神经管缺陷

摘要： 1概述胎儿神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是仅次于先天性心脏病的第二种最常见的严重出生缺陷,在全世界,每1000例中就有1例NTDs,给家庭和社会带来了巨大的负担和压力。神经管发育开始于妊娠的第3~4周,由中胚层中背侧部分神经板的底层脊和前脊索折叠形成,并通过神经元的形成封闭前后神经孔。如果在整个神经发育过程中受到某些致病因素的影响,则会导致NTDs。NTDs可存在于从大脑到脊髓的任何部位,分为开发性神经管畸形和闭合性神经管畸形。NTDs致病的详细机制仍不清楚,但一致认为是遗传和环境因素相互作用的结果[1]。

摘要： 神经管缺陷(neural tube defect,NTD)是胚胎发育早期因神经管闭合失败而导致的严重先天性缺陷,包括无脑畸形、脊柱裂、脑膨出。脊柱裂是NTD最常见表型。如果胎儿的中枢神经系统出现缺陷,会严重影响胎儿发育,给孕妇及其家庭带来很大的心理压力和经济负担。围受孕期补充叶酸可预防NTD的发生,大大降低胎儿发生NTD的风险[1-2],但每年仍有许多NTD新发病例,且病因和发病机制尚不清楚[3]。

摘要： 目的了解北京市什刹海社区建册孕妇叶酸规律服用状况及其影响因素,为辖区目标人群提高叶酸规律服用提供行动依据。方法针对2020年6月至2021年5月在什刹海社区卫生服务中心建立《北京市母子健康手册》的793名孕妇的叶酸服用情况及其规律服用情况进行描述性统计学分析,采用Logistic回归模型分析影响叶酸规律服用的因素。结果2020年6月至2021年5月什刹海社区建册孕妇叶酸服用率为99.24%(787/793),规律服用叶酸依从率为55.53%(437/787)。不同年龄、文化程度、户籍,以及是否有分娩史、不同孕产次数的孕妇规律服用叶酸依从率不同(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示年龄、文化程度、户籍、产次、是否有分娩史是孕妇叶酸规律服用的影响因素(P<0.05)。结论什刹海社区建册孕妇普遍服用叶酸,但规律服用叶酸依从率较低;年龄较长、文化程度较高、本地户口、有分娩史者规律服用叶酸的依从率较高;应针对性加强辖区目标人群的宣传教育。

摘要： 目的 观察产前超声定位胎儿脊髓圆锥的价值,评价其诊断胎儿脊髓拴系综合征(TCS)的准确率及临床意义.方法 10胎产前超声诊断TCS,后经新生儿脊柱超声、MRI或尸检证实;与羊膜腔穿刺及羊水细胞染色体核型检查结果相对照,回顾性观察其超声表现,判断脊髓圆锥下缘位置及有无合并症.结果 10胎脊髓圆锥位置均低于L3水平,均合并椎体或椎管内异常,其中4胎合并椎管外复杂畸形.4胎接受染色体核型分析,2胎为18-三体综合征合并复杂畸形,2胎核型正常.结论 脊髓圆锥下缘低于L3水平是产前超声诊断TCS的重要线索;发现TCS胎儿合并脊柱外结构异常等复杂畸形时,应行遗传学检测.

摘要： 目的 探讨miR-322-5p调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的表达及改善细胞凋亡对大鼠神经管闭合的作用.方法 采用全反式维甲酸?(ATRA)?诱导大鼠神经管畸形?(NTDs)?模型.通过实时定量PCR检测miR-322-5p在ARTA诱导的大鼠胚胎脊髓中的表达情况;通过Western?blotting检测NOX4及凋亡蛋白的表达情况;采用免疫组织化学技术和组织免疫荧光技术观察NOX4在胚胎神经管中的定位和表达情况;通过对C17.2神经干细胞转染miRNA-空白对照?(miR-NC)、mimic-322-5p及NOX4高表达质粒,明确NOX4和miR-322-5p之间的调控作用,采用实时定量PCR检测转染后miR-322-5p的表达,并通过Western?blotting检测转染后细胞NOX4以及凋亡蛋白的表达情况.结果 在ATRA诱导的大鼠NTDs模型中,NOX4表达上调,miR-322-5p表达下调.在C17.2神经干细胞中,转染miR-322-5p抑制了NOX4的表达,也抑制了凋亡蛋白的表达.结论 miR-322-5p可抑制NOX4的表达,并抑制大鼠NTDs的发生.

摘要： cqvip:孕妇39岁,孕38周,外院超声提示"胎儿脊髓圆锥低位";孕2产1,无家族遗传病史及致畸因素接触史。产科查体未见异常。超声:胎儿脊柱连续,脊髓圆锥位于L4水平,硬脊膜下端止于S2水平,骶管末端见14 mm×5 mm无回声包块(图1A),骶尾部椎弓合拢;提示胎儿骶管囊肿合并脊髓拴系综合征。出生后1个月高频超声见骶管内16mm×5mm无回声包块,脊髓圆锥位于L4水平(图1B);2个月后包块增大至24mm×8mm(图1C);同期MRI见L5~S1硬脊膜囊内终丝脂肪沉积伴周围脂肪组织稍增多,S2~S3水平骶管稍扩张、骨质结构欠完整,提示脊髓圆锥低位、骶管Tarlov囊肿。

摘要： 目的 分析孕中期母血清AFP(血清甲胎蛋白)检测产前筛查胎儿神经管缺陷(NTD)的临床应用效果.方法 采用回顾性分析,收集2012年1月至2018年12月进行产前筛查的产妇395112例作为研究对象,对上述研究对象的各种资本资料、缺陷监测资料、产前检测结果、随访结果等进行统计分析,利用软件评估胎儿NTD发生风险以及检查准确率.结果 在2012年至2018年我县共进行产前筛查患者395112例,其中NTD高风险检出1848例,检出率为0.47％;产妇筛查后对产妇分娩情况等进行随访,395112筛查患者共随访380663例,随访率为96.34％;1848例高风险产妇中检出无脑儿11例、脊柱裂36例、脑膨出9例、NTD 91例,检出率分别为0.60％、1.95％、0.49％、4.92％;378815例低风险产妇中检出无脑儿10例、脊柱裂26例、脑膨出14例、NTD 50例,检出率分别为0.03％、0.07％、0.04％、0.13％,高风险NTD检出率明显高于低风险,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 在产妇孕中期进行血清AFP检测产前筛查能够帮助医护人员明确胎儿是否正常,能够有效检出神经管缺陷症,对于提高新生儿出生质量具有较好的应用效果.

摘要： 目的分析国家重大公共卫生服务项目"增补叶酸预防神经管缺陷"(简称为叶酸项目)在上海市的实施情况和干预效果。方法基于上海市叶酸项目统计表和上海市《出生缺陷儿、残疾儿童报告卡》数据,分析2008-2018年神经缺陷(neonatal neural tube defects, NTD)发生率的分布趋势,并与上海市妇女孕期前后叶酸服用行为进行线性分析。结果 2010-2018年,累计87 133名育龄期妇女增补了叶酸,依从比>90%。上海市全孕周NTD病例共910例,发生率为4.06■。其中,2010年发生率(5.42■)最高,2017年(2.56■)最低。上海市NTD发生率呈总体显著下降趋势(Z=3.272,P=0.001)。2008-2018年,910例NTD病例中,叶酸项目区病例数为459例(50.44%),非叶酸项目区病例数为450例(49.45%),1例为弃婴。叶酸项目区和非叶酸项目区NTD发生率均呈显著下降趋势(Z=-3.272,P=0.022;Z=-2.451,P=0.014);上海市户籍人口NTD发生率的变化趋势无统计学意义(Z=-1.420,P=0.156),非上海市户籍人口NTD发生率亦呈显著下降趋势(Z=-3.067,P=0.002)。2008-2018年,上海市NTD以无脑畸形为主,占54.62%,其次是脊柱裂(26.37%)和脑膨出(19.01%),三者发生率均在波动中下降。2011-2018年,上海市NTD产前确诊的平均比例为86.52%,2018年达94.74%,总体呈显著上升趋势(Z=2.085,P=0.037);2008-2018年,有109例NTD(11.99%)活产,733例(80.64%)治疗性引产,59例(6.49%)死胎死产,8例(0.88%)出生后死亡。活产儿NTD的发生率为0.23■~0.89■,平均值为0.49■,总体变化趋势无统计学意义(Z=-1.630,P=0.103)。叶酸项目实施前后,叶酸项目区、非叶酸项目区与上海市NTD的发生率均下降,差异具有统计学意义(P=0.003、P<0.001和P<0.001),其中上海市降幅达27.1%。叶酸服用人数和服用依从人数与叶酸项目区NTD发生率呈良好的线性关系(调整R2均为0.709),而叶酸服用人数和服用依从人数与上海市NTD发生率无显著的线性关系。结论非上海市户籍人口是NTD干预健康教育的重点人群,建议探索育龄期妇女增补叶酸个性化方案,形成孕产妇人群叶酸增补长效机制。

摘要： 神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是一种严重的小儿神经系统先天畸形,据报道2015年全球NTDs患病率为1.86‰,世界不同地区的NTDs患病率为0.75‰~3.12‰[1]。该病于妊娠早期21~28 d发生,因神经皱襞在中线融合失败,神经管未闭合所致,是最常见和致残率最高的出生缺陷之一[2]。根据中枢神经组织是否暴露于外部环境,可将神经管缺陷划分为两种类型,即开放性和闭合性缺陷;根据神经管闭合失败的解剖部位,开放性缺陷又可分为颅轴裂、前脑无脑和脊髓脊膜膨出,闭合性缺陷又可分为脑膨出、脊膜膨出和隐性脊柱裂[3]。

摘要： 孕妇25岁,无明显遗传病家族史,与其配偶非近亲关系。此次妊娠系第1胎,妊娠期间未接触过有毒或致畸剂。妊娠16周时在当地医院进行唐氏综合征筛查,结果显示甲胎蛋白中位数倍数值为3.09,神经管缺陷风险为高风险。孕17周胎儿超声结果显示单胎,胎儿测量指标与孕16周相符,羊水量少,头颅形状不规则,小脑呈香蕉样,骶尾部脊柱前方见混合性回声,部分增强,提示婴儿多囊肾及脊柱裂可能。妊娠18周行羊膜腔穿刺,胎儿染色体芯片检测未发现明显异常。妊娠20周孕妇选择终止妊娠,并保留胎儿组织,以便进一步检测,确定病因。引产后来本院产前诊断中心进行咨询。

摘要： 为了解答妇幼保健人员和公众在增补叶酸预防神经管缺陷NTDs方面存在的疑问，中国妇幼保健协会出生缺陷防治与分子遗传分会组成围受孕期增补叶酸预防神经管缺陷工作组，制定本指南。本指南是在充分复习国内外文献，参考其他国家和世界卫生组织的指南或建议，并结合NTDs在中国的分布特点、居民膳食叶酸摄入情况及血液叶酸水平等因素后制定的。

摘要： 目的：探讨山西省神经管缺陷的流行病学分布特征。rn 方法：对1996～2004年山西省出生缺陷监测资料进行分析。rn 结果：神经管缺陷的时间分布，9年间全省、城镇和农村神经管缺陷发生率分别经趋势卡方检验均有显著性(P<0．05)，并呈现下降趋势．城镇与农村分布，经卡方检验有高度显著性(P<0．005)。男女性别分布，经卡方检验有高度显著性(P<0．005)。季节分布，应用圆形统计方法中的周期回归法，经方差分析检验，P<0．01。rn 结论：9年间神经管缺陷发生率呈现下降趋势，以农村下降幅度较大．农村神经管缺陷发生率远远高于城镇，女性明显高于男性．神经管缺陷发生率随时间呈周期性的变化，高峰位置在2月份。

摘要： 神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)是一种最常见的严重中枢神经系统先天畸形,主要表现为无脑畸形、脊柱裂、脑膨出.一般认为NTDs是一种多基因遗传病,是遗传因素和环境因素综合作用的结果.本文研究神经管缺陷的NTD的发病特点，NTD的病因，NTD的防治。

摘要： 目的：探讨采用甲胎蛋白(AFP)和绒毛膜促性腺激素β亚单位(Free-βhCG)血清二联法在孕中期胎儿神经管缺陷、染色体异常出生缺陷中的作用，并进一步评价血清二联指标在产前筛查中的实用价值，增加检出率，减少假阳性及假阴性，规范检查程序，减少医疗资源浪费。rn 方法：对2004年8月至2006年4月来本院的孕妇，在知情情况下进行产前筛查，选择孕周15-20周6天的孕妇，结合母龄、孕周、体重等因素，应用时间分辨荧光分析系统，随机分析软件计算出风险率，对高危孕妇进行羊水细胞染色体、B超等产前诊断进行确诊，接受筛查的孕妇追踪至出生。rn 结果：1020例孕中期孕妇，筛查出高危孕妇49例，阳性率为4.8％，其中唐氏高风险38例，神经管畸形高风险11例，确诊4例(脑积水1例、染色体异常2例、死胎1例)，异常检出率DS为6.7％、NTD为2.5％。rn 结论：孕中期二联指标是产前筛查异常胎儿的有效指标，对出生缺陷，降低围产儿死亡率的重要手段之一，具有社会效应和实用性，值得推广应用。

摘要： 21三体综合征又称唐氏综合征(Down),是最常见的一种染色体病.发病率为1/600~1/800.临床表现:患儿有特殊面容和外表,多发畸形,严重智力低下,目前没有有效的治疗方法.神经管缺陷是由于神经管未完全闭合和发育不全所引起的一类先天畸形,主要表现是脑和脊髓的异常,合并有颅骨和脊柱的异常,全国每年新生儿中有10万为神经管缺陷儿,严重者可死亡,病情较轻的虽可手术治疗,但治疗费用昂贵,同时还会造成终生残疾.可以看出21三体综合征和神经管缺陷是常见对人类生命危害严重的疾病,给家庭和社会造成沉重的精神经济负担.因此,无论从社会还是从家庭考虑都迫切需要产前筛查和产前诊断的有效方法.国家和政府对提高出生人口素质非常重视,颁布了一系列法律、法规和相关文件,在2002年卫生部颁布的《产前诊断技术管理办法》中对21三体综合征和神经管缺陷进行产前筛查及产前诊断作出明确规定.为便于统一方法,便于质控,我省从2003年以协作组的形式开展产前筛查和产前诊断工作,我院做了孕14周~22周孕妇血清标志物,每个孕周30例共350例,同时对方法对比、报告方式作了初步临床应用研究.

摘要： 本文介绍了叶酸与神经管缺陷预防，探讨了增补小剂量叶酸预防神经管缺陷调查情况，通过对奥运村地区调查情况的分析，针对育龄妇女增补小剂量叶酸预防神经管缺陷问题，提出了建议和对策。

摘要： 目的：通过妊娠中期孕妇血清甲胎蛋白(AFP)、游离-β-绒毛膜促性腺激素(Free-β-HCG)的检测，进行孕中期胎儿染色体异常及先天性神经管缺陷(NTD)的产前筛查。rn 方法：采用时间分辨免疫荧光分析法(DELFIA)，对孕15-20周孕妇血清AFP、Free-β-HCG的浓度进行检测，结合母龄、孕周、体重等因素，经过软件计算风险率，对高风险孕妇在知情的情况下，自愿选择进行羊膜腔穿刺，羊水细胞染色体核型分析或经腹脐静脉穿刺，取胎儿血培养，进行染色体核型分析;对NID高风险孕妇，均进行B超检查。rn 结果：在17221例孕妇中筛查出21三体高风险798例，占筛查总数的4.63％，18三体高风险73例占筛查总数的0.42％;NID高风险98例占筛查总数的0.57％，在798例21三体高风险和73例18三体高风险孕妇中，有865例进行了羊水细胞染色体检查或胎儿脐血染色体检查，检测出染色体异常核型40例，异常率为4.62％，其中，21三体8例，18三体8例，其它异常24例。98例NTD高风险孕妇中，共检测出无脑儿和/或脊柱裂5例，异常检出率为5.1％。rn 结论：利用孕妇血清AFP，Free-β-HCG对孕中期胎儿染色体异常和NTD进行产前筛查，结合产前诊断，对减少出生缺陷的发生，具有一定的意义。

摘要： 目的：通过对孕妇行孕中期血清生化指标产前筛查，发现孕期胎儿染色体及神经管发育异常，降低出生缺陷率。rn 方法：采用时间分辨免疫荧光法(DELFLA)Eu和Sm双标记试剂盒，测定孕妇空腹静脉血清AFP和Freeβ-HCG浓度，结合孕妇年龄、体重、是否双胎、有无糖尿病史及吸烟史等因素，采用随机软件计算唐氏综合征(DS)和神经管缺陷(NTD)的风险率。rn 结果：5457例筛查孕妇中高风险435例，(唐氏综合征391例、NTD30例、18-三体14例)高风险率8.10％。在391例唐氏综合征高风险孕妇中22例妊娠结局异常，其中4例唐氏综合征患儿，其他染色体异常7例。30例神经管缺陷高风险中8例妊娠结局异常。14例18三体高风险，1例于妊娠21周时羊水过多超声检查发现胎儿多发性畸形，1例多发畸形脐带囊肿。终止妊娠。rn 结论：产前筛查是降低出生缺陷的重要手段之一，不仅能发现预期筛查的疾病，也能发现其他胎儿发育异常，但是并不能发现各种发育异常的胎儿。

摘要： 目的：本研究旨在应用Sequenom MassARRAY SNP基因型分析技术检测并分析山西省出生缺陷高发地区汉族人群中碱基切除修复基因rs1052536及rs3135967多态性与神经管畸形(NTDs)的易感性的关系,为寻找与NTDs发病相关性的危险基因型,并将其作为分子标志用于NTDs高危人群或易感个体的筛选及为预防提供理论依据.方法:本研究应用MassArray单碱基延伸技术平台，对山西省出生缺陷高发地区，08例孕N下Ds胎儿孕妇及233例与病例组相匹配的正常对照孕妇LIG3基因SNPs(rs1052536及rs3135967)进行了病例一对照研究，以探讨其多态性与N下Ds发生的相关性。结果:LIG3基因位点rs1052536携带下厅基因型的个体胚胎发生NTDs的风险较携带纯合野生基因型C/C个体增加(P=0.014,OR=2.31，95%CI,1.17-4.54)，等位基因T相对于等位基因C，有增加NTDs发病风险的趋势(P=0.024,OR=1.50,95%CI,1.06-2.13)。将病例组按畸形类型进行分层分析发现，位点rs1052536无脑儿分组中携带T汀基因型的个体发生NTDs的风险较携带纯合野生基因型C/C个体明显增加(P=0.016,OR=2.69,95%CI，1.18-6.10);等位基因T相对于等位基因C，显著增加了胚胎发生NTDs的风险(P=0.014,OR=1.71,95%CI,1.11-2.63).结论:DNA碱基切除修复通路基因LIG3 rs1052536与NTDs易感性有关，下汀基因型可显著增加胚胎发生脑部NTDs的风险。携带等位基因T可能是发生脑部NTDs的危险因素。

摘要： 本发明提供了一种CDR1as在神经管畸形产前筛查中的应用、神经管畸形产前筛查的产品和方法，涉及临床诊断的技术领域，包括提供circRNA‑CDR1as在作为神经管畸形产前筛查标志物中的应用。通过研究发现，circRNA‑CDR1as在NTDs患儿组织中显著高表达，circRNA‑CDR1as可以单独或联合其他标志物用于怀孕早期先天畸形的常规筛查，对于家庭和社会都具有重大的意义。神经管畸形产前筛查的产品及方法，通过检测circRNA‑CDR1as的表达量对NTDs进行诊断，检测成本低而且灵敏快捷，在怀孕早期即可诊断NTDs。

摘要： 本发明提供了一种CDR1as在神经管畸形产前筛查中的应用、神经管畸形产前筛查的产品和方法，涉及临床诊断的技术领域，包括提供circRNA‑CDR1as在作为神经管畸形产前筛查标志物中的应用。通过研究发现，circRNA‑CDR1as在NTDs患儿组织中显著高表达，circRNA‑CDR1as可以单独或联合其他标志物用于怀孕早期先天畸形的常规筛查，对于家庭和社会都具有重大的意义。神经管畸形产前筛查的产品及方法，通过检测circRNA‑CDR1as的表达量对NTDs进行诊断，检测成本低而且灵敏快捷，在怀孕早期即可诊断NTDs。

摘要： 本发明公开了一种寡肽及其衍生物在制备改善神经管缺陷药物或食品中的应用，属于医药健康技术领域，所述神经管缺陷为妊娠糖尿病引起的胎儿神经管缺陷；所述寡肽包括氨基酸序列Leu‑Pro‑Phe；包含此序列的寡肽简单易得、作用显著，其能够逆转因高糖或其他围产期不良因素引起的Pax3的表达水平降低，进而维持或恢复正常的发育期基因表达程序；因此，本发明技术方案提供的应用除了能改善神经管缺陷外，还能改善神经管缺陷的并发症；本发明的技术方案提供的寡肽可以联合降糖药制成组合物或药盒，应用于妊娠期糖尿病患者，一方面可以通过降糖药的作用降血糖，减少高血糖对胎儿的影响，另一方面可以通过寡肽改善高糖等不利因素导致的胎儿神经管缺陷或其并发症。

摘要： 本发明公开了一种构建KLF12高表达小鼠的方法及在构建非叶酸依赖的神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)小鼠模型的应用，其包括根据Klf12基因序列，利用Cre‑loxP基因重组技术，构建Rosa26Klf12/Klf12小鼠；将所述Rosa26Klf12/Klf12小鼠与SoxCre雌鼠交配，获得的KLF12高表达胚胎即为非叶酸依赖的神经管缺陷小鼠模型，该小鼠模型可以应用在筛选治疗候选药物、保健品的制备或研发中。本发明首次构建高水平KLF12所致非叶酸依赖的NTDs动物模型，该模型与人类非叶酸依赖的NTDs患者类似，具有很好的临床症状模拟性，稳定性高，十分利于进行机理研究和药物筛选。

摘要： 本发明提供一种自胎儿羊水分离人类神经干细胞的方法，所述胎儿经诊断为罹患神经管缺陷。本发明亦提供所述经分离的人类神经干细胞于治疗神经疾病的用途。

摘要： 本发明公开了一种寡肽及其衍生物在制备改善神经管缺陷药物或食品中的应用，属于医药健康技术领域，所述神经管缺陷为妊娠糖尿病引起的胎儿神经管缺陷；所述寡肽包括氨基酸序列Leu‑Pro‑Phe；包含此序列的寡肽简单易得、作用显著，其能够逆转因高糖或其他围产期不良因素引起的Pax3的表达水平降低，进而维持或恢复正常的发育期基因表达程序；因此，本发明技术方案提供的应用除了能改善神经管缺陷外，还能改善神经管缺陷的并发症；本发明的技术方案提供的寡肽可以联合降糖药制成组合物或药盒，应用于妊娠期糖尿病患者，一方面可以通过降糖药的作用降血糖，减少高血糖对胎儿的影响，另一方面可以通过寡肽改善高糖等不利因素导致的胎儿神经管缺陷或其并发症。

摘要： 本发明公开了一种构建KLF12高表达小鼠的方法及在构建非叶酸依赖的神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)小鼠模型的应用，其包括根据Klf12基因序列，利用Cre‑loxP基因重组技术，构建Rosa26Klf12/Klf12小鼠；将所述Rosa26Klf12/Klf12小鼠与SoxCre雌鼠交配，获得的KLF12高表达胚胎即为非叶酸依赖的神经管缺陷小鼠模型，该小鼠模型可以应用在筛选治疗候选药物、保健品的制备或研发中。本发明首次构建高水平KLF12所致非叶酸依赖的NTDs动物模型，该模型与人类非叶酸依赖的NTDs患者类似，具有很好的临床症状模拟性，稳定性高，十分利于进行机理研究和药物筛选。

摘要： 本发明涉及用于医学领域的hTERT重组子诱导构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库，其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo，以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并抽提质粒，以脂质体转染离体传代呈对数生长的神经管缺陷细胞，使重组子与细胞DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT重组子诱导的神经管缺陷细胞模型冻存于液氮，为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。

摘要： 本发明涉及出生缺陷干预领域的导入SV40LT和hTERT重组基因构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库，其主要特征是以T4DNA连接经BamHI酶切质粒SV40LTag DNA及载体pcDNA3.1(-)DNA的产物，构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子；并以Ligation Mix连接经EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo的产物，构建pLXSNneo-hTERT重组子，两重组子经感受态细胞扩增纯化和鉴定后转染入神经管缺陷细胞，经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆并扩大培养，筛选符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40LT和hTERT重组基因介导的神经管缺陷体外研究细胞模型，为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。

摘要： 本发明涉及用于医学研究领域的导入SV40T基因构建神经管缺陷细胞模型及其细胞库，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子、以感受态大肠杆菌纯化重组子、以脂质体转染法将其导入经胶原酶II消化的离体传代或呈对数生长的神经管缺陷组织细胞，使重组子与细胞的DNA整合，并扩大培养经G418筛选含阳性重组子的细胞克隆，筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、软琼脂集落生长、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为SV40T基因介导神经管缺陷体外研究细胞模型冻存于液氮中，为在体外从细胞水平长期研究其发病机制奠定基础。