新藤黄酸

摘要： 目的制备藤黄酸(GA)、新藤黄酸(NGA)的纳米囊(GA-LNCs、NGA-LNCs),并进行其抗糖尿病活性评价。方法以水为水相、中链甘油三酯为油相、聚乙二醇单硬脂酸酯为表面活性剂,采用相转换法制备GA-LNCs、NGA-LNCs。以包封率和载药量为指标,利用单纯型网格设计法优化上述2种纳米囊的处方工艺,并对其理化性质进行考察。建立糖尿病小鼠模型,灌胃给予GA-LNCs、NGA-LNCs(剂量分别为1.92、2.42 mg/kg),每天1次,连续给药6周,检测小鼠空腹血糖值和血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。结果这2种纳米囊的最优处方均为60%水、10%中链甘油三酯、30%聚乙二醇单硬脂酸酯(三者总量固定为2 g)以及35 mg GA或NGA。以最优处方制得的GA-LNCs、NGA-LNCs的包封率分别为(92.01±0.68)%、(93.12±2.11)%,载药量分别为(0.99±0.21)%、(1.21±0.22)%;两者均为黄色均一透明液体,无沉淀,微观形态均为类球形,且具有明显的壳膜结构,粒径分别为(28.11±9.76)、(22.06±6.84)nm,Zeta电位分别为(-4.09±1.00)、(-17.40±1.32)mV,多分散系数分别为0.93±0.06、0.74±0.12。动物实验结果显示,GA-LNCs、NGA-LNCs均可显著升高模型小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和HDL-C含量(P<0.05或P<0.01),显著降低模型小鼠空腹血糖值和血清中MDA、TC、TG、LDL-C含量(P<0.05或P<0.01)。结论本研究制得的GA-LNCs、NGA-LNCs理化性质良好,且具有良好的抗糖尿病活性。

摘要： 目的探究PTEN-PI3K/Akt/VEGF/eNOS信号通路在新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)抑制人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial,HUVECs)迁移中的作用。方法倒置显微镜下观察HUVECs形态变化;Boyden chamber实验以及细胞划痕实验观察GNA对HUVECs迁移能力的影响;硝酸还原酶法检测NO水平;Western blot法检测GNA及LY29400预处理对HUVECs内磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、p-AKT表达水平的影响;HUVECs转染PTEN-siRNA后,RT-PCR实验检测VEGF mRNA的表达水平。结果GNA能有效抑制HUVECs迁移,其抑制效果与剂量相关(P<0.05)。GNA和抑制剂LY294002以及L-NAME均能有效抑制NO的产生,且GNA+LY294002组、GNA+L-NAME组抑制效果更好(P<0.05);Western blot检测结果显示,GNA上调PTEN蛋白表达水平,下调eNOS、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平(P<0.05)。RT-PCR检测结果表明,PTEN-siRNA转染后,GNA能上调VEGF mRNA基因的表达水平(P<0.05)。结论GNA通过PTEN-PI3K/Akt/VEGF/eNOS信号传导通路,抑制HUVECs迁移,阻止HUVECs血管生成。

摘要： 目的 探究PTEN-PI3K/Akt/VEGF/eNOS信号通路在新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)抑制人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial,HUVECs)迁移中的作用.方法 倒置显微镜下观察HUVECs形态变化;Boyden chamber实验以及细胞划痕实验观察GNA对HUVECs迁移能力的影响;硝酸还原酶法检测NO水平;Western blot法检测GNA及LY29400预处理对HUVECs内磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、p-AKT表达水平的影响;HUVECs转染PTEN-siRNA后,RT-PCR实验检测VEGF mRNA的表达水平.结果 GNA能有效抑制HUVECs迁移,其抑制效果与剂量相关(P<0.05).GNA和抑制剂LY294002以及L-NAME均能有效抑制NO的产生,且GNA+LY294002组、GNA+L-NAME组抑制效果更好(P<0.05);Western blot检测结果 显示,GNA上调PTEN蛋白表达水平,下调eNOS、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平(P<0.05).RT-PCR检测结果 表明,PTEN-siRNA转染后,GNA能上调VEGF mR-NA基因的表达水平(P<0.05).结论 GNA通过PTEN-PI3K/Akt/VEGF/eNOS信号传导通路,抑制HUVECs迁移,阻止HUVECs血管生成.

摘要： 目的 探讨从藤黄中提取分离藤黄酸(GA)、新藤黄酸(GN A)的实验技术及其酰胺新实体的合成.方法 藤黄丙酮提取物中分离出藤黄酸吡啶盐的母液浸膏与200目硅胶均匀混合后干法上样,硅胶H干柱逆流梯度层析分离出GA、GNA,N,N'-二异丙基碳二亚胺法催化合成它们的N-芳基和N-烷基酰胺.结果 较高效分离出GA、GNA,温和制备了N-[2-(N',N'-二甲氨基)乙基]藤黄酰胺、N-(3-氯-4-氟苯基)新藤黄酰胺和N-(3-氯-4-氟苯基)藤黄酰胺3种酰胺新实体.结论 本实验所建立的GA、GN A干柱逆流层析分离及其酰胺化方法操作简便、温和、重现性好.

摘要： 目的观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对人肝癌细胞BEL-7402自噬的影响,为GNA抗肿瘤研究提供理论依据。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞株,采用MTT法检测GNA对人肝癌细胞BEL-7402存活率的影响;倒置显微镜观察给药前后细胞形态变化;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色,荧光显微镜观察细胞自噬小体;透射电子显微镜进一步观察自噬小体;Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1light chain 3,LC3)和p62、Beclin1的表达水平及加入自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)和自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)后自噬相关蛋白的表达情况。结果 GNA能显著抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖并呈时效及量效关系;倒置显微镜观察结果显示GNA组细胞随药物浓度增大,细胞悬浮增多,高浓度给药组细胞出现碎片化;荧光显微镜下观察结果显示,随药物浓度的增加,荧光点状聚集增多;透射电子显微镜观察发现,随GNA浓度的增加,细胞内自噬空泡数量增多,与对照组比较,加入自噬诱导剂Rap后,自噬空泡数量显著增多;Western blot法检测结果显示,随GNA浓度的增加,Beclin1、p62、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均增加(P<0.05),LC3-Ⅰ无明显变化,表明BEL-7402细胞自噬前期被激活,后期进程被抑制。结论 GNA能抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖,其机制可能部分是通过抑制自噬后期自噬体与溶酶体的融合,抑制人肝癌BEL-7402细胞的保护性自噬。

摘要： 目的 研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制.方法 采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的凋亡率,采用PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞周期的影响,采用Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞凋亡率的影响,采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达的影响.结果 MTT检测结果表明,新藤黄酸对卵巢癌细胞A2780的增殖具有抑制作用,且抑制作用具有明显的剂量依赖性;fluo-3AM染色荧光显微镜下观察,可见各浓度新藤黄酸均能升高A2780细胞内钙离子水平,且呈现浓度依赖关系;PI染色流式细胞仪检测结果表明,新藤黄酸能阻滞A2780细胞于G0/G1期;Hoechst 33342染色和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测结果表明,随着新藤黄酸浓度的增加,A2780细胞凋亡率呈现增高的趋势;Western blot检测结果表明,新藤黄酸可以促进凋亡相关蛋白p53、细胞色素C以及Caspase-9表达水平升高.结论 新藤黄酸具有抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导肿瘤细胞发生线粒体凋亡的作用.

摘要： 目的 探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响.方法 用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化.结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加.结论 新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的.

摘要： 本发明涉及中低压梯度硅胶干柱色谱分离新藤黄酸、藤黄酸及N‑芳基藤黄酰胺制备的方法，以硅胶H作固定相利用选定的洗脱剂，经中低压梯度硅胶干柱色谱即能低成本、简便、较大规模地分离出纯度分别为90％、93％的GA及GNA样品；室温搅拌下,1‑乙基‑3‑(3‑N,N‑二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(或二环己基碳二亚胺)和4‑(N,N‑二甲氨基)吡啶催化藤黄酸与取代芳胺的酰胺化反应。粗产物经硅胶H作固定相的中压硅胶干柱色谱，即能低成本、简便、较大规模地制备出高纯度的N‑芳基藤黄酰胺样品。

摘要： 本发明旨在提供一种能够高效地从中药藤黄中提取分离藤黄酸与新藤黄酸的方法，包括以下步骤：将藤黄粉碎微波提取，浓缩得浸膏A；加入石油醚淋洗，乙醇溶解过滤，经模拟移动床色谱分离，得到富含藤黄酸的组分B和含有藤黄酸、新藤黄酸的组分C；回收溶剂干燥得纯度95%以上的藤黄酸及纯度10%～20%的藤黄酸与纯度30%～50%的新藤黄酸混合物两种规格的产品。本发明所述的中药藤黄有效成分提取方法步骤简单，产品纯度较高，可以同时得到两种规格的藤黄酸与新藤黄酸产物，将原料中的有效成分充分提取分离，节约了原料资源的同时也提高了生产效率。

摘要： 本发明公开了一种超临界流体提取中药藤黄中的藤黄酸和新藤黄酸的方法，首先将藤黄原料颗粒投入萃取釜中，连续输入超临界流体、夹带剂进行萃取，将含溶解萃取物的高压流体降压到低于临界压力以下，进入分离釜分离出溶质产品。本发明提取方法简单，专属性强，提取过程符合环保要求，提取物/药液中藤黄酸的含量为30-80％或更高，新藤黄酸的含量为10-50％或更高。

摘要： 本发明公开了一种可同时大量分离高纯度藤黄酸和新藤黄酸的方法，所述方法包括：采用正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比(6.5‑7.5)：(2.5‑3.5)：(6.5‑8.5)：(1.5‑3.5)进行混合后，静置使分层为上相和下相；采用适量的所述上相溶解藤黄的乙醇粗提物，得到样品溶液；以含有三氟乙酸的上相为固定相，以含有三乙胺的下相为流动相，采用高速逆流色谱仪进行分离，紫外检测器进行监测，分别收集目标流分，然后进行浓缩、干燥。本发明实现了对藤黄酸和新藤黄酸的同时大量分离纯化，且纯度均高于95％，解决了藤黄酸与新藤黄酸的同时分离难题。

摘要： 本发明公开了一种藤黄酸、新藤黄酸及其组合物在具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的药物中的新用途。本药物组合物是从藤黄科植物藤黄Garcinia？hanbaryi？Hook.？f.分泌的干燥树脂中提取制备得到后按照一定比例配比组成。藤黄酸、新藤黄酸可各自以单体形式制成降血糖药物，也可以按一定的配比以组合物的形式制成降血糖药物。并阐述了组合物的药物制剂，可以是片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。

摘要： 本发明涉及中低压梯度硅胶干柱色谱分离新藤黄酸、藤黄酸及N‑芳基藤黄酰胺制备的方法，以硅胶H作固定相利用选定的洗脱剂，经中低压梯度硅胶干柱色谱即能低成本、简便、较大规模地分离出纯度分别为90％、93％的GA及GNA样品；室温搅拌下,1‑乙基‑3‑(3‑N,N‑二甲氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(或二环己基碳二亚胺)和4‑(N,N‑二甲氨基)吡啶催化藤黄酸与取代芳胺的酰胺化反应。粗产物经硅胶H作固定相的中压硅胶干柱色谱，即能低成本、简便、较大规模地制备出高纯度的N‑芳基藤黄酰胺样品。

摘要： 本发明旨在提供一种能够高效地从中药藤黄中提取分离藤黄酸与新藤黄酸的方法，包括以下步骤：将藤黄粉碎微波提取，浓缩得浸膏A；加入石油醚淋洗，乙醇溶解过滤，经模拟移动床色谱分离，得到富含藤黄酸的组分B和含有藤黄酸、新藤黄酸的组分C；回收溶剂干燥得纯度95%以上的藤黄酸及纯度10%～20%的藤黄酸与纯度30%～50%的新藤黄酸混合物两种规格的产品。本发明所述的中药藤黄有效成分提取方法步骤简单，产品纯度较高，可以同时得到两种规格的藤黄酸与新藤黄酸产物，将原料中的有效成分充分提取分离，节约了原料资源的同时也提高了生产效率。

摘要： 本发明公开了一种超临界流体提取中药藤黄中的藤黄酸和新藤黄酸的方法，首先将藤黄原料颗粒投入萃取釜中，连续输入超临界流体、夹带剂进行萃取，将含溶解萃取物的高压流体降压到低于临界压力以下，进入分离釜分离出溶质产品。本发明提取方法简单，专属性强，提取过程符合环保要求，提取物/药液中藤黄酸的含量为30-80％或更高，新藤黄酸的含量为10-50％或更高。

摘要： 本发明公开了一种可同时大量分离高纯度藤黄酸和新藤黄酸的方法，所述方法包括：采用正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比(6.5-7.5)：(2.5-3.5)：(6.5-8.5)：(1.5-3.5)进行混合后，静置使分层为上相和下相；采用适量的所述上相溶解藤黄的乙醇粗提物，得到样品溶液；以含有三氟乙酸的上相为固定相，以含有三乙胺的下相为流动相，采用高速逆流色谱仪进行分离，紫外检测器进行监测，分别收集目标流分，然后进行浓缩、干燥。本发明实现了对藤黄酸和新藤黄酸的同时大量分离纯化，且纯度均高于95％，解决了藤黄酸与新藤黄酸的同时分离难题。

摘要： 本发明公开了一种藤黄酸、新藤黄酸及其组合物在具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的药物中的新用途。本药物组合物是从藤黄科植物藤黄GarciniahanbaryiHook.f.分泌的干燥树脂中提取制备得到后按照一定比例配比组成。藤黄酸、新藤黄酸可各自以单体形式制成降血糖药物，也可以按一定的配比以组合物的形式制成降血糖药物。并阐述了组合物的药物制剂，可以是片剂、胶囊剂、软胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。