶活性等指标,分析2个苜蓿品种对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)存活率及体内保护酶和解毒酶活性的影响。结果表明:取食高抗苜蓿品种的豌豆蚜在24 h时体内的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferase,GST)和细胞色素P450s(Cytochrome P450s,P450s)活性最高,其存活率从12 h的85.3%降到46.7%;取食感虫苜蓿品种的豌豆蚜过氧化物酶(Peroxidase,POD),SOD和CarE活性呈现先上升后下降的趋势,过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性呈现先下降后上升的趋势,存活率从12 h的90.7%降到24 h的86.0%。从结果可以看出,抗虫品种对豌豆蚜的影响大于感虫品种,24 h为豌豆蚜通过酶活维持机体内代谢平衡的关键期,且CarE在豌豆蚜适应两苜蓿品种时起到重要的调控作用。

摘要： 【目的】探明茶皂素亚致死浓度(LC_(20))不同时间处理对蛞蝓保护酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)及过氧化氢酶(CAT)]和解毒酶[羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AchE)及谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)]活性的影响,以期为蛞蝓的生物防治提供依据。【方法】采用浸液法测定茶皂素对蛞蝓的毒杀效力,并用分光光度法测定LC_(20)处理6 h、12 h、24 h、48 h和72 h蛞蝓体内保护酶和解毒酶活性的变化。【结果】茶皂素对蛞蝓72 h的LC_(20)为5.123 mg/mL;茶皂素LC_(20)不同时间处理SOD、POD和CAT的活性分别为1.31~2.43 U/mg、3.87~4.58 U/mg和15.99~28.33 U/mg,对SOD表现为抑制作用,对POD表现为抑制-激活-抑制-激活-抑制作用,对CAT表现为先激活后抑制作用;不同时间处理CarE、AchE和GSTs的活性分别为4.57~5.97 U/mg、0.44~0.58 U/mg和39.00~56.74 U/mg,各时间处理均表现为抑制作用。【结论】茶皂素对蛞蝓具有较高的浸杀活性,72 h的亚致死浓度(LC_(20))为5.123 mg/mL,可有效干扰蛞蝓体内SOD、POD、CAT、CarE、AchE和GSTs的活性,扰乱其正常生理代谢功能。

摘要： 以3龄蛴螬为研究对象,采用载毒叶碟法研究5、10、20、30、60 mg/mL浓度人参根总皂苷对蛴螬体内解毒酶活性在处理24 h和48 h时的影响,探究人参根总皂苷处理蛴螬的最佳时间和最佳浓度。结果表明:人参根总皂苷处理浓度为中浓度(20、30 mg/mL)、处理24 h,对蛴螬体内多功能氧化酶(MFO)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)、羧酸酯酶(CarE)活性抑制效果显著。该研究为人参根总皂苷作为生物型农药的发展提供参考依据。

摘要： [目的]基于不同寄主植物对云南松毛虫(Dendrolimus houi Lajonquiere)生长发育、繁殖、解毒酶和消化酶活性的影响,解析其对不同寄主植物的生理适应机制,为营造新型混交林开展生态调控提供理论依据。[方法]以柳杉、侧柏、柏木、云南松和马尾松为寄主植物进行室内饲养,分别比较不同寄主植物条件下云南松毛虫幼虫、蛹的发育历期和成虫繁殖力,并测定云南松毛虫5龄幼虫的解毒酶(谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)、细胞色素P450酶(CYP450)、羧酸酯酶(CarE))和消化酶(蛋白酶、淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS))的活性。[结果]取食柳杉、柏木、侧柏和云南松的云南松毛虫幼虫具完整的生活史,而取食马尾松的幼虫只存活至5龄,不具有完整的生活史。同时,取食柳杉和柏木的云南松毛虫幼虫和蛹发育历期短、雌蛹重且成虫产卵多。取食柳杉和柏木的云南松毛虫5龄幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶和细胞色素P450酶活性显著高于取食云南松、侧柏和马尾松的幼虫(P<0.05)。在3种消化酶中,取食柳杉与柏木的云南松毛虫幼虫体内蛋白酶活性均处于较高水平。[结论]云南松毛虫对柳杉和柏木具较好的适应性,虫体内解毒酶和蛋白酶可能是其对柳杉和柏木有较好适应性的主要原因。

摘要： 黄宽条跳甲是内蒙古西部地区春油菜苗期最重要的害虫。本研究测定了2个抗虫油菜品种‘太空蒙Ⅳ’和‘大黄油菜’及1个感虫品种‘青油14’的叶片性状、次生代谢物质及取食不同品种油菜后黄宽条跳甲解毒酶活性。结果表明,油菜叶片含水量高的抗虫性强。叶片茸毛短、密度低与‘太空蒙Ⅳ’抗虫性高度相关,蜡质含量高可能是‘大黄油菜’抗黄宽条跳甲的原因之一。油菜叶片总黄酮、总酚和总生物碱含量与抗虫性呈正相关;取食抗虫性高的油菜品种的黄宽条跳甲体内谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性极显著高于感虫品种。

摘要： 【目的】番茄潜叶蛾是新入侵我国的对番茄具有毁灭性危害的入侵害虫,目前入侵我国的番茄潜叶蛾种群对杀虫剂的抗性尚无报道。本研究旨在明确新疆和云南番茄潜叶蛾田间种群对6种常用杀虫剂的敏感性及其与解毒酶活性的关系。【方法】采用浸叶法测定6种常用杀虫剂对番茄潜叶蛾新疆和云南种群2龄幼虫的室内毒力。通过对2龄幼虫的生物测定确定3种增效剂[CYP450抑制剂胡椒基丁醚(PBO)、酯酶抑制剂磷酸三苯酯(TPP)和GST抑制剂丁烯二酸二乙酯(DEM)]对氯虫苯甲酰胺的增效作用。采用酶活性分析测定室内敏感种群和田间抗性种群(新疆种群)2龄幼虫体内解毒酶[细胞色素P450酶(CYP450)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和羧酸酯酶(CarE)]活性,以确定杀虫剂抗性与解毒酶活性的关系。【结果】番茄潜叶蛾云南种群对6种杀虫剂的敏感性由高到低依次为甲维盐、溴虫腈、多杀菌素、茚虫威、氯虫苯甲酰胺和高效氯氰菊酯。新疆种群对6种杀虫剂的敏感性由高到低依次为甲维盐、溴虫腈、氯虫苯甲酰胺、多杀菌素、茚虫威和高效氯氰菊酯。与室内敏感种群相比,云南和新疆种群对氯虫苯甲酰胺的抗性水平最高,抗性倍数分别为212.7和169.3倍。生物测定结果表明,3种增效剂PBO,TPP和DEM均对氯虫苯甲酰胺无明显增效作用。酶活性测定结果表明,番茄潜叶蛾室内敏感种群和田间抗性种群之间2龄幼虫中CYP450,GST和CarE活性无显著差异。【结论】番茄潜叶蛾新疆和云南种群对测试的6种杀虫剂产生不同程度的抗性,对氯虫苯甲酰胺的抗性最高,番茄潜叶蛾对杀虫剂的抗性与解毒酶活性无关。本研究的结果对番茄潜叶蛾的田间防治和杀虫剂抗性治理具有指导意义。

摘要： 【目的】探明美国白蛾对丛枝菌根真菌(AMF)定殖银中杨的适应和生理响应,为揭示AMF在林木与植物昆虫之间的相互作用奠定基础,为利用AMF诱导增强林木化学防御提供理论依据。【方法】对银中杨扦插苗进行外源接种摩西球囊霉(GM),在GM侵染率达到最高时(90天),采叶饲喂美国白蛾幼虫,观察美国白蛾幼虫的生长发育、食物利用情况,分析其消化酶和解毒酶的活性变化。【结果】与对照相比,取食GM侵染的树叶后,3~6龄幼虫体质量均不同程度的低于CK,但差异不显著;2~5龄幼虫发育历期显著延长,且3龄和5龄幼虫相对生长率显著降低;美国白蛾5龄幼虫食物消耗率无显著差异,食物转化率和利用率被抑制;6龄幼虫食物消耗率、转化率和利用率均无显著差异。5龄幼虫脂肪酶活性显著增加,谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性被抑制,蛋白酶和淀粉酶、羧酸酯酶(CarE)活性与对照无显著差异。6龄幼虫脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶、GSTs和CarE活性均显著高于对照。【结论】接种GM的银中杨对美国白蛾的生长发育和食物利用在短时间内有一定抑制作用,美国白蛾会通过提高消化酶和解毒酶活性来突破这种抑制作用,维持正常生长发育。

摘要： 为探索24-表油菜素内酯(24-Epibrassinolide,EBR)处理对西瓜中啶虫脒、多菌灵、苯醚甲环唑、腈菌唑的降解作用及其机理,以西瓜为试验材料,喷施EBR处理,以清水处理为对照,分别于喷施农药后2 h、1 d、3 d、5 d、7 d、9 d、15 d、24 d进行取样,采用液相色谱串联质谱法测定西瓜果实中上述农药的残留含量,采用吸光光度法测定解毒酶活性、活性氧含量以及代谢产物的变化。结果表明:与清水对照组相比,EBR处理组显著降低了西瓜果实中啶虫脒、多菌灵、苯醚甲环唑、腈菌唑的含量(P<0.05),抑制丙二醛(MDA)的生成,显著降低了超氧阴离子(O_(2)^(-))的产生速率,保持较高解毒酶(超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、谷胱甘肽还原酶(GR)及抗坏血酸过氧化物酶(APX))的活性,且使可溶性蛋白、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H_(2)O_(2))含量保持在较高的水平。喷施EBR能提高西瓜果实中解毒物质的含量及解毒酶的活性,最终降低西瓜果实中的农药残留含量。

摘要： 本研究所已从一株Armillariella tabescens E-20菌株分离得到一种能够降解黄曲霉毒素的蛋白酶，命名为黄曲霉毒素解毒酶(Aflatoxin -detoxifiaymeADTZ)，研究已经表明:黄曲霉毒素解毒酶(ADTZ)，是一种具有氧化还原作用的加氧酶，故该酶也称Aflatoxin-Oxidase，(AFO)，但是对该酶的结构和功能的了解甚少，虽然在ADTZ结构与功能的生物学预测方面可获取一些信息，但是却难以解释其实际的功能。

摘要： 研究了桑树、构树、杨树和柳树四种树种对桑天牛成虫生长发育和解毒酶活性的影响。结果表明，桑天牛成虫的寿命、取食量和产卵量均以取食桑树为最高，其次是构树，而杨树和柳树最低；但取食不同植物后其血淋巴中解毒酶活性并无显著差异。

摘要： 本文阐述了抗解毒酶结构在新农药分子设计及合成中的应用,以此设计思想,设计并合成了一批化合物,从中发了一些对黄瓜白粉病具有很好防治效果的化合物.

摘要： 本文研究了烟碱、芸香苷两种次生物质对斜纹夜蛾中肠羧酸酯酶、谷胱甘肽转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响以及对攻蛾、锐劲特、菜喜三种低毒化学药剂的敏感性影响。结果表明这三种次生物质能够不同程度的抑制羧酸酯酶活性，同时诱导谷胱甘肽转移酶和乙酰胆碱酯酶的活性。烟碱能够明显提高斜纹夜蛾对三种药剂的敏感性，而芸香苷则随浓度升高降低斜纹夜蛾对药剂的敏感性。

摘要： 本文综述了近年来小麦对麦蚜抗性机制的研究概况,从形态与组织结构抗性、抗生性、耐害性及诱导抗虫性4个方面阐述了小麦对麦蚜尤其是对麦长管蚜的抗性机制,侧重于小麦抗生性研究.小麦的抗生性主要来源于其体内的一些次生物质如单宁、丁布、总酚、黄酮类化合物及吲哚生物碱等.本文还就次生物质对麦蚜的抗性机理和对麦长管蚜体内多种糖转化酶和解毒酶的抑制作用在近年来的研究进展作了介绍.

摘要： 绿盲蝽是中国北方棉花、果树和多种蔬菜上的重要害虫,化学药剂防治仍是目前控制该害虫的主要措施.而杀虫剂活性通常会受到温度的影响,主要通过影响杀虫剂自身的理化性质以及昆虫的新陈代谢等来影响杀虫剂的毒力和防效,从而产生不同的温度效应.

摘要： 绿盲蝽是中国北方棉花、果树和多种蔬菜上的重要害虫,化学药剂防治仍是目前控制该害虫的主要措施.而杀虫剂活性通常会受到温度的影响,主要通过影响杀虫剂自身的理化性质以及昆虫的新陈代谢等来影响杀虫剂的毒力和防效,从而产生不同的温度效应.

摘要： 绿盲蝽是中国北方棉花、果树和多种蔬菜上的重要害虫,化学药剂防治仍是目前控制该害虫的主要措施.而杀虫剂活性通常会受到温度的影响,主要通过影响杀虫剂自身的理化性质以及昆虫的新陈代谢等来影响杀虫剂的毒力和防效,从而产生不同的温度效应.

摘要： 绿盲蝽是中国北方棉花、果树和多种蔬菜上的重要害虫,化学药剂防治仍是目前控制该害虫的主要措施.而杀虫剂活性通常会受到温度的影响,主要通过影响杀虫剂自身的理化性质以及昆虫的新陈代谢等来影响杀虫剂的毒力和防效,从而产生不同的温度效应.

摘要： 本发明公开了一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2‑丁酮酸代谢解毒中的应用，具体涉及一种利用该突变型丙酮酸氧化酶重构乙酸旁路途径增强细胞对2‑丁酮酸耐受性的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。对丙酮酸氧化酶(PoxB)进行定点饱和突变得到PoxBF112W突变体，该酶增强了丙酮酸选择性，减弱了2‑丁酮酸结合亲和力。基于此突变体，在微生物细胞TWF115 ΔaceE中重建乙酸旁路，用于L‑苏氨酸的生物合成供应乙酰辅酶A和还原型辅助因子。该重构的乙酸旁路途径可以进一步去除2‑丁酮酸的代谢毒性，帮助宿主菌TWF115 ΔaceE在5g/L的2‑OBA添加下合成更高的L‑苏氨酸(13.98g/L)。

摘要： 与天然凝血酶相比在序列上有如下不同的凝血酶突变蛋白质(a)Ala取代Gly,Gly位于序列环境Tyr-Gly-Phe并占据天然人类凝血酶原第558位(序列号14);(b)下列残基中至少一个取代或缺失(b1)位于序列环境Ala-His-Cys并占据天然人类凝血酶原第363位(序列号14)的His;(b2)位于序列环境Arg-Asp-Ile并占据天然人类凝血酶原第419位(序列号14)的Asp;(b3)位于序列环境Asp-Ser-Gly并占据天然人类凝血酶原第525位(序列号14)的Ser;用作解毒剂。

摘要： 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的黄曲霉毒素解毒酶。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素解毒酶三维结构外层部位的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对胰蛋白酶抗性提高的ADTZ突变体。本发明所述的作用于黄曲霉毒素的突变体黄曲霉毒素解毒酶(ADTZ

摘要： 本发明涉及一种具有转化黄曲霉毒素活性的解毒酶及编码该酶的基因。发明人首先分离并纯化出了具有该活性的新型蛋白，命名为黄曲霉毒素解毒酶(Aflatoxin-detofizyme，ADTZ)。本发明通过纯化和测序获得ADTZ的基因特异性引物，从假蜜环菌(Armillariella tabescens)的总RNA出发，克隆得到编码ADTZ的基因，并利用基因工程的方法，在多种表达系统中表达并纯化出重组ADTZ蛋白。本发明所述的解毒酶具有转化AFB1的生物活性，能降低AFB1的致畸变作用，为今后在饲料加工、食品加工以及抗肿瘤药物开发打下了良好的基础。

摘要： 本发明属于昆虫解毒酶在农药降解中的应用，具体是飞蝗解毒酶LmGSTpcF1在降解马拉硫磷农药中的应用，所述飞蝗解毒酶LmGSTpcF1的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示的序列。LmGSTpcF1与GSH和马拉硫磷在反应条件下进行孵育，通过液相色谱法检测马拉硫磷，结果表明马拉硫磷基本被完全降解，检测不到农药成分残留，降解效率达到99％以上。本发明飞蝗解毒酶LmGSTpcF1可用于农产品、水源、土壤等中的马拉硫磷农药残留去除。

摘要： 本发明公开了一种谷胱甘肽巯基转移酶作为防治AFB1致鸭肝脏损伤解毒酶的应用，本发明对鸭GSTs酶家族中10种GST进行了试验，筛选出了有解毒效果的GST和GST3，提供了GST和GST3作为防治AFB1致动物肝脏损伤靶标酶的应用。本发明的谷胱甘肽巯基转移酶(GST或GST3)能有效抑制或缓解AFB1诱导的雏鸭肝脏毒性作用，主要与其能够催化AFBO生成无毒的AFBO‑GSH的代谢有关。本发明的GST和GST3可以作为治疗AFB1致鸭肝脏损伤药物及新型饲料添加剂开发提供新的的靶标基因。

摘要： 本发明公开了一种对胰蛋白酶抗性提高的黄曲霉毒素解毒酶。本发明通过蛋白质工程技术对野生型黄曲霉毒素解毒酶三维结构外层部位的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对胰蛋白酶抗性提高的ADTZ突变体。本发明所述的作用于黄曲霉毒素的突变体黄曲霉毒素解毒酶(ADTZ

摘要： 本发明涉及一种具有转化黄曲霉毒素活性的解毒酶及编码该酶的基因。发明人首先分离并纯化出了具有该活性的新型蛋白，命名为黄曲霉毒素解毒酶(Aflatoxin－detofizyme，ADTZ)。本发明通过纯化和测序获得ADTZ的基因特异性引物，从假蜜环菌(Armillariella tabescens)的总RNA出发，克隆得到编码ADTZ的基因，并利用基因工程的方法，在多种表达系统中表达并纯化出重组ADTZ蛋白。本发明所述的解毒酶具有转化AFB1的生物活性，能降低AFB1的致畸变作用，为今后在饲料加工、食品加工以及抗肿瘤药物开发打下了良好的基础。

摘要： 本发明公开了一种负调控害虫解毒酶基因表达的杀虫剂纳米增效剂的制备方法及其应用，该方法包括：首先制备介孔有机二氧化硅，再采用一锅法将氧化铈纳米粒子锚定于介孔有机二氧化硅上，极大提高了氧化铈纳米粒子的分散性，即得负调控害虫解毒酶基因表达的杀虫剂纳米增效剂。本发明的制备方法简单、成本低廉、反应条件温和、使用方法便捷。本发明所制备的杀虫剂纳米增效剂具有活性氧清除能力，可显著降低虫体活性氧水平进而降低害虫解毒酶活力，并且下调害虫P450基因表达水平，在同等杀虫剂使用剂量下，可提高杀虫活性39％‑64％，有效克服和延缓有害生物抗药性，减少环境污染，具有巨大的经济效益和可持续发展意义。

摘要： 本实用新型解毒酶对除草剂药害解除作用测定装置及其关键机构涉及除草剂测定装置技术领域；所述测定装置包括样本保存机构，所述样本保存机构的顶部卡接有光照机构，所述样本保存机构的内顶部固定连接有药剂添加机构，所述样本保存机构包括实验仓，所述实验仓的顶部固定连接有支撑架，所述支撑架的顶部设置有连接导轨，所述连接导轨的底部固定连接有管道支撑架。该测定装置，通过设置实验仓，并在实验仓的内部设置隔离结构，同时通过带有药剂瓶的导管和喷淋头配合，对测定样本进行供水，使所有样本处于的环境相同，进行测定的时候，也能方便观察员进行数据观测和记录，达到了便进行除草剂浓度测定的效果。