葫芦素B对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的作用

摘要

cqvip:目的探讨葫芦素B(CuB)对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的作用。方法培养HUVECs并利用随机数字法进行分组,对照组采用同等渗透压的甘露醇,高糖组采用33.3 mmol/L的葡萄糖刺激细胞,实验组经不同浓度的CuB(1、2、4、8、10 nmol/L)处理12 h后应用高糖刺激,采用CCK-8检测细胞增殖;采用实时聚合酶链反应检测炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6]mRNA转录水平;采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针检测细胞活性氧类(ROS)的水平;采用原位末端缺口标记法(Tunel)检测细胞凋亡水平;采用Matrigel基质胶三维培养内皮细胞,评估其小管形成能力。结果各组细胞的增殖能力逐渐下降;与高糖组相比,8 mmol/L和10 mmol/L CuB组细胞增殖能力提高(P<0.01)。与对照组相比,高糖组促炎因子TNF-α、IL-1、IL-6的mRNA转录水平升高(P<0.05);与高糖组相比,8 nmol/L CuB组和10 nmol/L CuB组促炎因子的mRNA转录水平降低,且10 nmol/L CuB组低于8 nmol/L CuB组(1.98±0.13比2.43±0.11,2.87±0.34比3.45±0.23,1.34±0.21比2.09±0.22)(P<0.05)。与对照组相比,高糖组细胞的ROS荧光强度增强(P<0.05);与高糖组相比,8 nmol/L CuB组和10 nmol/L CuB组的细胞ROS荧光强度减弱,且10 nmol/L CuB组弱于8 nmol/L CuB组(2.12±0.54比3.42±0.23)(P<0.05)。与对照组相比,高糖组的凋亡阳性细胞数目明显增加(P<0.05);与高糖组相比,8 nmol/L CuB组和10 nmol/L CuB组的凋亡阳性细胞数目减少,且10 nmol/L CuB组少于8 nmol/L CuB组[(12.4±4.0)%比(17.8±4.0)%](P<0.05)。培养6 h后,高糖组的平均小管长度明显低于对照组(P<0.05);与高糖组相比,8 mmol/L CuB组和10 mmol/L CuB组的平均小管长度均增长[(254±58)μm、(309±54)μm比(143±65)μm](P<0.05)。结论CuB能保护HUVECs免受高糖刺激损害,减少炎症细胞因子表达,抑制氧化应激,降低细胞凋亡水平,提高小管形成能力。