免疫基因治疗

摘要： 目的 通过构建转人4-1BBL-B7-H3基因肿瘤细胞株,探讨4-1BBL-B7-H3体外诱导抗肿瘤免疫的能力.方法 通过脂质体法将真核表达载体pEGFP-4-1BBL-B7H3转染人口腔鳞癌Tca8113细胞,经G418筛选及有限稀释后获得稳定高表达克隆,用流式细胞仪分析表型,RT-PCR检测转染细胞中4-1BBL-B7-H3 mRNA的表达.用淋巴细胞分离液分离纯化人外周血T淋巴细胞,分别与转染4-1BBL、B7-H3、4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞混合培养.用CCK-8法检测细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性;ELISA法检测培养上清液中IFN-y水平.结果 转基因Tca8113细胞能够稳定高表达4-1BBL-B7-H3.与Tca8113细胞相比较,转染4-1BBL-B7-H3的Tca8113细胞能够显著增强T细胞增殖,促进IFN-y分泌,并有效地诱导CTL产生对Tca8113细胞的特异性杀伤作用.结论 转染人4-1BBL-B7-H3基因既能增强口腔鳞癌Tca8113细胞的免疫原性,亦能诱导T细胞产生有效的抗肿瘤免疫应答.

摘要： Depending on the development of intensity-modulated radiation therapy (IMRT) combined with chemotherapy,the survival and local control of nasopharyngeal carcinoma has been improved.Nevertheless,tumor metastasis remains to be a major reason for treatment failure.Recently,it's found that immunotherapy is incorporated into standard treatment paradigms,and has shown potential effects with broad prospects.Immunotherapy is supposed to provide more choices for patients with nasopharyngeal carcinoma with its advantages of high efficacy,good specificity and less adverse reaction.%鼻咽癌多选择以放疗、放化疗为主的综合治疗模式.随着调强放疗联合化疗在鼻咽癌综合治疗模式中的推广应用,鼻咽癌的局部控制率和生存率得到改善,远处转移成为治疗失败的主要原因.近年来,免疫治疗在恶性肿瘤的研究和应用中取得了明显的进步,并逐渐成为肿瘤综合治疗领域的焦点,在多种恶性肿瘤的治疗中都显示出潜在的疗效和良好的发展前景.免疫治疗具有疗效高、特异性强、不良反应小等优点,有望为鼻咽癌患者的治疗提供新的选择.

摘要： 乳腺癌已经超越宫颈癌成为居于发展中国家女性肿瘤死亡率首位的恶性肿瘤,其发病率约占全身恶性肿瘤的23％,死亡率占14％.目前乳腺癌的治疗方法主要包括手术、放疗、化疗或联合治疗,但治疗效果有限,尤其是对三阴乳腺癌及晚期乳腺癌效果不佳,探索新的治疗方法刻不容缓.随着精准医疗概念的提出,乳腺癌的发生、转移、耐药机制、基因组学等分子水平的研究逐渐深入,推动了乳腺癌基因治疗地快速发展.目前,乳腺癌基因治疗主要包括癌基因治疗、抑癌基因治疗、免疫基因治疗、多药耐药基因治疗、自杀基因治疗、溶瘤病毒治疗、microRNA治疗等,本文将从上述治疗及进展方面进行综述.

摘要： Genprex公司宣布正在进行的评估免疫基因治疗候选药物oncoprex联合酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼（er-lotinib）治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的Ⅱ期临床试验中期获阳性结果。NSCLC缺乏肿瘤抑制基因TUSC2。该药是优化的TUSC2基因,封装在脂肪带正电荷的纳米微囊中,静脉注射靶向癌细胞,在DNA中插入野生型TUSC2基因取代有缺陷的TUSC2基因,引起癌细胞死亡。

摘要： Objective:To observe whether Staphylococcus enterotoxin A( SEA)and CD80 expressing on the surface of B16 cells could induce immune response after infection with recombinant adenoviruses. Methods:Mouse spleen lymphocytes were cocultured with B16 cells after infection with empty adenoviruse vector Ad( empty)or the recombi-nant adenoviruses of Ad-MMRE-mTERT-B7,Ad-MMRE-mTERT-SEA or Ad-MMRE-mTERT-BIS. Then,lymphocyte proliferation was assayed by BrdU incorporation using a commercial kit,flow cytometric analysis was used to detect proliferation of T lymphocyte subgroups. The production of IL-2,TNF-α and IFN-γ was tested by enzyme-linked immunosorbent assay. Results:Compared with B16 infected with empty adenovirus or without infec-tion,B16 infected with recombinant adenoviruses could significantly induce proliferation of spleen lymphocytes and T lymphocyte subgroups,and increase IL-2,TNF-αand IFN-γproduction. The antitumor response was significantly stronger in B16 cells after dual-gene expression than that in B16 cells after single-gene expression. Conclusion:The results indicate that SEA and CD80 expressed on the membrane of B16 cells after infection with recombinant ade-novirus has immune activities. This study provides some experimental evidence for further immune genetherapy against malignant melanoma with the recombinant adenovirus.%目的：观察恶性黑色素瘤B16细胞经重组腺病毒感染后，表达在B16细胞膜上的SEA和CD80体外能否诱导免疫学反应。方法：B16细胞分别经空载体腺病毒Ad（空）和重组腺病毒Ad-MMRE-mTERT-B7、Ad-MMRE-mTERT-SEA、Ad-MMRE -mTERT-BIS感染后，和小鼠脾淋巴细胞共培养，然后，采用Brdu 酶联免疫法（ ELISA）检测淋巴细胞增殖；流式细胞术检测T淋巴细胞亚群增殖；ELISA法检测细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ的产生。结果：与感染空载体腺病毒Ad（空）和未感染B16细胞相比，经重组腺病毒感染的B16细胞体外能够显著诱导脾淋巴细胞的增殖，其中CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞增殖显著；细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2的产生显著升高；CTLs对肿瘤细胞的杀伤活性显著增强；表达双基因的B16细胞体外诱导免疫应答的能力高于单基因过表达B16细胞。结论：B16细胞经重组腺病毒感染后，表达在细胞膜上的SEA和CD80具有免疫学活性，本研究为今后进一步采用所构建重组腺病毒进行恶性黑色素瘤的免疫基因治疗提供了实验依据。

摘要： With the development of immunologic techniques and molecular biology, biological treatment especially the active immune treatment offers a new way to prevent and to cure OSCC . This article will summarize the research progress of OSCC, from the aspects of immune cells, tumor antigen and cytokine.%口腔鳞状细胞癌( OSCC)是口腔癌中最常见的恶性肿瘤，目前采用以手术为主的综合疗法，但术后转移率和复发率高。因此，对口腔鳞状细胞癌免疫基因疗法的研究具有深远的现实意义。肿瘤免疫疗法是研究肿瘤的抗原性，机体对肿瘤的免疫应答以及肿瘤免疫诊断、免疫防治的新兴学科。免疫学的飞速发展，给口腔颌面部恶性肿瘤的免疫基因治疗增添了新的内容。笔者通过对近十年来，口腔颌面部鳞状细胞癌免疫基因疗法的研究现状及临床疗效进行研究，报告了目前国内外对口腔颌面部鳞状细胞癌的治疗所采取的各种较为先进的免疫基因疗法，并对其机制进行了综述。

摘要： 口腔鳞状细胞癌（ OSCC）是口腔癌中最常见的恶性肿瘤，目前采用以手术为主的综合疗法，但术后转移率和复发率高。因此，对口腔鳞状细胞癌免疫基因疗法的研究具有深远的现实意义。肿瘤免疫疗法是研究肿瘤的抗原性，机体对肿瘤的免疫应答以及肿瘤免疫诊断、免疫防治的新兴学科。免疫学的飞速发展，给口腔颌面部恶性肿瘤的免疫基因治疗增添了新的内容。笔者通过对近十年来，口腔颌面部鳞状细胞癌免疫基因疗法的研究现状及临床疗效进行研究，报告了目前国内外对口腔颌面部鳞状细胞癌的治疗所采取的各种较为先进的免疫基因疗法，并对其机制进行了综述。

摘要： 目的:总结鼻咽癌基因治疗研究进展,为临床治疗及基础研究提供参考.方法:在万方、中国知网、pubmed数据库检索近年关于鼻咽癌基因治疗的研究资料,并进行综合分析.结果:鼻咽癌基因治疗在基础研究方面取得满意的效果,在临床应用中副作用少、医从性好.具体方法有免疫基因治疗,自杀基因治疗,基因替代治疗,基因沉默治疗和反义基因治疗.结论:基因治疗将成为鼻咽癌治疗的重要手段.

摘要： 大多数肾癌对化疗和放疗不敏感,相对预后较差,目前仍缺乏有效的治疗手段.随着基因技术、肿瘤免疫、分子生物技术的迅速发展,免疫治疗成为较有前景的一种治疗肿瘤的方法,人们对免疫治疗寄予厚望.免疫治疗是以激发机体的免疫功能,达到控制和消灭肿瘤细胞的一种治疗方法.应用免疫细胞、肿瘤疫苗、免疫基因等方法治疗肾癌已取得了很大的进展,相信在不久的将来,肾癌免疫治疗将获得突破性的进展,终将成为临床治疗手术后肾癌患者的主要手段.

摘要： Objective To establish mouse model of gastric carcinoma,and assess the effects of tumor-bearing state on the immune system and the therapeutic and preventive effects of interleukin 15 ( IL-15 ) gene therapy.Methods Six-week-old male BALB/C mice were utilized to establish gastric cancer model through multiple carcinogens attack.Gastric specimens were collected for pathologic study at the 20th week,and peripheral blood and splenocytes were tested for T-cell subsets and Treg by flow cytometry.NK cell cytotoxicity was assessed to evaluate the effect of IL-15 gene therapy on gastric cancer,and data were analyzed statiscally.Results 37.5％ of mice were successfully induced with gastric carcinoma on the week 20.Compared to the other two groups,IL-15 expression (9.20 ± 2.92 ) ng/L and NK cell cytotoxicity (216.91±117.80) U/L in cancer-induced group were significantly decreased ( P＜0.05).Periphpearl blood Treg expression was significantly increased in the cancer-induce group ( 8.07 ± 6.62 ) ％,while spleenocyte Treg expression was significantly decreased in the control group [(4.40 ± 3.34)％,P ＜0.05].There was no significant difference in T cell subsets in the peripheral blood among the group ( P ＞0.05 ),but in cancer-induced group the number of spleenocyte CD3 + T cells (78.31 ± 29.79) ％ was significantly increased ( P ＜0.05 ),while that of CD4+ T cells(19.98 ±5.77)％ and CD8+ T cells ( 10.15±1.72) ％ was significantly decreased ( P ＜ 0.05 ).Conclusion Multiple carcinogens attack was an ideal way to establish mouse model of gastric carcinoma in mice.During tumor-bearing state,there was a significant decrease in immune function,and immunogene therapy with IL-15 plasmid vector can enhance immune function to achieve anti-tumor immune response.%目的 建立小鼠胃癌模型,检测荷瘤状态对小鼠免疫细胞的影响,同时给予白细胞介素-15(IL-15)免疫基因治疗,以检测IL-15对胃癌的预防及治疗效果.方法 采用多因素联合攻击法诱导小鼠胃癌,同时采用IL-15表达质粒载体进行免疫基因治疗.20周后取胃标本行病理学检查,并取血及脾细胞检测T细胞亚群及CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg).同时进行自然杀伤(NK)细胞的细胞毒性试验,通过统计学方法分析结果.结果 多因素联合攻击法诱导胃癌发生率为37.5％.诱癌组小鼠血清IL-15水平(9.20±2.92) ng/L明显降低(P＜0.05),且其脾NK细胞杀伤活性(216.91±117.80) U/L明显降低(P＜0.05).诱癌组小鼠外周血Treg水平(8.07±6.62)％明显升高(P＜0.05),而对照组小鼠脾细胞Treg水平(4.40±3.34)％明显降低(P＜0.05).各组小鼠之间外周血T细胞亚群变化差异无统计学意义(P＞0.05).诱癌组小鼠脾细胞CD3+T细胞水平(78.31±29.79)％明显升高(P＜0.05),而CD4+T细胞(19.98±5.77)％及CD8+T细胞水平(10.15±1.72)％明显降低(P＜0.05).结论 多因素联合攻击法为小鼠胃癌模型建立提供了良好的模型.小鼠荷瘤状态下免疫功能下降,通过IL-15免疫基因治疗可提高机免疫功能,起到抗肿瘤的效果.

摘要： 人们已经认识到肿瘤细胞存在抗原性弱、缺乏第二信号(共刺激分子)作用等问题，无法激活机体有效的免疫排斥反应，从而导致其免疫治疗效果不理想。已有的研究表明给肿瘤细胞转染免疫刺激分子编码基因，使其表达免疫刺激分子，从而达到增强肿瘤细胞免疫原性和有效提高肿瘤细胞免疫杀伤作用的目的。本研究利用这一思路，建立了肝癌超抗原和共刺激分子双信号免疫基因治疗系统，同时对治疗的安全性和有效性进行评估。rn 本研究构建了超抗原SEA和共刺激分子CD80双信号表达系统，通过体外免疫学研究评估该系统的有效性。之后建立荷肝癌小鼠模型并进行基于上述表达系统的免疫基因治疗研究，通过瘤体变化、系统免疫活性测定、存活时间和治疗相关毒性观察综合评价治疗效果，并建立最适的治疗方案。rn 我们建立的肝癌细胞超抗原SEA和共刺激分子CD80双信号免疫激活系统可有效提高肝癌细胞的免疫原性，增强细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞的免疫识别和杀伤效应，体内研究结果显示在所有接受治疗的荷肝癌小鼠中，SEA、CD80和SEA/CD80治疗组的总有效率(瘤体部分或全部消退)分别为65％，60％和75％，显著高于对照组(P<0.01)，同时，荷肝癌小鼠存活时间测定结果显示本治疗系统可有效延长存活时间(P<0.01)。。大部分接受治疗的小鼠均顺利完成治疗过程，未观察到明显的毒性反应。CTL杀伤实验和ELISPOT实验显示CTL活性随着治疗时间的延长而逐渐增加，并与瘤体消退情况有一定的相关性。同时，本研究结果还显示局部瘤体内SEA的表达并未导致脾脏T细胞免疫耐受的形成，连续治疗后，CTL活性未出现明显的下降。rn 通过上述研究表明，肿瘤局部转染超抗原和共刺激分子可诱导很强的系统抗肿瘤免疫活性，同时可以很好的避免免疫耐受现象的出现，因此本研究所建立的这一肿瘤免疫基因治疗系统有望为恶性肿瘤的生物治疗提供一个全新的思路。

摘要： 本文就近年肿瘤免疫基因治疗中的细胞因子基因治疗、肿瘤抗原靶向基因治疗、MHC靶向基因治疗、共刺激分子基因治疗以及反义免疫基因治疗等进行了概述，并展望了这一新兴科技领域的良好前景，提出了发展我围肿瘤免疫基因治疗研究应注意的问题。肿瘤生物治疗已成为继手术、化疗和放疗后肿瘤治疗的第四种模式。在肿瘤生物治疗中，免疫基因治疗发展迅猛，已形成一个庞大的领域，展现出了令人鼓舞的前景。

摘要： B7分子在免疫基因治疗恶性肿瘤中发挥重要作用,利用B7免疫基因治疗恶性肿瘤包括制备肿瘤疫苗,使B7肿瘤细胞本身成为抗原提呈细胞,制备B7抗体融合蛋白以及制备抗B7抗体免疫毒素等,这些方法均可以增强机体对肿瘤细胞的免疫杀伤作用.本文就近几年在这方面的研究进展作简要综述.

摘要： 本发明公开了一种基因治疗用载体，其能够在进行基因治疗时以更高敏感度监控目的蛋白质的血液中浓度，并且标记肽不具有生理作用而在多种动物中无免疫原性。基因治疗用载体具有如下结构：在哺乳动物细胞用表达载体中整合了编码由胰高血糖素的C末端侧19-29个氨基酸肽区域和有待在体内生产的目的蛋白质区域的融合蛋白质的核酸。

摘要： 本发明涉及一种表达IL2RG基因的重组慢病毒载体及其制备。其中，该载体是自身失活的第三代慢病毒载体SIN，所述的IL2RG基因的序列如SEQ ID NO﹕1所示。本发明还提供了该载体的制备方法，以及该载体在制备治疗原发性免疫缺陷病药物中的用途。

摘要： 本发明描述含有被CD4+自然杀伤T(NKT)细胞识别的表位以增加活性的新型肽，所述新型肽用于感染性疾病、自体免疫性疾病、针对给予同种异体因子的免疫反应、变应性疾病、肿瘤治疗、预防移植排斥以及预防针对基因治疗或基因疫苗接种所用病毒蛋白的免疫。

摘要： 本发明公开了一种可抑制转基因产物所致免疫反应的基因治疗药物，该基因药物载体质粒的转基因表达框的3’-UTR区含有miR-155的结合序列，其碱基序列为CCCCTATCACAATTAGCATTAA；及其制备方法。本发明从解决目前尚无办法的由rAAV载体的转基因产物引起的细胞免疫反应为目标，采用MicroRNA靶向沉默特定细胞内的转基因表达的技术方法，该载体不仅能有效地在体内表达转基因，并且能抑制由rAAV载体的转基因产物引起的细胞免疫反应，为基于rAAV载体的基因药物的安全性提供了保障。

摘要： 本文中提供了用于治疗个体中的癌症的方法和组合物，所述方法包括向个体施用有效量的至少一种免疫检查点抑制剂和包含一种或更多种病毒的病毒组合物，所述一种或更多种病毒经改造成包含N1L基因缺失、基质降解蛋白基因、腺病毒死亡蛋白(ADP)基因，和/或细胞色素p450基因。本文中还提供了用于治疗个体中的癌症的方法和组合物，所述方法包括向个体施用有效量的包含两种或更多种病毒的病毒组合物，所述两种或更多种病毒经改造成包含N1L基因缺失、基质降解蛋白基因、腺病毒死亡蛋白(ADP)基因，和/或细胞色素p450基因。本文中还提供了通过将上述药剂与其他癌症治疗组合施用来增强抗肿瘤效力的方法。

摘要： 本文提供了用于治疗个体中的癌症的方法和组合物，所述方法包括向所述个体施用有效量的至少一种免疫检查点抑制剂和p53和/或MDA‑7(IL24)基因治疗。本文中还提供了通过施用细胞外基质降解蛋白来增强抗肿瘤效力的方法。本文中还提供了通过与p53和/或IL24基因治疗组合施用节拍化疗(对于上述试剂，5FU+CTX+GM‑CSF)来增强抗肿瘤效力的方法。

摘要： 本发明提供了一种抗肿瘤处置方法，该方法包含将编码免疫刺激性细胞因子的单链负链RNA病毒载体，或导入该载体的细胞给药到肿瘤部位的步骤。本发明还提供了包括以编码免疫刺激性细胞因子的单链负链RNA病毒载体，或导入该载体的细胞等为有效成分的抗肿瘤组合物。此外，本发明还提供了包含编码免疫刺激性细胞因子的单链负链RNA病毒载体，以及肿瘤抗原或者表达该抗原的载体的抗肿瘤处置试剂盒。

摘要： 本发明公开了一种基因治疗用载体，其能够在进行基因治疗时以更高敏感度监控目的蛋白质的血液中浓度，并且标记肽不具有生理作用而在多种动物中无免疫原性。基因治疗用载体具有如下结构：在哺乳动物细胞用表达载体中整合了编码由胰高血糖素的C末端侧19－29个氨基酸肽区域和有待在体内生产的目的蛋白质区域的融合蛋白质的核酸。

摘要： 本文公开了通过施用阻断、抑制或减少免疫球蛋白G(IgG)和新生儿Fc受体(FcRn)之间的相互作用的药剂来治疗可能发展或已经具有预先存在的基因治疗中和抗体(例如抗FcRn抗体)的患者以减少IgG再循环并增强体内IgG清除率的方法。还公开了使用减少IgG与FcRn相互作用的药剂用于基因疗法治疗有需要的患者的疾病的方法。

摘要： 本文公开了通过施用切割存在于免疫球蛋白中的肽键的蛋白酶或通过施用切割存在于免疫球蛋白中的碳水化合物残基的糖苷酶或其他类似的酶促切割体内免疫球蛋白的方法来治疗可能发展或已经具有预先存在的基因治疗中和抗体的患者的方法。还公开了利用IdeS和其他免疫球蛋白G降解酶多肽进行基因疗法治疗有需要的患者的疾病的方法。