葫芦素B

摘要： 目的:本文旨在探讨中药活性成分葫芦素B(cucurbitacin B,CuB)抑制急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的作用及机制。方法:Western blot、QPCR检测蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)在AML细胞中的表达水平;CCK-8及台盼蓝拒染法检测CuB对AML细胞增殖的抑制作用;DAPI染色和流式细胞术检测CuB对kasumi-1细胞凋亡的影响;Western blot检测CuB对kasumi-1细胞中CIP2A表达及凋亡蛋白表达的影响;QPCR检测CuB对CIP2A基因转录的影响;PP2A活性试剂盒检测CuB对Kasumi-1细胞中PP2A活性的影响;Western blot检测C-KIT及其下游信号分子的变化;CuB与PP2A抑制剂冈田酸(Okadaic acid,OA)共处理细胞检测CuB抑制C-KIT是否与PP2A活性的再激活有关。结果:CIP2A在t(8;21)AML中高表达并与AML预后不良显著相关。CuB可以显著抑制kasumi-1细胞增殖并诱导其发生caspase依赖性的细胞凋亡,该作用机制可能与CIP2A/PP2A/C-KIT信号通路有关。结论:CuB通过抑制AML细胞中CIP2A的表达并重激活PP2A,使C-KIT及其下游信号失活,进而抑制AML细胞增殖并诱导其凋亡。

摘要： 目的:针对狼疮性肾炎(LN)的重要靶点Toll样受体7(TLR7),构建高通量筛选(HTS)体系从天然产物库中筛选TLR7抑制剂,为LN新药研发提供线索。方法:基于稳定表达人TLR7(hTLR7)基因的HEK-Blue^(TM)hTLR7细胞系构建HTS体系,从活性天然产物库中进行TLR7抑制剂筛选。分离并原代培养MRL/lpr狼疮小鼠脾脏单个核细胞,给予葫芦素B(CuB)处理,通过western blot和qPCR检测TLR7下游信号分子及炎症因子表达情况。结果:对TLR7配体瑞喹莫德(R848)及阳性药羟氯喹(HCQ)的最佳工作浓度进行优化后构建HTS体系,经初筛和次筛发现CuB可显著抑制TLR7活性且对细胞活力影响较小。体外实验证实CuB可抑制TLR7下游信号分子MyD88、p-p65表达,下调炎症因子白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)的分泌以及I型干扰素签名基因(ISGs)表达。结论:本研究成功建立了TLR7抑制剂的HTS模型并筛选获得新TLR7抑制剂CuB,为治疗LN提供了先导化合物。

摘要： 目的基于超高效液相色谱(UPLC)波长切换法构建小陷胸汤中腺苷、巴马汀、小檗碱、葫芦素B等4种指标性成分的含量测定方法。方法固定相为Poroshell 120 EC-C 18(3.0 mm×150 mm,2.7μm)色谱柱;流动相为A相为0.1%甲酸-水,B相为0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱(0~6 min,B:5%→8%;6~9 min,B:8%→35%;9~12 min,B:35%→50%),检测波长0~10 min,262 nm;10~12 min,234 nm,柱温46°C,流速0.6 mL·min^(-1)。结果小陷胸汤中4个成分腺苷、巴马汀、小檗碱、葫芦素B分别在0.017~0.17、0.073~0.73、0.15~1.50、0.01~0.10 mg·mL^(-1)范围内呈良好线性关系;平均加样回收率分别为100.0%、100.6%、101.2%、99.1%,RSD均小于3.0%(n=6);4种成分的含量分别为0.052~0.061、0.24~0.30、0.49~0.59、0.033~0.045 mg·g^(-1)。结论该方法精密度高、重复性好、稳定性好、简便高效,可用于小陷胸汤的质量控制。

摘要： 目的 探讨葫芦素B对激素受体阳性的人MCF-7乳腺癌细胞生物学行为的影响及其机制.方法培养人MCF-7细胞,随机分为对照组和20μM、50μM、100μM葫芦素B组.SRB法观测葫芦素B对人MCF-7细胞增殖活性的影响,Hoechst 33258凋亡实验观察葫芦素B对人MCF-7细胞凋亡的影响,Western Blotting检测自噬相关蛋白.结果与对照组相比,葫芦素B各浓度组能显著抑制人MCF-7细胞增殖,增强其细胞凋亡,差异具有统计学意义(均P<0.05);葫芦素B各浓度组LC3-Ⅱ表达水平显著升高,LC3-Ⅰ、P62表达水平显著下降(均P<0.05).结论葫芦素B可诱导人MCF-7细胞自噬和凋亡,抑制细胞增殖.

摘要： 目的:建立外感二号合剂中葫芦素B的鉴别和含量测定方法,为外感二号合剂的质量控制提供依据.方法:采用薄层色谱(TLC)法对外感二号合剂中葫芦素B进行定性鉴别,并采用高效液相色谱(HPLC)法对其进行含量测定.色谱条件为:JADE-PAK ODS-AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1％醋酸(46∶54,v/v).流速选用 1.0 mL/min,检测波长选择228 nm,进样量10μL.结果:在TLC图中,外感二号合剂的供试品溶液与葫芦素B的对照品溶液在相同位置上显现暗斑.含量测定实验中,葫芦素B质量浓度在0.10～10.00μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.49％(RSD=1.77％,n=6).结论:此鉴别和含量测定方法简便、准确、可靠,能有效地对外感二号合剂的质量进行控制.

摘要： 目的:了解葫芦素B的抗肿瘤作用机制,以期为该化合物的进一步开发应用提供理论参考.方法:以"葫芦素B""肿瘤""癌症""cucurbitacin B""CuB""tumor""cancer"等为关键词,在中国知网、万方数据、维普网、EBSCO、PubMed、Web of Science等数据库中组合查询2000年1月-2021年6月发表的相关文献,对葫芦素B抗肿瘤作用机制进行总结归纳.结果 与结论:葫芦素B对多种恶性肿瘤均具有显著的抗肿瘤作用,其作用机制主要是通过调控Janus激酶/信号转导和转录激活因子3(JAK/STAT3)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇激酶-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、Notch、Wnt、血管内皮生长因子/黏附灶激酶/基质金属蛋白酶9(VEGF/FAK/MMP-9)等信号通路,进而发挥抑制细胞增殖、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡、抑制细胞迁移和侵袭、抗血管生成、破坏细胞骨架、改变表观遗传、诱导自噬、诱导细胞衰老等作用.此外,葫芦素B的抗肿瘤作用往往涉及多个肿瘤表型,是一种多靶点、多途径的抗肿瘤药物,其对信号通路的效应具有肿瘤差异性.葫芦素B还可以有效改善肿瘤细胞对阿霉素、吉非替尼、紫杉醇等药物的耐药现象,与临床常用的抗肿瘤药物如顺铂、多西他赛、吉西他滨等联合使用也可极大地提高治疗效果.

摘要： 目的:提高葫芦素B葡萄糖苷(CuBg)生物转化为葫芦素B(CuB)的得率.方法:采用单因素实验,优化链霉菌(Streptomyces sp.)RW-2菌株产β-葡萄糖苷酶培养基中的碳源、氮源、初始pH和培养时间.结果:200 g·L-1的马铃薯煮沸后汁液中,加入30 g·L-1的蔗糖、14 g·L-1的大豆粉,调节pH为7.5,作为产酶培养基,接种链霉菌RW-2孢子液后,于30°C、180 r·min-1条件下培养4 d,除去菌体的粗酶液转化甜瓜蒂提取物,CuBg转化为CuB的得率最高,达到69.1％.结论:在马铃薯汁中仅加入蔗糖和大豆粉作为链霉菌RW-2产β-葡萄糖苷酶的培养基,具有组分少,配制方法简单,成本低的优点.

摘要： 目的 通过观察葫芦素B对非小细胞肺癌A549细胞增殖、细胞周期、细胞迁移及凋亡的影响,及其与CIP2A/AKT信号表达的相关性,明确葫芦素B对非小细胞肺癌的作用及可能机制.方法 不同浓度的葫芦素B处理A549细胞不同时间,采用MTS法检测细胞增殖、划痕实验检测细胞迁移、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡、Western Blot检测CIP2A、AKT、PAKT表达.结果 葫芦素B以时间及浓度依赖性抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移,对A549细胞存在G2/M期阻滞并促进其凋亡,抑制CIP2A及PAKT表达.结论 葫芦素B能够抑制A549细胞增殖、迁移、阻滞细胞周期于G2/M期并促进其凋亡,其作用途径可能为CIP2A/AKT,这为葫芦素B作为CIP2A抑制剂在非小细胞肺癌的治疗中提供了有力证据.

摘要： 目的:探讨葫芦素B(Cucurbitacin B,CuB)抑制胃癌细胞发生发展的分子机制。方法:MTT法、克隆形成实验检测CuB对胃癌细胞MGC803和SGC7901增殖的影响;Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;SwissTargetPrediction在线预测与CuB相结合的关键因子;Western blot法检测信号通路蛋白表达情况;分子对接模拟CuB与STAT3的结合作用。结果:CuB对胃癌细胞的增殖具有显著的抑制作用并诱导胃癌细胞凋亡。在线预测发现STAT3是CuB潜在结合靶点,分子对接发现CuB与STAT3直接结合。结论:CuB通过靶向STAT3抑制胃癌细胞增殖并诱导凋亡。

摘要： 目的:葫芦素类化合物广泛存在于自然界中,最近研究显示其具有显著的抗肿瘤活性.本研究拟测定葫芦素B对肿瘤细胞DNA的作用及其对细胞周期的影响,并探讨该作用的可能信号通路。方法:葫芦素B(0-100 nM)处理12小时后,采用流式细胞术检测K562、MCF-7、A549细胞周期情况;彗星电泳检测细胞DNA损伤;JC-1染色检测线粒体膜电位变化;蛋白印迹实验检测γ-H2AX蚩白和细胞周期相关蛋白表达.结果:在K562, MCF-7、A549细胞中，葫芦素B可浓度依赖性地引起肿瘤细胞DNA损伤，降低线粒体膜电位，诱导细胞G2/M期周期阻滞。蛋白印迹实验显示.葫芦素B可剂量依赖性地诱导γ-H2AX蛋白表达，诱导细胞周期相关蛋白表达发生改变。结论:葫芦素B可以引起多种肿瘤细胞发生DNA损伤，这作用可能是其诱导肿瘤细胞G2/M期细胞周期阻滞的重要原因。

摘要： 目的:葫芦素类化合物广泛存在于自然界中,最近研究显示其具有显著的抗肿瘤活性.本研究拟测定葫芦素B对肿瘤细胞DNA的作用及其对细胞周期的影响,并探讨该作用的可能信号通路。方法:葫芦素B(0-100 nM)处理12小时后,采用流式细胞术检测K562、MCF-7、A549细胞周期情况;彗星电泳检测细胞DNA损伤;JC-1染色检测线粒体膜电位变化;蛋白印迹实验检测γ-H2AX蚩白和细胞周期相关蛋白表达.结果:在K562, MCF-7、A549细胞中，葫芦素B可浓度依赖性地引起肿瘤细胞DNA损伤，降低线粒体膜电位，诱导细胞G2/M期周期阻滞。蛋白印迹实验显示.葫芦素B可剂量依赖性地诱导γ-H2AX蛋白表达，诱导细胞周期相关蛋白表达发生改变。结论:葫芦素B可以引起多种肿瘤细胞发生DNA损伤，这作用可能是其诱导肿瘤细胞G2/M期细胞周期阻滞的重要原因。

摘要： 目的:葫芦素类化合物广泛存在于自然界中,最近研究显示其具有显著的抗肿瘤活性.本研究拟测定葫芦素B对肿瘤细胞DNA的作用及其对细胞周期的影响,并探讨该作用的可能信号通路。方法:葫芦素B(0-100 nM)处理12小时后,采用流式细胞术检测K562、MCF-7、A549细胞周期情况;彗星电泳检测细胞DNA损伤;JC-1染色检测线粒体膜电位变化;蛋白印迹实验检测γ-H2AX蚩白和细胞周期相关蛋白表达.结果:在K562, MCF-7、A549细胞中，葫芦素B可浓度依赖性地引起肿瘤细胞DNA损伤，降低线粒体膜电位，诱导细胞G2/M期周期阻滞。蛋白印迹实验显示.葫芦素B可剂量依赖性地诱导γ-H2AX蛋白表达，诱导细胞周期相关蛋白表达发生改变。结论:葫芦素B可以引起多种肿瘤细胞发生DNA损伤，这作用可能是其诱导肿瘤细胞G2/M期细胞周期阻滞的重要原因。

摘要： 目的:葫芦素类化合物广泛存在于自然界中,最近研究显示其具有显著的抗肿瘤活性.本研究拟测定葫芦素B对肿瘤细胞DNA的作用及其对细胞周期的影响,并探讨该作用的可能信号通路。方法:葫芦素B(0-100 nM)处理12小时后,采用流式细胞术检测K562、MCF-7、A549细胞周期情况;彗星电泳检测细胞DNA损伤;JC-1染色检测线粒体膜电位变化;蛋白印迹实验检测γ-H2AX蚩白和细胞周期相关蛋白表达.结果:在K562, MCF-7、A549细胞中，葫芦素B可浓度依赖性地引起肿瘤细胞DNA损伤，降低线粒体膜电位，诱导细胞G2/M期周期阻滞。蛋白印迹实验显示.葫芦素B可剂量依赖性地诱导γ-H2AX蛋白表达，诱导细胞周期相关蛋白表达发生改变。结论:葫芦素B可以引起多种肿瘤细胞发生DNA损伤，这作用可能是其诱导肿瘤细胞G2/M期细胞周期阻滞的重要原因。

摘要： 本发明是一种由葫芦素B水解制备葫芦素D的方法，该方法简便易行，只需（1）良溶剂将葫芦素B溶解，得有机相；（2）配置pH值大于9的碱液和/或缓冲液，得水相；（3）将水相加入到有机相中，搅拌均匀，得具有有机相水相比例的反应液；（4）将反应液在大于20°C温度下反应，之后，冰浴停止反应；（5）向停止反应的反应液加入等体积的乙酸乙酯萃取水解产物，40°C旋转蒸发挥去乙酸乙酯，即得所需水解产物。本发明解决了葫芦素D来源单一的问题。

摘要： 葫芦素或葫芦素组合物在制备提高白细胞的药物中的应用。

摘要： 本发明公开一种葫芦素I的应用，属于生物医学技术领域。本发明通过实验证明葫芦素I在THP‑1衍生的巨噬细胞中能够在一定程度上刺激巨噬细胞向M1型的极化以及抑制其向M2型的极化。同时，葫芦素I还能上调TNF、iNOS等因子的表达，下调TGF‑β、CD206等因子的表达。本发明发现葫芦素I可作为一种新型的M1型巨噬激活剂/M2型巨噬抑制剂，是一种有潜力的针对于肿瘤微环境中巨噬细胞的抗癌新药，可作为有效的活性成分用于制备各种癌症如肝癌、肾癌、乳腺癌、结直肠癌等癌症的药剂，有利于抑制肿瘤微环境中各种因素产生的的免疫抑制作用，从肿瘤杀伤和免疫激活两个方面着手进一步拓展癌症治疗的可能。

摘要： 本申请涉及西瓜苦味物质葫芦素E的转运蛋白及其应用。本申请在西瓜基因组中鉴定出一种能够运输苦味物质葫芦素E的转运蛋白，为西瓜分子辅助育种提供了理论依据，同时也为利用合成生物学技术合成葫芦素E提供了支持。

摘要： 本发明提供葫芦素B在制备治疗多发性硬化药物中的应用。通过药效试验评价了葫芦素B对人、鼠巨噬细胞死亡率和IL‑1β炎症因子分泌量的影响以及对小鼠EAE模型的防治作用。实验结果表明，葫芦素B可显著降低人、鼠巨噬细胞的死亡率，并减少IL‑1β炎症因子的分泌。对EAE模型小鼠给药处理后，显著降低了小鼠临床评分推迟发病时间，说明葫芦素B可缓解MS的症状，在调控MS病理中具有关键的作用，可以作为治疗MS的药物，为今后MS治疗提供一种新的药物选择，具有广阔的开发应用价值。

摘要： 本申请首次发现葫芦素能通过提高肠杆菌和芽孢杆菌的丰度，间接抑制镰刀菌生长，进而形成了一套对土传病原菌‑镰刀菌的有效的防御方法。本申请的方法有效提高了植物的抗病性，并为培育优质高产、适应性强的作物提供了依据。

摘要： 本发明提供了一种葫芦素B在抗结膜黑色素瘤中的应用，具体地，本发明提供了式(I)所示的葫芦素B、或其药学上可接受的盐、或其溶剂化物或前药的用途；所述的葫芦素B用于制备药物组合物，且所述的药物组合物用于选自下组的用途：治疗和/或缓解结膜黑色素瘤，或抑制结膜黑色素瘤细胞增殖。

摘要： 本申请涉及甜瓜苦味物质葫芦素B的转运蛋白及其应用。本申请首次揭示了甜瓜苦味运输的分子机制，为甜瓜分子辅助育种提供了理论依据，同时也为利用合成生物学技术合成葫芦素B提供了支持。

摘要： 本申请涉及黄瓜苦味物质葫芦素C的转运蛋白及其应用。本申请首次揭示了黄瓜苦味运输的分子机制，为黄瓜分子辅助育种提供了理论依据，同时也为利用合成生物学技术合成葫芦素C提供了支持。

摘要： 本发明公开了一种葫芦素B及其衍生物在制备抗肿瘤耐药的药物中的应用。本发明发现，葫芦素B抑制卵巢癌顺铂耐药细胞株增殖，对C13*和A2780DDP细胞的IC50值分别是：64.28±14.54nM和29.20±2.26nM；促进C13*细胞凋亡，抑制C13*细胞侵袭和迁移；抑制C13*和A2780DDP细胞中的PI3K/Akt信号通路。因此，葫芦素B在制备抗肿瘤耐药的药物中的应用。葫芦素B具有较好的开发前景。