公开/公告号CN1742996A
专利类型发明专利
公开/公告日2006-03-08
原文格式PDF
申请/专利权人 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院;
申请/专利号CN200510057294.2
申请日2005-09-27
分类号
代理机构重庆市恒信专利代理有限公司;
代理人盛元坤
地址 400038 重庆市沙坪坝区高滩岩正街29号
入库时间 2023-12-17 16:59:29
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2016-11-09
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):A61K38/18 授权公告日:20060920 终止日期:20150927 申请日:20050927
专利权的终止
2006-09-20
授权
授权
2006-05-03
实质审查的生效
实质审查的生效
2006-03-08
公开
公开
一、技术领域
本发明属於含蛋白质材料的医药配制品,特别涉及含有特异生长因子-肠三叶因子(简称ITF,以下同)的一种生物医药配制品。
二、背景技术
胃肠消化道是食物和水通向体内的走廊,经常受到机械性和化学性(特别是强酸和强碱物质)的冲击,并时常受到其它有害或有毒物质的攻击,同其它器官相比受损机会更多。现代医学研究表明,胃肠道对缺血缺氧性损伤非常敏感,在各种病理条件下胃肠道是机体最易受损害的器官之一。因此,如何减轻胃肠损伤,促进损伤修复就显得格外重要。目前临床上使用的胃肠保护药物如硫糖铝、甲氰咪瓜、雷尼替丁以及四君子汤等虽有一定疗效,但大多缺乏特异性,属于被动保护,其疗效不理想。经过多年研究发现,生长激素、各类生长因子和胃肠肽等对肠粘膜具有保护作用,能促进受损肠粘膜修复。但它们大多无特异性,除了促进肠粘膜增殖、修复外,也影响其它细胞功能,如生长激素可干扰糖代谢,促进糖异生,这限制了它在糖尿病患者和严重创伤病人中的应用,又如成纤维生长因子、胰岛素样生长因子等具有促进细菌耐药基因表达和促进肿瘤细胞生长的副作用。总之,目前用上述药物前体制备的生物医药配制品在治疗消化道疾病上存在诸多缺陷。
三、发明内容:
本发明的目的在于针对现有技术的不足,提供一种以新型的特异保护肠道的生长因子-肠三叶因子为药效活性组分的口服制剂,使之在临床上用于胃肠道缺血缺氧性损伤的治疗,疗效好,副作用小。
本发明所采用的技术方案如下:
一种肠三叶因子口服制剂,其特征在于:所用原料及它们的重量百分配比为:肠三叶因子0.0001~0.1,肠三叶因子激活剂0.1~1,肠三叶因子保护剂0.1~1,粘合剂5~10,润滑剂0.2~1,矫味剂0.5~1,着色剂0.5~1,赋型剂平衡至100。
所说的肠三叶因子指的是鼠肠三叶因子(mITF)、牛肠三叶因子(cITF)、人肠三叶因子(hITF)或基因工程重组表达的上述三种肠三叶因子,任选其中一种。
所说的肠三叶因子激活剂指的是硫糖铝或羟脯氨酰纤维素。
所说的肠三叶因子保护剂指的是复合氨基酸、维生素、多糖或金属离子磷酸盐,任选其中一种。
所说的粘合剂通常用阿拉伯胶或明胶;所说的润滑剂通常用硬脂酸镁或聚乙二醇(PEG);所说的矫味剂通常用甜菊甙、薄荷脑或柠檬酸,任选其中一种;所说的着色剂通常用绿色不溶性食用色素;所说的赋型剂通常用乳糖或蔗糖。
本发明肠三叶因子口服制剂,指的是药剂学上所说的颗粒剂、片剂、胶囊剂、糖浆剂、混悬剂、乳剂或散剂中的任何一种制剂品。
本发明的肠三叶因子口服制剂,其药效活性组分是ITF。ITF是小分子蛋白,由59个氨基酸残基构成,分子量约6~7kD;ITF包含一个特殊的保守序列,由38~39个氨基酸残基组成,其中有6个半胱氨酸;第1、5,2、4,3、6个半胱氨酸形成3个二硫键,从而产生特异而稳定的三叶结构。这种稳定的结构确保其在肠道中发挥活性,不受消化酶和PH变化的影响。ITF为肠道环状细胞分泌的特殊生长因子,体内其他组织中几乎不存在ITF,因此它具体肠道专一性。ITF与其他生长因子比较,它不仅能促进肠上皮细胞增殖,还能同肠粘液中的粘蛋白结合,稳定肠粘液层,这是ITF有别于其他生长因子,在其治疗消化道溃疡上优于其他生长因子的药理基础。
下面就本发明肠三叶因子口服制剂的药效活性组分ITF原料来源和动物试验做进一步说明。
1.药效活性组分ITF原料来源
来源一:从动物肠道提取ITF,主要可取材于小鼠、大鼠或小牛的肠道,经分离纯化得鼠肠三叶因子(mITF)和牛肠三叶因子(cITF)。
来源二:从人胎粪中提取纯化人肠三叶因子(hITF)。
来源三:基因工程重组表达的上述三类肠三叶因子。
上述来源已有文献报道,纯度在95%,不同来源的肠三叶因子对药效没有明显差异。
2.动物试验
采用30%体表面积III度烧伤大鼠模型,观察烧伤后大鼠肠道受损情况,及使用ITF和表皮生长因子(以下简称EGF)后对动物肠粘膜损伤程度和修复速率的影响。烧伤模型制作:大鼠伤前禁食12小时,1%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉,背部电推剃毛,后置剃毛区于92℃水浴中18秒,造成30%TBSAIII度烧伤。伤后按40ml/kg腹腔注入乳酸林格氏液抗休克。ITF组大鼠每天使用重组表达的人肠三叶因子10μg/kg,EGF组使用同等剂量的重组人EGF,其他治疗措施与烧伤对照组相同,观察烧伤1、3、5、7天肠粘膜受损和修复情况。
(1)烧伤后大鼠肠粘膜损伤指数的变化
在光镜下肠粘膜损伤情况,采用Ogura记分法,分值越高表示损伤越重。烧伤后肠粘膜广泛受损,损伤指数大幅上升,和烧伤对照组相比,ITF组和EGF组在烧伤后3~7天肠粘膜损伤程度明显减轻(P<0.01),ITF和EGF两组间未见显著差异(P>0.05)。
表1烧伤大鼠肠粘膜损伤指数的变化(n=8)
注:与正常对照组比较:**p<0.01;与烧伤对照组比较:ΔΔp<0.01
(2)烧伤大鼠血浆二胺氧化酶(DAO)活性的改变
DAO活性是反应肠粘膜损伤敏感的酶学指标,酶活性越高标明肠粘膜损伤越重。结果显示,DAO在伤后第1天就达峰值,后有逐渐降低的趋势,至伤后7天仍明显高于伤前,同烧伤对照组相比,ITF组和EGF组大鼠血浆DAO活性在伤后1~7天均明显降低(P<0.05~0.01),ITF和EGF两组间未见显著差异(P>0.05)。
表2烧伤大鼠血浆二胺氧化酶(DAO)活性的改变(U/ml,n=8)
注:与正常对照组比较:**p<0.01;与烧伤对照组比较:Δp<0.05,ΔΔp<0.01
(3)烧伤大鼠肠粘膜厚度的变化
光镜下观察发现,烧伤后肠粘膜受损严重。随着病程进展,肠粘膜有变薄的趋势,从伤后第3天开始粘膜厚度明显低于伤前,ITF组和EGF组大鼠肠粘膜变薄的程度低于烧伤对照组(P<0.05~0.01)。ITF组肠粘膜较EGF组厚,但两组无显著差异(P>0.05)。
表3烧伤大鼠肠粘膜厚度的变化(μm,n=8)
注:与正常对照组比较:**p<0.01;与烧伤对照组比较:Δp<0.05,ΔΔp<0.01
(4)肠粘液厚度的变化
烧伤可导致肠道粘液层变薄,除伤后第1天粘液厚度一过性增高外,其余各时相均显著降低。ITF组在伤后5~7天显著高于烧伤对照组和EGF组(P<0.01)。
表4烧伤大鼠肠粘液层厚度的变化(x±s,mg,n=8)
注:与ITF组比较:##p<0.01;与烧伤对照组比较:ΔΔp<0.01
(5)烧伤大鼠肠粘液中粘蛋白含量的变化
烧伤后肠粘液中粘蛋白含量呈下降趋势,ITF组大鼠在伤后5~7天明显高于烧伤对照组和EGF组(p<0.01)。
表5烧伤大鼠肠粘液中粘蛋白含量的变化(x±s,mg/ml,n=8)
注:与ITF组比较:##p<0.01;与烧伤对照组比较:ΔΔp<0.01
(6)烧伤大鼠肠粘膜增殖指数的变化
烧伤后肠粘膜增殖能力下降,表现为增殖指数降低,ITF组和EGF组大鼠肠粘膜增殖受抑的程度较烧伤对照组轻(P<0.05~0.01),ITF促细胞增殖的作用较EGF快,在伤后3天就显示出疗效,而EGF在伤后5天才显出疗效。但两组间的差异无统计学意义
表6烧伤大鼠肠粘膜细胞增殖指数的变化(%,n=8)
注:与正常对照组比较:**p<0.01;与烧伤对照组比较:Δp<0.05,ΔΔp<0.01
动物试验表明,烧伤可导致动物肠粘膜严重受损,使用ITF和EGF都能明显减轻肠道受损程度,促进肠粘膜修复。但ITF的作用更明显,特别是对肠粘液的维护其疗效明显优于EGF。
本发明的肠三叶因子口服制剂,临床上用于胃肠道缺血缺氧性损伤的治疗,例如用于治疗各种原因造成的消化道溃疡、放射性肠炎、慢性胃炎、肠炎等疾病,能快速促进胃肠上皮细胞增殖,稳定胃肠粘液层,不干扰糖代谢和促进糖异生,没有促进细菌耐药基因表达和促进肿瘤细胞生长的副作用。
五、具体实施方式
下面是本发明肠三叶因子口服制剂的几种片剂实施例,但本发明的口服制剂不局限于片剂。
实施例1
将乳糖5.3kg、舌菊甙6g以及着色剂50g混匀后加入阿拉伯胶0.48kg制成均匀的软材,通过16目筛制粒。湿粒在45℃烘箱中干燥,干粒过14目筛整粒。另取95%乙醇50ml与10g薄荷油混溶,均匀喷在干颗粒上。均匀加入60g硬脂酸镁,置敞口容器中放置1小时,再将肠三叶因子0.1g、硫糖铝30g和10g甘氨酸、5g赖氨酸、15g维生素C、1gNa3PO4的混合物混匀后加入,压10000片即可,每片含ITF10μg。
实施例2:
制取工艺同实施例1,配料如下:
肠三叶因子(上述ITF中的任意一种) 0.1g
硫糖铝 10g
几丁质 15g
维生素C 15g
Na3PO4 1g
乳糖 5.4kg
甜菊甙 10g
柠檬酸 40g
着色剂 40g
阿拉伯胶 0.35kg
薄荷油 20g
聚乙二醇 12g
压10000片即得,每片含ITF10μg。
实施例3
制取工艺同实施例1,配料如下:
肠三叶因子(上述ITF中的任意一种) 0.1g
羟脯氨酰纤维素 60g
甘氨酸 20g
赖氨酸 10g
几丁质 8g
维生素C 20g
Na3PO4 0.5g
蔗糖 5.1g
甜菊甙 10g
柠檬酸 40g
着色剂 50g
明胶 0.6kg
薄荷油 10g
压10000片即得,每片含ITF10μg。
机译: 肠三叶因子受体
机译: 肠三叶因子受体
机译: 制备和合成小肽的方法及试剂盒,用于制备肽C-AcaQALGNQAVGHLMNH2,类似物Bombesin(BN2),放射标记有放射性核素tc-99m和rE-188的临床应用以及类似物的临床应用肿瘤治疗。