小孢子

摘要： 【目的】探明栽培草莓小孢子具有胚发生能力时期的花器形态,以期为小孢子培养田间准确取样提供参考。【方法】以章姬、红颜、黔莓1号和黔莓2号4个草莓品种为试材,观察测定小孢子花粉母细胞时期、四分孢子时期、单核早期、单核中期、单核晚期和双核期6个发育时期花蕾、花瓣、花药外观形态及花蕾纵横径、主副萼长、花瓣长和花药长的变化。【结果】章姬、红颜、黔莓1号和黔莓2号4个草莓品种小孢子细胞学发育时期与花蕾形态存在相关性,除主副萼比外,各品种小孢子细胞学不同发育时期花蕾的横径、纵径、主萼长、副萼长、花瓣长和花药长均随发育时期的推进而不断增大,可根据其指标明确断定小孢子的发育时期;小孢子单核晚期,4个草莓品种花蕾外观上均为花蕾膨大、饱满,副萼开张,主萼闭合,看不到花瓣,花药柠檬黄色,不透明;花蕾纵径、花蕾横径、主萼长、副萼长、花瓣长和花药长分别为9.47~9.93 mm、6.39~7.39 mm、10.65~11.85 mm、11.13~12.55 mm、5.00~5.65 mm和1.63~1.70 mm,各品种间花蕾纵径和花药长差异不显著,可作为不同草莓材料取样时期的鉴定指标。【结论】栽培草莓小孢子单核晚期发育阶段的判断标准为花蕾膨大、饱满,副萼开张,主萼闭合,看不到花瓣,花药柠檬黄色,花蕾纵径和花药长分别为9.47~9.93 mm和1.63~1.70 mm。

摘要： 为探究辣椒细胞质雄性不育材料B351A小孢子败育的时期及细胞学机制,小孢子发育时期与花蕾外观形态特征的关系,本研究采用半薄切片法对辣椒细胞质雄性不育系B351A及其保持系B351B的小孢子不同发育时期的细胞学形态进行了观察,并对不同时期对应花蕾外观形态进行了测量和描述。结果表明,雄性不育材料B351A小孢子败育发生在花粉母细胞减数分裂期,此时部分绒毡层细胞高度液泡化,体积径向增加,挤压药室导致花粉母细胞畸形,不能完成减数分裂形成四分体而败育。供试材料花粉母细胞时期或之前时期最明显的特征是花萼紧闭;四分体时期花萼微开,纵径3.11±0.40 mm,横径2.77±0.30 mm;当花冠与花萼等长时处于单核靠边期。花蕾外观形态特征可作为判断小孢子发育时期的依据,从而方便选取所需的小孢子对应的花蕾。

摘要： 应用游离小孢子培养技术获得单倍体,进而加倍成后代完全纯合的双单倍体植株(DH植株),在创制菜心优良自交系和提高育种效率方面具有明显优势。本文总结了菜心小孢子培养技术的发展历程,并提出了现阶段该技术面临的主要问题,以期为今后菜心小孢子技术的进一步发展和应用提供参考。

摘要： 本研究利用;Co-γ辐射诱变松香早粳种子获得一个稳定遗传的水稻雄性不育突变体dtp1,为了研究其不育的发生机制并克隆目的基因,对其进行形态学观察、细胞学分析和基因定位。结果表明,dtp1突变体能完成正常的营养生长,但花药瘦小呈浅黄色,属无花粉型雄性不育突变体。石蜡切片的分析结果发现dtp1突变体能进行正常的减数分裂,与野生型(WT)相比,在小孢子发育时期dtp1突变体绒毡层染色较浅、小孢子形状不规则,后期绒毡层异常膨大,小孢子不能形成花粉粒。遗传学分析结果表明dtp1突变体受单隐性核基因控制,通过图位克隆的方法将DTP1基因定位在7号染色体SYrbC7-2680809和SYrbC7-2832575之间,物理距离为151.7 kb,共包含14个开放阅读框。本研究为进一步进行DTP1基因的克隆与功能分析奠定了理论基础。

摘要： 该研究采用光学显微镜和扫描电镜,观察罗汉松雄球花、小孢子及其配子体发育过程的形态结构特征,以揭示罗汉松小孢子的发生和雄配子体的发育规律,为罗汉松的生殖和杂交组合提供胚胎学证据。结果发现:(1)罗汉松花芽于每年的7月开始分化,至次年5月花粉成熟散粉,雄球花由单生的卵圆形转为2~3个葇荑花序并生,小孢子叶螺旋状着生于圆柱状的花序轴上,每一小孢子叶远轴面基部并列着生2个小孢子囊。(2)小孢子囊壁发育过程中由外及里出现各由1层薄壁细胞组成的表皮、药室内壁、中层和绒毡层,至散粉前,后两者基本被分解吸收。(3)同一小孢子囊内的造孢细胞发育在时间上存在差异,小孢子母细胞减数分裂后形成的四分体有四面体型和十字交叉型两种排列方式,成熟的雄配子体包括生殖细胞和粉管细胞,发育过程中出现的第一和第二原叶细胞大部分被分解消失。(4)电镜下罗汉松花粉粒为典型的松花型花粉,两侧各具1个气囊,远极面具一萌发沟,花粉粒表面具纹理或皱褶。

摘要： 对茎瘤芥品种甬榨2号不同发育时期的花药及小孢子进行细胞学观察,明确小孢子发育各时期的细胞结构特征;观察、测定小孢子不同发育时期的花器官形态指标,进而分析小孢子发育时期与花器官形态的相关性。结果表明,甬榨2号小孢子形成经历了小孢子母细胞时期、四分体时期、单核早中期、单核后期、双核时期及三核时期,各时期特征明显,且与花器官外部形态指标具有一定的相关性。单核后期、双核时期的花药和花瓣颜色特征明显,而且双核时期的的花瓣长于花药,由此可肉眼简单区分出甬榨2号小孢子发育的单核后期;小孢子各发育时期的花蕾纵径和花蕾横径均差异显著,且花蕾纵茎测量简单方便,甬榨2号单核后期的花蕾纵径范围为3.50~3.79 mm,可依据此标准进一步确定处在单核后期的花蕾。

摘要： 几乎所有中文植物学教材都把花粉管当成是种子植物对受精摆脱水束缚的适应特征,并得出粉管受精使种子植物更适应于陆生生活的结论.但是,某些灭绝的(种子蕨和科得荻植物)和一些现存的(银杏和苏铁)裸子植物行游动受精,需要特别指出的是其受精并不需要液态水.种子蕨和科得荻植物不形成花粉管,银杏和苏铁的花粉管是吸器而无输送精子的功能.其实,正是小孢子在小孢子囊中的原位发育导致植物演化出花粉和传粉,花粉的形成及其传播才使受精真正摆脱了水的限制.澄清花粉管的功能可作为植物学批判性教学的案例,以促进学生们科学精神和科学思维的发展.

摘要： 采用石蜡切片技术对宝华玉兰[Yulania zenii(W.C.Cheng)D.L.Fu]大小孢子发生和雌雄配子体发育过程中的解剖结构进行观察.结果显示:宝华玉兰的小孢子发生和雄配子体发育从8月上旬开始,至翌年3月上旬结束;其大孢子发生和雌配子体发育从12月中下旬开始,至翌年4月上旬结束,雌配子体成熟时间比雄配子体晚约30 d.宝华玉兰有雄蕊64～72个,离生,由下至上螺旋状排列,每个成熟花药具4个花粉囊;从孢原细胞开始,在经历了"孢原细胞分化期、小孢子母细胞形成期、单核绒毡层形成期、双核绒毡层形成期、小孢子发育期、二分体期、四分体期、单核居中期、单核靠边期、单核花粉期、双核花粉期"等过程后形成成熟花药.其成熟花粉为二细胞型;同一个花药中花粉囊发育不同步且小孢子四分体的排列方式不同;其雄配子体发育异常现象主要出现在四分体小孢子释放后,即在单核居中期前出现发育停滞现象,最终成熟花粉的败育率达61.3％.宝华玉兰的雌蕊由146～150个浅紫色离生心皮组成,由下至上螺旋状排列;每个心皮含2个胚珠,倒生、双珠被、厚珠心、边缘胎座;从胚珠原基开始,在经历了"胚珠发育初期、孢原细胞形成期、大孢子母细胞形成期、功能大孢子形成期、单核胚囊期、二核胚囊期、四核胚囊期、八核胚囊期"等过程后形成成熟胚囊.其大孢子为单孢子发生型,四分体直线型排列,合点端为功能大孢子,成熟胚囊为7胞8核蓼型胚囊;其雌配子体发育异常现象主要出现在二核胚囊期至八核胚囊期,最终成熟胚囊的卵细胞败育率达79.5％.研究结果表明:在宝华玉兰大小孢子发生和雌雄配子体发育过程中均出现发育异常现象,导致大部分的花药和卵细胞败育,这是宝华玉兰结实率低的重要致因之一.

摘要： 以天津蓟州区发现的野生山樱桃花芽和花蕾为试验材料,采用石蜡切片法对野生山樱桃大小孢子发生、雌雄配子体发育过程和雌雄性细胞发育的对应关系进行了研究.结果表明:野生山樱桃花药为蝶形,有4个药室,花药壁由内而外分别是绒毡层、中层、药室内壁和表皮,四分体为正四面体.大孢子发生过程中,孢原细胞分裂产生造孢细胞,进而分裂形成大孢子母细胞.大孢子母细胞减数分裂成线性排列的四分体,形成4个大孢子,最后只有1个功能大孢子最终发育成胚囊.部分山樱桃子房中形成双胚珠,其中一个可以发育成成熟胚珠,另一个退化消失.山樱桃雄蕊发育早于雌蕊.

摘要： 以四川杉木种子园母株为试验材料,观察春季雄球花和小孢子叶球外部形态发育与小孢子发育的对应关系,结果表明,同一个小孢子叶球上的小孢子叶发育基本同步;小孢子叶的颜色和长度与小孢子发育极其相关,小孢子叶球整体呈青色、长5?mm时,其内部小孢子基本处于四分体时期;当小孢子叶之间的鳞片失水变黄、小孢子囊壁变为淡黄色时,其内部小孢子基本处于单核靠边期,采集小孢子叶球为此状态的雄球花,在干燥温室中放置12～24?h后,能收获大量成熟的、活力旺盛的花粉.

摘要： 以不同基因型的青梗菜品种为试材,通过在小孢子胚诱导培养基中添加3种组蛋白去乙酰化酶抑制剂——曲古抑菌素A(TSA)、辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)和丁酸钠(NaB)来促进其小孢子的胚胎发生和植株再生.这3种抑制剂对3种青梗菜的小孢子胚胎发生和直接成苗均有促进作用.TSA对3种青梗菜'421','424','426'的小孢子胚胎发生最佳的浓度为0.075、0.05、0.025μM.SAHA对'421','424','426'的小孢子胚胎发生最佳的浓度为0.05、0.075和0.025μM.2μM NaB处理对于3种青梗菜的小孢子胚胎发生的促进效果最好.'421'的小孢子在加入0.05μM SAHA的NLN-13培养基中胚诱导率直接成苗率最高为75.01％.0.05μM TSA和0.5μNaB浓度下的'424'小孢子胚直接成苗率最高分别为78.33％和78.79％.0.5μM NaB浓度下的'426'小孢子胚直接成苗率最高为88.36％.

摘要： 以五个不同品种的紫花苜蓿为材料,对小孢子不同发育时期细胞学特征、花蕾形态和花药颜色进行了观察;并研究小孢子不同发育时期的细胞学特征与花器形态之间的相关性.为小孢子培养诱导单倍体选择材料提供依据.结果表明:(1)紫花苜蓿小孢子的发育过程共分为四个时期,即四分体时期、单核早中期、单核靠边期和双核期;(2)不同品种紫花苜蓿小孢子发育的四个时期,花蕾纵径和花瓣长存在极显著差异,其它花器形态指标部分存在差异;因此花蕾纵径和花瓣长可作为小孢子发育时期的判断指标;(3)小孢子发育的各个时期花药大小差异不明显;(4)本试验中紫花苜蓿小孢子处于单核靠边期时,纵径长和花瓣长分别在5.40-6.10mm和3.98-5.55mm之间,花蕾已明显膨大,花瓣露出萼片,花瓣呈紫色,花药为淡黄色.

摘要： 游离小孢子培养即小孢子在外界胁迫诱导的条件下,从其配子体发育途径转向孢子体发育途径,从而诱导小孢子胚胎发生的过程.采用多种染色方法对结球甘蓝小孢子游离培养中的小孢子发育过程及特征进行了观察,并对其体内配子体发育途径和体外孢子体发育途径进行了比较分析.结果表明,小孢子正常发育方向是通过不对称核分裂后发育成三核花粉,而单核靠边期小孢子在体外经32.5°C热激胁迫24h后,小孢子绝大部分死亡,培养3d后小孢子死亡率达到90％左右.结球甘蓝游离小孢子培养胚胎发生途径以B途径为主:第一次分裂为对称分裂,其后两个核进行反复分裂形成多细胞团,多细胞团从孢子壁中被释放出来,依次经历球形胚、心形胚、鱼雷胚,直至子叶胚的形成.除了以上典型B途径外,培养过程中还同时存在多种发育途径:第一次不对称分裂后,生殖核继续分裂即为A-G途径;营养核和生殖核两者同时继续分裂的A-VG途径.首次对结球甘蓝小孢子培养中的细胞死亡及胚胎发育途径进行研究.

摘要： 采用石蜡切片技术,以南荻不同倍性种质的幼穗为实验材料,连续解剖观察其小孢子发育及雄配子体发生过程,并分析其发育进程与染色体倍性的关系.结果表明:(1)南荻雄蕊3枚,每个花药具有4个小孢子囊.(2)花药壁发育方式为基本型,从外到内分别为表皮、药室内壁、中层,绒毡层,绒毡层为分泌型.(3)小孢子母细胞经减数分裂形成两侧对称型四分体,胞质分裂为连续型.成熟花粉粒为3细胞型.(4)三倍体和四倍体材料都存在不同程度小孢子发育异常.

摘要： 为了直接从花器形态来判断小孢子的发育时期,对叶芥小孢子发育时期的细胞学,以及小孢子发育时期与花蕾大小及花瓣长度与花药长度比的关系进行了研究.结果表明,叶芥小孢子发育经四分体时期、单核期、双核期和三核期,各时期特征明显.叶芥小孢子发育时期与花蕾大小,花瓣与花药长度比密切相关.适合叶芥小孢子培养胚状体发生的小孢子发育阶段为单核靠边期,以单核靠边期小孢子所占比率大于50％为好,对应的花蕾长度2.5-3.0mm,瓣药比为2/3,(删除菜字)同一花蕾小孢子发育存在一定程度的不同步性.依据花器官形态特征可判断小孢子的发育时期,从而确定小孢子培养最佳时期所对应的选蕾标准.

摘要： 在人工气候培养箱内对‘锦绣’黄桃(prunus persica var.Jinxiu)花器官进行高温处理，利用光学显微镜探讨了高温对小孢子形成和花粉发育的影响。结果表明：与对照相比，35°C高温处理1h花粉量影响不显著，随着处理时间增加，花粉量、萌发率以及花粉管生长量显著下降，5h高温处理的花粉量仅为对照的1.9％，且基本不萌发;5h高温处理部分花粉母细胞减数分裂后不能形成正常的四分体，而形成二分体、三分体以及多分体。随着花药胼胝质的解体，花药内出现了多核小孢子。高温处理后小孢子细胞质收缩解体，随后小孢子壁也解体;高温处理的花药壁细胞染色浅，绒毡层提前解体。说明绒毡层不能继续为小孢子发育提供营养物质，使小孢子发育受阻，造成小孢子逐渐消失。

摘要： 甘蓝在春季自然条件下生长抽薹植株花蕾的小孢子发育时期,以现蕾5天时,花粉细胞随着内容物的增多和液泡的形成变大,细胞核被挤到细胞边缘,靠近细胞壁,处于单核靠边期.以花蕾大小判断,在4．5～5．49mm区段范围内甘蓝小孢子所处的单核靠边期平均所占比例为76％.花蕾小孢子多数处在单核靠边期,容易诱导出胚状体.

摘要： 本文对卫星搭载凤仙花SP1代小孢子母细胞减数分裂的染色体畸变和不同单株四分孢子期的小孢子数目、小孢子大小等进行了比较研究.发现花瓣呈紫白相嵌者的诱变株,在减数分裂中易产生分散和落后染色体、染色体环,而浅粉色花与顶部花呈盘状者多出现分散染色体,盘状和浅粉色花者容易出现染色体桥.在四分孢子期则容易形成多分孢子,其中有四个单株(Ⅳ9-2,Ⅰ9-1,院3,Ⅰ7-1)均发现有九分孢子及其以上.同时,四分孢子期还容易产生不同程度的联体二分孢子、三分孢子,尤其少见的是出现了一株花萼为双距单株的四分孢子不分离现象.小孢子的大小和形状也有差异,主要是诱变株小孢子的中小型小孢子偏多,甚至高达69.52﹪,同时小孢子的育性降低,不育小孢子多达87﹪.

摘要： 高粱非迈罗型细胞质雄性不育(CMS)系A2V4，具有来源于IS12662C不育细胞质和Chicklett细胞核背景，以A2V4组配的杂交种己用于生产。本文以A2V4/B2V4为材料，对A2CMS的花药发育及小孢子败育过程进行了细胞学观察研究。结果发现，在A2V4雄性不育系的花药发育过程中有大量异常现象。药室的绒毡层细胞不形成或提前解体;药室内的花粉母细胞不发育或小孢子液泡化;绒毡层细胞发育异常，出现巨型化而挤满整个药室;绒毡层细胞虽发育正常，但花粉母细胞发育异常，在造孢细胞时期即开始出现变形现象，随后发生粘连退化;绝大部分花粉母细胞不能完成正常的减数分裂过程而形成四分体，最终导致小孢子退化。

摘要： 水稻是我国最主要的粮食作物之一，随着我国耕地资源的日益减少，如何开发利用我国现有的大面积盐碱地资源成为了广大农业科技工作者研究的首要问题之一。吉林省西部地处松嫩平原腹地，存在着 大面积的苏打盐碱地，而为了保证粮食增产计划的实施，开发盐碱地种稻已成为吉林省重要的农业发展项目之一。本研究在中国科学院大安碱地生态试验站中进行，2010年在站区内选择吉林省西部地区典型的轻度与重度苏打盐碱地作为供试土壤，并根据水稻温室耐盐碱鉴定结果选择耐盐碱性相对较强的“东稻4”和耐盐碱性相对较弱的“吉粳88”两个粳稻品种作为供试材料。

摘要： 一种中华小长臂虾微孢子虫绝对荧光定量PCR检测方法、试剂盒及引物，属于分子生物学技术领域。具体检检测方法：采集样本；中华小长臂虾微孢子虫DNA的提取；合成扩增片段大小为141bp的上下游引物；绝对荧光定量PCR方法的建立；标准曲线的绘制；绝对荧光定量PCR方法的灵敏度和特异性试验。本发明建立快速，灵敏的中华小长臂虾微孢子虫分子检测方法，与传统的PCR检测方法相比，具有省事、高效、灵敏、定量的特点。

摘要： 本发明涉及大白菜游离小孢子培养技术领域，公开了一种适宜四倍体大白菜游离小孢子培养的花蕾筛选方法和四倍体大白菜游离小孢子的提取方法。取四倍体大白菜花序由外向内的第三圈花蕾，其花瓣长度和花药长度之比小于等于1/2，该方法得到的花蕾进行游离小孢子的提取，小孢子处于单核靠边期，适宜四倍体大白菜游离小孢子培养，能够为四倍体大白菜游离小孢子再生植株的培育提供技术基础。

摘要： 本发明提供了用于小孢子胚胎发生和产生加倍单倍体胚的新型方法。例如，所提供的方法包括从供体植物获得多个花芽，确定包含在所述花芽中的小孢子的发育阶段，选择包含处于所需发育阶段的小孢子的花芽，处理所述花芽，从所述花芽中分离小孢子，以及在诱导培养基中培养所述小孢子或用染色体加倍剂处理所述经分离的小孢子。

摘要： 本发明公开了促进黄瓜小孢子分裂的方法以及黄瓜小孢子的培养方法。本发明公开的促进黄瓜小孢子分裂的方法包括：在33°C下利用纤维素酶和果胶酶处理处于单核靠边期的黄瓜小孢子2小时，以促进黄瓜小孢子分裂。利用本发明的促进黄瓜小孢子分裂的方法，不仅可以克服黄瓜小孢子壁障碍，还不影响小孢子内容物的完整性与活性，所得小孢子可以分裂与进一步发育，实现小孢子的培养，本发明的方法以及植物小孢子的培养方法可以用于制备黄瓜单倍体以及单倍体胚。

摘要： 本发明提供了一种芹菜小孢子诱导培养基及小孢子诱导培养方法，所述芹菜小孢子诱导培养基由一定含量的大量元素、微量元素、铁盐、有机成分、促进因子、植物生长调节剂所组成。所述芹菜小孢子诱导培养方法包括以下步骤：（1）花蕾选取和预处理；（2）小孢子悬浮液的制备；（3）小孢子诱导培养，并且在小孢子诱导培养过程中进行特定电磁波辐照处理。本发明的小孢子诱导培养基专门适用于芹菜小孢子培养，再结合本发明的诱导方法可以成功获得芹菜小孢子愈伤组织，为今后的芹菜单倍体育种奠定了物质基础。

摘要： 本发明提供了一种烟草小孢子诱导培养基及烟草小孢子培养方法，所述培养基由特定成分配比和含量比例的养分、有机添加物、无机添加物、植物生长调节剂、凝固剂、活性炭等所构成。所述烟草小孢子培养方法的步骤包括：花药取材与低温预处理、培养基的灭菌、消毒与花粉提取、花粉接种与变温诱导、愈伤分化与继代培养、炼苗与移栽。该烟草小孢子诱导培养基及烟草小孢子培养方法特异性针对烟草小孢子培养的要求，诱导效率高，培养效果好，大大加快了烟草小孢子培养育种进程。

摘要： 本发明涉及植物细胞培养技术领域，公开了一种白菜小孢子超低温冻存及复苏和诱导获得胚状体的方法。本发明所提供的方法选择改良B5培养基为冷冻保护剂，将所述白菜小孢子收集提取并分装到冻存管中进行超低温保存，保存温度为‑80°C，复苏条件为35‑38°C恒温水浴加热38‑42s，使小孢子复苏后能维持高活力和胚胎发生能力。复苏后小孢子悬浮培养于NLN‑13液体培养基诱导孵育胚状体：小孢子悬浮液浓度调整为105个/ml左右，热激暗培养诱导具活性小孢子的胚胎发生，并按白菜优化的小孢子培养体系最终获得胚状体及再生植株。

摘要： 一种利用农杆菌转化大麦小孢子愈伤组织的方法，使用国产大麦品种‘花22’作为受体材料，通过：1)大麦小孢子提取、诱导培养；2)农杆菌侵染大麦小孢子愈伤组织；3)筛选转化后的愈伤组织；4)分化培养及壮苗培养步骤，选定合适的侵染条件，在分化阶段使用抗除草剂基因作为筛选标记，成功建立了农杆菌侵染大麦小孢子愈伤组织转基因体系，获得转基因阳性植株，阳性率在77％以上。

摘要： 本发明公开了一种萝卜小孢子培养方法，专用于提高萝卜游离小孢子胚胎发生率的方法，具体方法为：(1)根据最低气温的差异选取适宜大小的花蕾，将选取的花蕾置于4°C下预处理8～10h，接着置于6°C下预处理12～14h；(2)花蕾消毒后加入pH5.8的B5提取液中进行提纯，获得提纯后的小孢子；(3)将提纯后的小孢子悬浮在pH5.8的1/2NLN‑13(添加0.25mg/L 6‑BA)培养基中，32.5°C下热激处理6～8h后，室温下静置暗培养，得到肉眼可见的胚状体；(4)将胚状体振荡培养，获得子叶型胚。本发明将满身红萝卜和穿心红萝卜小孢子胚胎平均发生率由8胚/蕾和3胚/蕾分别提高到15胚/蕾和8胚/蕾。本发明解决了现有技术存在的问题。

摘要： 本发明公开了一种小孢子培养获得纯合芦笋种质的方法，属于植物生物工程领域，该方法包括选取花蕾，预处理，研磨，离心，一次培养，二次培养；本发明的方法以芦笋小孢子作为原始培养材料进行培养，在材料的处理上，通过挤压，过滤，反复离心等步骤来确保原材料为芦笋小孢子，排除了体细胞的干扰，保证了后期培养出来的植株就必然是芦笋单倍体和花粉植株染色体的自然加倍形成的纯合二倍体。