肌球蛋白轻链

摘要： 目的:研究小GTP结合蛋白(Rho)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)大鼠急性缺血性卒中发生中的作用,为OSAHS后急性缺血性卒中病变的防治提供参考.方法:50只SD大鼠随机分为假手术组、OSAHS组、卒中组、OSAHS后卒中组和Rho抑制剂组(C3转移酶5μg·kg-1·d-1腹腔注射),每组10只.采用慢性间歇性低氧建立OSAHS模型,线栓法阻断大脑中动脉建立急性脑卒中模型.观察各组大鼠建模后的一般情况和脑皮质区组织病理形态表现,计算脑梗死体积.比较各组大鼠呼吸频率和神经功能损伤评分,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组大鼠脑组织中肌球蛋白轻链(MLC)、Rho和ROCK mRNA及蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,其他各组大鼠均有精神状态不佳和脑皮层结构损伤等改变,其中OSAHS后卒中组大鼠变化最严重,Rho抑制剂组变化较轻.与假手术组比较,OSAHS组大鼠呼吸频率增加(P<0.05);与OSAHS组比较,卒中组大鼠呼吸频率降低(P<0.05);与卒中组比较,OSAHS后卒中组大鼠呼吸频率和Longa评分增加(P<0.05),Rho抑制剂组大鼠Longa评分降低(P<0.05);与OSAHS后卒中组比较,Rho抑制剂组大鼠呼吸频率与和Longa评分均降低(P<0.05).与假手术组比较,OSAHS组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05);与OSAHS组比较,卒中组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05);与卒中组比较,OSAHS后卒中组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数减少(P<0.05);与OSAHS后卒中组比较,Rho抑制剂组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05).与卒中组比较,OSAHS后卒中组大鼠脑梗死体积增大(P<0.05);与OSAHS后卒中组比较,Rho抑制剂组大鼠脑梗死体积缩小(P<0.05).与假手术组比较,OSAHS组大鼠脑组织中Rho和ROCK mRNA和蛋白表达水平及p-MLC/MLC比值升高(P<0.05);与OSAHS组比较,卒中组大鼠脑组织中Rho和ROCK mRNA及蛋白表达水平及其p-MLC/MLC比值升高(P<0.05);与卒中组比较,OSAHS后卒中组大鼠脑组织中Rho和ROCK mRNA及蛋白相表达水平及其p-MLC/MLC比值升高(P<0.05);与OSAHS后卒中组比较,Rho抑制剂组大鼠脑组织中Rho和ROCK mRNA及蛋白表达水平及其p-MLC/MLC比值降低(P<0.05).结论:OSAHS的间歇性缺氧状态可损伤神经功能,Rho/ROCK信号通路可能在OSAHS大鼠急性缺血性卒中发生中起一定作用.

摘要： 目的 探讨RhoA/Rho激酶1(ROCK1)下调抑制肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化在主动脉夹层(AD)形成过程中的作用.方法 检测正常(NA)和AD主动脉原代平滑肌细胞(SMC)中RhoA/ROCK1的表达与MLC的磷酸化程度.免疫荧光观察SMC中MLC磷酸化程度和结构.β-氨基丙腈(BAPN)联合应用ROCK1抑制剂Fasudil,验证RhoA/ROCK1下调在AD形成中的作用.组间比较采用t检验或x2检验,Kaplan-Meier生存曲线采用非参数检验.结果 NA组和AD组年龄(t=-1.439,P＞0.05)、性别(x2=0.900,P＞0.05)差异无统计学意义,AD组高血压患者多于正常组(x2=5.562,P＜ 0.05).AD主动脉SMC中RhoA(NA: 42 782±31 339,AD:6975±3 130,t=2.585,P＜0.05)和ROCK1表达下调(NA:64 626±38 822,AD: 13 851±961,t=2.977,P＜0.05),MLC磷酸化减少(NA:230 193±27 749,AD:51 142 ±48 151,t =6.561,P＜0.01).免疫荧光显示AD组SMC和Fasudil处理的SMC中MLC磷酸化降低,结构受损.Fasudil联合BAPN的夹层形成率(100％)高于BAPN的夹层形成率(50％,x2=22.780,P＜0.01).结论 RhoA/ROCK1下调抑制MLC磷酸化促进了AD的发生.

摘要： 目的 通过观察电针"次髎""三阴交""中极"穴对完全性骶髓损伤神经源性膀胱(neurogenic bladder,NB)模型大鼠尿流动力学及逼尿肌组织中肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)和磷酸化肌球蛋白(phosphorylated myosin,p-MLC)表达的影响,探究电针治疗完全性骶髓损伤后NB的可能机制.方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为两组,一组随机分为空白组和假手术组各12只,剩余大鼠采用改良Hassan Shaker脊髓横断法制成骶髓损伤NB大鼠模型,成模后随机分为模型组和电针组各12只,电针组大鼠术后第20天取双侧"次髎""三阴交"及"中极"进行电针干预,连续10 d,1次/d,20 min/次,其余大鼠不做干预处理;干预结束后对比观察各组大鼠尿流动力学检测结果 ,HE染色后光镜下观察各组大鼠逼尿肌组织形态学变化,Western blot法比较逼尿肌组织中MLCK、MLC、p-MLC蛋白表达情况.结果 (1)与空白组、假手术组相比,模型组大鼠漏尿点压力明显下降(P<0.01),膀胱最大容量和顺应性显著增大(P<0.01);与模型组相比,电针组大鼠漏尿点压力显著升高(P<0.01),膀胱最大容量和顺应性降低(P<0.05或P<0.01).(2)光镜下空白组、假手术组逼尿肌形态结构正常,模型组肌纤维萎缩严重、大量的间质结构填充,电针组肌纤维轻度萎缩.(3)与空白组、假手术组相比,模型组逼尿肌中MLCK、MLC、p-MLC的含量显著降低(P<0.01);与模型组相比,电针组逼尿肌中MLCK、MLC、p-MLC蛋白含量增高(P<0.05或P<0.01).结论 电针穴位"次髎""三阴交"及"中极"能够减轻完全性骶髓损伤NB模型大鼠逼尿肌萎缩、提高漏尿点压力、降低膀胱最大容量和顺应性从而改善膀胱排尿功能,通过提高逼尿肌组织中MLCK、MLC、p-MLC含量从而增加膀胱逼尿肌的收缩能力可能是电针产生治疗效应的机制之一.

摘要： Coronary artery spasm(CAS)is a hyper-contraction of segmental coronary artery in response to multiple stimuli. At present, it's still in lack of specific diagnostic indicators of sudden cardiac death caused by CAS. This review summarizes current researches on the mechanisms of CAS and describes the roles of vascular endothelial dysfunction and vascular smooth muscle hypersensitivity in the course of CAS. Furthermore, the molecular mechanisms of the endogenous NO and endothelin-1 cause vascular endothelial dysfunction, and the phosphorylation of MLC2, Rho kinase and endoplasmic reticulum stress related to vascular smooth muscle hypersensitivity are discussed. Meanwhile, the possibility of forensic application for the related molecules on the diagnosis of sudden cardiac death caused by CAS are also explored.%冠状动脉痉挛是指局部冠状动脉对各类刺激的过收缩反应.目前缺乏对冠状动脉痉挛导致心脏性猝死的特异性诊断指标.本文总结了目前国内外对冠状动脉痉挛发病机制的研究进展,介绍血管内皮功能障碍和血管平滑肌兴奋性增高在冠状动脉痉挛过程中的作用,并对引起血管内皮功能障碍的内源性一氧化氮、内皮素-1,与血管平滑肌兴奋性增高有关的MLC2磷酸化、Rho激酶及内质网应激的分子作用机制展开阐述,探讨相关分子在诊断冠状动脉痉挛导致心脏性猝死法医鉴定中的可能性.

摘要： 目的:观察夹脊电针对脊髓损伤大鼠神经细胞轴突再生相关抑制因子重组人Ras同源物基因家族成员A(RhoA)、Rho蛋白激酶Ⅱ(ROCK Ⅱ)、肌球蛋白轻链(MLC)蛋白的影响,探讨夹脊电针治疗急性脊髓损伤(ASCI)的作用机制.方法:雌性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、夹脊电针组、抑制剂组,每组12只.采用脊髓打击法制备大鼠ASCI模型.夹脊电针组于模型制备成功后3h进行夹脊电针治疗,每日1次,每次30 min,连续治疗14 d、28 d;抑制剂组于造模成功后立即给予腹腔注射盐酸法舒地尔(10 mg/kg),每日1次,连续治疗14 d、28 d.采用BBB评分法评估大鼠后肢运动功能变化,免疫组化法检测各组大鼠脊髓组织中RhoA、ROCK Ⅱ、MLC蛋白的表达情况.结果:BBB评分结果显示:与假手术组比较,造模后14 d、28d模型组大鼠运动功能评分显著降低(P＜0.05);与模型组比较,造模后14 d、28 d夹脊电针组、抑制剂组大鼠运动功能评分均显著升高(P＜0.05);夹脊电针组、抑制剂组造模后28 d大鼠肢体运动功能评分较造模后14 d显著升高(P＜0.05).免疫组化结果显示:与假手术组比较,造模后14d、28 d模型组大鼠脊髓组织RhoA、ROCK Ⅱ、MLC阳性细胞数增加(P＜0.05);与模型组相比,造模后14 d、28 d夹脊电针组、抑制剂组大鼠脊髓组织RhoA、ROCK Ⅱ、MLC阳性细胞数显著降低(P＜0.05);夹脊电针组、抑制剂组造模后28 d大鼠脊髓组织RhoA、ROCK Ⅱ、MLC阳性细胞数较造模后14 d显著降低(P＜0.05).结论:夹脊电针能够显著改善ASCI大鼠肢体运动功能,其作用机制可能与抑制大鼠脊髓损伤组织微环境Rho-ROCK Ⅱ信号通路RhoA、ROCK Ⅱ、MLC抑制因子表达有关.

摘要： 目的 观察运脾开胃方含药血清对人胃窦平滑肌细胞(HGSMCs)内 Ca2+、MLC、p-MLC的干预作用以及与 Ghrelin受体(GHSR)的关系,研究运脾开胃方治疗厌食症的机制.方法 培养 HGSMCs,制备低、中、高浓度的运脾开胃方含药血清;采用激光共聚焦、Western blot法检测运脾开胃方含药血清对 HGSMCs 内 Ca2+、MLC、p-MLC 的影响;阻断 HGSMCs 表面GHSR并干扰细胞内外Ca2+的正常调控,研究运脾开胃方含药血清对 HGSMCs 内 p-MLC的干预机制.结果 低、中、高剂量组运脾开胃方含药血清能在一定时间范围内上调 HGSMCs 内 Ca2+的相对荧光强度(P<0.05~0.01);低、中、高剂量组运脾开胃方含药血清能在10 min时显著上调 HGSMCs内 p-MLC水平(P<0.05~0.01);(D-Lys3)-GHRP-6、Thapsigargin、D-HBSS液能显著抑制高剂量运脾开胃方含药血清在10 min时对 p-MLC的上调作用(P<0.01).结论 运脾开胃方含药血清可能通过激活 GHSR提高细胞内Ca2+水平来促进 MLC磷酸化.%OBJECTIVE To observe the effect of spleen appetizer formula(SAF)containing serum(SAF-CS)on Ca2+, MLC and the p-MLC in human gastric smooth muscle cells(HGSMCs)and the relationship with Ghrelin receptor(GHSR), and to explore the mechanism of SAF for treating anorexia.METHODS HGSMCs were cultured,while the low,medium and high concentrations of SAF-CS were prepared;Confocal laser detection method and Western blot were used to test the effects of SAF-CS on Ca2+,MLC and p-MLC;The GHSR existed on the surface of HGSMCs was blocked and the normal rgulation of intracellular and extracellular Ca2+were abolished to study the mechanism of SAF-CS effect on p-MLC.RESULTS Low,me-dium and high dose group of SAF-CS up-regulated the relative fluorescence intensity of Ca2+in a certain time range(P<0.01, P<0.05)in HGSMGs;low,medium and high dose group of SAF-CS markedly increased the level of p-MLC at 10 min in HGSMCs(P<0.01,P<0.05);(D-Lys3)-GHRP-6,Thapsigargin,D-HBSS solution significantly inhibited the up-regula-tion of p-MLC by the high dose of SAF-CS at 10 min(P<0.01).CONCLUSION The SAF-CS may increase intracellular Ca2+levels and promote phosphorylation of MLC via activating GHSR.

摘要： 肠黏膜通透性改变与肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的调节密切相关,MLCK介导磷酸化肌球蛋白轻链(P-MLC)所引起的细胞骨架收缩是引起肠黏膜上皮屏障功能破坏的必要因素,多种信号分子可通过不同的信号通路激活MLCK,从而引起肠黏膜上皮屏障功能紊乱.本文分别从MLCK的结构、生物学功能以及MLCK在不同信号通路中对肠黏膜上皮屏障的调控作用及机制进行阐述,以期为今后探索防治肠黏膜上皮屏障功能损伤的新型技术措施提供思路和理论支持.

摘要： 血管平滑肌的舒张与收缩是调节血管外周阻力和血压的重要因素,其功能紊乱可能导致高血压。血管调控剂通过细胞内信号转导通路影响肌球蛋白轻链磷酸化水平,从而调节血管平滑肌的收缩。此过程中蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)是重要调节因子。研究发现,血管平滑肌中PKC的表达或活性增加可以引起血管过度收缩以及营养性血管变化,导致血管阻力增加和高血压,且PKC突变可能影响个体对血管反应性的敏感性。本文就PKC对高血压状态下血管平滑肌收缩的调节作用及机制进行阐述。

摘要： 阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)是心血管疾病的独立危险因素,慢性间歇性低氧(CIH)所致的血管内皮损伤是其重要的病理生理学机制.研究发现OSA的发病率及合并心血管疾病发生率存在性别差异.本研究拟通过CIH暴露的小鼠模型,研究CIH下小鼠血管损伤相关蛋白质表达谱的性别差异,以探讨CIH下雌性小鼠耐受心血管损伤的机制,为相关药物开放提供理论依据.

摘要： 根据Frank-starling定律,慢性心力衰竭的形成与代偿期及失代偿期心肌收缩能力的变化密切相关.心肌细胞肌球蛋白轻链激酶(cMLCK)可调控心肌收缩力.二甲双胍(metformin,Met)被证实是一种单磷酸腺苷活化激酶(AMPK)激活剂,激活的AMPK被证实可降低大动脉平滑肌的收缩.为此,本研究拟通过二甲双胍激活AMPK-cMLCK-MLC信号通路,验证AMPK活性在心力衰竭形成过程中对心肌收缩力的影响.结果表明激活态的AMPK可以通过调控cMLCK与p-MLC的表达来降低压力负荷条件下心肌细胞的收缩力，从而延缓小鼠慢性心力衰竭的形成。

摘要： 本研究利用蛋白质组学技术对1.5Gy、3Gyγ射线照射的人支气管上皮细胞和未经照射的人支气管上皮细胞蛋白差异表达谱进行了分析与鉴定。研究结果表明：2-D电泳后在分子量14.4～94 kD，等电点3～10范围内分离出约1000多个不同蛋白质斑点。凝胶图象显示1.5Gy的γ射线照射后与对照组相比有15个蛋白点上调，104个下调；3Gy的γ射线照射后有20个蛋白点上调，144个下调；二个不同照射剂量共同表达的差异蛋白点有18个，其中上调的有3个，下调的有15个。通过对选取的10个蛋白点进行质谱分析，有8个蛋白点的肽段在数据库中找不到相应的蛋白，有可能是尚未发现的新蛋白；有2个蛋白点(样品D和样品660)经检索鉴定为肌球蛋白轻链(MLC)。这些蛋白表达量的改变可能与辐照诱发肺部肿瘤的发生有关，为进一步研究肺癌的发病机理提供了一定的基础。

摘要： 本发明为淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法，试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、硫酸镁、dNTP(含dUTP)、Taq酶、上游引物、下游引物、SYBR Green I染料，鱼类淡水鱼类肌球蛋白调节轻链基因表达量的快速检测方法包括鱼的总RNA提取、鱼类肌球蛋白基因的实时荧光PCR扩增和结果判定。本发明的优点是需要量少、快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。

摘要： 本发明涉及药物领域，具体涉及具有促进免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白，具有减轻急性炎症反应对机体破坏的多肽。其序列为MQISEPEITPEY是全新的序列，它们可以在体内试验中增加内毒素休克小鼠的生存率，具有潜在的新药开发价值。

摘要： 本发明为淡水鱼类肌球蛋白调节轻链mRNA表达量快速检测试剂盒及其检测方法，试剂盒包括PCR扩增反应液A、对照cDNA；PCR扩增反应液A含有10×PCR反应缓冲液、硫酸镁、dNTP(含dUTP)、Taq酶、上游引物、下游引物、SYBR Green I染料，鱼类淡水鱼类肌球蛋白调节轻链基因表达量的快速检测方法包括鱼的总RNA提取、鱼类肌球蛋白基因的实时荧光PCR扩增和结果判定。本发明的优点是需要量少、快速、特异性强、灵敏度高、操作简便、重复性好。

摘要： 本发明公开了一种编码双峰驼肌球蛋白的核苷酸序列、双峰驼肌球蛋白及应用，涉及基因工程技术领域。本发明的主要技术方案为：一种编码双峰驼肌球蛋白的核苷酸序列，所述核苷酸序列是序列表中SEQ ID NO:1第21-5939位。或者，所述核苷酸序列为在高严谨条件下与序列表中SEQ ID NO:1第21-5939位的核苷酸序列杂交且编码双峰驼肌球蛋白。或所述核苷酸序列与序列表中SEQ ID NO:1第21-5939位的核苷酸序列具有90％以上同源性且编码双峰驼肌球蛋白。本发明还提供一种双峰驼肌球蛋白，由如上所述核苷酸序列编码。优选的双峰驼肌球蛋白由序列表中SEQ ID NO:2所示的氨基酸组成。

摘要： 本发明涉及药物领域，具体涉及具有促进免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白，具有减轻急性炎症反应对机体破坏的多肽。其序列为AMVEPHSQARMRCGF是全新的序列，它们可以在体内试验中增加内毒素休克小鼠的生存率，具有潜在的新药开发价值。

摘要： 本发明涉及药物领域，具体涉及具有促进免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白，具有减轻急性炎症反应对机体破坏的多肽。其序列为mPEG-SC

摘要： 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链I诊断试剂，主要包括人心肌肌球蛋白轻链I基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法，即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原——心肌肌球蛋白轻链I，用多抗作为检测抗体，根据酶与底物反应后所测得的ELISA读数值与本发明提供的临界值(cut off值)比较，大于cut off值的，判断为急性心肌梗塞发病期。

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及检测抗肌球蛋白轻链1‑IgG自身抗体的试剂在制备检测血管内皮损伤的试剂盒中的应用。本发明首次发现针对血管内皮细胞的一种抗Myosin light chain 1的自身抗体。通过检测抗原蛋白Myosin lightchain 1、抗Myosin light chain 1‑IgG抗体能够检测血管内皮损伤，填补了国内外鉴别血管内皮损伤自身抗体的空白。

摘要： 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂,主要包括人心肌肌球蛋白轻链Ⅰ基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法,即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原—心肌肌球蛋白轻链Ⅰ,用多抗作为检测抗体,根据酶与底物反应后所测得的ELISA读数值与本发明提供的临界值(cut off值)比例,大于cut off值的,判断为急性心肌梗塞发病期。

摘要： 公开了肌球蛋白轻链激酶抑制剂，包括该抑制剂的药物组合物和试剂盒及使用方法。