叶酸缺乏

摘要： 目的观察叶酸缺乏对N2a-APP细胞β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)、外泌体数量的影响,利用外泌体蛋白质组学探讨叶酸缺乏影响神经细胞外泌体分泌的可能分子机制。方法体外培养N2a-APP细胞,根据有无叶酸添加,分成叶酸缺乏(folic acid deficiency,FD)组(0μmol/L)和叶酸正常(folic acid normal,FN)组(10μmol/L)。采用酶联免疫吸附法测定检测细胞内外Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)水平;试剂盒提取细胞培养液外泌体;电镜观察、粒径分析鉴定外泌体;Western blot检测外泌体标志蛋白及细胞内自噬相关蛋白;非标记定量技术检测外泌体蛋白质组变化,进行生物信息学分析。结果FD组N2a-APP细胞内外Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)水平高于FN组(P<0.05)。两组N2a-APP细胞分泌的物质均呈现外泌体典型结构,表达外泌体标志蛋白CD36和Flotillin-1。FD组外泌体蛋白浓度高于FN组[(637.56±47.31)μg/mL vs.(365.76±76.21)μg/mL,P<0.001]。蛋白质组学结果显示,FD组与FN组间有50种蛋白差异表达,其中FD组细胞分泌的外泌体内14种蛋白表达下降,36种蛋白表达增加。FD组细胞内自噬相关蛋白Beclin-1(1.33±0.11 vs.0.88±0.13)、LC3II/I(0.55±0.08 vs.0.40±0.04)表达高于FN组,p62(0.88±0.07 vs.1.27±0.16)低于FN组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论叶酸缺乏可影响N2a-APP细胞自噬水平、外泌体的分泌数量及内容物,增加细胞内外Aβ水平。

摘要： 叶酸是一种水溶性维生素,是血液系统传统用药,目前常用的叶酸片有两种规格,一种为0.4mg,另一种为5mg。根据药品说明书,其适用于各种原因引起的叶酸缺乏及叶酸缺乏所致的巨幼红细胞贫血;妊娠期、哺乳期妇女预防给药;慢性溶血性贫血所致的叶酸缺乏。给药方式为口服,成人一次5~10mg,一日15~30mg,直至血象恢复正常;儿童一次5mg,一日3次(或一日5~15mg,分3次);妊娠期、哺乳妇女预防用量为一次0.4mg,一日1次。

摘要： 1例46岁女性类风湿性关节炎患者因营养性巨幼细胞性贫血给予叶酸10 mg口服、3次/d.首次服药后约8 min,患者出现全身皮肤瘙痒,随即头面部、四肢、躯干部出现弥漫性斑丘疹.考虑为叶酸引起的速发型过敏反应,停用叶酸,给予氯苯那敏4 mg口服.但患者皮肤症状加重,继而出现气促、胸闷、恶心等症状.立即给予地塞米松、10％葡萄糖酸钙、异丙嗪和吸氧等对症治疗.40 min后,患者皮肤瘙痒缓解;5h后,皮疹消退;7h后,过敏症状消失.给予氯苯那敏治疗3d后,行叶酸脱敏治疗,未再出现不良反应,患者贫血逐渐改善.继续口服氯雷他定和叶酸.随访1个月,患者无不适,血红蛋白113.5 g/L,停药,嘱患者于风湿科就诊治疗类风湿性关节炎.

摘要： 目的 探讨汉族孕妇胎儿神经管缺陷发生的危险因素并对胎儿神经管缺陷易感性进行分析.方法 选取2010年1月至2018年12月滨州市中医医院接收的8124例汉族孕妇的产检和随访资料作回顾性分析.均检测其外周血单个核细胞TS、MTHFR基因多态性,并统计胎儿神经管缺陷的发生情况.对比胎儿神经管缺陷发生者和未发生者TS、MTHFR基因多态性,并采用Logistic回归分析探讨其与胎儿神经管缺陷易感性的关系.结果 所选研究对象TS、MTHFR基因多态性符合Hardy-Weinberg平衡;研究对象中胎儿神经管缺陷发生率为0.38％;发生者TS基因rs3819102位点GG基因型、MTHFR基因C667T位点TT基因型明显高于未发生者,差异具有统计学意义(P<0.05),发生者TS基因rs3819102位点G等位基因、MTHFR基因C667T位点T等位基因频率明显高于未发生者,差异具有统计学意义(P<0.05);TS基因rs3819102位点突变、MTHFR基因C667T位点突变、高龄、维生素B12缺乏、叶酸缺乏、药物滥用、长期在高温环境中工作、孕早期持续高热均可是胎儿神经管缺陷的危险因素(P<0.05).结论 汉族孕妇TS基因rs3819102位点突变、MTHFR基因C667T位点突变均可增加胎儿神经管缺陷易感性,且高龄、维生素B12缺乏等也均是危险因素.

摘要： 目的 观察叶酸缺乏的小鼠胚胎干细胞系ES-D3中微小RNA302a(miR-302a)、Bcl2L11的表达变化,并对miR-302a与Bcl2L11的靶向关系进行预测和验证.方法 取适量ES-D3细胞,置于缺乏叶酸的培养液中培养,分别于培养0、24、48、72 h(A、B、C、D组)时收集细胞,实时荧光定量PCR法检测miR-302a、Bcl2L11 mRNA,Western blotting法检测细胞Bcl2L11蛋白(BimEL、BimL及BimS蛋白).生物信息学软件预测Bcl2L11与miR-302a的靶向结合位点.以小鼠3T3细胞基因组DNA为模板,设计3'UTR扩增引物,PCR扩增基因的3 'UTR序列,将其克隆到pmiR-RB-REPORT双荧光素酶报告载体中,构建Bcl2L11-3 'UTR野生载体;设计突变引物将靶标序列突变,构建突变载体,miRNA-302a mimics及Negative Control分别与Bcl2L113'UTR双报告基因野生载体及突变载体共转染,分别为1组(Bcl2L113 'UTR野生型载体+Negative Control)、2组(Bcl2L113'UTR野生型载体+miR-302a mimics)、3组(Bcl2L113 'UTR突变型载体+Negative Control)、4组(Bcl2L113'UTR突变型载体+miR-302a mimics),转染后测算各组报告基因hRluc的相对荧光值,验证miR-302a与Bcl2L11是否存在相互作用.结果 A、B、C、D组细胞miR-302a相对表达量分别为1.00±0.20、0.65±0.32、0.50±0.22、0.43±0.24,与A组比较,D组miR-302a相对表达量下降(P＜0.05);A、B、C、D组细胞Bcl2L11 mRNA相对表达量分别为1.00±0.00、1.22±0.19、1.82±0.37、3.49±0.45,与A组比较,D组Bcl2L11 mRNA相对表达量升高(P＜0.05);A、B、C、D组细胞BimEL相对表达量分别为0.86±0.02、0.87±0.03、0.92±0.02、1.10±0.06,与A组比较,C、D组BimEL相对表达量升高(P＜0.05);A、B、C、D组细胞BimL相对表达量分别为0、0.09±0.02、0.16±0.04、0.26±0.03,与A组比较,B、C、D组BimL相对表达量升高(P＜0.05);A、B、C、D组细胞BimS相对表达量分别为0、0、0.11 ±0.04、0.18 ±0.04,与A组比较,C、D组BimS相对表达量升高(P＜0.05).miR-302a和Bcl2L11存在相互作用.1、2、3、4组报告基因hRluc的相对荧光值分别为1.00±0.07、0.64±0.02、1.00±0.03、0.95±0.06,与其他组比较,2组相对荧光值降低(P＜0.05).结论 叶酸缺乏的ES-D3细胞中miR-302a表达下调、Bcl2L11 mRNA及蛋白表达上调.miR-302a与Bcl2L11基因有较强的相互作用,胚胎干细胞凋亡过程中Bcl2L11为miR-302a的靶基因.

摘要： 目的 以小鼠胚胎干细胞(mESCs)为模型,研究叶酸缺乏与自噬可能的关联性.方法 mESCs由本实验室冻存,在正常叶酸条件下培养至48 h进行传代,收集细胞后取等量细胞,分别在低剂量叶酸水平(叶酸缺乏组,FD)和正常叶酸(正常对照组,Control)条件下,培养mESCs至48 h,检测自噬关键蛋白LC3B和促进自噬的转录因子Foxo3表达量变化.结果 叶酸缺乏组中,LC3B在mRNA水平和蛋白水平的表达量均上调(P<0.05);Foxo3在mRNA水平表达上调(P<0.01).结论 叶酸缺乏时培养的mESCs可能发生自噬,可能通过作用于促进自噬的转录因子Foxo3,使其表达量升高,影响了DNA的转录,自噬相关基因表达上调,从而可能促进了自噬的发生,为神经管畸形的发病机制研究提供了新的思路,也为孕期补充叶酸的必要性提供了可能的理论依据.

摘要： 提到叶酸大家可能会说,叶酸明明是“胎儿的守护神”,孕妇才需要特别注意补叶酸。其实,中老年人也是需要补充叶酸的重点人群。权威部门数据显示:我国居民叶酸缺乏比例高达20%~60%。身体缺少了叶酸,极容易导致血液中的同型半胱氨酸含量升高。而这种物质升高,将会导致脑中风发生的概率直线上升。叶酸可改善血管内皮功能,所以可预防冠心病及其他慢性心血管疾病的发生。

摘要： 目的 探讨叶酸缺乏对人肺腺癌细胞H1299细胞形态、增殖、凋亡及迁移的影响.方法 将人肺癌细胞株H1299分别置于有、无叶酸培养基中(对照组与实验组)连续培养12 d;光学显微镜下观察叶酸对细胞形态变化的影响;采用平板克隆实验、划痕实验评价叶酸对H1299细胞增殖能力及迁移能力的影响;流式细胞术检测2组细胞周期及凋亡变化情况.结果 叶酸缺乏可影响H1299细胞形态;与对照组比较,无叶酸培养6 d后H1299细胞增殖能力明显下降,迁移能力减弱,凋亡率显著增加(P<0.05),细胞周期阻滞于S期.结论 叶酸缺乏可抑制人肺腺癌细胞株H1299的增殖及迁移能力,造成细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡.

摘要： 目的：探讨叶酸缺乏时离乳大鼠学习记忆能力的改变。rn 方法：54只刚离乳的健康雄性SD大鼠，随机分成实验组、对饲组和对照组三组。实验组饲以去叶酸的RHAA配方饲料，另二组饲以添加了8mg叶酸/kg膳食的RHAA饲料，对饲组按实验组的进食量加以控制，对照组不控制进食。每周记录体重和摄食量两次。分别于饲养第2和第6周末测定血清叶酸浓度和进行Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力，记录平均逃避潜伏期和分析原平台象限游泳距离占游泳总距离的百分比，对血清叶酸浓度、逃避潜伏期及原平台象限游泳距离百分比做相关性分析。rn 结果：实验第2周除实验组血清叶酸浓度降低外(p0.05)。实验组从第3周、对饲组从第4周开始摄食量减少，生长速度减慢(p0.05)。相关分析结果表明，血清叶酸浓度与逃避潜伏期及原平台象限游泳距离百分比非常显著相关(r=-0.546，p<0.01;r=0.86，p<0.01)。rn 结论：叶酸缺乏可损害离乳大鼠的空间学习记忆能力，这种损害在叶酸缺乏6周时已相当明显。

摘要： 本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种分离检测叶酸及其光学异构体的方法，该方法采用的色谱柱是以硅胶表面共价键合O‑9‑(叔丁基氨基甲酰)奎宁为填料，采用有机溶剂、有机酸和三乙胺进行梯度洗脱，将叶酸和/或叶酸光学异构体进行分离；流动相流速为0.4～0.6ml/min；色谱柱柱温为20～30°C；检测器波长设定为280±10nm；使用的稀释剂为四氢呋喃、甲醇、水、醋酸、三乙胺的混合溶液，利用峰面积归一化法测得叶酸及其光学异构体的含量。该方法叶酸及其光学异构体出峰时间快，20分钟内即可完成，峰型对称，能将其从多种杂质中分离出来，得到准确的含量，方法简单、快速、有效。

摘要： 一种制备和浓缩(6S，αS)或(6S，αR)四氢叶酸酯盐和(6S，αS)或(6S，αR)四氢叶酸的方法，其特征在于在有机溶剂中制备或溶解由四氢叶酸酯与芳族磺酸的加成盐的非对映体构成的等摩尔的或浓缩的混合物，随后将其结晶至少一次，如果合适，再将结晶体水解以产生(6S，αS)或(6S，αR)四氢叶酸，并将其作为游离酸结晶出来或以盐的形式将其分离出来。

摘要： 本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种分离检测叶酸及其光学异构体的方法，该方法采用的色谱柱是以硅胶表面共价键合O‑9‑(叔丁基氨基甲酰)奎宁为填料，采用有机溶剂、有机酸和三乙胺进行梯度洗脱，将叶酸和/或叶酸光学异构体进行分离；流动相流速为0.4～0.6ml/min；色谱柱柱温为20～30°C；检测器波长设定为280±10nm；使用的稀释剂为四氢呋喃、甲醇、水、醋酸、三乙胺的混合溶液，利用峰面积归一化法测得叶酸及其光学异构体的含量。该方法叶酸及其光学异构体出峰时间快，20分钟内即可完成，峰型对称，能将其从多种杂质中分离出来，得到准确的含量，方法简单、快速、有效。

摘要： 本发明提供了一种叶酸药物组合物，包括：亚铁盐、B型明胶与叶酸。与现有技术相比，本发明以亚铁盐作为抗氧剂，可以隔绝和吸引氧化物质如氧气等对叶酸的氧化作用，同时亚铁盐还可与叶酸发挥抗贫血的协同作用；以B型明胶作为粘合剂，利用B型明胶的高粘度值使组合物形成紧密结合的固体组合物从而对叶酸形成保护效应，同时B型明胶为碱性明胶，能够改变叶酸的酸碱微环境，使叶酸处于一个偏碱性环境从而有利于叶酸的稳定；通过亚铁盐与B型明胶的协同作用，使叶酸的化学稳定性得到增强，特别是能够有效降低叶酸结构A位的断裂风险，增强叶酸的抗氧化性，有利于叶酸的长期稳定，且不影响叶酸的药物溶出行为，还能同时与叶酸发挥抗贫血的协同功效。

摘要： 一种制备和浓缩(6S,αS)或(6S,αR)四氢叶酸酯盐和(6S,αS)或(6S,αR)四氢叶酸的方法,其特征在于在有机溶剂中制备或溶解由四氢叶酸酯与芳族磺酸的加成盐的非对映体构成的等摩尔的或浓缩的混合物,随后将其结晶至少一次,如果合适,再将结晶体水解以产生(6S,αS)或(6S,αR)四氢叶酸,并将其作为游离酸结晶出来或以盐的形式将其分离出来。

摘要： 本发明主要涉及6‑R‑四氢叶酸氧化合成叶酸的方法。所述的6‑R‑四氢叶酸氧化合成叶酸的工艺是按下面方法实现的：在以苯甲酸盐为拆分剂，拆分6‑S‑四氢叶酸苯甲酸盐晶体剩余的母液中，加入一定量的双氧水和负载在大孔分子筛上的卟啉镍/卟啉錳复合催化剂，低温下反应一段时间，TLC监控反应，反应结束后过滤回收复合催化剂。反应液经真空浓缩，冷却放置即得到叶酸粗产品。HPLC分析粗产品叶酸纯度大于95.2％，乙醇重结晶后精制叶酸纯度大于98.5％，按拆分母液中6‑R‑四氢叶酸含量计算，精制叶酸收率大于90％。

摘要： 本发明主要涉及用于6‑R‑四氢叶酸氧化合成叶酸的负载型复合催化剂的制备方法。所述的6‑R‑四氢叶酸氧化合成叶酸负载型复合催化剂的制备是按下面方法实现的：一定量的SBA‑15分子筛悬浮于10倍体积的氯仿/乙醇(2:1)溶液中，加入一定量的四苯基卟啉，搅拌下溶解，回流2小时，再加入一定量的乙酸镍和乙酸錳的乙醇/水(5:1)溶液，继续回流4小时。过滤，用蒸馏水洗涤3次，真空干燥得到负载型复合催化剂。该催化剂用于6‑R‑四氢叶酸双氧水氧化合成叶酸反应中，催化效果良好。使用原料2％重量的催化剂，得到的叶酸产品精制后纯度可达98.5％以上，收率90％以上。

摘要： 本发明涉及一种基因工程及临床医学领域，具体为一种miRNA标志物在制备筛查叶酸缺乏群体的宫颈上皮内瘤变试剂中的应用。一种miRNA标志物在制备筛查叶酸缺乏群体的宫颈上皮内瘤变试剂中的应用，所述的叶酸缺乏标准为不大于10nmol/L，所述的miRNA标志物包括：miRNA为14个；miR‑10a,miR‑375，miR‑23a,miR‑18a，miR‑6774,miR‑21,miR‑3613,miR‑4730，miR‑1247,miR‑3607,miR‑224,miR‑30a,miR‑30c,miR‑196b。所述的试剂或试剂盒可以用来检查叶酸缺乏患者宫颈组织内14个miRNA表达情况。以便于分析此类群体患CIN乃至宫颈癌的风险性。

摘要： 本发明的实施方案涉及治疗叶酸缺乏和早孕反应的制剂和方法。该剂型具有有效量的叶酸和有效量的姜醇成分，以抑制恶心和/或胃部不适并促进血细胞生成。

摘要： 本发明涉及一种基因工程及临床医学领域，具体为一种miRNA标志物在制备筛查叶酸缺乏群体的宫颈上皮内瘤变试剂中的应用。一种miRNA标志物在制备筛查叶酸缺乏群体的宫颈上皮内瘤变试剂中的应用，所述的叶酸缺乏标准为不大于10nmol/L，所述的miRNA标志物包括：miRNA为14个；miR‑10a,miR‑375，miR‑23a,miR‑18a，miR‑6774,miR‑21,miR‑3613,miR‑4730，miR‑1247,miR‑3607,miR‑224,miR‑30a,miR‑30c,miR‑196b。所述的试剂或试剂盒可以用来检查叶酸缺乏患者宫颈组织内14个miRNA表达情况。以便于分析此类群体患CIN乃至宫颈癌的风险性。