分子细胞遗传学

摘要： 20世纪初"遗传的染色体学说"的提出和证明标志着细胞遗传学交叉学科建立,伴随相关学科的发展,20世纪60年代末期细胞遗传学又与分子遗传学相结合,建立发展了分子细胞遗传学交叉学科.分子细胞遗传学以DNA分子原位杂交技术为核心,不断拓展应用领域,为生命科学研究提供了直观、高效的技术手段.原位杂交技术与基因组、细胞生物学等技术结合,被广泛应用于人类、动物、植物的起源、进化、驯化等基础研究和远缘杂交、染色体工程等应用研究.通过形象地展示DNA、RNA、蛋白质在细胞中的实际位置,揭示DNA序列之间的实际位置和顺序、亲缘物种间的进化关系和结构重排、基因组拼接序列的质量、转录水平RNA和翻译水平蛋白质的位置和数量变化等.江苏省遗传学会会员单位南京农业大学、扬州大学、南京林业大学、江苏师范大学、徐淮地区农科院等自20世纪中期开展细胞遗传学理论技术研究,伴随学科发展不断创新,建立了较完善的分子细胞遗传技术体系,并成功应用于开展植物系统进化、远缘杂交、染色体工程、基因组学等研究,取得了一批研究成果.本文将主要综述江苏省在该领域取得的重要进展,并展望未来发展方向.

摘要： 目的分析儿童初发急性淋巴细胞白血病(ALL)分子细胞遗传学异常及其与临床特征的关系。方法以2009年1月至2018年12月上海市儿童医院血液科确诊的初发ALL患儿403例为研究对象,完善骨髓涂片细胞学、免疫分型、染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)等。结果 1.403例患儿中,男240例(59.6%),女163例(40.4%);年龄(5.31±3.46)岁;急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)374例(92.8%),急性T淋巴细胞白血病(T-ALL) 29例(7.2%)。2.细胞遗传学:染色体核型分析有分裂相者311例(77.2%),异常者126例,异常检出率40.5%,其中高超二倍体和超二倍体占15.4%(48/311例)。3.融合基因:融合基因阳性者110例(27.3%),其中TEL/AML1 70例(17.4%)、BCR/ABL 13例(3.2%)、MLL 19例(4.7%),2015年至2018年检出PBX1/TCF3 8例(4.0%),EBF1-PDGFRB 1例(0.5%),SIL/TAL1 6例,占T-ALL的33.3%(6/18例),提高了T-ALL分子异常检出率;BCR/ABL阳性患儿年龄大于MLL、TEL/AML1阳性患儿[(8.01±3.11)岁比(3.89±1.84)岁、(1.56±1.25)岁,P<0.001];PBX1/TCF3阳性患儿年龄[(6.58±4.83)岁]大于TEL/AML1、MLL阳性患儿(均P<0.05);MLL阳性患儿年龄小于TEL/AML1阳性患儿[(1.56±1.25)岁比(3.89±1.84)岁,P=0.001];MLL阳性患儿初发时的白细胞数高于TEL/AML1、BCR/ABL阳性患儿[(76.97±19.87)×109/L比(16.94±2.28)×109/L、(20.53±6.49)×109/L,P<0.05];PBX1/TCF3阳性患儿初发时的白细胞数高于TEL/AML1阳性患儿[(85.75±30.32)×109/L比(16.94±2.28)×109/L,P=0.002];MLL阳性患儿免疫分型以早前B-ALL为主(14/19例),TEL/AML1阳性、BCR/ABL阳性患儿均以普通B-ALL为主(57/70例、11/15例)。4.染色体核型分析、FISH、PCR3种方法对初发ALL患儿分子遗传学异常检出率分别为40.5%(126/403例)、69.2%(279/403例)、29.7%(60/202例),差异有统计学意义(P<0.001);染色体核型分析与PCR异常检测率差异无统计学意义(P=0.71)。5.不同性别及年龄组分子细胞遗传学异常检出率差异均无统计学意义(P=0.651、0.721),而初发时的白细胞数≥50×109/L组与<50×109/L组异常检出率比较差异有统计学意义(37/51例比107/352例,P<0.001),B-ALL遗传学异常检出率高于T-ALL(275/374例比14/29例,P=0.005)。结论儿童ALL染色体核型以超二倍体比例较高;融合基因分布与年龄、初发白细胞数和免疫分型有关;3种检测方法互相补充大大提高了遗传学异常检出率;T-ALL遗传学异常检出率低,可能需要新的检测方法。

摘要： 目的 分析儿童初发急性淋巴细胞白血病(ALL)分子细胞遗传学异常及其与临床特征的关系.方法 以2009年1月至2018年12月上海市儿童医院血液科确诊的初发ALL患儿403例为研究对象,完善骨髓涂片细胞学、免疫分型、染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)等.结果 1.403例患儿中,男240例(59.6％),女163例(40.4％);年龄(5.31±3.46)岁;急性B淋巴细胞白血病(B-ALL) 374例(92.8％),急性T淋巴细胞白血病(T-ALL) 29例(7.2％).2.细胞遗传学:染色体核型分析有分裂相者311例(77.2％),异常者126例,异常检出率40.5％,其中高超二倍体和超二倍体占15.4％(48/311例).3.融合基因:融合基因阳性者110例(27.3％),其中TEL/AML1 70例(17.4％)、BCR/ABL 13例(3.2％)、MLL 19例(4.7％),2015年至2018年检出PBX1/TCF38例(4.0％),EBF1-PDGFR1例(0.5％),SIL/TAL1 6例,占T-ALL的33.3％(6/18例),提高了T-ALL分子异常检出率;BCR/ABL阳性患儿年龄大于MLL、TEL/AML1阳性患儿[(8.01±3.11)岁比(3.89±1.84)岁、(1.56±1.25)岁,P＜0.001];PBX1/TCF3阳性患儿年龄[(6.58±4.83)岁]大于TEL/AML1、MLL阳性患儿(均P＜0.05);MLL阳性患儿年龄小于TEL/AML1阳性患儿[(1.56±1.25)岁比(3.89±1.84)岁,P=0.001];MLL阳性患儿初发时的白细胞数高于TEL/AML1、BCR/ABL阳性患儿[(76.97±19.87)×109/L比(16.94±2.28)×109/L、(20.53±6.49)×109/L,P＜0.05];PBX1/TCF3阳性患儿初发时的白细胞数高于TEL/AML1阳性患儿[(85.75 ±30.32)×109/L比(16.94±2.28)×109/L,P=0.002];MLL阳性患儿免疫分型以早前B-ALL为主(14/19例),TEL/AML1阳性、BCR/ABL阳性患儿均以普通B-ALL为主(57/70例、11/15例).4.染色体核型分析、FISH、PCR3种方法对初发ALL患儿分子遗传学异常检出率分别为40.5％(126/403例)、69.2％(279/403例)、29.7％(60/202例),差异有统计学意义(P＜0.001);染色体核型分析与PCR异常检测率差异无统计学意义(P=0.71).5.不同性别及年龄组分子细胞遗传学异常检出率差异均无统计学意义(P=0.651、0.721),而初发时的白细胞数≥50×109/L组与＜50×109/L组异常检出率比较差异有统计学意义(37/51例比107/352例,P＜0.001),B-ALL遗传学异常检出率高于T-ALL(275/374例比14/29例,P=0.005).结论 儿童ALL染色体核型以超二倍体比例较高;融合基因分布与年龄、初发白细胞数和免疫分型有关;3种检测方法互相补充大大提高了遗传学异常检出率;T-ALL遗传学异常检出率低,可能需要新的检测方法.

摘要： 目的 对1例B超提示为Dandy-Walker畸形的胎儿进行遗传学分析,探讨其染色体DNA拷贝数变异与表型的相关性.方法 对1例产前诊断Dandy-Walker综合征胎儿行G显带染色体核型分析、单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism array,SNP array)及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测.胎儿父母行外周血染色体核型分析及FISH检测.结果 SNP array分析显示患儿染色体6p25.3p25.1存在4266 kb缺失,FISH验证了SNP array的结果.根据父母外周血FISH结果,确认胎儿父亲为隐匿性t(6;14)(p25.1;p13)携带者,而胎儿遗传了其中一条衍生的6号染色体der(6)t(6;14)(p25.1;p13).结论 成功诊断了Dandy-Walker综合征胎儿的遗传学病因,6p25.3p25.1片段缺失的染色体是由于父亲隐匿性平衡易位产生的不平衡配子所致.

摘要： 大赖草对赤霉病具有较好的抗性,将大赖草赤霉病抗性基因转入普通小麦,对拓宽小麦赤霉病抗性基础有重要意义.本研究在获得抗赤霉病普通小麦-大赖草异附加系基础上,采用1200 R 60 Co-γ射线处理小麦-大赖草二体附加系DA7Lr花粉,授予已去雄的普通小麦中国春,对其后代(M1)种子根尖细胞有丝分裂中期染色体进行GISH分析,获得了1株具有1条普通小麦-大赖草易位染色体的植株,让其自交,对自交后代中具有2条易位染色体植株的花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ进行观察,发现2条易位染色体形成了稳定的环状二价体,表明该植株为纯合体.利用顺序GISH-双色FISH分析,结合C-分带、小麦D基因组专化探针Oligo-pAs1-2和B基因组专化探针Oligo-pSc119.2-2,进一步鉴定出该普通小麦-大赖草易位系为T3AS·3AL-7Lr#1S,且筛选出了可追踪该易位系的3个EST-STS分子标记BE591127、BQ168298和BE591737.该易位系的育成为小麦赤霉病遗传改良提供了新种质.

摘要： 目的 综合应用多种技术产前诊断1例Phelan-McDermid综合征.方法 综合应用单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP Array)、多重连接探针扩增(multiplex ligation dependent probe amplification,MLPA)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对胎儿进行产前诊断.结果 SNP Array分析显示患儿携带染色体22q13.31q13.33区4.03 Mb的缺失,MLPA、FISH证实了上述发现.患儿父母FISH检测未发现易位或缺失.结论 在产前诊断中综合应用多种技术进行判断,可为临床提供更为准确的信息,避免缺陷患儿的出生.

摘要： 大赖草对赤霉病具有较好的抗性,将大赖草赤霉病抗性基因转入普通小麦,对拓宽小麦赤霉病抗性基础有重要意义.本研究在获得抗赤霉病普通小麦-大赖草异附加系基础上,采用60Co-γ 射线(1200 Rad,剂量率100 Rad min-1)处理小麦-大赖草二体附加系DA7Lr,并用处理后的花粉授给去雄的普通小麦中国春,对其M1代种子根尖细胞有丝分裂中期染色体进行GISH分析,获得1株具有一条普通小麦-大赖草易位染色体的植株,对其自交后代中具有2条易位染色体植株的花粉母细胞减数分裂中期I观察发现,2条易位染色体形成了稳定的环状二价体,表明该植株为纯合体.利用顺序GISH-双色FISH分析,结合C-分带、小麦D组专化探针Oligo-pAs1-2和B组专化探针Oligo-pSc119.2-2,进一步鉴定出该易位系为T5AS-7LrL·7LrS,同时筛选出可追踪该易位系的3个EST-STS分子标记,即BE591127、BQ168298和BE591737.该易位系的育成也为小麦赤霉病遗改良提供了新种质.

摘要： 大赖草高抗小麦赤霉病,将大赖草抗性基因导入普通小麦,对创新小麦赤霉病抗性种质有重要意义.为了获得普通小麦-大赖草抗赤霉病易位系,采用12 00 R 60Co-γ射线处理小麦-大赖草二体附加系DA7Lr花粉,授予已去雄的普通小麦中国春,对其后代(Ml)种子根尖细胞有丝分裂中期染色体进行GISH分析,获得了1株具有1条普通小麦-大赖草易位染色体的植株,让其自交,对自交后代中具有2条易位染色体植株的花粉母细胞减数分裂中期I进行观察,发现2条易位染色体形成了稳定的棒状二价体,表明该植株为纯合体.利用顺序GISH-双色FISH分析,结合小麦D组专化探针Oligo-pAs 1-2和B组专化探针Oligo-pSc119.2-2,进一步鉴定出该普通小麦-大赖草易位系为T6DL· 7LrS,该易位系的育成也为小麦赤霉病遗传改良提供了新种质.

摘要： 多发性骨髓瘤(multiple rmyeloma,MM)是一种浆细胞克隆性增生的恶性肿瘤.在血液系统恶性肿瘤中占1o％,具有不稳定的遗传学特点,多表现为明显多变的染色体异常,仍属于不可治愈的疾病.MM患者的生存差异较大,从数月至十余年不等.这说明骨髓瘤患者间存在有遗传异质性,主要表现为分化程度不一及细胞和分子遗传特征的差异.随着新的研究技术的不断发展证实几乎所有的MM患者均存在染色体的异常,包括数目和结构的异常,基因表达的异常.各种异常之间有重要的联系,并且这些细胞遗传学的改变与疾病的临床特点密切相关.通过对MM患者细胞遗传学的研究,有助于深入了解疾病的发生,进展机制,制定更加合理的治疗方案.

摘要： 细胞学与分子细胞遗传学为研究菊属植物的形成和菊属植物种间关系的确定提供了技术上的支持,而且对研究所需的基本信息,起着至关重要的作用.对菊属植物细胞学和分子细胞遗传学中的染色体倍数性、减数分裂以及荧光原位杂交这3个方面的研究进展进行了详细的探讨,希望能为相关领域的技术人员提供参考依据.

摘要： 多发性骨髓瘤(MM)与实体肿瘤类似,存在严重的染色体不稳定,分子及细胞遗传学异常在疾病的发生和发展中起着重要的始动和促进作用.分子细胞遗传学异常是MM最重要的预后因素,在疾病发生发展过程中出现的克隆性衍化与肿瘤的难治和耐药密切相关.本中心自2007年起逐渐建立起了系统的MM遗传学研究体系,并完成了500余例初诊和200余例复发/难治患者的遗传学检测,并对85例具有初诊及至少一次复发标本的患者进行了克隆性衍化的监测。

摘要： 目的：对部分经常规染色体核型发现结构畸变后通过不同的细胞分子遗传学方法进行更精细的染色体定位和定量分析的病例进行了总结。方法：采用荧光原位杂交(FISH )、多重连接探针扩增(MLPA)和微阵列比较基因组杂交(aCGH)等方法进行分子遗传学分析。结果：病例根据染色体结构畸变分二类:1)存在小的额外标记染色体(sSMCs)，简称标记染色体；2)染色体部分缺失或重复、倒位和易位畸变。结论：一部分sSMCs与表型异常相关，具有表型效应。

摘要： 人们对白血病的遗传学认识已从染色体水平进入分子水平。本文介绍了急性白血病预后、儿童急性淋巴细胞性白血病的预后、成人急性淋巴细胞性白血病的预后、慢性淋巴细胞性白血病(慢淋)及多发性骨髓瘤预后的生物学指标；探讨了以分子靶点为基础的白血病靶向治疗及药物药敏治疗问题。

摘要： 荧光原位杂交(FISH)技术是一种分子细胞遗传学技术，可在单一细胞内观察到不同的基因信息。本文拟对在检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤样病变时采用的宫颈薄层液基细胞FISH技术中的制片方法及操作技术进行探讨。

摘要： 肿瘤细胞遗传学异常的检测是进行白血病和实体瘤的诊断、分型及预后的重要手段，同时也为肿瘤发病机制的研究提供了分子生物学研究的线索。肿瘤中常见染色体异常:易位、缺失、倒位和扩增。本文对细胞遗传学检测技术进行介绍，并就染色体核型分析、荧光原位杂交(FISH)原理、比较基因组杂交技术等进行了简述。

摘要： 本发明公开了一种小分子荧光探针及其在染色体分析和细胞遗传学中的应用，本发明可以用作染色体图像分割的通用工具，用于识别区分重叠、聚集或接触的染色体；作为定位着丝粒位置的参考标记，用于同源染色体的分类、不同形态的染色体的区分、染色体臂长估计，与核型分析配合使用用于染色体缺失、多倍体、与荧光原位杂交(FISH)配合使用，用于指定基因的定位和染色体异常的判断。该发明为辅助染色体分析提供了一种快速、可靠的方法，在常规临床实践中有很大的潜力。

摘要： 本发明公开了一种应用卡扣式载玻片培养盒检测细胞遗传学异常的方法及装置。其中，该方法包括：获取核苷酸探针信息；将所述核苷酸探针信息用于杂交，得到杂交生物组织；通过荧光检测法对所述杂交生物组织进行检测，得到检测结果；利用所述检测结果生成异常定位分析数据。本发明解决了现有技术中的检测过程仅仅是通过普通核酸探针来进行对位检测，并将异常项进行筛选和标记，但是这样往往由于核酸探针序列不稳定，导致对位检测不精准，降低了检测的质量和效率的技术问题。

摘要： 本发明提供了应用MLPA检测细胞遗传学异常的方法及试剂盒，属于细胞遗传学异常检测技术领域，所述方法包括以下步骤：分别分离细胞检测样本和细胞参照样本中的单个核细胞从中分选获得CD138阳性浆细胞；提取所述CD138阳性浆细胞的基因组DNA；将所述基因组DNA变性后，进行MLPA反应、连接和PCR扩增获得PCR扩增产物；对所述PCR扩增产物进行毛细管电泳，比较细胞检测样本和细胞参照样本的毛细管电泳结果分析细胞遗传学异常。本发明所述方法可以同时检测多达100个基因的外显子情况，包括小拷贝数的缺失或重复；并且所述试剂盒检测快速、简单、价格便宜、特异性高。

摘要： 本发明公开了一种应用卡扣式载玻片培养盒检测细胞遗传学异常的方法，包括以下步骤：羊水细胞培养：将取样的羊水细胞采用细胞原位培养载玻片法制备于卡扣式玻片培养盒内；绒毛取样培养：首先采用CVS获得绒毛样本，然后对绒毛样本进行清洁获得纯净的绒毛，然后采用细胞原位培养载玻片法对纯净的绒毛进行培养。有益效果：能够全面直观的检测染色体组的数目及结构异常，并且采用卡扣式载玻片培养盒进行原位培养，在检测过程中的培养、接种和收获过程简单，工作量较小，而且操作难度低。

摘要： 公开了用于白血病相关疾病，特别地急性髓性白血病的诊断、预后和/或治疗的利用miRNA特征的方法和组合物。

摘要： 本发明涉及医学遗传学诊断hTERT和SV40转导质控细胞及其制备方法，其主要特征是以T4DNA连接重组子SV40LTag-pcDNA3.1(-)和pLXSNneo-hTERT，以脂质体导入常见染色体数目异常组织细胞，G418筛选整合有重组子的细胞作传代扩增后冻存，临用时按质控所需比例混合，使原先每例细胞只有1种染色体数目异常转变为含有一定比例的2种至5种染色体数目异常的嵌合体质控细胞，增加了鉴别诊断、嵌合体诊断的难度，原始细胞易得且将废弃的多余细胞转化为有效的永生化质控细胞，以疑难质控细胞作室间质评和室内质控，对及时发现和解决质量问题、提高诊断水平具有重要的意义。

摘要： 本实用新型公开了一种细胞遗传学培养架，包括控制箱，所述控制箱正面的上方与正面的下方分别固定安装有顶板与底板，所述顶板与所述底板之间固定安装有两块侧板，两块所述侧板相对的一侧均等间距固定安装有四根安装轴，两块所述侧板通过八根所述安装轴安装有四个培养瓶固定盒，四个所述培养瓶固定盒的正面均为开口结构，所述控制箱的正面开设有滑槽，所述滑槽的内部设置有四块滑块，所述控制箱内侧的底部固定安装有电机，所述电机输出端通过转轴固定安装有转盘，所述转盘的一侧活动安装有推杆，四块所述滑块位于所述控制箱内部的一端均固定安装有连接块。本实用新型具有可对培养瓶进行摇瓶工序，以及便于将培养瓶保持倾斜的特点。

摘要： 本实用新型属于显微镜载物片技术领域，涉及一种细胞遗传学载玻片晾片板，其包括板体(1)，所述板体(1)上设有多个用于放置载玻片的玻片槽(2)，所述玻片槽(2)的底部从一端向另一端倾斜设置，每个所述玻片槽(2)的较低的一端都与引流槽(5)相连、较高的一端处都设有一个扣片口(4)。其能够帮助去除载玻片上的残留液体，降低液体污染的可能性，保证后续实验图片的质量。

摘要： 本实用新型公开了一种细胞遗传学培养架，包括培养架主体，所述培养架主体由底部托板、一组相对的侧立板、固定背板和固定顶板共同组成，所述一组相对的侧立板安装在底部托板顶部，所述一组相对的侧立板分别位于底部托板左右两侧，所述固定背板安装在底部托板后方，所述固定顶板安装在一组相对的侧立板顶部，所述固定顶板顶部中心处安装有活动把手，所述培养架主体上设有倾角调节机构。本实用新型的有益效果是，可以同时放置多个培养瓶，放置取用方便快捷，减少培养箱开关门事件，避免培养箱温度下降避免影响气体细胞培养，可以调节倾角的角度，调节细胞与培养瓶的接触面积，提高了培养效果。

摘要： 本实用新型属于实验室设备技术领域，具体涉及一种应用于细胞遗传学实验的通风橱，包括壳体，工作台面和玻璃挡板，壳体上设置有风机、抽风口，工作台面上设置加湿喷头A；壳体内设置有连接壳体左右两侧的滑道，滑道上分别设置加热器和加湿喷头B，加热器和加湿喷头B连接电机；所有的加湿喷头通过加湿管外连接加湿装置；在壳体内部的左右两侧还设置有温度传感器和湿度传感器；在壳体外表面设置有控制面板和显示屏，显示屏镶嵌在控制面板上，温度传感器和湿度传感器均连接到控制面板的输入端，控制面板的输出端连接到显示屏、加热器、加湿装置和电机。本实用新型既能满足常规通风橱的作用，也能为实验提供所需的温度和湿度。