BEL-7402细胞

摘要： 目的:探讨硼酸钠对人肝癌Bel-7402细胞基因表达的影响。方法:用4 mmol/L硼酸钠处理Bel-7402细胞2 h和24 h。提取细胞总RNA,使用基因芯片进行基因表达分析,然后进行基因GO分析和Kegg信号通路分析。结果:与对照组相比,硼酸钠作用2 h和24 h后,Bel-7402细胞多个基因发生改变。2 h组有462个差异表达基因(270个上调、192个下调);24 h组有1917个差异表达基因(980个上调、937个下调)。GO分析显示硼酸钠引起Bel-7402细胞的差异基因,涉及到分子功能、生物学过程多个层级。Kegg通路富集分析显示,硼酸钠作用2 h后差异表达基因参与多条信号通路(NF-κB、MAPK等),作用24 h后差异表达基因主要参与NF-κB信号通路、细胞凋亡等。结论:硼酸钠处理Bel-7402细胞后,导致多种基因表达上调或下调,从而发挥多种生物学作用。

摘要： 目的:探讨氯化两面针碱(NC)对肝癌Bel-7402细胞系自噬的影响.方法:选取肝癌Bel-7402细胞株,在透射电子显微镜下观察NC处理Bel-7402细胞24h后吞噬泡、自噬小体、自噬溶酶体等结构;Westernbloting检测微管相关蛋白轻链3(LC3)和P62蛋白表达水平的改变;采用CCK-8法检测不同浓度NC(0μmol/L、1.5μmol/L、3μmol/L、6μmol/L、12μmol/L、24μmol/L)在加入或不加入自噬抑制剂氯喹(CQ)处理细胞24h后对细胞增殖能力的影响.结果:与阴性对照组比较,Bel-7402细胞经过12μmol/LNC处理24h后,在透射电镜显微镜下观察到细胞产生大量空泡,出现自噬小体和自噬溶酶体等结构;随着药物剂量增大,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增加(P＜0.05),P62表达降低(P＜0.05);CCK-8法检测结果表明,随着NC给药剂量增加,细胞死亡增多(P＜0.05),加入CQ能减轻NC导致的细胞死亡(P＜0.05).结论:NC能激活肝癌Bel-7402细胞自噬,引起Bel-7402细胞自噬性死亡.

摘要： 目的:构建人BATF2真核表达载体,并验证其过表达对肝癌Bel-7402细胞增殖的影响.方法:利用Trizol法提取正常人外周血单核细胞RNA并将其反转录成cDNA,再以cDNA为模板扩增出BATF2基因序列,再将其连接到pcDNA3.1真核表达载体上,采用酶切和测序的方法对重组质粒进行鉴定;用脂质体转染的方法将重组质粒转染Bel-7402细胞后,Western blot检测BATF2蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响.结果:双酶切和DNA测序结果验证了pcDNA3.1-BATF2真核表达载体构建成功;pc-DNA3.1-BATF2组BATF2蛋白表达量高于空白对照组与pcDNA3.1组(P<0.05).转染48、72、96 h后,pc-DNA3.1-BATF2组Bel-7402细胞增殖的OD值均低于空白对照组和pcDNA3.1组(P<0.05).结论:成功构建pcDNA3.1-BATF2真核表达载体并转染Bel-7402细胞后BATF2蛋白表达量增加,且过表达BATF2能够显著抑制肝癌细胞Bel-7402细胞增殖能力.

摘要： 以培养的人肝癌细胞Bel-7402及其5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞(Bel-7402/5-FU)为研究对象,通过使用快速PNGase F酶切,结合TMPP-Ac-OSu和甲胺化共衍生方法,对两者的总蛋白和分泌蛋白的N-连接聚糖进行了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析。从两种细胞总蛋白中共鉴定到56种N-连接聚糖,分泌蛋白中鉴定到38种N-连接聚糖。5-FU与Bel-7402相比,耐药细胞岩藻糖化唾液酸糖型在总蛋白和分泌蛋白中都显著升高;高甘露糖型N-聚糖在总蛋白中下降,而在分泌蛋白中显著增加。本研究为进一步探索肿瘤耐药提前诊断提供糖链标志物起到一定的参考作用,并为后续解决癌症治疗的耐药提供理论依据。

摘要： 目的观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对人肝癌细胞BEL-7402自噬的影响,为GNA抗肿瘤研究提供理论依据。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞株,采用MTT法检测GNA对人肝癌细胞BEL-7402存活率的影响;倒置显微镜观察给药前后细胞形态变化;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色,荧光显微镜观察细胞自噬小体;透射电子显微镜进一步观察自噬小体;Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1light chain 3,LC3)和p62、Beclin1的表达水平及加入自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)和自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)后自噬相关蛋白的表达情况。结果 GNA能显著抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖并呈时效及量效关系;倒置显微镜观察结果显示GNA组细胞随药物浓度增大,细胞悬浮增多,高浓度给药组细胞出现碎片化;荧光显微镜下观察结果显示,随药物浓度的增加,荧光点状聚集增多;透射电子显微镜观察发现,随GNA浓度的增加,细胞内自噬空泡数量增多,与对照组比较,加入自噬诱导剂Rap后,自噬空泡数量显著增多;Western blot法检测结果显示,随GNA浓度的增加,Beclin1、p62、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均增加(P<0.05),LC3-Ⅰ无明显变化,表明BEL-7402细胞自噬前期被激活,后期进程被抑制。结论 GNA能抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖,其机制可能部分是通过抑制自噬后期自噬体与溶酶体的融合,抑制人肝癌BEL-7402细胞的保护性自噬。

摘要： 目的:探讨RNAi下调Nin1结合蛋白(NOB1)表达对肝癌细胞增殖及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平的影响.方法:以肝癌BEL-7402细胞作为研究对象,将肝癌细胞分为空白对照组、siRNA-NC组、NOB1 siRNA组3组,其中siRNA-NC组、NOB1 siRNA组分别为稳定感染阴性对照慢病毒和NOB1 siRNA慢病毒的肝癌细胞,空白对照组为不做慢病毒感染的肝癌细胞.用qRT-PCR和Western blot检测干扰效果.CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞中磷酸化p38MAPK和活化的Caspase-3蛋白的表达情况.结果:NOB1 siRNA组细胞中NOB1表达水平、细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,磷酸化p38MAPK和活化的Caspase-3蛋白表达水平升高,与空白对照组、siRNA-NC组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:下调NOB1表达具有抑制BEL-7402细胞增殖、诱导细胞凋亡、促进细胞中p38MAPK磷酸化的作用.

摘要： 目的研究过表达CXCR7通过AKT信号通路诱导人肝细胞癌细胞新血管生成的作用机制。方法(1)检测CXCR7基因在SMMC-7721,Huh-7,HepG2,BEL-7402和MHCC-97H五种肝细胞癌细胞中的表达量,选取最适合癌细胞株进行转染实验;(2)转染Lenti-CXCR7-GFP慢病毒到BEL-7402细胞,观察转染后细胞形态,获得纯Lenti-CXCR7-GFP转染的BEL-7402细胞液;(3)检测CXCR7、p-AKT(phospho-AKT)、AKT、MMP2和MMP9表达量;(4)qRT-PCR法检测肝细胞癌中CXCR7与VEGFmRNA表达;(5)通过AKT通路抑制剂LY294002处理BEL-7402细胞,检测4组(Lenti-CXCR7-GFP-BEL-7402+DMEM处理组、Lenti-CXCR7-GFP-BEL-7402+LY294002处理组、Lenti-GFP-BEL-7402+DMEM处理组、Lenti-GFP-BEL-7402+LY294002处理组)细胞中CXCR7与VEGF蛋白表达;(6)采用鸡胚绒毛尿囊膜法检测BEL-7402肿瘤血管生成情况。结果(1)Western blot实验结果表明正常肝细胞中CXCR7基因表达量很少,5株癌细胞中BEL-7402的CXCR7表达量相对较低,所以我们选择BEL-7402肝癌细胞株进行转染实验;(2)用倒置荧光显微镜观察细胞形态,可见大部分细胞均呈绿色荧光显色,表明Lenti-CXCR7-GFP转染到BEL-7402细胞后细胞活性较好,转染已经成功;(3)AKT通路相关蛋白表达量检测结果表明CXCR7、p-AKT,MMP2和MMP9蛋白表达量结果显示实验组显著高于对照组;(4)转染Lenti-CXCR7-GFP的BEL-7402肝癌细胞中CXCR7基因处于过表达状态,VEGFmRNA表达量显著高于对照组(P0.05);(6)接种BEL-7402细胞后,鸡胚绒毛尿囊膜中血管密度增加形成血管瘤,CAM增厚,结构不规则,血管加粗且呈放射状分布,Lenti-CXCR7-GFP转染BEL-7402肝细胞后,鸡胚绒毛尿囊膜中血管密度增加,增强了血管生成能力。结论肝细胞癌中CXCR7的过表达促进新血管生成的作用是经由激活了肝细胞癌中的AKT信号通路而诱导产生实现,CXCR7可能是AKT信号通路的一个重要激活剂。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.rn 方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.rn 结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)% (P<0.001);胞内钙下降到(541.67±8.15)(P<0.05);CCK-8细胞活性检测发现TMP联合UO 126 (ERK抑制剂)或SP600125(JNK抑制剂)，多柔比星对肝癌多药耐药细胞的IC50值下降。然而，当TMP联合SB203580印38抑制剂)时，IC50值升高。而且，经TMP处理的胞内活性氧(ROS)荧光强度升高。讨论:TMP可能通过提高胞内ROS，激活p38;抑制Erk和JNK而降低了胞内钙浓度、抑制PKCa而逆转了肝癌细胞的多药耐药。rn 结论:TMP具有潜在逆转肝癌多药耐药的作用，值得深入研究。

摘要： 本实验选用了我国境内常见的30种桑树栽培品种的桑树枝条韧皮部为主要实验材料,研究了其乙醇提取物对肝癌细胞Bel-7402和肺癌细胞A549的体外抗肿瘤活性.不同品种的桑枝醇提物的得率差异很大.最高的为79×201(5.44％),而最低的则为沙二(1.207％),二者相差约4.5倍.细胞培养试验结果显示,不同桑品种的桑枝醇提物对肝癌Bel-7402和肺癌A549细胞的抑制作用也不尽相同.就Bel-7402肝癌细胞而言,桑品种张巷的提取物抑制作用可达78.59％,而品种凤尾则只有11.96％,二者相差近6.6倍.而对于A549肺癌细胞,品种张巷的提取物为84.53％,而山乘县桑则几乎没有抑制作用.这些实验结果表明,张巷等品种的桑枝皮醇提物对肝癌和肺癌细胞具有明显的抗癌作用,但这种抗癌作用在桑品种间的差异十分显著.本试验结果为未来蚕桑产业中桑树栽培品种的选育与生物药物的开发利用提供了可靠的实验数据.

摘要： 本实验选用了我国境内常见的30种桑树栽培品种的桑树枝条韧皮部为主要实验材料,研究了其乙醇提取物对肝癌细胞Bel-7402和肺癌细胞A549的体外抗肿瘤活性.不同品种的桑枝醇提物的得率差异很大.最高的为79×201(5.44％),而最低的则为沙二(1.207％),二者相差约4.5倍.细胞培养试验结果显示,不同桑品种的桑枝醇提物对肝癌Bel-7402和肺癌A549细胞的抑制作用也不尽相同.就Bel-7402肝癌细胞而言,桑品种张巷的提取物抑制作用可达78.59％,而品种凤尾则只有11.96％,二者相差近6.6倍.而对于A549肺癌细胞,品种张巷的提取物为84.53％,而山乘县桑则几乎没有抑制作用.这些实验结果表明,张巷等品种的桑枝皮醇提物对肝癌和肺癌细胞具有明显的抗癌作用,但这种抗癌作用在桑品种间的差异十分显著.本试验结果为未来蚕桑产业中桑树栽培品种的选育与生物药物的开发利用提供了可靠的实验数据.

摘要： 本发明公开了一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗Bel/fu的单克隆抗体，该杂交瘤细胞株通过耐5-氟尿嘧啶人肝癌细胞株（Bel/fu）免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合获得，该抗Bel/fu的单克隆抗体具备抑制Bel/fu生长的功能且应用于诊断或者治疗肿瘤，其包含于一种用于诊断或者治疗肿瘤的制剂中，本发明还公开了杂交瘤细胞株及抗Bel/fu的单克隆抗体的制备方法。本发明通过免疫Bel/fu细胞，制备了抗Bel/fu杂交瘤细胞株AC10364，可以分泌相应的单克隆抗体AC10364，具有有效的抑制多种肿瘤细胞生长的活性，可应用于肝癌的诊断和治疗。

摘要： 本发明公开了一种可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体，包括序列1～序列4中所示的DNA片段，还包括该核酸序列的一系列衍生物。本发明核酸适体的筛选方法包括以下步骤：首先合成随机单链DNA文库和引物，然后Cell-SELEX获得人肝癌细胞株Bel-7404特异核酸适体，PCR扩增文库，制备DNA单链文库，然后经过重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤后，得到可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体。本发明的核酸适体可在识别人肝癌细胞株Bel-7404或者制备检测人肝癌细胞株Bel-7404的试剂盒中应用，具有特异性强、无免疫原性、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。

摘要： 本发明公开了一种水稻Bel基因的定点敲除系统及其应用，属于植物基因工程领域，具体涉及一种水稻苯达松基因的定点敲除方法及其应用。本发明提供了一种偏好于植物基因组DNA的TALEN定点突变系统，所述TALEN定点突变系统包含四个识别模块。本发明与现有的创建苯达松敏感植物的技术相比，其优势在于方便、快速，用此技术可以一位科研人员在一年半的时间内可以得到多个不同突变位点的纯合突变体植株，大大节省人力、物力，而且得到的突变体不带转基因成分，消除人们对转基因的顾虑，对植物基因工程创制新的种质资源有重要意义。

摘要： 本发明属于微生物基因工程技术领域。公开了一种来自于苏云金芽胞杆菌的增效蛋白基因bel1的分离、克隆及增效蛋白Bel1在生物杀虫剂中的应用。从苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种YBT-1520菌株中分离得到一个新的增效蛋白基因bel1，该基因编码产物为一种新的增效蛋白Bel1；该蛋白对鳞翅目昆虫的杀虫晶体蛋白Cry1Ac具有很强的杀虫增效活性；本发明制备的重组蛋白的杀虫活性是出发菌株杀虫蛋白活性的5.7倍。本发明还包括重组苏云金芽胞杆菌增效蛋白bel1基因工程菌的制备，该工程菌已保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏编号为CCTCC NO：M208245。

摘要： 本发明适用于生物医学领域，提供了一种多药联合诱导构建多药耐药人肝癌Bel-7402细胞株的方法，包括以下步骤：提供人肝癌Bel-7402细胞株，并对其进行复苏和传代处理；采用奥沙利铂、5-氟尿嘧啶、顺铂多药联合诱导所述人肝癌Bel-7402细胞株，得到多药耐药人肝癌Bel-7402细胞株。

摘要： 本发明公开了一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗Bel/fu的单克隆抗体，该杂交瘤细胞株通过耐5-氟尿嘧啶人肝癌细胞株（Bel/fu）免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合获得，该抗Bel/fu的单克隆抗体具备抑制Bel/fu生长的功能且应用于诊断或者治疗肿瘤，其包含于一种用于诊断或者治疗肿瘤的制剂中，本发明还公开了杂交瘤细胞株及抗Bel/fu的单克隆抗体的制备方法。本发明通过免疫Bel/fu细胞，制备了抗Bel/fu杂交瘤细胞株AC10364，可以分泌相应的单克隆抗体AC10364，具有有效的抑制多种肿瘤细胞生长的活性，可应用于肝癌的诊断和治疗。

摘要： 本发明公开了一种可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体，包括序列1～序列4中所示的DNA片段，还包括该核酸序列的一系列衍生物。本发明核酸适体的筛选方法包括以下步骤：首先合成随机单链DNA文库和引物，然后Cell-SELEX获得人肝癌细胞株Bel-7404特异核酸适体，PCR扩增文库，制备DNA单链文库，然后经过重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤后，得到可用于检测人肝癌细胞株Bel-7404的核酸适体。本发明的核酸适体可在识别人肝癌细胞株Bel-7404或者制备检测人肝癌细胞株Bel-7404的试剂盒中应用，具有特异性强、无免疫原性、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。

摘要： 本发明属于盘磨机磨浆强度计算技术领域，特别涉及一种利用BEL计算盘磨机磨浆强度的方法，利用磨齿边缘长度BEL与磨齿宽度分别计算出动盘齿面面积和定盘齿面面积；根据动盘盘面总面积，以及BEL计算得到的动盘齿面面积和定盘齿面面积，求出磨齿接触面积；利用磨浆净功率、磨盘转速与磨齿接触面积，求得盘磨机的磨浆强度。该方法有利于分析磨浆机理，明确成浆质量，比较磨浆能耗，建立磨齿参数、主要的打浆控制变量及打浆效果之间的联系，其包含的磨盘齿形参数可以为磨盘选型和磨齿设计提供指导，涉及的控制参数有利于对磨浆过程进行把控。

摘要： 本发明公开了一种水稻Bel基因的定点敲除系统及其应用，属于植物基因工程领域，具体涉及一种水稻苯达松基因的定点敲除方法及其应用。本发明提供了一种偏好于植物基因组DNA的TALEN定点突变系统，所述TALEN定点突变系统包含四个识别模块。本发明与现有的创建苯达松敏感植物的技术相比，其优势在于方便、快速，用此技术可以一位科研人员在一年半的时间内可以得到多个不同突变位点的纯合突变体植株，大大节省人力、物力，而且得到的突变体不带转基因成分，消除人们对转基因的顾虑，对植物基因工程创制新的种质资源有重要意义。

摘要： 本发明涉及一种桑寄生植物中草药中抗肝癌BEL－7402蛋白的提取或制备方法，属生有分离纯化工艺方法技术领域。本发明方法的特征在于具有以下工艺步骤：(1)将中草药桑寄生粉碎，用氯化钠溶液浸提12～24小时，抽滤混合物得滤液；(2)滤液中加入硫酸铵固体调至饱和度70％，离心分离得沉淀物粗品蛋白；(3)将粗品蛋白以水溶解、超滤，滤液上层析柱得蛋白活性组分，然后冷冻干燥，得纯化后的桑寄生蛋白。由MTT法检测肝癌细胞BEL－7402生长抑制实验结果表明，桑寄生蛋白对肝癌细胞BEL－7402生长抑制作用较为显著。