肠三叶因子

摘要： 目的研究芪连结肠宁对溃疡性结肠炎大鼠TLR4/NF-κB信号通路及肠黏膜保护因子的影响。方法健康雄性SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、芪连结肠宁低、中、高剂量组,每组10只。采用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)喂养建立溃疡性结肠炎大鼠模型,连续给药3周后检测指标。观察体质量变化及DAI评分;HE染色观察结肠组织病理情况;免疫组化法观察结肠组织MUC2表达情况;Western blot检测结肠组织TLR4、NF-κB p65、IL-6、TNF-α、MUC2、TFF3蛋白表达水平;实时荧光定量PCR检测结肠组织MUC2、TFF3 mRNA的表达。结果芪连结肠宁各组大鼠在给药之后体质量明显增加(P<0.01),DAI评分明显降低(P<0.01),且中、高剂量组具有明显优势。芪连结肠宁各组大鼠结肠组织病理损伤不同程度恢复,MUC2、TFF3蛋白表达相比于模型组均明显增加(P<0.01)。与模型组比较,芪连结肠宁各组大鼠结肠组织TLR4、p-NF-κB p65、IL-6、TNF-α蛋白表达均有不同程度的下降(P<0.05,P<0.01),TFF3 mRNA相对表达量显著增加(P<0.01)。结论芪连结肠宁能有效恢复溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织的病理损伤,降低DAI评分,降低结肠组织TLR4、p-NF-κB p65、IL-6、TNF-α蛋白表达,增加MUC2、TFF3蛋白及TFF3 mRNA的表达,进而治疗溃疡性结肠炎,其中芪连结肠宁中、高剂量组疗效及调节作用较为显著。

摘要： 目的探讨肠三叶因子对脓毒症患者急性胃肠损伤的早期预测价值。方法收集2020年3月至2021年3月治疗的152例脓毒症患者为研究对象,根据患者住院治疗期间是否并发急性胃肠损伤分为80例急性胃肠损伤组(研究组)和72例非急性胃肠损伤组(对照组)。收集患者临床资料,所有患者均于入院时24 h内空腹抽取肘静脉血5 ml,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血清(intestinal trefoil factor,TFF3)、C-反应蛋白(C-reactionprotein,CRP)水平,并绘制相应ROC曲线。结果2组患者性别比、年龄、体重指数、呼吸频率、心率、感染部位、机械通气时间、ICU时间等方面比较,差异无统计学意义(P>0.05);其中研究组在APACHEⅡ评分、SOFA评分、血清TFF3、CRP水平明显高于对照组(P<0.05);Logistic回归分析显示,APACHEⅡ评分、CRP、TFF3是影响脓毒症患者急性胃肠损伤的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清TFF3对预测脓毒症患者急性胃肠损伤的AUC为0.941,最佳临界值为12.76μg/L,敏感度为82.50%,特异度为90.28%;相关性分析显示,急性胃损伤患者血清TFF3与CRP、APACHEⅡ评分呈显著正相关关系(r=0.728、0.763,P<0.05)。结论脓毒症患者并发早期急性胃损伤血清TFF3升高,可以作为脓毒症急性胃肠酸的血清生物标志物之一。

摘要： 目的 探讨缺血性脑卒中后胃肠功能障碍与病人血清瓜氨酸(CIT)、肠型脂肪酸结合蛋白(IFABP)、肠三叶因子(ITF)的关系。方法 选取2017年3月—2019年3月国家电网公司北京电力医院神经内科收治的缺血性脑卒中病人93例为观察组,根据是否发生胃肠功能障碍分为无胃肠功能障碍组(71例)和胃肠功能障碍组(22例)。另选取同期在本院进行体检的健康人95名作为对照组。收集受试者一般资料;采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测受试者血清CIT、IFABP、ITF水平;采用Logistic回归分析缺血性脑卒中后发生胃肠功能障碍的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CIT、IFABP、ITF水平对缺血性脑卒中后发生胃肠功能障碍的预测价值。结果 与对照组相比,观察组血清CIT水平降低(P<0.05),IFABP、ITF水平升高(P<0.05)。与无胃肠功能障碍组相比,胃肠功能障碍组血清CIT水平降低(P<0.05),IFABP、ITF水平升高(P<0.05)。Logistic回归分析显示,CIT水平偏低及IFABP、ITF水平偏高是缺血性脑卒中病人发生胃肠功能障碍的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CIT、IFABP、ITF预测缺血性脑卒中后发生胃肠功能障碍的曲线下面积(AUC)分别为0.762,0.756,0.770;联合检测预测缺血性脑卒中后发生胃肠功能障碍的ROC曲线下面积(AUC)为0.847。结论 血清CIT水平降低,IFABP、ITF水平升高是缺血性脑卒中病人发生胃肠功能障碍的危险因素,对该病具有一定预测价值,可能作为潜在的诊断标志物。

摘要： 目的 建立高效的人肠三叶因子(ITF)重组表达及纯化策略,观察重组人ITF (rhITF)对烧伤小鼠肠黏膜损伤与修复的作用并探讨其机制.方法 采用实验研究方法.采用新型酵母表达载体pGAPZαA和酵母菌X33重组表达ITF,并通过金属螯合亲和层析与阴、阳离子交换层析法纯化蛋白,行非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白质印迹法鉴定rhITF.rhITF与胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液按体积比1∶1混合,分别作用0.5、1.0、1.5、2.0 h和1.0、2.0、4.0 h后行非还原SDS-PAGE,分析rhITF的稳定性.按随机数字表法将105只6～8周龄BALB/c雄性小鼠分为假伤组(30只)、单纯烧伤组(45只)、烧伤+rhITF组(30只).将单纯烧伤组和烧伤+rhITF组小鼠背部造成30％体表总面积Ⅲ度烧伤,假伤组小鼠模拟致假伤,烧伤+rhITF组小鼠伤后灌胃1 mg/kg rhITF,其余2组小鼠伤后给予等量生理盐水.伤后24 h,取15只单纯烧伤组小鼠,制备烧伤血清,用于细胞实验.伤后3、5、7d,每组各取10只小鼠处死后取小肠组织,苏木精-伊红染色观察肠黏膜病理变化,分光光度法和酶联免疫吸附测定法测定肠组织二胺氧化酶(DAO)及乳酸脱氢酶(LDH)活性.取3批人结直肠腺癌HT-29细胞,分为阴性对照组、25 μg/mL rhITF组、50 μg/mL rhITF组(样本数为3),正常对照组、烧伤血清组、烧伤血清+rhITF组(样本数为3),CK869抑制剂组、CK666抑制剂组和溶剂对照组(样本数为2),分别进行相应处理,Transwell实验观察培养12 h后细胞移行.另取2批HT-29细胞,每批细胞均分为正常对照组、烧伤血清组和烧伤血清+rhITF组(样本数均为6),培养24 h后,蛋白质印迹法检测细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1(Rac1)及肌动蛋白相关蛋白2/3 (Arp2/3)复合亚基1B(ARPC1B)蛋白表达,活化磁珠下拉实验检测细胞Rac1活性.对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、SNK检验.结果 每升发酵液获得rhITF 82.35 mg,蛋白纯度高达98％,且具有良好的抗原特异性.rhITF在胃蛋白酶和胰蛋白酶溶液中较稳定,与胰蛋白酶溶液作用2.0 h后仍有45％残余,与胃蛋白酶溶液作用4.0 h后仍有90％残余.假伤组小鼠伤后各时间点肠黏膜未见充血、水肿,单纯烧伤组小鼠伤后各时间点肠黏膜主要病理表现为充血、水肿、糜烂及出血.烧伤+rhITF组小鼠伤后3、5d肠黏膜主要以充血、水肿为主,伤后7d肠黏膜水肿和充血减轻.与单纯烧伤组比较,假伤组、烧伤+rhITF组小鼠伤后3、5、7d肠组织DAO和LDH活性显著升高(P＜0.05或P＜0.01).培养12h后,25μg/mL rhITF组细胞移行数为(58±12)个,显著多于阴性对照组的(16±5)个(P＜0.01),显著少于50μg/mL rhITF组的(123±9)个(P＜0.05).培养12h后,烧伤血清组细胞移行数为(60±13)个,显著少于正常对照组的(143±11)个和烧伤血清+rhITF组的(138±8)个(P＜0.05).培养12h后,溶剂对照组细胞移行数为(155±9)个,明显多于CK666抑制剂组的(33±5)个、CK869抑制剂组的(28±5)个(P＜0.01).培养24 h后,烧伤血清组细胞AMPK、Rac1蛋白表达量与正常对照组、烧伤血清+rhITF组相近(P＞0.05),p-AMPK蛋白表达量明显高于正常对照组、烧伤血清+rhITF组(P＜0.05或P＜0.01),ARPC1B蛋白表达量明显低于正常对照组、烧伤血清+rhITF组(P＜0.05).培养24 h后,烧伤血清组细胞Rac1活性明显低于正常对照组、烧伤血清+rhITF组(P＜0.05或P＜0.01).结论 本研究获得的rhITF具有较高的纯度和超强的稳定性,能耐受极端pH和蛋白酶水解,减轻烧伤小鼠肠黏膜损伤.rhITF能通过抑制AMPK磷酸化维持Rac1-Arp2/3活性,促进肠上皮细胞移行,加速肠黏膜修复.

摘要： 背景腹部推拿作为传统的中医外治法之一,可以有效促进胃黏膜损伤修复,但其作用机制尚不明确.本研究假设腹部推拿作用于腹部后,可以通过脑-肠轴刺激下丘脑,并释放肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)作用于胃黏膜,进而发挥修复胃黏膜的作用.目的探讨腹部推拿促进胃黏膜损伤修复的作用机制,验证脑-肠轴在其过程中的桥梁作用.方法采用无水乙醇灌胃法复制胃黏膜损伤大鼠模型,将造模后大鼠随机分为腹部推拿组和模型组,另设空白对照组.腹部推拿组每天予推拿干预,模型组和空白对照组不进行任何干预.21 d后,采用ELISA法检测结肠组织和下丘脑中胃泌素(gastrin,GAS)、神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)表达及血清中ITF含量,免疫组化法、Western Blot法检测下丘脑c-fos蛋白的表达,实时定量RT-PCR技术检测下丘脑和胃黏膜中ITF mRNA表达.结果模型组大鼠较空白对照组下丘脑组织中GAS和NPY含量均显著降低,结肠组织中GAS含量显著降低,NPY含量显著升高,下丘脑c-fos蛋白的表达显著增强,下丘脑及胃黏膜中ITF mRNA及血清中ITF水平降低;而经腹部推拿干预后结肠组织和下丘脑中GAS和NPY含量均有改善,下丘脑c-fos蛋白的表达显著降低,且下丘脑及胃黏膜中ITF mRNA和血清ITF水平显著增加.结论腹部推拿作用于胃黏膜损伤大鼠腹部可以改善结肠组织和下丘脑中GAS和NPY神经肽的含量,对中枢神经系统起到调控作用,验证了脑-肠轴的存在;且腹部推拿可以调节下丘脑c-fos蛋白表达,下调应激反应强度,同时刺激下丘脑释放ITF入血,并作用于胃黏膜,从而发挥修复胃黏膜的作用.

摘要： 目的:探讨肠三叶因子(TFF3)对脓毒性休克患者早期肠功能障碍的评估价值,及其与病情严重程度的关系.方法:选取2016年11月至2019年10月达州市中心医院重症医学科入院24h内出现脓毒性休克的患者150例作为研究对象,并根据住院期间是否并发早期肠功能障碍分为非肠功能障碍组(n=72)与肠功能障碍组(n=78).收集临床资料,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TFF3水平.采用Pearson检验分析肠功能障碍患者血清TFF3水平与急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)、C反应蛋白(CRP)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、胃肠功能评分的相关性;采用二分类变量多因素Logistic回归分析筛选影响脓毒性休克患者并发早期肠功能障碍的独立危险因素;并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评价APACHEⅡ评分、SCr、TFF3对脓毒性休克患者并发早期肠功能障碍的预测价值.结果:肠功能障碍组患者APACHEⅡ评分、CRP、BUN、SCr及血清TFF3水平均显著高于非肠功能障碍组患者(P<0.05).肠功能障碍患者血清TFF3水平与APACHEⅡ评分、CRP、BUN、SCr、胃肠功能评分均呈正相关(P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,APACHEⅡ评分、SCr及血清TFF3水平升高均是影响脓毒性休克患者并发早期肠功能障碍的独立危险因素(P<0.05).ROC曲线显示,血清TFF3水平评估脓毒性休克患者并发早期肠功能障碍的曲线下面积(AUC)高于APACHEⅡ评分、SCr,最佳截断值为12.97 ng/mL时预测敏感度为82.10％,特异度高达98.60％.结论:脓毒性休克并发早期肠功能障碍患者血清TFF3水平升高,可作为评估脓毒性休克患者早期肠功能障碍的血清标记物.

摘要： 目的 探讨中药贴敷神阙穴治疗多发伤后胃肠功能障碍的效果及对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肠三叶因子(ITF)的影响.方法 选择医院2014年1月至2016年1月收治的多发伤后胃肠功能障碍患者100例,按治疗方法的不同分为对照组和试验组,各50例.在常规治疗基础上,对照组给予安慰剂,试验组给予中药贴敷神阙穴.结果 试验组总有效率为94.00％,明显高于对照组的80.00％(P<0.05);治疗3 d及7 d后,两组患者TNF-α水平均明显降低,ITF水平明显升高,且试验组变上述指标均优于对照组(P<0.05).结论 中药贴敷神阙穴治疗多发伤后胃肠功能障碍效果显著,且有助于改善TNF-α及ITF水平.

摘要： 通过研究大肠埃希菌对小鼠肠绒毛生长和肠三叶因子mRNA表达的影响,探讨牛源致病性大肠埃希菌感染与肠黏膜上皮细胞再生的相互关系.选取Balb/c小鼠,分成空白对照组、Brdu组(Brdu)和E.coli感染组(Brdu+ E.coli),并于不同时间点(6、12、24、30、36、48、60 h)采集小鼠十二指肠、空肠和回肠组织.用HE染色观察病理组织学变化,并测量肠绒毛长度和隐窝深度;用免疫组化染色检测肠黏膜上皮细胞中Brdu阳性信号;用PAS染色检测杯状细胞数;用real-time PCR检测肠黏膜组织中ITF mRNA表达水平.结果 显示,空白对照组和Brdu组肠组织结构无明显变化.E.coli感染小鼠肠组织6 h～36 h后,十二指肠、空肠绒毛萎缩或崩解成碎片脱落,隐窝变深;其他时间未见明显变化.E.coli感染小鼠后6 h～36 h,Brdu阳性信号在上皮细胞中的移动距离极显著高于Brdu组(P＜0.01).E.coli感染小鼠后6 h～60h,十二指肠、空肠、回肠中的杯状细胞数均显著低于空白对照组和Brdu组(P＜0.01).E.coli感染小鼠后6 h～36h,小肠组织中ITF mRNA表达极显著低于空白对照组和Brdu组(P＜0.01).牛源致病性E.coli感染小鼠后,既可引起小肠黏膜上皮细胞的损伤和抑制ITF mRNA表达,也能够促进小肠绒毛上皮细胞的生长.

摘要： Objective To investigate the regulation of miR-7 on intestinal trefoil factor (TFF3) and its effect on the proliferation and migration of intestinal epithelial cells. Methods miR-7 mimics and miR-7 inhibitor were transfected into LS174T cells respectively. The experiment was divided into 5 groups,including blank control group,miR-7 mimic negative control group,miR-7 mimic group,miR-7 inhibitor negative con-trol group,miR-7 inhibitor group. MTT assay was used to detect cell proliferation. Cell scratch assay was used to detect the effect of miR-7 on cell migration. Western blot was used to detect the change of TFF3 protein in each group. Results Compared with the blank control group,the miR-7 mimic negative control group and the miR-7 inhibitor negative control group,the OD value of the miR-7 mimic group decreased significantly, the difference was statistically significant(P<0. 05); the cell scratch interval increased,the cell migration rate decreased,the difference was statistically significant( P<0. 05); and the TFF3 protein expression was accompanied(P<0. 05). The OD value of the miR-7 inhibitor group significantly increased,the difference was statistically significant(P<0. 05); the cell scratch gap decreased,the cell migration rate was enhanced, the difference was statistically significant( P <0. 05); and the expression of TFF3 protein increased ( P <0. 05). Conclusion miR-7 can regulate the expression of TFF3 and further inhibit the proliferation and migration of LS174T cells.%目的 探讨miR-7对肠三叶因子(intestinal trefoil factor,TFF3)的调控及对肠上皮细胞增殖和迁移能力的影响.方法 使用miR-7类似物和miR-7抑制剂分别转染LS174T细胞.实验分为5组:空白对照组,miR-7类似物阴性对照组,miR-7类似物组,miR-7抑制剂阴性对照组,miR-7抑制剂组.利用MTT实验检测细胞增殖能力;通过细胞划痕实验检测miR-7对细胞迁移能力的影响;Western blot检测各组细胞中TFF3蛋白变化情况.结果 相较于LS174T细胞空白对照组、miR-7类似物阴性对照组和miR-7抑制剂阴性对照组,miR-7类似物组的细胞光密度( optical density,OD)值明显下降,差异具有统计学意义(P<0. 05);细胞划痕间隙增大,细胞迁移率降低,差异具有统计学意义(P<0. 05);同时伴有TFF3蛋白表达的下降(P<0. 05).而miR-7抑制剂组细胞OD值明显升高,差异具有统计学意义(P<0. 05);细胞划痕间隙减小,细胞迁移率增强,差异具有统计学意义( P<0. 05);同时伴有TFF3蛋白表达的升高(P<0. 05).结论 miR-7可以调控TFF3的表达,进一步抑制LS174T细胞的增殖和迁移能力.

摘要： 目的 研究肠三叶因子(trefoil factor 3,TFF3)在食管癌术后胃肠道功能衰竭时的表达,探讨tff3对食管癌术后胃肠道功能衰竭的早期诊断、治疗及预后意义.方法 ELISA双夹心抗体法结合酶标仪检测食管癌术后患者不同时期血清中TFF3含量.结果 食管癌术后胃肠道功能衰竭患者未发生胃肠道功能衰竭前,血清中TFF3表达较阴性对照组及无胃肠道功能衰竭组显著升高(P＜0.01);TFF3在食管癌术后发生胃肠道功能衰竭时的表达与细化的胃肠道功能评分呈负相关(r=-0.712);Cox风险比例模型检验提示,术后发生胃肠道功能紊乱或衰竭时病程时间及预后受各种因素影响.其中发生胃肠道功能衰竭时TFF3浓度(r=1.443),发生胃肠道功能衰竭48 h后TFF3浓度(风险因子=1.872,)的高表达可缩短胃肠道功能衰竭时病程时间改善预后.结论 TFF3在胃肠道功能衰竭的预测及胃肠道功能衰竭时黏膜保护及修复过程中发挥了重要的作用.%Objective To evaluate the relationship between the Trefoil factor 3 (TFF3) serum,concentration and gastrointestinal failure(GIF) and discuss eaely diagnosis,treatment and prognosis in patients with GIF after esophageal cancer surgery.Methods To test the TFF3 levels of the serum during the postoperation of esophageal cancer by ELISA.Results Serum TFF3 concentrations measured prior to the occurrence of GIF were significantly higher than in control group (P ＜ 0.01).serum TFF3 concentration was significantly related to gastrointestinal tract function score(r =-0.712).Cox proportional hazards model analysis showed that the serum TFF3 concentrations at the time of occurrence of gastrointestinal failure,and 48 hours later,could be used as prognostic factors in critically ill pediatric patients with GIF(r =1.443 and 1.872,respectively).Conclusion TFF3 may play an important role in predicting GIF in pediatric critical illness and has a protective function in the mucosal repair process.

摘要： 目的:观察肠三叶因子(ITF)在新生鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型中对叉头蛋白O3a(FOXO3a)与促凋亡蛋白(Bim)含量的影响并探讨其是否通过PI3K/AKT/FOXO3a/Bim通路发挥作用.方法:建立NEC模型,新生鼠被分为5组(A、B、C、D、E),即NEC+生理盐水、NEC+ITF、NEC+wortmannin、NEC+lTF+wortmannin和正常对照组,HE染色观察肠道病理变化,免疫组化检测FOXO3a、Bim蛋白含量.结果:A组肠粘膜水肿充血,绒毛倒伏,结构紊乱,病理评分中位积分3分;B组病变明显减轻,病理评分中位积分1分;FOXO3a蛋白在B组较其他四组显著升高(P＜0.01),A组较E组略高(P＜0.05),C组与E组比较显著降低(p＜0.01),A、D之间比较差异无统计学意义(P＞0.05);Bim在C组表达最高,A较B、E组显著升高(P＜0.01),A、D及B、E之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:ITF治疗NEC可能通过PI3K/AKT/FOXO3a/Bim通路保护损伤肠组织.

摘要： 三叶因子(TFFs，Trefoil factors)是一族富含半胱氨酸的小分子多肽。1989年Thim等发现它们带有三对二硫键，呈“三叶草”襻状结构图案特征，也称P结构域，故将其命名为三叶肽。本文介绍了粘膜重建过程和ITF加速粘膜重建过程等肠三叶因子(ITF)促肠损伤修复机制。

摘要： 肠三叶因子(ITF)足一类由杯状细胞分泌的、较新的细胞生长因子，被看作是粘膜损伤的快速反心肽，具有上皮保护和促进粘膜愈合作用，与炎症性肠病的发生、发展、颅后都何一定的关系。其作用机制町能涉及与粘糖蛋白相互作用，增强粘液凝胶层对粘膜表面有害物质的抵抗，以及促细胞迁移增巯等。对ITF的深入研究，特别是对其在炎性肠病粘膜修复中作用的研究，颇具应用价值。

摘要： 肠黏膜屏障的破坏在儿科急慢性疾病的发生发展中具有显著的意义,而肠黏膜通透性的升高是早期的和主要的病理生理基础。本文研究了血小板活化因子对肠黏膜屏障紧密连接的影响及肠三叶因子保护作用。

摘要： 目的:比较电针对胃粘膜损伤的预保护作用各组对胃粘膜组织肠三叶因子(in-testinaltrefoilfactor,ITF)基因表达的影响. 方法:将40只大鼠随机分为空白组、模型组、胃经组、胆经组.空白组不做任何处理,而模型组仅捆缚7天后造模,胃经组、胆经组须先捆缚电针7日后再造模.造模采用水浸束缚法,水浸束缚10个小时.经相应处理后检测胃粘膜损伤指数(UI),同时取各组大鼠胃粘膜组织,采用RT-PCR方法测胃粘膜组织肠三叶因子基因(ITFmR-NA)表达. 结果:胃经组、胆经组与模型组的UI经统计有极明显或明显差异(P＜0.05/0.01),但电针有提高胃粘膜中的ITFmRNA的趋势,胆经组较模型组显著升高(P＜0.05),胃经组较模型组升高极显著(P＜0.01). 结论:电针对胃粘膜组织特异性调整作用,与肠三叶因子基因表达差异有关.

摘要： 目的：探讨肠三叶因子(TFF-3)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达与胃癌的发生、浸润和转移的相关性.rn 方法：采用免疫组化方法检测80例胃癌患者(胃癌组),50例癌旁正常组织(对照组)中TFF-3、E-cadherin和VEGF的表达情况.rn 结果：胃癌患者组织中TFF-3(62.5％vs.42％)和VEGF(73.75％vs.44％)表达水平显著高于对照组(P＜0.05),E-cadherin(36.25％vs.90％)水平显著低于对照组(P＜0.01);TFF-3、E-cadherin和VEGF的表达与胃癌患者性别、年龄及胃癌分化程度、瘤块大小无相关性(P＞0.05),与胃癌TNM分期、浸润程度、淋巴结转移及远处转移相关(P＜0.05,P＜O.01).rn 结论：TFF-3、E-cadherin和VEGF的表达与胃癌的发生、浸润和转移密切相关.

摘要： 为探讨肠三叶因子(TFF3)在肠道性疾病中的作用机理,本文采用酶消化法分离培养仔猪肠黏膜上皮细胞,添加不同浓度的内毒素及重组人小肠三叶因子(rhTFF3),通过检测细胞活力来观察rhTFF3抗内毒素致细胞损伤,并采用荧光定量PCR技术检测内毒素及rhTFF3对肠黏膜上皮细胞中TFF3基因表达的影响.结果,利用酶消化法成功培养仔猪肠黏膜上皮细胞,得到的细胞具有较强的活性;rhTFF3可以有效预防内毒素对肠黏膜上皮细胞的损伤(P＜0.05),且对不同浓度内毒素的预防效果不一(P＜0.05);低浓度(1、10μg/ml)内毒素可抑制TFF3基因的表达;高浓度(100μg/ml)的内毒素可促进TFF3基因的表达;而加入rhTFF3时,细胞中TFF3基因的表达也会相对降低.结果表明,酶消化法可成功培养仔猪肠黏膜上皮细胞;TFF3具有抗内毒素致新生仔猪肠黏膜上皮细胞损伤的作用;内毒素及rhTFF3可以调节细胞中TFF3基因的表达.

摘要： 为探讨肠三叶因子(TFF3)在肠道性疾病中的作用机理,本文采用酶消化法分离培养仔猪肠黏膜上皮细胞,添加不同浓度的内毒索及重组人小肠三叶因子(rhTFF3),通过检测细胞活力来观察rhTFF3抗内毒素致细胞损伤,并采用荧光定量PCR技术检测内毒素及rhTFF3对肠黏膜上皮细胞中TFF3基因表达的影响.结果,利用酶消化法成功培养仔猪肠黏膜上皮细胞,得到的细胞具有较强的活性;rhTFF3可以有效预防内毒素对肠黏膜上皮细胞的损伤(P＜005),且对不同浓度内毒素的预防效果不一(P＜0.05);低浓度(1、10μg/ml)内毒素可抑制TFF3基因的表达;高浓度(100μg/ml)的内毒素可促进TFF3基因的表达;而加入rhTFF3时,细胞中TFF3基因的表达也会相对降低.结果表明,酶消化法可成功培养仔猪肠黏膜上皮细胞;TFF3具有抗内毒素致新生仔猪肠黏膜上皮细胞损伤的作用;内毒素及rhTFF3可以调节细胞中TFF3基因的表达.

摘要： 本文将4周龄SPF级BALB/C小鼠随机分为空白组、病毒组、GCV组3组.空白组:等量0.9％氯化钠腹腔注射;病毒组:一次性腹腔注射MCMV(TCID50=105.31/ml)100μl,从接种MCMV24小时后等量0.9％氯化钠每日1次腹腔注射;GCV组:一次性腹腔注射MCMV(TCID50=105.31/ml)100μl,从接种MCMV24小时后GCV 60mg/kg每日1次腹腔注射.每组分为3天、7天、14天三个亚组.观测小鼠的生长发育情况、体重变化。以HE染色观察结肠病理，PCR法检测结肠MCMV DNA采用RT-PC R方法检测结肠的ITF, MUC2 mRNA的表达情况，初步探讨巨细胞病毒结肠炎时ITF、MUC2的变化,阐明巨细胞病毒结肠炎的可能发病机制。研究得出结论：1. MCMV感染后急性期可引起ITF, MUC2基因表达下调，恢复期ITF, MUC2基因表达上调。2.更昔洛韦对巨细胞病毒结肠炎的治疗作用可能与其抑制病毒复制，ITF、MUC2基因的表达上调有关。

摘要： 本文将4周龄SPF级BALB/C小鼠随机分为空白组、病毒组、GCV组3组.空白组:等量0.9％氯化钠腹腔注射;病毒组:一次性腹腔注射MCMV(TCID50=105.31/ml)100μl,从接种MCMV24小时后等量0.9％氯化钠每日1次腹腔注射;GCV组:一次性腹腔注射MCMV(TCID50=105.31/ml)100μl,从接种MCMV24小时后GCV 60mg/kg每日1次腹腔注射.每组分为3天、7天、14天三个亚组.观测小鼠的生长发育情况、体重变化。以HE染色观察结肠病理，PCR法检测结肠MCMV DNA采用RT-PC R方法检测结肠的ITF, MUC2 mRNA的表达情况，初步探讨巨细胞病毒结肠炎时ITF、MUC2的变化,阐明巨细胞病毒结肠炎的可能发病机制。研究得出结论：1. MCMV感染后急性期可引起ITF, MUC2基因表达下调，恢复期ITF, MUC2基因表达上调。2.更昔洛韦对巨细胞病毒结肠炎的治疗作用可能与其抑制病毒复制，ITF、MUC2基因的表达上调有关。

摘要： 本发明提供三叶因子3及三叶因子3表达促进剂在制备预防和/或治疗肝损伤药物中的应用。肝损伤包括非酒精性脂肪性肝炎、病毒性肝炎、药物性肝损伤、酒精性肝病等造成的肝损伤。本发明研究发现非酒精性脂肪性肝炎患者血清TFF3含量较健康成人降低，并与肝功能负相关，提示TFF3有保肝作用。进一步研究发现，TFF3可减轻肝细胞损伤、减轻炎症反应，并促进肝细胞增殖修复。过表达TFF3小鼠诱导的肝损伤程度较对照显著减轻。因此，可应用TFF3进行预防和治疗多种原因导致的肝损伤。

摘要： 本发明提供三维拓扑分子三叶结的制备方法，依该制备方法制得的金属三维拓扑分子三叶结和有机三维拓扑分子三叶结。该三维拓扑分子三叶结的制备方法包括：将含有联吡啶二醛类化合物的卤代烷烃类溶液与含有烷基或烷氧基桥连的联苯胺类化合物的乙腈溶液或丙酮溶液混合，得混合液，其中，所述联吡啶二醛类化合物、所述联苯胺类化合物和所述脂溶性金属模板离子的摩尔比为1∶0.8‑1.5∶0.5‑0.8；向所述混合液中加入脂溶性金属模板离子如Fe2+、Zn2+、Cu2+、Co2+、Ni2+中的一种；于45‑60°C下反应18‑24小时，制得金属三维拓扑分子三叶结。该制备方法可一步合成目标产物，产率高，且可通过微调节联苯胺类化合物的分子结构实现制备不同结构和功能的三维拓扑分子三叶结。

摘要： 本发明提供一种三叶片闭式污水泵及水力设计方法和三叶片闭式叶轮，三叶片闭式污水泵的叶轮为三叶片闭式叶轮形式，本发明主要用于输送含有纤维等易缠绕杂质的城市生活污水，采用一元理论及速度三角形在原有技术的基础上提出了一种新的污水泵水力设计方法，本发明的目的是在给出设计要求参数的情况下，利用一元理论及速度三角形设计叶轮几何参数，包括：叶轮进口直径D1、叶轮出口直径D2、叶片出口宽度b2、叶片出口安放角β2和叶片包角α，设计出防堵性较好的污水泵，能够有效提高污水泵输送含有长纤维污水的通过性能，避免发生堵塞，同时能够提高污水泵的水力性能。本发明所述污水泵适用性广，防堵性能较好，同时能够保证污水泵的有着较高的效率。

摘要： 本实用新型公开了一种易于拆装三叶桨片的双层三叶桨式反应池混凝搅拌机，该反应池混凝搅拌机旨在解决现在的混凝反应池中的污水使工作人员难以进入对三叶桨片搅动机构进行安拆的技术问题。该反应池混凝搅拌机包括反应池、对称安装于所述反应池前后两侧的活动圆台、水平对称设置于所述活动圆台之间的检修台。该反应池混凝搅拌机采用活动圆台可以在反应池内部进行旋转，令搅拌机装置在旋转的过程中露出水面以上，并随着搅拌机装置的转动，检修台同步浮出水面，方便检修人员从反应池顶部抵达检修台对搅拌机构进行安拆，而不用深入反应池内，安拆更加方便，同时，搅拌机构通过圆台的转动可以改变在反应池内的工作姿态，根据使用需要加速污水的流动。

摘要： 本发明涉及基因工程的DNA或RNA、载体和质粒，或其分离、制备或纯化。是一种采用GS115酵母菌合成重组人肠三叶因子的工艺：包括目的基因的获取、酵母表达载体的构建、酶切及测序鉴定、转化入GS115酵母菌、诱导表达和纯化六步过程。按照本发明表达方法获得的重组人肠三叶因子，表达产量可达100mg/L，提纯纯度可达95%或更高，纯化的蛋白产物经检测结果表明：用本发明表达方法获得的重组人肠三叶因子为高纯度、无热源、无内毒素，有正确的分子量，与天然的肠三叶因子有相同的等电点、氨基酸序列和紫外光谱，及其完好的生物学活性的重组蛋白。它在治疗由各种致伤因子引起的胃肠粘膜损伤等方面具有显著效果。

摘要： 本发明属于含蛋白材料的医药配制品。它是一种肠三叶因子口服制剂，其特征在于它含有肠三叶因子作为药效活性组分，还含有肠三叶因子激活剂和肠三叶因子保护剂。它在临床上用于胃肠道缺血缺氧性损伤的治疗，例如用于治疗各种原因造成的消化道溃疡、放射性肠炎、慢性胃炎、肠炎等疾病，能快速促进胃肠上皮细胞增殖，稳定胃肠粘液层，不干扰糖代谢和促进糖异生，没有促进细菌耐药基因表达和促进肿瘤细胞生长的副作用。

摘要： 本发明公开了一种以pGAP为启动子，以毕赤酵母GS115为工程菌，在发酵罐中发酵表达肠三叶因子的工艺方法，首先构建重组毕赤酵母表达载体pGAPZɑA-ITF并转化到大肠杆菌Top10中扩增，提取大肠杆菌质粒线性化后转入酵母菌GS115中，根据载体上所带的zeocin抗性基因筛选高拷贝转化子并进行组成性表达，筛选高表达中试工程菌在培养基中发酵2天分泌表达ITF；通过纯化处理得到纯度95%以上的目的蛋白ITF，产量约为200mg/L，收率约50%；本发明生产成本低，发酵周期短，纯化方法简单，无需甲醇诱导，蛋白表达量高，为ITF的大规模工业化生产奠定了良好的基础。

摘要： 本发明属蛋白分离纯化领域，涉及肠三叶因子的受体的分离方法，包括：含有肠三叶因子的固相载体的制备、肠三叶因子及其受体复合物的制备及肠三叶因子受体的获得；本方法以重组表达的带有标签的肠三叶因子融合蛋白为配体，利用标签与层析柱的高亲和力使配体蛋白挂在层析柱上，利用配体和受体的亲和力捕获细胞提取物中的肠三叶因子受体蛋白，经逐级洗脱后收集洗脱液，浓缩、纯化，获得了较高纯度的肠三叶因子受体，该受体蛋白具有与肠三叶因子特异性结合的特点；该方法操作简便，重现性好，获得的肠三叶因子受体特异性强；保持了原有蛋白的生物活性以及抗原性，比现有的从组织中提取蛋白的方法省时省力，容易获取高产量目的蛋白，同时成本低廉。

摘要： 本发明涉及基因工程的DNA或RNA、载体和质粒，或其分离、制备或纯化。是一种采用GS115酵母菌合成重组人肠三叶因子的工艺：包括目的基因的获取、酵母表达载体的构建、酶切及测序鉴定、转化入GS115酵母菌、诱导表达和纯化六步过程。按照本发明表达方法获得的重组人肠三叶因子，表达产量可达100mg/L，提纯纯度可达95％或更高，纯化的蛋白产物经检测结果表明：用本发明表达方法获得的重组人肠三叶因子为高纯度、无热源、无内毒素，有正确的分子量，与天然的肠三叶因子有相同的等电点、氨基酸序列和紫外光谱，及其完好的生物学活性的重组蛋白。它在治疗由各种致伤因子引起的胃肠粘膜损伤等方面具有显著效果。

摘要： 本发明属于含蛋白材料的医药配制品。它是一种肠三叶因子口服制剂，其特征在于它含有肠三叶因子作为药效活性组分，还含有肠三叶因子激活剂和肠三叶因子保护剂。它在临床上用于胃肠道缺血缺氧性损伤的治疗，例如用于治疗各种原因造成的消化道溃疡、放射性肠炎、慢性胃炎、肠炎等疾病，能快速促进胃肠上皮细胞增殖，稳定胃肠粘液层，不干扰糖代谢和促进糖异生，没有促进细菌耐药基因表达和促进肿瘤细胞生长的副作用。