螺旋神经节

摘要： 目的 探讨受体相互作用蛋白激酶-1(receptor-interacting protein kinase1,RIPK1)/受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)/混合系列蛋白激酶样结构域(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路介导的程序性坏死在水杨酸钠诱导大鼠螺旋神经节(spiral ganglion neurons,SGN)细胞损伤中的作用,以及程序性坏死特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)对螺旋神经节细胞损伤的保护作用.方法 通过听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)筛选出ABR阈值<40 dB SPL的48只成年健康雄性大鼠,随机分为空白对照组(左耳经圆窗注入外淋巴液,腹腔注入生理盐水)、人工外淋巴液(artificial perilymph,APL)(左耳经圆窗注入含Nec-1人工外淋巴液)组、水杨酸钠(sodium salicylate,SS)组(腹腔注射水杨酸钠350 mg·kg-1·d-1)和Nec-1组(左耳经圆窗注入Nec-1后经腹腔注射水杨酸钠),每组12只.各组连续给药7天后检测ABR,然后,通过HE染色观察螺旋神经节细胞形态变化并计算细胞坏死率;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组大鼠螺旋神经节RIPK1、RIPK3、MLKL mRNA表达水平;采用免疫组织化学染色检测各组大鼠螺旋神经节RIPK1、RIPK3、MLKL蛋白表达.结果 给药后水杨酸钠组ABR反应阈较对照组及APL组升高,Nec-1组ABR阈值较水杨酸钠组降低;HE染色示与对照组、APL组相比,水杨酸钠组SGN细胞变圆,细胞质肿胀,细胞界限不清;坏死细胞计数(47.8％ ±2.387％)最高(P<0.0001),Nec-1组SNG中坏死细胞计数(30.6％ ±1.14％)较水杨酸钠组降低(P<0.0001).qRT-PCR和免疫组化结果 显示,水杨酸钠组SGN中RIPK1、RIPK3和MLKL高表达,Nec-1组SGN中RIPK1、RIPK3和MLKL表达较水杨酸钠组降低.结论 在水杨酸钠致大鼠SGN损伤中存在RIPK1/RIPK3/MLKL介导的程序性坏死,Nec-1抑制程序性坏死,对SGN细胞损伤有保护作用.

摘要： 目的观察狼蛛毒素(psalmotoxin-1)对胆红素诱导的耳蜗组织毒性作用。方法新生3 d的SD大鼠,断头解剖获得耳蜗基底膜离体培养24 h,将耳蜗组织随机分5个组,对照组、50μmol/L胆红素组、100μmol/L胆红素组、100 ng/ml psalmotoxin-1组和100μmol/L胆红素+100 ng/ml psalmotoxin-1组。实验组培养基按各分组浓度,加入相应胆红素和(或)psalmotoxin-1溶液,对照组加入相应体积生理盐水。所有耳蜗样本继续培养24 h后终止,进行组织固定和免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察,最后进行统计学分析。结果不同浓度胆红素作用后,50μmol/L胆红素组基底膜螺旋神经节神经元细胞(spiral ganglion neurons,SGNs)开始出现不同程度减少,但耳蜗毛细胞(hair cells,HCs)形态及数量完整;100μmol/L胆红素组耳蜗组织SGNs出现细胞体积明显缩小,伴随细胞核浓缩或碎裂,细胞数目明显减少,HCs出现不同程度损伤,SGNs数目与对照组比较,差异有统计学意义(t=18.89,P0.05);100μmol/L胆红素+100 ng/ml psalmotoxin-1组SGNs形态变化及数量减少较单纯100μmol/L胆红素组明显减轻(t=21.63,P<0.0001)。结论在耳蜗器官培养中,胆红素以剂量依赖性方式损伤新生大鼠耳蜗SGNs和HCs;胆红素对耳蜗SGNs的损伤较HCs发生早,损伤程度重。在耳蜗器官培养中,psalmotoxin-1可减弱胆红素诱导的耳蜗毒性作用。

摘要： 目的 探讨大鼠耳蜗胶质细胞的体外分离培养和纯化的方法,为进一步研究耳蜗胶质细胞功能提供实验基础.方法 分离出生后3天的新生大鼠(18只,36耳)耳蜗轴组织,通过组织酶消化及阿糖胞苷补充法、组织酶消化及免疫磁珠分选法、组织块培养及细胞冷喷注法三种方法(各2只,4耳,均重复三次)进行耳蜗胶质细胞分离、培养和纯化,通过细胞计数、CCK-8检测以及胶质细胞标记物免疫荧光染色计算细胞的产量、活性及纯度.结果 组织块培养及细胞冷喷注法获得的耳蜗胶质细胞的产量尽管最低,但其细胞活性最高并优于其它两种方法,且细胞纯度较高,接近组织酶消化及免疫磁珠分选法.结论 蜗轴组织块培养及细胞冷喷注法获得的耳蜗胶质细胞活性良好且细胞纯度较高,操作简便且成本低,可作为一种便捷的耳蜗胶质细胞体外培养和纯化方法.

摘要： 耳聋是全球第三大导致老年人残疾障碍的原因,不仅仅影响声音的感知,还会引发一系列日常交流和社交障碍.目前,人工耳蜗植入是重度-极重度感音性聋且助听器效果不佳老年人的听觉和言语康复的最有效方法,但众多原因导致我国老年耳聋患者人工耳蜗植入开展得不够,并且老年人本身耳聋发生及其听力学和听觉康复有其特殊性.本文从老年耳聋的发生率、老年性聋的病因、人工耳蜗植入的适应证及疗效特点等方面进行分析和讨论,并对老年耳聋患者人工耳蜗植入的未来前景做展望.

摘要： Auditory neuropathy (AN) is a hearing disorder where cochlear inner hair cell and/or the auditory nerve function is disrupted while outer hair cell function is normal.It can affect people of all ages,from infancy to adulthood.People with auditory neuropathy may have normal hearing threshold,or hearing loss ranging from mild to severe;they always have poor speech-perception abilities.It is a heterogeneous disorder which can have either congenital or acquired causes.AN may result from specific loss of cochlear inner hair cells,disordered release of neurotransmitters by inner hair cell ribbon synapses,deafferentation accompanying loss of auditory nerve fibers,neural dys-synchrony or conduction block as a result of demyelination of nerve fibers and auditory nerve hypoplasia.Although the definition of AN includes the central part,its incidence is low,and the etiology and pathology are not clear.The present review aimed to provide an overview of the genetic conditions associated with AN and highlight the neural and synaptic mechanism of AN.Possible strategy for treatments of AN was also discussed.%听神经病(auditory neuropathy)是指由听觉编码异常所造成的听觉障碍.这种听觉障碍除了影响听力外,还影响了言语理解能力.听神经病可以由内毛细胞、内毛细胞带状突触或耳蜗螺旋神经节细胞受损引起.目前遗传学、生理学及动物模型研究显示,破坏内毛细胞带状突触功能(通过改变基因表达从而影响突触前突触囊泡谷氨酸装载、钙离子内流或突触囊泡胞吐作用)可导致类似“听觉突触病变”的听力受损.此外,动物研究已证明过度声刺激会造成内毛细胞带状突触兴奋性毒性损伤,这可能是噪声暴露或年龄相关性听力损失造成听力障碍的机制.虽然听神经病的定义包括了中枢部分,但由于其发病少、病因和病理机制均不清楚,而大部分听神经病发生在外周听觉系统,所以本文主要集中阐述听神经病外周(突触和听神经)病理机制及相应临床发现,讨论听神经病患者听力康复的现行策略,并对未来恢复听力的治疗方式进行展望.

摘要： 目的 研究缺氧对大鼠螺旋神经节神经元(SGN)电压门控性钠通道及凋亡因子表达水平的影响.方法 分离出生3 d SD大鼠SGN并进行原代培养,对照组给予常规培养处理,实验组给予无氧培养处理24 h,提取总RNA,采用荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测凋亡因子Caspase-3,电压门控性钠通道Nav1.1、Nav1.6及Nav1.7α 亚单位mRNA表达水平,比较实验组和对照组各基因mRNA表达水平.结果 与对照组相比,实验组大鼠SGN Caspase-3、Nav1.1和Nav1.7α 亚单位mRNA表达上调,Nav1.6α 亚单位mRNA表达下调(P<0.05).结论 缺氧可能促进Caspase介导的SGN凋亡过程,并调控电压门控性钠通道的表达,该调控作用具有亚型选择性特点,可能是缺氧引起听力下降的机制之一.

摘要： 目的 分析Waardenburg综合征(Waardenburg Syndrome,WS)患者人工耳蜗植入效果与耳蜗残余螺旋神经节细胞衰退特征的相关性.方法 搜集2001年至2017年于解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科进行人工耳蜗植入手术并明确诊断为Waardenburg综合征的患者为病例组,根据电极型号及手术时术耳年龄,选取非综合征耳聋患者为对照组.分析术后1-4年调机数据T值(Threshold Level,T Level)、C值(Comfortable Level,C Level)以及动态范围(Dynanmic range,DR),作为耳蜗植入效果评价数据.以术中eCAP电刺激量-振幅函数线性回归分析的Slope值及预测阈值(Threshold,T)为指标,评价螺旋神经节细胞(Spiral Ganglion Cells,SGC)衰退特征.分析实验组与对照组的差异及两者之间的相关性.结果 术中eCAP测试:WS患者Slope值明显低于NS患者(t=-5.60,P<0.01),阈值明显高于对照组(t=2.09,P<0.05),且在4岁以上患者中差异更显著.WS患者中,4岁以上患者Slope值低于4岁以下患者(t=2.63,P<0.05),阈值T则高于4岁以下患者(t=-3.62,P<0.01).术后1-4年调机数据:WS患者T值明显高于NS患者(t=2.82,P<0.05),DR值明显低于NS患者(t=-8.86,P<0.01).两组患者术后1-4年的T、C值均无显著差异,而第3、4年的DR值高于第1、2年.结论 Waardenburg综合征患者SGC随着年龄的增加而减少,术后4年的调机数据两组患者变化趋势一致,表明人工耳蜗植入后的电刺激可能减缓SGC的衰退.早期植入可以使Waardenburg综合征患者获得更好的听觉植入效果.

摘要： 目的观察噪声性聋豚鼠耳蜗侧壁血管纹边缘细胞及蜗轴螺旋神经节细胞乙酰化组蛋白H2B表达水平的变化。方法成年雄性白色红目豚鼠50只随机分为噪声组和对照组,通过听性脑干反应检测两组豚鼠噪声前听力,噪声组给予高强度窄带噪声(122 dB SPL,3 h)暴露,于暴露后1 h行ABR检测噪声后听力,并通过免疫荧光染色和Western blot方法检测暴露后2 h两组豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞及蜗轴螺旋神经节细胞中乙酰化组蛋白H2B的表达水平。结果两组豚鼠噪声暴露前听力在4、8、16与32 kHz频率的反应阈比较,差异无统计学意义。噪声组在噪声刺激1 h后ABR阈值在4、8、16与32 kHz频率的最大输出90 dB无反应。免疫荧光染色显示在噪声刺激2 h后血管纹边缘细胞中乙酰化组蛋白H2B荧光强度明显下降,Western blot显示噪声组豚鼠侧壁中乙酰化组蛋白H2B表达(H2B-AcK5/β-actin的比值为0.3471±0.0843)较对照组(0.6114±0.0207)明显下调,两组比较差异有统计学意义(t=5.268,P0.05)。结论噪声可导致豚鼠耳蜗血管纹边缘细胞组蛋白乙酰化水平显著下降,螺旋神经节细胞中组蛋白乙酰化水平无明显改变,血管纹边缘细胞组蛋白乙酰化失衡有可能参与噪声性聋的发生发展。

摘要： Objective To sduty the protection of low doses of CoCl2 pretreatment in cochlear hair cells and spiral ganglions which are injured by cisplatin.Methods We culture the cochlear basement membrane in vitro and divide them into four groups randomly:normal group,100uM CoCl2 treatment group,200μM cisplatin treatment group,100μM CoCl2 and pretreatment plus 200uM cisplatin intervention group.We observe the cell status and count with immunofluorescence staining,detect the expression quantity of Caspase 3,HIF-1αt and NF-kB with Western blot.Results The CoCl2 treatment group is the same as the normal group,While the cisplatin treatment group has extremely injured hair cells and spiral ganglions compared to the normal group.The survival cell number of hair cell and spiral ganglions in CoCl2 pretreatment group is 2.81,1.4 times as many as the cisplatin treatment group.The western blot results indicate the expression quantity of CoCl2 pretreatment group and the cisplatin treatment group is 2.5,3.91 times as many as the normal group.Conclusion CoCl2 pretreatment can reduce the oxidative stress-mediated injury caused by cisplatin on hair cells and spiral ganglions.%目的 研究低剂量氯化钴预处理对顺铂导致的耳蜗毛细胞和螺旋神经节损伤的保护作用.方法 体外培养小鼠耳蜗基底膜,随机分为4组:正常组、100μM氯化钴处理组、200μM顺铂处理组、100μM氯化钴预处理加200 μ M顺铂干预组,通过免疫荧光染色观察细胞状态并计数,通过蛋白质印记法检测各组Caspase 3、HIF-1α、NF-kB表达量.结果 氯化钴处理组与正常组之间无明显差异,顺铂处理组较正常组毛细胞和螺旋神经元损伤严重,氯化钴预处理加顺铂作用组毛细胞和螺旋神经元存活数目分别是顺铂处理组的2.81、1.40倍.氯化钴预处理组和顺铂组Caspase 3表达量分别比正常组高2.50、3.91倍.结论 氯化钴预处理对减轻顺铂对毛细胞和螺旋神经元的氧化应激损伤有明显作用.

摘要： 本发明提供了一种单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法，包括以下步骤：1)称取动物脑组织，用去垢剂的水溶液作为提取溶剂，搅拌提取，除去沉淀，得到提取液；2)将所述提取液浓缩，得到单唾液酸四己糖神经节苷脂粗提液。本发明还提供了包含该单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制剂。本发明在单唾液酸四己糖神经节苷脂的提取过程中不使用有机溶剂，且制备过程简化，适于大规模生产，更加环保，并且可以降低生产成本和生产周期。本发明还提供了一种包含由上述方法制备得到的单唾液酸四己糖神经节苷脂的注射剂，其具有较高的纯度，且不含有机溶剂，可提高临床用药的安全性。

摘要： 本发明发现利用咪唑并[1，2-a]吡啶-3-乙酰胺衍生物来制备一种药物，并用该药治疗帕金森氏病，帕金森样综合症，其它诸如冠以“附加的帕金森机能障碍”的锥体外系综合症(Steele-Richardson-Olszewski综合症，皮质-基底结变性，多系统萎缩，威尔森氏病，Hallervorden-Spatz病，亨廷顿氏病，神经棘红细胞增多症)，强迫观念行为疾病及其它强迫观念行为综合症，顶叶及皮质下痴呆。

摘要： 本发明提供一种运用重组唾液酸酶转化多唾液酸神经节苷脂制备单唾液四己糖神经节苷脂的方法，包括以下步骤：1)提供一种游离的重组唾液酸酶，所述重组唾液酸酶是由SEQ ID NO:1所示的碱基序列编码的蛋白；以及2)将步骤1)中的重组唾液酸酶与多唾液酸神经节苷脂混合，以将所述多唾液酸神经节苷脂(GLS)转化为单唾液四己糖神经节苷脂(GM1)。本发明首次通过全合成唾液酸酶的全长基因，在大肠杆菌中成功实现了唾液酸酶的可溶性表达，该重组唾液酸酶比活高，制备成本低，并且该方法通过采用透析原位分离产物唾液酸可进一步解除唾液酸的抑制作用，促进反应向产物方向进行，从而将高浓度的GLS完全转化为GM1。

摘要： 本发明提供了一种单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法，包括以下步骤：1)称取动物脑组织，用去垢剂的水溶液作为提取溶剂，搅拌提取，除去沉淀，得到提取液；2)将所述提取液浓缩，得到单唾液酸四己糖神经节苷脂粗提液。本发明还提供了包含该单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的制剂。本发明在单唾液酸四己糖神经节苷脂的提取过程中不使用有机溶剂，且制备过程简化，适于大规模生产，更加环保，并且可以降低生产成本和生产周期。本发明还提供了一种包含由上述方法制备得到的单唾液酸四己糖神经节苷脂的注射剂，其具有较高的纯度，且不含有机溶剂，可提高临床用药的安全性。

摘要： 本发明发现利用咪唑并[1,2－a]吡啶－3－乙酰胺衍生物来制备一种药物,并用该药治疗帕金森氏病,帕金森样综合症,其它诸如冠以“附加的帕金森机能障碍”的锥体外系综合症(Steele－Richardson－01szewski综合症,皮质—基底结变性,多系统萎缩,威尔森氏病,Ha11ervorden－Spatz病,亨延顿氏病,神经棘红细胞增多症),强迫观念行为疾病及其它强迫观念行为综合症,顶叶及皮质下痴呆。

摘要： 本发明公开了一种靶向损伤节段背根神经节的pH响应镇痛药及其应用，属于生物医药技术领域。本发明基于在外周神经损伤引起的神经病理性疼痛条件下，受损伤节段背根神经节持续存在局部酸环境，提出以损伤节段背根神经节作为药物作用靶点来制备外周神经损伤镇痛药物，采用pH响应载体包埋镇痛药物，使其在受损伤节段的背根神经节部位释放并发挥作用，其镇痛效果达到同种药物全身作用的镇痛水平。本发明实现了在酸性病灶处精准用药，显著减少药物在其他部位的释放，大大降低现有阿片类用药存在的成瘾性等毒副作用。另外，药物在损伤节段背根神经节持续缓释，显著延长镇痛作用时间，避免镇痛药的过度使用。

摘要： 本发明提供了一种治疗带状疱疹和疱疹后神经痛的背根神经节分子手术刀，涉及手术刀技术领域，该装置包括第一端用于与主机相连接的电缆线段、与电缆线段的第二端相连接软管，软管为绝缘管，软管穿设在人体内，软管的第二端设置有多个软态环状的激发电极和回路电极，激发电极的数量与回路电极的数量相等，能够实现多点激发，提高了手术的效率，激发电极和回路电极沿软管的长度间隔设置，导管内设置有与激发电极相连接第一导线、与回路电极相连接的第二导线，第一导线、第二导线用于与电缆线段相连接，促使激发电极与回路电极之间产生高能电子、高能粒子、活性离子等离子体，直接作用与病变神经节、神经根、神经干和神经末梢，达到靶向治疗的目的。

摘要： 本发明公开了一种青春双歧杆菌及其培养方法和其促进背根神经节的神经元细胞生长中的应用，涉及微生物领域，本发明提供了一种青春双歧杆菌菌株MN‑84，可高产γ‑氨基丁酸，它们是神经系统中的神经抑制剂，对神经元的兴奋程度有着潜在的影响，在改善人抑郁等不良情绪上有着很大的调节作用；MN‑84还能通过促进背根神经节神经元细胞的生长，潜在参与人体神经系统的调节过程。

摘要： 本发明提供了一种背根神经节神经细胞与软骨细胞共培养的方法及应用，所述共培养方法包括：分别构建无需支架材料的背根神经节神经细胞球和无需支架材料的软骨细胞球，再将所得神经细胞球和软骨细胞球进行3D共培养；其中，构建所述背根神经节神经细胞球和3D共培养使用的培养基为神经细胞完全培养基，构建所述软骨细胞球使用的培养基为软骨细胞完全培养基。本发明还提供了一种背根神经节神经细胞球和软骨细胞球3D共培养体系及其神经浸润检测方法。所述共培养方法操作简单，细胞生理状态良好，可作为模型用于相关疾病致病机理的研究中，具有广阔的应用前景。

摘要： 本实用新型公开了一种用于神经痛背根神经节治疗的3D打印导航模板，包括导板本体和两到三个中空穿刺引导柱，所述导板覆盖患者胸背部穿刺侧区域，且贴合患者背部曲线，所述导板在每个穿刺位点对应的区域分别设有中空穿刺引导柱，所述导板本体上还设有用于嵌合在患者背部定位电极片金属突起上的多个固定孔。本实用新型使用时只需沿导板上穿刺引导柱向前推进穿刺针至预定深度即可，实现对DRG的精准定位穿刺、缩短手术时间、减少穿刺次数、减少患者创伤、降低手术风险，同时也减少了医患放射暴露时间。本实用新型导航模板只覆盖患者胸背部的穿刺区域，中间还设有孔洞，可以增加患者的舒适度，缩短打印时间。