豌豆蚜

摘要： 【目的】本研究旨在鉴定豌豆蚜Acyrthosiphon pisum触角转录组中化学感受蛋白(chemosensory protein,CSP)基因,明确触角中高表达的豌豆蚜CSP蛋白与蚜虫报警信息素、性信息素以及植物挥发物的分子结合特性。【方法】通过对豌豆蚜成蚜触角进行转录组测序,鉴定触角中候选CSP基因;采用RPKM值和半定量RT-PCR分别明确这些CSP基因在豌豆蚜成蚜触角以及不同组织(触角、口针、去除触角和口针的头、胸、腹、足和翅)中的表达谱;通过荧光竞争结合实验测定这些触角CSPs与蚜虫报警信息素和性信息素以及植物挥发物的结合特性。【结果】在豌豆蚜成蚜触角转录组中鉴定得到10个CSP基因。RPKM值和半定量RT-PCR分析结果表明ApisCSP2,ApisCSP4和ApisCSP5在豌豆蚜成蚜触角中表达量最高。荧光竞争结合实验表明ApisCSP4与报警信息素主要组分(E)-β-法尼烯[(E)-β-farnesene,EβF]和微量组分(-)-α-蒎烯结合力强,K_(i)值分别为2.2±0.8和4.9±0.7μmol/L;ApisCSP5与两种性信息素组分(+)-(4aS,7S,7aR)-荆芥内酯和(-)-(1R,4aS,7S,7aR)-荆芥醇结合力强,K_(i)值分别为4.8±0.9和2.6±0.6μmol/L。【结论】豌豆蚜成蚜触角转录组中鉴定到10个CSP基因,其中ApisCSP4和ApisCSP5可能分别参与了蚜虫报警信息素和性信息素的转运。

摘要： 本研究通过测定豌豆蚜在取食“抗”“感”2个紫花苜蓿品种(高抗品种‘甘农5号’和感虫品种‘猎人河’)之后的存活率、体内酶活性等指标,分析2个苜蓿品种对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)存活率及体内保护酶和解毒酶活性的影响。结果表明:取食高抗苜蓿品种的豌豆蚜在24 h时体内的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)、谷胱甘肽-S-转移酶(Glutathione-S-transferase,GST)和细胞色素P450s(Cytochrome P450s,P450s)活性最高,其存活率从12 h的85.3%降到46.7%;取食感虫苜蓿品种的豌豆蚜过氧化物酶(Peroxidase,POD),SOD和CarE活性呈现先上升后下降的趋势,过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性呈现先下降后上升的趋势,存活率从12 h的90.7%降到24 h的86.0%。从结果可以看出,抗虫品种对豌豆蚜的影响大于感虫品种,24 h为豌豆蚜通过酶活维持机体内代谢平衡的关键期,且CarE在豌豆蚜适应两苜蓿品种时起到重要的调控作用。

摘要： 南方小花蝽Oriussimilis是我国南方农田生态系统中一种对小型害虫极具控害潜力的重要捕食性天敌昆虫。为了明确天敌南方小花蝽对云南小春作物上常见蚜虫的捕食能力和喜好性,本文在实验室条件下研究了南方小花蝽5龄若虫、雌雄成虫对不同组猎物的捕食喜好性。选取云南小春作物上3种主要蚜虫种类:烟蚜Myzus persicae、甘蓝蚜Brevicoryne brassicae、豌豆蚜Acyrthosiphon pisum组成的混合猎物(A组);烟蚜低日龄寄生蚜,烟蚜僵蚜和烟蚜健蚜(B组);不同发育阶段烟蚜混合共存(C组),测定南方小花蝽的捕食选择性。结果表明:南方小花蝽对烟蚜和甘蓝蚜(A组)、烟蚜僵蚜和健蚜(B组)、烟蚜低龄若蚜和高龄若蚜(C组)的捕食量高于同组其他蚜虫,表现出正喜好性(Ci>0);而对豌豆蚜(A组)、低日龄寄生烟蚜(B组)、烟蚜成蚜(C组)表现出负喜好性(Ci<0)。3种混合猎物环境下南方小花蝽的日总捕食量为6.71~15.08头/d,对各组混合猎物的日总捕食量从大到小依次为A组,C组,B组。南方小花蝽对蚜虫具有较强的捕食能力,能利用其控制小春作物上的蚜虫。但南方小花蝽对烟蚜茧蜂Aphidius gifuensis寄生烟蚜后形成的僵蚜存在较大误食风险,在利用南方小花蝽控制蚜虫时应在僵蚜形成和子代蚜茧蜂羽化高峰期过后释放。此外,混合猎物条件下,南方小花蝽日捕食总量受混合猎物蚜虫种类和类型的复杂程度影响。

摘要： 为有效释放异色瓢虫防控豌豆蚜,调查异色瓢虫各龄期幼虫和成虫对不同密度豌豆蚜的捕食量及捕食效应。结果表明,异色瓢虫各龄期幼虫(Ⅰ龄~Ⅳ龄)、雄虫和雌虫的理论最大日捕食量分别为12.88、46.66、85.88、160.04、198.20、204.75头;捕食功能参数a/Th最大的为雌虫,可达206.75,其次是雄虫和Ⅳ龄幼虫,分别为196.18和143.79,雌虫对豌豆蚜的控制能力最强,其次是雄虫和Ⅳ龄幼虫,Ⅳ龄幼虫的捕食能力强于其他低龄幼虫;随豌豆蚜密度的增加,异色瓢虫各龄幼虫和成虫的捕食量也不断增大,当豌豆蚜超过一定密度后,其捕食量增加缓慢并逐渐趋于稳定。异色瓢虫各龄期幼虫和成虫对豌豆蚜的捕食功能反应均符合HollingⅡ模型,圆盘方程的理论值与实测值拟合较好。随豌豆蚜密度的增加,异色瓢虫各龄期幼虫和成虫对豌豆蚜的寻找效应随之降低。异色瓢虫成虫对豌豆蚜的控害效果较好,可作为生物防治技术应用于田间防控。

摘要： 本试验采用带虫浸叶法和酶标板法研究吡虫啉对红绿色型豌豆蚜体内的2种解毒酶,即谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)活性的影响。结果表明,随着选育代数的增加,LC_(50)值逐渐升高,抗性逐渐增强,豌豆蚜体内2种解毒酶活力均显著升高。至第8代时,红绿色型豌豆蚜体内GSTs比活力分别达到28.35和26.68μmol/[min·mg(pro)],分别是F_(0)比活力的2.88和2.30倍;MFO比活力分别达到2.05和1.72μmol/[min·mg(pro)],分别是F_(0)比活力的1.56和1.45倍,说明GSTs和MFO解毒酶活性与选育代数的增加呈正相关。该试验结果为豌豆蚜防治中合理使用化学杀虫剂提供科学的理论依据。

摘要： 为探讨醉马草水浸液对豌豆蚜触杀活性及种群增长的影响,采用带虫浸叶法比较不同生育期醉马草带菌(E+)和不带菌(E-)水浸液对豌豆蚜触杀活性及种群生命表,测定了豌豆蚜的死亡率及触杀后对其生殖期,平均繁殖力,繁殖率及生命表参数的影响.结果表明,不同生育期醉马草带菌(E+)水浸液触杀豌豆蚜后对其各项指标均有显著影响.在苗期时,E+水浸液触杀豌豆蚜后校正死亡率最高,繁殖力最低,内禀增长率(rm =0.145 d-1)和净生殖率(Ro =4.802头)均为最小值.在成熟期时,E+水浸液触杀豌豆蚜24 h、48 h和72 h后校正死亡率分别为26.15％,19.01％,9.07％;繁殖期(3.87 d),平均繁殖力(8.80头),繁殖率(1.40％),内禀增长率(rm =0.208 d-1)和净生殖率(R0=8.820头).在枯黄期时,E+水浸液触杀豌豆蚜后校正死亡率最低,繁殖力最强,内禀增长率(rm=0.247d-1)和净生殖率(R0 = 13.647头)均为最大值.不同生育期醉马草E-水浸液触杀豌豆蚜后对其种群繁殖无显著影响,与对照差异不显著(P＞0.05).综上,苗期醉马草E+水浸液对豌豆蚜有较好的触杀效果,校正死亡率高,且触杀后当代繁殖力减弱,种群扩建时间延长,不利于其种群繁殖和增长;故苗期醉马草E+水浸液具有很好的杀虫潜力,所采用水浸液方法制备简单,成本低,可为新型植物源农药研发提供重要理论依据.

摘要： [目的]蜕皮激素对孤雌蚜翅两型性分化具有重要调控作用.在前期研究中我们发现5个微小RNA(microRNA,miRNA)在豌豆蚜Acyrthosiphon pisum翅两型性分化中也发挥关键作用,但蜕皮激素是否与miRNA互作参与蚜虫翅型分化未知.本研究旨在探索蜕皮激素对5个miRNA及其预测靶基因表达的影响,揭示蜕皮激素与miRNA协同调控蚜虫翅型分化的机理.[方法]选择5个与豌豆蚜翅两型性分化相关的miRNA(Let-7,miR-92a,miR-92b,miR-92a-1-p5和miR-277),使用0.1 mol/L蜕皮激素类似物20-羟基蜕皮酮(20E)分别处理孤雌生殖豌豆蚜2龄若蚜10 min和30 min,48 h后取样;qPCR检测这些miRNA及其预测靶基因在20E处理后的表达量;利用双荧光素酶活性检测法对miR-92a-1-p5的预测靶基因flightin进行验证;利用纳米载体/变性剂在孤雌生殖豌豆蚜4龄若蚜中敲低miR-92a-1-p5表达,验证miR-92a-1-p5与其预测靶基因flightin的互作关系.[结果]0.1 mol/L 20E处理30 min可极显著诱导孤雌生殖豌豆蚜2龄若蚜5个miRNA的表达;处理10 min则miR-92a-1-p5和miR-92b表达量较对照极显著下降,而Let-7和miR-277较对照极显著上升.Let-7与预测靶基因abrupt在0.1 mol/L 20E处理后孤雌生殖豌豆蚜豌2龄若蚜中表达趋势相反,miR-92a和miR-277的预测靶基因wingless和Uba1在0.1 mol/L 20E处理10 min时表达量极显著下降,与两个对应的miRNA表达趋势相反;miR-92a-1-p5的预测靶基因flightin在0.1 mol/L 20E处理30 min后表达量极显著下降,与miRNA表达趋势相反.双荧光素酶活性检测结果显示,共转染miR-92a-1-p5模拟物和flightin CDS过表达载体pmirGlO [flightin]后与转染对照NC mimics相比,荧光素酶活性下降40％,达极显著水平;敲低孤雌生殖豌豆蚜4龄若蚜中miR-92a-1-p5后其表达量下调83％,其预测靶基因flightin表达量上升48％,均达极显著水平,表明flightin是miR-92a-1-p5的真实靶基因.[结论]蜕皮激素能够诱导豌豆蚜体内miRNA的表达;miR-92a-1-p5可能通过调控flightin参与孤雌蚜翅型分化;纳米载体/变性剂可以在蚜虫个体中实现miRNA的有效干涉.该研究为进一步探索蜕皮激素和miRNA互作参与孤雌蚜翅两型性分化机制奠定了基础.

摘要： [目的]探究豌豆蚜对吡虫啉抗性产生的规律,为防治豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum Harris)危害提供科学的施药方法.[方法]采用带虫浸叶法测定了吡虫啉原药对豌豆蚜相对敏感种群的毒力,并通过喷雾法测得豌豆蚜的抗性倍数,根据不同处理D值和标准曲线计算得出乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarEs)比活力.[结果]抗性筛选过程中随着LC50的增大,豌豆蚜体内AChE比活力达到19.25μmol/(min·mg)和23.03μmol/(min·mg),活性比升高为1.98和4.11;CarEs比活力达到29.29μmol/(min·mg)和32.03μmol/(min·mg),活性比升高为2.76和2.34,豌豆蚜对吡虫啉的抗性也逐渐增强.[结论]随着筛选代数增加豌豆蚜对吡虫啉的抗性逐渐增强,AChE和CarEs解毒酶活性均有显著增加,AChE和CarEs在豌豆蚜对吡虫啉抗性发展中有着十分重要的作用.

摘要： 为了探明豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)不同寄主种群杂交后代适合度的变化.采用3种寄主(蚕豆、紫花苜蓿和红车轴草)种群的4个克隆和1个自交克隆,在短 日照条件(15°C,L//D=8h//16h,光照强度4 000～5 000 lx,湿度50％～60％)下诱导产生性蚜,制作8个交配组合.分别从08AP2 ♂×HC ♀和08AP2 ♀×HC ♂组合的干母中选择3个克隆(1个克隆意外死亡),在环境条件(20°C,L//D=16h//8h,光照强度4 000～5 000 lx,湿度50％～60％)下饲养试验,与亲本的适合度进行对比.结果表明,发现并非所有的交配组合都能获得受精卵,不同组合间的受精卵孵化率和孵化历期有很大差异,且孵化历期与孵化率成正相关性(r=0.85,p＜0.001);无论正交还是反交,红车轴草种群(HC克隆)和紫花苜蓿种群(08AP2克隆)交配后都能产生很多杂交后代.杂交克隆在所有寄主植物上的适合度显著强于亲本.说明豌豆蚜不同寄主种群杂交后代可能获得了能适应多种植物的能力,从而更具破坏性.

摘要： 为了明确芥子油苷对2种色型豌豆蚜生长、存活及体内保护酶的影响.本研究采用豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)全纯人工饲料薄膜饲养技术,通过添加不同浓度(CK:0 μmol·g-1;A1:0.94 μmol·g-1;A2:1.87 μmol·g-1;A3:2.86 μmol·g-1)的芥子油苷,测定了豌豆蚜的存活率、相对日均体重增长率及保护酶活性等指标.结果表明:2种色型豌豆蚜的存活率和相对日均体重增长率下降;有翅蚜率逐渐升高,在2.86 μmol·g-1浓度时达到最大,红色型为46.0％、绿色型为43.3％;同时,豌豆蚜体内的超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(Per-oxisome,POD)和过氧化氢酶(Hydrogen peroxidase,CAT)酶活性升高,而可溶性蛋白总量降低(P＜0.05);此外,相对于取食正常人工饲料的豌豆蚜,取食含有芥子油苷的红色型豌豆蚜体内SOD和CAT的响应程度明显高于POD,绿色型豌豆蚜体内POD的响应程度明显高于SOD和CAT.研究结果表明,不同色型豌豆蚜体内的保护酶系统对芥子油苷的响应机制有所不同.

摘要： 研究关于不同光照强度和光周期对红绿两种色型豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)子代生物学特性的影响,探求豌豆蚜子代生长发育对不同光照强度和光周期的响应特性.在人工气候条件下,将红、绿两种色型豌豆蚜成蚜经过3个光照强度(低5722lx,中11778lx和高17389lx)和3种光周期(10h光/14h暗、16h光/8h暗、22h光/2h暗),分别测定各处理下豌豆蚜子代的发育历期、体重差、相对日均体重增长率、有翅蚜率和若蚜存活率等生物学参数.结果表明:在低光照强度下,光周期10h光/14h暗时,绿色比红色型若蚜存活率高,有翅蚜率高,相对日均增长率减小10.26％(P<0.05);光周期16h光/8h暗时,绿色比红色型相对日均增长率减小13.95％(P<0.05),且有翅蚜率高;光周期22h光/2h暗时,绿色比红色型发育历期延长0.53d(P<0.05),且有翅蚜率高.在中光照强度下,光周期10h光/14h暗时,绿色比红色型发育历期延长0.30d(P<0.05),且有翅蚜率高;光周期16h光/8h暗时,红色型若蚜存活率低于绿色,且相对日均增长率比绿色增大13.04％(P<0.05);光周期22h光/2h暗时,红色型若蚜存活率高于绿色,且有翅蚜率高.在高光照强度下,光周期10h光/14h暗时,红色型若蚜存活率高于绿色,且有翅蚜率低;光周期16h光/8h暗时,红色型若蚜存活率高于绿色,发育历期延长1.93d(P<0.05),且有翅蚜率低;光周期22h光/2h暗时,红色型若蚜存活率高于绿色,且有翅蚜率高.故高光照强度(17389lx),两种色型豌豆蚜子代随着光照时间的缩短,发育历期显著延长,相对日均增长率明显减小,此环境不适合两种色型豌豆蚜生长,且红色型更为敏感.

摘要： 在室内测定了核桃楸叶乙醇提取物对三种常见害虫即温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum、小菜蛾Plutellaxylostella及豌豆蚜Aphis craccivora的毒力作用.结果表明,核桃楸叶乙醇提取物对白粉虱、小菜蛾和蚜虫均表现出较好的毒杀作用,其LC50分别为0.7527、0.7924和0.2121g/L;在稀释质量浓度为2.0395g/L时,白粉虱成虫和小菜蛾幼虫的校正死亡率分别为94.48％和98.00％,而在稀释浓度为0.9518g/L时,蚜虫的校正死亡率为89.35％.核桃楸叶乙醇提取物对温室白粉虱、小菜蛾幼虫及蚜虫表现出较好的杀虫活性.

摘要： 本发明公开了一种豌豆蚜CCAP基因，序列如SEQ ID NO:9所示；还公开了该基因的扩增方法，采用巢式PCR，引物为CCAP‑1‑F/CCAP‑1‑R和CCAP‑2‑F/CCAP‑2‑R；还公开了豌豆蚜CCAP配体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示，编码氨基酸序列的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:10所示；还公开了豌豆蚜CCAP受体的开放阅读框序列，如SEQ ID NO:12所示，还公开了其扩增方法，采用引物对CCAP‑R‑1‑F/CCAP‑R‑1‑R、CCAP‑R‑2‑F/CCAP‑R‑2‑R；还公开了豌豆蚜CCAP基因及其配体、受体在制备蚜属昆虫杀虫剂等方面的应用。

摘要： 本发明公开了一种保持豌豆蚜孤雌蚜无翅状态的低密度养殖方法，包括以下步骤：蚕豆的种植、蚜虫培养、分组实验、观察与数据记录。本发明提供的保持豌豆蚜孤雌蚜无翅状态的低密度养殖方法，具有操作简单、状态稳定、饲养不受季节限制等优点，并为研究蚜虫的翅型分化机制提供材料，为研究蚜虫害虫防治奠定良好基础。

摘要： 本发明公开了一种蚕豆对豌豆蚜抗性的快速鉴定方法，该方法为挑选颗粒饱满的蚕豆种子，用清水洗净，浸泡至完全膨胀；将蚕豆种子均匀摆在托盘内，光照黑暗交替下培养，并定期观察蚕豆苗生长情况；待蚕豆长到2‑3叶期时，接种2‑3头无翅蚜虫于正面叶片上，观察其感虫情况。蚜虫的生长繁殖受季节影响较大，由于培养室的环境条件较稳定，加之本发明的鉴定体系本身是一个完全封闭的系统，使得鉴定结果的重复性和可靠性得到保证。

摘要： 本发明公开了一种豌豆蚜CCAP基因，序列如SEQ ID NO:9所示；还公开了该基因的扩增方法，采用巢式PCR，引物为CCAP‑1‑F/CCAP‑1‑R和CCAP‑2‑F/CCAP‑2‑R；还公开了豌豆蚜CCAP配体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示，编码氨基酸序列的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:10所示；还公开了豌豆蚜CCAP受体的开放阅读框序列，如SEQ ID NO:12所示，还公开了其扩增方法，采用引物对CCAP‑R‑1‑F/CCAP‑R‑1‑R、CCAP‑R‑2‑F/CCAP‑R‑2‑R；还公开了豌豆蚜CCAP基因及其配体、受体在制备蚜属昆虫杀虫剂等方面的应用。

摘要： 本发明公开了一种保持豌豆蚜孤雌蚜无翅状态的低密度养殖方法，包括以下步骤：蚕豆的种植、蚜虫培养、分组实验、观察与数据记录。本发明提供的保持豌豆蚜孤雌蚜无翅状态的低密度养殖方法，具有操作简单、状态稳定、饲养不受季节限制等优点，并为研究蚜虫的翅型分化机制提供材料，为研究蚜虫害虫防治奠定良好基础。

摘要： 一种用于豌豆蚜饲养的方法，一：准备一个直径12cm，高5cm的圆形透明塑料容器作为培养基容器；二：将花宝原液按照1000倍的浓度配置500ml溶液后倒入烧杯中，备用；三：将第二步所得液体内加入1%的琼脂粉备用；四：将第三步所得放入微波炉进行加热至沸腾后放置在磁力搅拌器上进行搅拌，待温度降至55°C备用；五：将第四步所得90ml溶液倒入步骤一准备的容器内，在室温放置直到冷却凝固；六：将蚕豆叶片正面贴到第五步所得的琼脂表面，再把豌豆蚜接种在蚕豆叶表面，并将培养基倒立放置，即可开始饲养，每隔3天更换或添加一片蚕豆叶即可。本发明饲养的豌豆蚜，个体大小、寿命、发育时间均与其寄主活体植株饲养无显著性差异。

摘要： 本发明公开了一种豌豆蚜车间大规模生产的方法，其生产方法如下：S1:种子处理；S2:装填基质土播种；S3:苗盆浇水；S4:出苗接种；S5:蚜虫补接；S6:剪取饲料；S7:后期处理；将蚕豆种子在水中浸泡24小时后，捞出晾干12小时，以备播种，选择在规格为33.5cm×27cm×12cm（长×宽×高）的种苗盆装填3‑5cm的富农基质土，挑选籽粒饱满的蚕豆种子，以10×10（行×列）的比例种植，种完后覆土1cm，用喷水壶对苗盆进行浇水，第一次浇水500ml,苗盆底部湿润，接苗前一天(豌豆苗刚刚露芽)浇水200ml,接苗后每两天浇一次水，每次浇水200ml，豆苗长至2‑4cm接种豌豆蚜，从豌豆蚜种蚜上轻轻剪下一株，迅速抖落在一个小的容器里，用勾线笔挑出30‑40只豌豆蚜种蚜放在豆苗上。

摘要： 本发明公开了一种用于防治豌豆蚜药剂的制备方法，先取醉马草地上部分，阴干，剪短，粉碎，样品加至蒸馏水浸泡，榨汁后得到浸提液。本发明的药剂对红色型豌豆蚜的有效死亡率第一天可达24.24％，到第七天可达100％；绿色型豌豆蚜有效死亡率第一天可达25.23％，到第七天可达97.17％；平均产蚜量红绿两种色型处理组明显低于对照组，可有效抑制豌豆蚜种群繁殖的危害，本发明制作方法简便，成本低，所需时间短，杀虫效果好，操作方便，实用性强。

摘要： 本申请公开了一种豌豆蚜海藻糖酶基因的RNA干扰序列的制备方法，包括以下步骤：①、根据豌豆蚜的海藻糖酶序列(XM_003245847.3)选取RNAi的靶标区域，并利用Primer5.0设计靶标区域的PCR扩增引物；②、提取豌豆蚜的总RNA并通过反转录过得cDNA，然后用扩增引物对cDNA中含有海藻糖酶基因进行PCR扩增，纯化产物获得目的基因；③、扩增含T7promoter序列的双链目的DNA，然后利用试剂盒合成双链RNA。

摘要： 本实用新型公开了一种豌豆蚜气体饲养器，包括培养盖和培养盒，所述培养盖和培养盒通过螺纹旋接，所述培养盒的空腔底部设置有吸水海绵，所述吸水海绵的上方叠加有不少于三层的滤纸，所述培养盖的顶部分布有通气小孔，培养盖的侧壁设置有开合装置，所述开合装置包括培养盖内部轨道及小孔闭合装置，所述培养盖内部轨道连接在培养盖的底部，培养盖内部轨道内卡合有与通气小孔接触的小孔闭合装置。本豌豆蚜气体饲养器，价格低廉，易于转移且可以随时观察在不同供试气体饲养下单体豌豆蚜或成对豌豆蚜的成长历程、生活习性等，此实用新型透明豌豆蚜气体饲养器在保证供试气体通入的同时可以有效防止豌豆蚜逃逸。