蔗糖合成酶

摘要： 蔗糖分解酶在马铃薯和胡萝卜等块根/块茎的生长发育中发挥着重要作用,但在甘薯块根发育中的作用机制尚不清楚。本研究以2个在块根数量和鲜重上存在显著差异的甘薯品种‘高系14’及其突变体为材料,对其不同发育时期(30、60、90、120 d)块根中的可溶性糖(蔗糖、葡萄糖和果糖)、淀粉含量、蔗糖分解酶活性以及相关基因家族成员的表达水平进行测定,以明确调控块根数量和大小的关键蔗糖分解酶及主要基因家族成员。结果表明:(1)阐明了4种蔗糖分解酶活性在薯块根发育过程中的变化规律,细胞质转化酶(CIN)和液泡转化酶(VIN)活性的整体变化趋势呈现‘u’形曲线,即块根发育早期、晚期活性相对较高,发育中期最低;细胞壁转化酶(CWIN)和蔗糖合成酶(Sus)活性整体变化趋势呈‘n’形曲线,与前者正好相反,即在块根发育早期、晚期较低,发育中期最高。(2)和突变体相比,具有较高块根数量和鲜重的‘高系14’在块根发育早期(30 d)具有较高的Sus和CIN活性,而高Sus和CIN活性可以促进蔗糖由叶片向块根转运,从而提高块根中的淀粉、蔗糖和葡萄糖含量,最终为块根的生长发育提供能量和碳骨架以增加块根数量和鲜重。(3)从甘薯基因组中共鉴定出9个Sus基因家族成员和12个CIN基因家族成员,其中有1个Sus基因(IbSus6)和5个CIN基因(IbCIN4、IbCIN6、IbCIN8、IbCIN10和IbCIN11)的表达水平在30 d时表现为‘高系14’显著高于突变体,同时IbSus6和IbCIN4、IbCIN8、IbCIN10、IbCIN11分别为30 d块根中表达的主要Sus和CIN基因家族成员,因此上述1个Sus基因家族成员和4个CIN基因家族成员可能是调控甘薯块根发育的主要蔗糖分解酶基因。总之,Sus和CIN在甘薯块根早期发育中发挥着重要作用,其关键基因家族成员的阐明可为优异甘薯新品种的选育提供理论依据。

摘要： 蔗糖合成酶(SUS)是植物蔗糖代谢的关键酶之一,它不仅影响植物的产量和品质,还在植物抵御逆境胁迫中起重要作用.基于已经公布的甘蓝全基因组数据信息,利用生物信息学方法对甘蓝BoSUS基因家族成员进行鉴定,分析其系统进化关系、染色体定位、基因结构、启动子顺式作用元件和低温胁迫下的表达模式.结果表明,甘蓝全基因组共鉴定到7个BoSUS基因成员,系统进化分析分成3个亚组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ).BoSUS蛋白氨基酸长度范围为805(BoSUS1a)～940(BoSUS6b)个,均是亲水性蛋白.在芸薹族特异的全基因组3倍化事件后,与拟南芥AtSUS4共线性的甘蓝BoSUS4基因发生了丢失,与AtSUS1、AtSUS6共线性的BoSUS1和BoSUS6基因均发生了扩张,出现了双拷贝(BoSUS1a、BoSUS1b和BoSUS6a、BoSUS6b).表达模式分析表明,BoSUS1a、BoSUS1b和BoSUS3基因在甘蓝不同器官/组织尤其在花器官的蔗糖代谢中起着重要作用,为库器官(花)的发育提供能量和物质.耐冷甘蓝CT-923叶片中BoSUS1a和BoSUS1b基因表达水平在低温处理6、24 h后相比对照急剧升高,BoSUS1a和BoSUS1b酶活性增强,为甘蓝产生保护性反馈机制提供能量,使得耐冷甘蓝CT-923耐寒性增强.综上所述,本研究为解析甘蓝BoSUS基因响应低温胁迫的分子机制和指导甘蓝耐寒种质资源创新具有重要意义.

摘要： 本研究构建了UDP-糖基转移酶UGT76G1基因的重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-UGT76G1和绿豆来源的蔗糖合成酶(mbSUS)基因的重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K/pPICZA-mbSUS.通过甲醇诱导产酶,制备UDP-糖基转移酶UGT76G1和蔗糖合成酶,并构建生物催化级联反应体系,生物催化甜菊糖苷(Stevioside,ST)合成莱鲍迪苷A(rebaudioside A,RA),有效实现了级联反应体系中尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)的循环利用.本研究通过反应条件优化,发现级联反应中的限速酶是糖基转移酶UGT76G1,添加酶活比例为U(UGT76G1):U(mbSUS)=6:1为合成莱鲍迪苷A的最佳酶活比例,在pH 7.0,UDP浓度1 mM,蔗糖浓度50 mM,MgCl2浓度3 mM的反应条件下,10 mM ST转化合成8.20±0.11 mM RA,RA的产率达到82.91％,与在大肠杆菌表达系统中相比,极大缩短了催化反应时间.利用体外偶联UDP-糖基转移酶与蔗糖合成酶催化合成RA为酶法高效生物合成RA及其产业化应用提供技术支持.

摘要： 蔗糖合成酶(sucrose synthase,SS)作为催化蔗糖代谢的关键酶之一,能够参与蔗糖的代谢和运输,调节细胞分化与细胞壁的形成,对调控作物的品质和产量也有重要作用.克隆出菠萝蜜AhSS2基因并对其进行生物信息学分析.菠萝蜜AhSS2基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)全长2436 bp,共编码811个氨基酸,其蛋白理化性质预测显示,相对分子量是92.583 ku,等电点pI为5.77,属亲水性酸性蛋白质,二级结构主要为Alpha helix(α-螺旋).保守结构域分析显示,菠萝蜜AhSS2基因属于PLN00142超级家族成员,主要包括蔗糖合成酶结构域(Sucrose_synth)与糖基转移酶结构域(Glycos_transf_1)2个保守结构域.磷酸化位点预测显示,菠萝蜜AhSS2基因蛋白的磷酸化位点主要是丝氨酸(Ser)磷酸化位点.系统发育树分析显示,菠萝蜜AhSS2基因在分类上属SSⅡ.本研究为进一步研究菠萝蜜蔗糖合成酶家族成员的功能提供依据.

摘要： 【目的】明确甜樱桃PavSS基因家族在果实成熟过程中的功能。【方法】利用qRT-PCR技术分析了7个蔗糖合成酶基因PavSS1~7在果实发育过程中的表达情况,并分析了蔗糖对PavSS家族基因表达的影响,利用甜樱桃果实的VIGS技术分析了PavSS1与PavSS6基因影响果实成熟的功能。【结果】PavSS1和PavSS2基因在甜樱桃果实发育和成熟过程中均表达,且PavSS1基因表达量是PavSS2基因的10倍以上;PavSS1和PavSS2在果实发育前期表达量逐渐升高,后期表达量逐渐降低。PavSS3和PavSS5基因在整个果实发育期均低表达,且表达量差异不显著。PavSS4和PavSS7基因在果实发育前期表达量高,后期表达量低。PavSS6基因在果实发育初期低表达,随后表达量逐渐升高,并维持较高水平。外施蔗糖显著下调了PavSS1和PavSS6基因的表达,而PavSS2、PavSS3、PavSS4、PavSS5和PavSS7基因的表达变化不显著。沉默甜樱桃果实PavSS1基因抑制了甜樱桃果实成熟,包括果实硬度、ABA含量、花色苷含量和可溶性糖含量发生显著变化以及成熟相关基因的表达量显著下调;而沉默PavSS6基因的甜樱桃果实与空载对照相比,没有显著变化。【结论】PavSS1基因可能是控制甜樱桃果实蔗糖代谢的关键基因,参与了甜樱桃果实成熟过程的调控。

摘要： 本研究选用3个纤维颜色不同的棉花近等基因系—绿色棉、棕色棉和白色棉为材料,研究参试材料的主茎功能叶片在整个生育期的生理特性变化,并对生理指标与产量因素进行相关性分析.结果表明:整个生育期2种彩色棉的净光合速率均低于白色棉;除吐絮期外,彩色棉总叶绿素含量、蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶活性均低于白色棉;净光合速率与单株铃数、单铃重及单株产量呈显著正相关;总叶绿素含量与单铃重、单株产量呈极显著正相关;蔗糖磷酸合成酶活性与单铃重呈极显著正相关,与单株产量呈显著正相关.本研究结果将为彩色棉高产品种选育提供理论依据.

摘要： 本研究构建经密码子优化后的UDP-糖基转移酶UGT76G1和蔗糖合成酶AtSUS基因的重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-UGT/pPICZA-AtSUS,实现双酶在毕赤酵母中的胞内共表达.利用共表达菌株作为全细胞催化剂在体外进行催化反应,可成功将ST转化为RA,并在此基础上对其最适反应温度、反应pH、底物UDP浓度与底物蔗糖浓度条件进行优化.重组菌株经甲醇诱导,对不同发酵时间菌体的催化能力进行探究,确定发酵120h菌体催化能力最佳,RA产量为0.58 mg/mL.对共表达菌株催化体系中全细胞催化条件进行优化,优化后的催化体系为:反应pH7.0,UDP浓度1mM,蔗糖浓度70mM,MgCl2浓度3mM,ST浓度10mg/mL,将OD600为30的细胞与上述体系混合后在最适温度45°C下,200 r/min反应15h,重组菌可将10 mg/mL ST转化为7.46 mg/mL RA,为RA酶法生物合成及其产业化应用提供技术支持.

摘要： 【目的】克隆甜玉米蔗糖合成酶(Sus)基因ZmSus6和ZmSus7,并进行生物信息学分析及组织表达特异性检测,为深入研究其在甜玉米生长发育和品质形成过程中的调控机制提供理论参考。【方法】以甜玉米品种佛甜10号为材料,采用RT-PCR克隆ZmSus6和ZmSus7基因,通过ProtParam、SOPMA、SignalP 4.0 Server等进行生物信息学分析,利用MEGA 6.0构建系统发育进化树,并采用实时荧光定量PCR检测其组织表达特异性。【结果】ZmSus6和ZmSus7基因的开放阅读框(ORF)长度分别为2550和2574 bp,编码849和857个氨基酸残基,对应的蛋白分子量为96.27和97.79kD,理论等电点为7.63和8.19,均无信号肽和跨膜区域,二级结构以α-螺旋为主。ZmSus6蛋白为不稳定的亲水性蛋白,定位于叶绿体或线粒体;ZmSus7蛋白为稳定的亲水性蛋白,定位于细胞质中。ZmSus6和ZmSus7蛋白归属于PLN00142家族(Sus超级家族),具有Sus和糖基转移酶的两个功能域,分别与高粱SbSus6和SbSus7蛋白的氨基酸序列同源性最高,其同源性对应为88.44%和96.62%,归属为单子叶植物III型Sus基因家族。ZmSus6和ZmSus7基因在甜玉米的根、茎、叶、玉米芯和籽粒中均有表达,但存在显著差异(P<0.05),分别以叶和根中的相对表达量最高。【结论】ZmSus6和ZmSus7基因具有一定的组织表达特异性,可能在甜玉米生长发育和品质形成过程中发挥重要作用。

摘要： 蔗糖合成酶(Sucrose synthase)在植物中是参与糖代谢的关键酶之一,植物体中可以同源四聚体形式存在.该酶催化:sucrose+ UDP→fructose+UDPG的可逆反应,以前的研究表明SUS的功能主要参与淀粉及纤维素的合成.近来越来越多的报道发现,SUS在植物抵抗逆境胁迫,影响种子生长发育和纤维伸长方面具有关键作用.本文对棉花蔗糖合成酶基因进行了生物信息学分析,并对陆地棉徐142野生型和突变体在纤维生长发育时期SUS基因家族表达模式做了初步的研究,结果表明SUS基因的表达在野生型和突变体中存在差异,GhSUS7可能与纤维生长发育有关.

摘要： 不同浓度NAA处理下,测定了南林-895杨无菌苗茎中糖含量及其相关酶活性的变化,并对其相关性进行了分析。结果显示:适宜浓度的NAA可促进南林-895杨无菌苗茎中可溶性糖的含量,提高酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)的活性,降低蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶(SS)的活性,其中以100mg/LNAA作用效果最为显著,但高浓度的NAA的作用效果正相反。相关性分析表明:在适宜浓度NAA处理下,茎中可溶性糖含量均与AI活性显著正相关,与NI相关性不显著,而可溶性总糖、蔗糖含量与sPs、ss活性显著负相关,果糖含量与其相关性不显著。所以,AI活性的升高和SPS、SS活性的降低促进了南林-895杨茎中可溶性总糖和蔗糖的积累,而果糖的积累则主要与AI活性的升高有关。外源NAA通过调节南林-895杨无菌苗茎中的糖含量及其糖代谢相关酶的活性而影响其同化物的分配格局。

摘要： 以“青种”、“霸红”和“鸡蛋白”三个枇杷品种为材料,测定不同发育时期果实中蔗糖、葡萄糖和果糖含量以及蔗糖代谢相关酶-酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)、蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)的活性,并对果实中糖积累与酶活性的关系进行了分析。结果表明：在5月3日之前,三种枇杷的蔗糖、葡萄糖和果糖积累缓慢;之后则迅速积累,存在着明显的转折点;5月23日之后积累速度趋于平稳。三种枇杷地发育过程中转化酶、蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶的活性与三种糖积累的趋势相一致。NI和AI在5月3日之前都较低且没有明显的变化,之后均快速上升。SS和SPS的活件在5月3日之前都很低且几乎无变化,之后“鸡蛋白”的活性迅速上升至5月23日,之后便缓慢上升。“青种”和“霸红”随果实成熟度的增加而升高,但均低于“鸡蛋白”。综上所述,枇杷果实糖积累足受蔗糖代谢相关酶综合调控的。

摘要： 以菠萝品种'卡因'为试验材料,测定了不同发育时期果实中蔗糖、葡萄糖和果糖含量以及蔗糖代谢相关酶--酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)、蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)的活性,并对果实中糖积累与酶活性的关系进行了分析。结果表明:'卡因'果实的发育呈单"S型"曲线,在幼果期到果实迅速生长期,果糖和葡萄糖积累较多,蔗糖积累缓慢,此期蔗糖积累较少与高活性蔗糖转化酶有关；进入成熟期,果实中蔗糖迅速积累,而己糖略有上升,果实蔗糖的显著增加主要与SS和SPS活性有关。酸性转化酶和中性转化酶前期活性很强,后期降低；蔗糖合成酶(合成方向)和蔗糖磷酸合成酶的活性变化趋势相似,前期弱后期强。经过相关性分析:果实中蔗糖含量与SS和SPS活性存在极显著的正相关性,而与NI活性呈极显著负相关,与AI的活性呈显著负相关。

摘要： 以工艺成熟期甘蔗品种GT28(早熟)和ROC22(早中熟)+1叶和不同节间为材料,分析SPS、SS合成和SS分解方向酶活性与节间糖分积累的相关性.结果表明,+1叶中SPS、SS合成和分解方向的酶活性比蔗茎中高,说明+1叶代谢活跃,是蔗茎糖分不断积累的物质基础.节间SPS酶活性与节间锤度、可溶性总糖和蔗糖含量都正相关,GT28节间SPS酶活性比ROC22中高.节间SS合成方向酶活性与锤度和蔗糖含量都负相关,GT28中SS合成方向酶活性比ROC22中低.而SS分解方向酶活性与ROC22节间锤度、可溶性糖和蔗糖含量都呈负相关,与GT28中呈正相关,未达到显著水平.说明成熟期节间SPS和SS合成方向酶活性提高有利于蔗糖的积累,而随着节间成熟,蔗糖含量可能是促使SS酶活性由合成方向向分解方向转化的一个重要调节因子.

摘要： 以工艺成熟期甘蔗品种GT28(早熟)和ROC22(早中熟)+1叶和不同节间为材料,分析SPS、SS合成和SS分解方向酶活性与节间糖分积累的相关性.结果表明,+1叶中SPS、SS合成和分解方向的酶活性比蔗茎中高,说明+1叶代谢活跃,是蔗茎糖分不断积累的物质基础.节间SPS酶活性与节间锤度、可溶性总糖和蔗糖含量都正相关,GT28节间SPS酶活性比ROC22中高.节间SS合成方向酶活性与锤度和蔗糖含量都负相关,GT28中SS合成方向酶活性比ROC22中低.而SS分解方向酶活性与ROC22节间锤度、可溶性糖和蔗糖含量都呈负相关,与GT28中呈正相关,未达到显著水平.说明成熟期节间SPS和SS合成方向酶活性提高有利于蔗糖的积累,而随着节间成熟,蔗糖含量可能是促使SS酶活性由合成方向向分解方向转化的一个重要调节因子.

摘要： 以工艺成熟期甘蔗品种GT28(早熟)和ROC22(早中熟)+1叶和不同节间为材料,分析SPS、SS合成和SS分解方向酶活性与节间糖分积累的相关性.结果表明,+1叶中SPS、SS合成和分解方向的酶活性比蔗茎中高,说明+1叶代谢活跃,是蔗茎糖分不断积累的物质基础.节间SPS酶活性与节间锤度、可溶性总糖和蔗糖含量都正相关,GT28节间SPS酶活性比ROC22中高.节间SS合成方向酶活性与锤度和蔗糖含量都负相关,GT28中SS合成方向酶活性比ROC22中低.而SS分解方向酶活性与ROC22节间锤度、可溶性糖和蔗糖含量都呈负相关,与GT28中呈正相关,未达到显著水平.说明成熟期节间SPS和SS合成方向酶活性提高有利于蔗糖的积累,而随着节间成熟,蔗糖含量可能是促使SS酶活性由合成方向向分解方向转化的一个重要调节因子.

摘要： 以工艺成熟期甘蔗品种GT28(早熟)和ROC22(早中熟)+1叶和不同节间为材料,分析SPS、SS合成和SS分解方向酶活性与节间糖分积累的相关性.结果表明,+1叶中SPS、SS合成和分解方向的酶活性比蔗茎中高,说明+1叶代谢活跃,是蔗茎糖分不断积累的物质基础.节间SPS酶活性与节间锤度、可溶性总糖和蔗糖含量都正相关,GT28节间SPS酶活性比ROC22中高.节间SS合成方向酶活性与锤度和蔗糖含量都负相关,GT28中SS合成方向酶活性比ROC22中低.而SS分解方向酶活性与ROC22节间锤度、可溶性糖和蔗糖含量都呈负相关,与GT28中呈正相关,未达到显著水平.说明成熟期节间SPS和SS合成方向酶活性提高有利于蔗糖的积累,而随着节间成熟,蔗糖含量可能是促使SS酶活性由合成方向向分解方向转化的一个重要调节因子.

摘要： 以工艺成熟期甘蔗品种GT28(早熟)和ROC22(早中熟)+1叶和不同节间为材料,分析SPS、SS合成和SS分解方向酶活性与节间糖分积累的相关性.结果表明,+1叶中SPS、SS合成和分解方向的酶活性比蔗茎中高,说明+1叶代谢活跃,是蔗茎糖分不断积累的物质基础.节间SPS酶活性与节间锤度、可溶性总糖和蔗糖含量都正相关,GT28节间SPS酶活性比ROC22中高.节间SS合成方向酶活性与锤度和蔗糖含量都负相关,GT28中SS合成方向酶活性比ROC22中低.而SS分解方向酶活性与ROC22节间锤度、可溶性糖和蔗糖含量都呈负相关,与GT28中呈正相关,未达到显著水平.说明成熟期节间SPS和SS合成方向酶活性提高有利于蔗糖的积累,而随着节间成熟,蔗糖含量可能是促使SS酶活性由合成方向向分解方向转化的一个重要调节因子.

摘要： 本文研究了枇杷果实发育过程中糖积累及其代谢相关酶活性的变化动态，以及它们与果实糖积累关系。结果表明：枇杷果实内转化酶活性降到最低时，果实开始糖分积累。果实膨大期，糖迅速积累时，SS合成方向、SPS和SS分解方向活性均相应地快速上升，且相关性达到显著水平。表明SS和SPS是影响枇杷果实糖积累的关键酶，它们的活性高，利于果实糖的积累。可以认为枇杷果实糖分的积累是几种酶综合作用的结果。

摘要： 一种利用重组耐高温蔗糖磷酸合成酶合成蔗糖‑6‑磷酸的方法，属于酶工程领域，本发明包括克隆耐高温蔗糖磷酸合成酶的基因，构建过表达质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)中；诱导表达耐高温蔗糖磷酸合成酶，亲和层析纯化获得重组耐高温蔗糖磷酸合成酶；将浓度为0.01‑10μg/ml的重组耐高温蔗糖磷酸合成酶、浓度为0.1‑20mM的果糖‑6‑磷酸和浓度为0.1‑20mM的二磷酸尿苷葡糖在70°C下反应1‑24h获得蔗糖‑6‑磷酸。该重组耐高温蔗糖磷酸合成酶最适反应温度为70°C，可耐受温度达100°C，能够在100°C保持酶活性，并催化蔗糖‑6‑磷酸的生成，适用于工业生产蔗糖‑6‑磷酸。

摘要： 一种利用重组耐高温蔗糖磷酸合成酶合成蔗糖‑6‑磷酸的方法，属于酶工程领域，本发明包括克隆耐高温蔗糖磷酸合成酶的基因，构建过表达质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)中；诱导表达耐高温蔗糖磷酸合成酶，亲和层析纯化获得重组耐高温蔗糖磷酸合成酶；将浓度为0.01‑10μg/ml的重组耐高温蔗糖磷酸合成酶、浓度为0.1‑20mM的果糖‑6‑磷酸和浓度为0.1‑20mM的二磷酸尿苷葡糖在70°C下反应1‑24h获得蔗糖‑6‑磷酸。该重组耐高温蔗糖磷酸合成酶最适反应温度为70°C，可耐受温度达100°C，能够在100°C保持酶活性，并催化蔗糖‑6‑磷酸的生成，适用于工业生产蔗糖‑6‑磷酸。

摘要： 本发明属于植物生理学领域，公开了一种提取梨果实蔗糖合酶和蔗糖磷酸合成酶及其活性测定方法。本发明通过在蔗糖合酶和蔗糖磷酸合成酶提取过程中增加盐析和透析步骤，常能够将初提取酶液中的糖分和离子等小分子物质除去，从而更能够精确地测定果实中果实蔗糖合酶和蔗糖磷酸合成酶的活性，为揭示果实内糖分的积累差异提供生理基础，进一步为果实甜度风味品质的改良提供理论依据。

摘要： 本发明的目的是抑制显示对将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分作用的催泪成分合成酶基因的表达，提供了以该催泪成分合成酶基因的序列为基础设计的DNA和RNA、将催泪成分合成酶基因的表达抑制用DNA导入植物所必需的载体，以及使用这些抑制催泪成分基因表达的反复和抑制了催泪成分生成基因表达的植物。

摘要： 本发明公开了一种测定木薯叶片中蔗糖磷酸合成酶酶活性的方法。采取新鲜的木薯叶片迅速置于冰盒中，用提取缓冲液于冰浴中提取酶液，高速冷冻离心，取上清液在低温下（4°C）于透析袋中透析脱糖，透析缓冲液组成为：20mmol／L、pH=7.2的Tris-HCI，2.5mmol／L MgCl

摘要： 本发明公开了一种蔗糖合成酶在调控植物果实发育中的应用。本发明提供了一种培育转基因植物的方法，是将蔗糖合成酶的编码基因导入目的植物中，得到转基因植物；所述转基因植物果实产量大于所述目的植物。所述蔗糖合成酶的编码基因具体可为蔗糖合成酶基因CsSus4。本发明发现了蔗糖合成酶基因CsSus4在黄瓜果实发育过程中发挥着的关键性作用，可以调节库强从而促进果实的发育。这一优良的功能对于改良黄瓜的高效增产具有指导意义。

摘要： 本发明提供一种测定植物中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶含量的方法，包括以下步骤：(1)蔗糖标准曲线的制作；(2)酶液的制备；(3)蔗糖合成酶或蔗糖磷酸合成酶活性的测定。本发明的方法能够准确的测定植物中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶含量。

摘要： 本发明公开了一种测定木薯叶片中蔗糖合成酶酶活性的方法。该方法包括木薯叶片中蔗糖合成酶合成方向与分解方向酶活性的测定，用新鲜木薯叶片提取酶液后，通过透析袋脱糖，再测定酶活性。与现有方法相比，本发明采用酶液提取后进行透析脱糖处理与酶活性测定技术相结合，能够有效消除木薯叶片酶提取液中高本底蔗糖含量对蔗糖合成酶酶活性测定的干扰，提高测定灵敏度，测定过程易于控制，测定结果可靠、可比性强、重现性好。

摘要： 本发明提供了一种百山祖冷杉蔗糖合成酶基因和产品及用途。本发明首次从百山祖冷杉中克隆得到百山祖冷杉蔗糖合成酶基因，并确定其核苷酸序列(SEQ ID NO.1)以及氨基酸序列(SEQ ID NO.2)，填补了现有技术中对百山祖冷杉蔗糖合成酶及其生物合成基因未知的空白，为百山祖冷杉的相关研究提供了理论和基础支持。此外，发明人通过将百山祖冷杉蔗糖合成酶基因重组得到重组载体和工程菌，并且成功纯化得到百山祖冷杉蔗糖合成酶基因，在体外酶活实验中该酶可将蔗糖和尿苷二磷酸催化合成尿苷二磷酸葡萄糖及其逆向反应，是一种双向反应酶，在生物合成及其代谢途径中具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种蔗糖合成酶用于酶法制备糖基化天然产物的方法。该方法利用低等真核来源的蔗糖合成酶和UDP‑糖基转移酶，以底物和蔗糖为原料生产糖基化产物。本发明的方法首先利用基因挖掘技术筛选得到具有UDP底物亲和力的蔗糖合成酶，并将其用于与UDP‑葡萄糖基转移酶在同一载体上共表达，然后收集生物酶粗品直接进行底物催化反应，通过新型蔗糖合成酶催化蔗糖实现UDP‑葡萄糖的高效循环，使UDP‑葡萄糖基转移酶具有持续的UDP‑葡萄糖补给催化底物糖基化。该方法与已有的双酶催化反应系统相比，转化速率快，收率高，具有重要且广泛的应用价值。