酶联免疫斑点试验

摘要： 目的评价胸膜厚度联合外周血结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)鉴别结核性与恶性胸腔积液的价值。方法纳入284例结核性胸膜炎患者(结核组)及213例恶性胸腔积液患者(恶性组)。采用超声测量胸膜厚度,并进行外周血T-SPOT.TB,比较组间结果差异;利用多因素logistic回归分析观察二者是否为恶性胸腔积液的独立危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评价胸膜厚度、外周血T-SPOT.TB及二者联合鉴别结核性与恶性胸腔积液的效能,并以DeLong检验比较其效能差异。结果2组间胸膜厚度及外周血T-SPOT.TB结果差异均存在统计学意义(P均<0.05),且此二项均为判断胸腔积液性质的独立危险因素,其OR分别为0.67[95%CI(0.60,0.75),P<0.05]及6.79[95%CI(4.44,10.39),P<0.05]。以胸膜厚度鉴别结核性与恶性胸腔积液的AUC为0.71,截断值取0.55 mm时,其诊断的敏感度为90.84%,特异度为45.08%;以外周血T-SPOT.TB鉴别诊断的AUC为0.72,敏感度为72.89%,特异度为70.89%;二者联合鉴别诊断的AUC为0.81,高于单一指标(P均<0.01),敏感度为65.49%,特异度为83.10%。结论胸膜厚度和外周血T-SPOT.TB可用于鉴别结核性与恶性胸腔积液,且二者联合可提高鉴别特异度。

摘要： 汉坦病毒在我国主要导致肾综合征出血热,以高感染率、高病死率严重危害公共健康。由于灭活疫苗存在免疫效力欠佳和免疫靶标脱失等问题,近期研究方向主要聚焦蛋白的免疫反应性表位。表位是抗原分子的主要功能单位,可有效刺激机体的细胞免疫和体液免疫。随着免疫学和生物信息学技术的发展,研究具有免疫反应性抗原表位的技术不断完善。本文总结了近年来关于汉滩病毒糖蛋白表位的研究,从方法和应用2个方面进展进行简要综述,并总结当前表位研究所存在的问题,为肾综合征出血热的预防和治疗提供指导。

摘要： 目的 分析结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核性脑膜炎诊断中的应用价值.方法 以2017年1月-2019年12月安徽省胸科医院收治的93例脑膜炎患者为研究对象,其中确诊或临床诊断为结核性脑膜炎62例,非结核性脑膜炎31例.所有入组患者治疗前均检测外周血T-SPOT.TB,脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)、结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)、抗酸杆菌(AFB)涂片,对试验结果 进行分析.结果 外周血T-SPOT.TB检测诊断结核性脑膜炎的灵敏度为82.3％(51/62),特异度为80.7％(25/31),灵敏度明显高于脑脊液ADA(61.3％,38/62)、脑脊液TB-DNA(27.4％,17/62)、脑脊液AFB涂片(16.1％,10/62),差异均有显著统计学意义(P<0.01).采用受试者工作特征(ROC)曲线及其曲线下面积(AUC)来分析不同试验方法 的诊断价值,外周血T-SPOT.TB、脑脊液ADA、脑脊液TB-DNA和脑脊液AFB涂片的AUC值分别为0.815、0.661、0.637、0.581.外周血T-SPOT.TB在结核性脑膜炎中的诊断效能最高.结论 外周血T-SPOT.TB在结核性脑膜炎的诊断中,可作为可靠的辅助参考指标之一.

摘要： 目的 评估结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合胸腔积液结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)在结核性胸腔积液的诊断价值.方法 收集胸腔积液患者112例,其中确诊或临床诊断为结核性胸腔积液76例,非结核性胸腔积液36例.所纳入患者治疗前均行胸腔积液T-SPOT.TB、血T-SPOT.TB、胸腔积液Xpert MTB/RIF、胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)检测,并对其检测结果进行分析.结果 胸腔积液T-SPOT.TB诊断结核性胸腔积液的敏感度(97.37％,74/76),高于外周血T-SPOT.TB(76.32％,58/76)、胸腔积液Xpert MTB/RIF(65.79％,50/76)和胸腔积液ADA(28.95％,22/76),差异均有统计学意义(χ2=14.74、25.22、76.45,P<0.01).胸腔积液Xpert MTB/RIF检测的特异度(100％,36/36)均高于胸腔积液T-SPOT.TB(77.78％,28/36)、外周血T-SPOT.TB(55.56％,20/36)和胸腔积液ADA(50.00％,18/36),差异均有统计学意义(χ2=6.89、20.57、24.00,P均<0.01).胸腔积液T-SPOT.TB和胸腔积液Xpert MTB/RIF联合检测的敏感度(64.47％,49/76)低于胸腔积液T-SPOT.TB单独检测(97.37％,74/76),差异有统计学意义(χ2=26.63,P<0.01),但特异度由77.78％(28/36)提高至100％(36/36),差异有统计学意义(χ2=45.82,P<0.01).结论 胸腔积液T-SPOT.TB检测结核性胸腔积液具有较高的敏感度和特异度,胸腔积液T-SPOT.TB和胸腔积液Xpert Mtb/RIF联合检测可明显提高诊断的特异度.

摘要： 目的 探讨外周血结核感染T细胞斑点试验(Tuberculosis T cell spot assay,T-SPOT.TB)在可疑结核病症状者诊断与鉴别诊断中的临床应用价值.方法 应用广州市结核病防治所海珠分所2018-2019年可疑结核病症状者行T-SPOT.TB检测的实验结果结合临床资料,将病例分成结核病者(A组)、其他肺部疾者(B组)和最后临床诊断为正常或陈旧性肺结核者(C组),应用x2检验比较分析各组间以及各组不同性别、年龄组间T-SPOT.TB检测阳性率的差异.结果 A组606例、B组104例和C组114例患者纳入分析.结核病患者与非结核病患者(B组+C组)的T-SPOT.TB检测阳性率分别为90.10％和49.08％,差异有统计学意义(x2=164.007,P＜0.001);按青年(≤44岁)、中年(45～59岁)、老年(≥60岁)年龄组分类分别予以比较,A、B、C3组间差异均有统计学意义(均P＜0.05),但男、女性别间差异均无统计学意义(均P＞0.05).在704例以ESAT6、CFP10分开报告阴阳性的实验结果中,报告双抗原阳性、ESAT6阳性、CFP10阳性和双抗原阴性的病例数分别为497例、55例、23例和129例.结论 可疑结核病症状者结核分枝杆菌潜伏感染率高于一般人群(目前全球约为1/4,2000年我国第4次结核病流行病学调查结果为44.5％),而且T-SPOT.TB检测指示结核分枝杆菌潜伏感染存在一定程度的假阴性.

摘要： 目的 分析结核感染T细胞斑点试验诊断胸腔积液的价值.方法 对2018年1-12月安徽省胸科医院临床诊断或确诊为结核性胸膜炎80例患者和36例非结核性胸膜炎进行回顾性分析.所有患者治疗前均行胸水T-SPOT.TB、血T-SPOT.TB、胸水ADA、血TB-Ab检测,并对其结果进行比较.结果 胸水T-SPOT.TB在结核性胸膜炎的敏感度97.5％(78/80),高于血T-SPOT.TB80％(64/80)、胸水ADA67.5％(54/80)、血TB-Ab27.5％(22/80),差异均有统计学意义(均P<0.01).胸水T-SPOT.TB在结核性胸膜炎的特异度91.67％(33/36)高于血T-SPOT.TB58.33％(21/36)、胸水ADA72.22％(26/36)、血TB-Ab55.56％(20/36)差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 胸水T-SPOT.TB在结核性胸腔积液检测中具有较高的敏感度和特异度.

摘要： Objective To study the changes of monocyte cytokines in peripheral blood of n-hexane neuropathy patients induced by P0 protein, and to explore the role of autoimmunity in n-hexane neuropathy patients. Methods In May 2018, 5 patients with peripheral neuropathy diagnosed as n-hexane poisoning were selected as case group in Shenzhen Prevention and Treatment Center for Occupational Disease in 2017. 6 workers exposure to n-hexane and 6 workers without n-hexane exposure were selected as contact group and control group. Peripheral blood mononuclear cells ﹙PBMC﹚ were isolated from venous blood. Results The number of spots produced by INF-γ and IL-10 increased after stimulation with P0 protein in case group, and the positive rate was significantly higher than control group and the contact group. Conclusion Autoimmunity induced by P0 protein may be involved in the occurrence of myelin sheath damage in n-hexane neuropathy patients.%目的 通过研究P0蛋白引发的正己烷中毒性周围神经病患者外周血单核细胞因子的变化,探讨自身免疫在正己烷周围神经病中的作用.方法 于2018年5月,选择2017年在深圳市职业病防治院住院,并诊断为正己烷中毒周围神经病的5名患者作为病例组,选择6名正己烷接触工人、6名未接触正己烷工人分别作为接触组、对照组.采集调查对象静脉血,分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),采用酶联免疫斑点试验(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)检测PBMC经P0蛋白、植物血球凝集素(Phytohemagglutinin, PHA )处理后PBMC干扰素-γ (INF-γ )和细胞因子10(IL-10)的分泌情况.结果 与对照组和接触组比较,病例组PBMC经P0蛋白抗原或PHA处理后,INF-γ、IL-10产生的抗原特异性T淋巴细胞(SFCs)数均升高,差异有统计学意义(P﹤0.01).与对照组比较,接触组PBMC经PHA处理后,INF-γ、IL-10产生的SFCs数均升高,差异有统计学意义(P﹤0.05),接触组PBMC经P0蛋白抗原处理后,INF-γ、IL-10产生的SFCs数无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05).结论 P0蛋白引发的自身免疫可能参与了正己烷中毒周围神经病髓鞘损害的发生.

摘要： 目的：探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测结核特异性IFN-γ在骨关节结核病患者中的诊断价值。rn 方法：收集2009年5月至2011年5月期间，深圳市第三人民医院收治并确诊为骨关节结核病患者及其，临床资料，共90例，比较分析ELISPOT检测、涂片染色镜检、结核菌培养、聚合酶链反应(PCR)检测结核菌DNA以及病理检查诊断在骨关节结核病中的阳性率。rn 结果：90例临床确诊骨关节结核患者中，ELISPOT检测阳性率为75.6％，涂片染色法(27.9％)，结核菌培养法(51.7％)，聚合酶链反应PCR(53.0％)，病理诊断(39.1％)，ELISPOT阳性率显著高于其他临床常用检测方法，差异有统计学意义(P＜0.05);BLISPOT联合涂片染色法、结核菌培养法及PCR检测法，阳性率分别达到80.9％、88.3％、87.9％，当BLISPOT、结核菌培养法和PCR检測法三者联合应用时，阳性率高达90.7％。rn 结论：BLISPOT检测方法在骨关节结核患者中有一定辅助诊断价值，与临床常规检测方法相结合有助于提高诊断率。

摘要： 为了解RA患者体内是否存在CCP抗原自身反应性T细胞(即CCP-ART)，以及CCP-ART细胞是否参与RA的发生及演变，研究建立了酶联免疫斑点试验(Enzyme-linked ImmunospotAssay，ELIspot)。此法结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA)，能检测单个细胞分泌细胞因子的情况。其原理是，用细胞因子抗体捕获细胞培养过程中分泌的特定细胞因子，并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。本实验用ELIspot方法检测RA患者与对照的PBMC，以CCP刺激后分泌IFN-γ及IL-4的细胞作为特异性CCP-ART细胞。IFN-γ，IL-4分别代表CCP特异性Th1／Th2细胞分泌的主要细胞因子。

摘要： 免疫学诊断技术是MTB(结核分枝杆菌)感染的重要辅助诊断方法之一。随着免疫化学技术的发展,血清结核抗体的检测已作为结核病诊断指标之一,TB-SA(Tuberculosis-SpecificAntigen)抗体检测在肺结核诊断中具有较高的敏感性和特异性；PPD皮肤试验已被卫生部生物制品标化委员会规定可直接用于临床诊断；近年来以结核菌特异蛋白ESAT-6(6KD early secretoryantigenic target)、CFP-10(culture filtrate protein10)为基础的酶联免疫斑点试验(ELISPOTTEST)在结核感染诊断中的应用价值已被国外许多相关研究所证实,国内上海复星长征医学科学有限公司研发了该试验试剂盒一结核感染T细胞斑点试剂盒,为考核该试剂盒在中国这个结核病高负担国家对肺结核诊断的敏感性和特异性,山东省胸科医院作为研究单位之一对其进行了考核,同时对血清TB-SA抗体、皮肤PPD试验进行了对照研究,旨在评价三者在活动性肺结核诊断中的应用价值。

摘要： 目的：评价以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验和PPD皮肤试验在涂阴肺结核诊断中的应用价值。方法：选择2008年1月至2009年6月入住山东省胸科医院的可疑肺结核患者共263例，对其行PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验，根据出院诊断将其分为涂阳肺结核、涂阴肺结核、非结核患者三组，计算两种试验在涂阳、涂阴肺结核诊断中的敏感性、特异性、准确性，并比较优劣。结果：PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验在涂阴肺结核诊断中均有参考价值(P=0.000)，其敏感性分别为85.5％和84％，特异性分别为34.5％和81.7％，准确性分别为66.7％和83.1％，在58例同时进行ELISPOT试验与PPD皮肤试验的非结核患者中的，其阳性率分别为65.5％(38／58)和19％(11／58)，差别有统计学意义(P=0.000)，在同时进行两种试验的涂阴、涂阳肺结核患者中，两者差别均无统计学意义。结论：在菌阴肺结核诊断中ELISPOT试验的特异性高于PPD皮肤试验，前者在排除肺结核诊断中的应用价值高于后者。

摘要： 目的：评价以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验和PPD皮肤试验在涂阴肺结核诊断中的应用价值。方法：选择2008年1月至2009年6月入住山东省胸科医院的可疑肺结核患者共263例，对其行PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验，根据出院诊断将其分为涂阳肺结核、涂阴肺结核、非结核患者三组，计算两种试验在涂阳、涂阴肺结核诊断中的敏感性、特异性、准确性，并比较优劣。结果：PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验在涂阴肺结核诊断中均有参考价值(P=0.000)，其敏感性分别为85.5％和84％，特异性分别为34.5％和81.7％，准确性分别为66.7％和83.1％，在58例同时进行ELISPOT试验与PPD皮肤试验的非结核患者中的，其阳性率分别为65.5％(38／58)和19％(11／58)，差别有统计学意义(P=0.000)，在同时进行两种试验的涂阴、涂阳肺结核患者中，两者差别均无统计学意义。结论：在菌阴肺结核诊断中ELISPOT试验的特异性高于PPD皮肤试验，前者在排除肺结核诊断中的应用价值高于后者。

摘要： 目的：评价以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验和PPD皮肤试验在涂阴肺结核诊断中的应用价值。方法：选择2008年1月至2009年6月入住山东省胸科医院的可疑肺结核患者共263例，对其行PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验，根据出院诊断将其分为涂阳肺结核、涂阴肺结核、非结核患者三组，计算两种试验在涂阳、涂阴肺结核诊断中的敏感性、特异性、准确性，并比较优劣。结果：PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验在涂阴肺结核诊断中均有参考价值(P=0.000)，其敏感性分别为85.5％和84％，特异性分别为34.5％和81.7％，准确性分别为66.7％和83.1％，在58例同时进行ELISPOT试验与PPD皮肤试验的非结核患者中的，其阳性率分别为65.5％(38／58)和19％(11／58)，差别有统计学意义(P=0.000)，在同时进行两种试验的涂阴、涂阳肺结核患者中，两者差别均无统计学意义。结论：在菌阴肺结核诊断中ELISPOT试验的特异性高于PPD皮肤试验，前者在排除肺结核诊断中的应用价值高于后者。

摘要： 目的：评价以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验和PPD皮肤试验在涂阴肺结核诊断中的应用价值。方法：选择2008年1月至2009年6月入住山东省胸科医院的可疑肺结核患者共263例，对其行PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验，根据出院诊断将其分为涂阳肺结核、涂阴肺结核、非结核患者三组，计算两种试验在涂阳、涂阴肺结核诊断中的敏感性、特异性、准确性，并比较优劣。结果：PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验在涂阴肺结核诊断中均有参考价值(P=0.000)，其敏感性分别为85.5％和84％，特异性分别为34.5％和81.7％，准确性分别为66.7％和83.1％，在58例同时进行ELISPOT试验与PPD皮肤试验的非结核患者中的，其阳性率分别为65.5％(38／58)和19％(11／58)，差别有统计学意义(P=0.000)，在同时进行两种试验的涂阴、涂阳肺结核患者中，两者差别均无统计学意义。结论：在菌阴肺结核诊断中ELISPOT试验的特异性高于PPD皮肤试验，前者在排除肺结核诊断中的应用价值高于后者。

摘要： 目的：评价以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验和PPD皮肤试验在涂阴肺结核诊断中的应用价值。方法：选择2008年1月至2009年6月入住山东省胸科医院的可疑肺结核患者共263例，对其行PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验，根据出院诊断将其分为涂阳肺结核、涂阴肺结核、非结核患者三组，计算两种试验在涂阳、涂阴肺结核诊断中的敏感性、特异性、准确性，并比较优劣。结果：PPD皮肤试验、以ESAT6、CFP10为基础的ELISPOT试验在涂阴肺结核诊断中均有参考价值(P=0.000)，其敏感性分别为85.5％和84％，特异性分别为34.5％和81.7％，准确性分别为66.7％和83.1％，在58例同时进行ELISPOT试验与PPD皮肤试验的非结核患者中的，其阳性率分别为65.5％(38／58)和19％(11／58)，差别有统计学意义(P=0.000)，在同时进行两种试验的涂阴、涂阳肺结核患者中，两者差别均无统计学意义。结论：在菌阴肺结核诊断中ELISPOT试验的特异性高于PPD皮肤试验，前者在排除肺结核诊断中的应用价值高于后者。

摘要： 目的:评价早期建立的结核菌特异性IFN-γ Elispot检测在活动性结核病和结核感染诊断中的价值。方法:应用Elispot技术对1154例结核病患者，52例非结核病肺部疾病对照，384例新发痰菌阳性结核患者的家庭密切接触者，422例健康对照进行外周血结核菌特异性IFN-γ水平检测。对健康对照和密切接触者同时还进行平行的PPD皮试。结果:结核患者Elispot检测的阳性率显著高于对照人群及结核病密切接触者。其中，血行播散性结核、继发性肺结核、结核性胸膜炎、结核性脑膜炎和其他肺外结核患者Elispot阳性率分别为91.3％，81.7％，86.49％，66.18％，89.76％。非结核病肺部疾病对照、健康对照和新发结核病人密切接触者Elispot阳性率分别为13.46％，15.4％和35.41％。在密切接触者筛查中，发现活动性结核病人17人，其中Elispot阳性14人(82.35％)，PPD强阳性5人(29.41％)；两者阳性率差别具有显著性。结论:在结合结核病史、结核病接触史以及临床表现的基础上，结核菌特异性IFN-γ的检测在活动性结核病诊断有一定的辅助诊断价值。通过检测结核高危人群结核菌特异性IFN-γ的水平，对早期发现活动性结核患者具有重要的价值。

摘要： 目的:评价早期建立的结核菌特异性IFN-γ Elispot检测在活动性结核病和结核感染诊断中的价值。方法:应用Elispot技术对1154例结核病患者，52例非结核病肺部疾病对照，384例新发痰菌阳性结核患者的家庭密切接触者，422例健康对照进行外周血结核菌特异性IFN-γ水平检测。对健康对照和密切接触者同时还进行平行的PPD皮试。结果:结核患者Elispot检测的阳性率显著高于对照人群及结核病密切接触者。其中，血行播散性结核、继发性肺结核、结核性胸膜炎、结核性脑膜炎和其他肺外结核患者Elispot阳性率分别为91.3％，81.7％，86.49％，66.18％，89.76％。非结核病肺部疾病对照、健康对照和新发结核病人密切接触者Elispot阳性率分别为13.46％，15.4％和35.41％。在密切接触者筛查中，发现活动性结核病人17人，其中Elispot阳性14人(82.35％)，PPD强阳性5人(29.41％)；两者阳性率差别具有显著性。结论:在结合结核病史、结核病接触史以及临床表现的基础上，结核菌特异性IFN-γ的检测在活动性结核病诊断有一定的辅助诊断价值。通过检测结核高危人群结核菌特异性IFN-γ的水平，对早期发现活动性结核患者具有重要的价值。

摘要： 本发明涉及一种利用多重信号放大系统进行酶联免疫斑点法的检测的方法，包括下述步骤：(1)固相基质上固定包被抗体或者抗原；(2)加入待检测细胞，或同时加入待检测细胞和细胞刺激物，作用一段时间；(3)加入抗体‑DNA/RNA连接链或者加入抗原‑DNA/RNA连接链，作用一定时间；(4)加入DNA/RNA放大链，作用一定时间；(5)加入连接有修饰物a的DNA/RNA检测链，反应一定时间；(6)加入连接有结合物b的酶；(7)加入酶的底物；(8)定量分析固相基质上所形成的具有检测信号的免疫斑点的数量。本发明检测方法具有信号多重放大、检测限低、灵敏度更高、操作简便等优点。

摘要： 本发明公开了一种酶联免疫斑点印迹的自身免疫检测试剂盒及其操作流程，酶联免疫斑点印迹的自身免疫检测试剂盒包括盒体、靶标分子及试剂，所述试剂盒是一种基于酶联免疫斑点印迹与富集相结合的技术，用于检测自身免疫功能的缺陷导致的血糖异常的试剂盒。酶联免疫斑点印迹的自身免疫检测试剂盒的操作流程包括制备靶标分子、制备靶标分子的覆被装置、制备细胞裂解液、制备抗人免疫细胞抗体及免疫细胞富集、制备扩增培养基、检测靶标分子及临床样品检测数据分析。本发明是一种免疫细胞富集技术结合具有高灵敏度和高特异性的酶联免疫斑点印迹技术，及对相应的靶标分子的精准分析，使得对的检测特异性升高和假阳性几率降低。

摘要： 本发明公开了酶联免疫斑点实验在氨苯砜综合征诊断中的应用。本发明提供了用于检测外周血单个核细胞在氨苯砜刺激下IFN‑γ和/或IL‑5释放Elispot实验是否为阳性的物质在制备诊断或辅助诊断受试者是否为氨苯砜综合征患者产品中的应用；所述物质包括如下：1)作为刺激药物的氨苯砜；2)获取受试者外周血单个核细胞的试剂和/或设备；3)用于检测IFN‑γ和/或IL‑5释放Elispot实验是否为阳性的试剂和/或设备。本发明成功建立了联合IFN‑γ/IL‑5释放Elispot实验，为氨苯砜综合征的诊断提供了有效的技术手段。

摘要： 本发明涉及一种利用多重信号放大系统进行酶联免疫斑点法的检测的方法，包括下述步骤：(1)固相基质上固定包被抗体或者抗原；(2)加入待检测细胞，或同时加入待检测细胞和细胞刺激物，作用一段时间；(3)加入抗体‑DNA/RNA连接链或者加入抗原‑DNA/RNA连接链，作用一定时间；(4)加入DNA/RNA放大链，作用一定时间；(5)加入连接有修饰物a的DNA/RNA检测链，反应一定时间；(6)加入连接有结合物b的酶；(7)加入酶的底物；(8)定量分析固相基质上所形成的具有检测信号的免疫斑点的数量。本发明检测方法具有信号多重放大、检测限低、灵敏度更高、操作简便等优点。

摘要： 本发明公开的一种酶联免疫斑点检测试剂盒，包括实验孔：包含anti‑CD28、IL‑2的培养基，多肽，细胞悬液；阴性对照：包含anti‑CD28、IL‑2的培养基，DMSO，细胞悬液；阳性对照：包含anti‑CD28、IL‑2的培养基，PMA+Ionomycin，细胞悬液；标准曲线：包含anti‑CD28、IL‑2的培养基，各浓度anti‑CD3，细胞悬液。其优点在于，提高酶联免疫斑点检测方法的灵敏度，并确保能够得到稳定可靠的检测结果。

摘要： 本发明属于电子医疗器械技术领域，具体的说是一种酶联免疫斑点分析装置及方法；包括底座和安装在底座一侧的支撑架，所述底座顶部设置有面光源，所述所述面光源上方设置有支撑台；本发明通过在试剂盒内安装有收调装置，只需要在某一时间段的初始时顺时针转动限位管，限位管带动动隔板靠近静隔板，将显色反应后漂浮在培养液表面的斑点拨动开，分隔板对先前形成的斑点进行遮挡，然后在接下来的一段时间内，再对动隔板与静隔板之外形成的斑点进行取景拍摄，无需再进行额外的比对，提高了分析效率；同时通过在相邻的动隔板与静隔板的间隙处滴入不同溶度的抗体试剂，降低了使用时的成本，适应不同测试条件的需要。

摘要： 本实用新型公开了一种酶联免疫斑点分析主机装置，涉及医疗设备技术领域，包括：底座；支撑架，两个所述支撑架安装于所述底座的顶端；支撑板，所述支撑板安装于所述支撑架的外壁一侧；相机。本实用新型通过设置第一传动机构和第二传动机构，实现通过启动第一电机带动，在限位座与第一限位轨的限位滑动作用下，第一连接座带动安装座移动，从而使安装座带动相机左右移动，通过启动第二电机使第二皮带转动带动第二连接座移动的同时，第二连接座带动安装板限位移动，安装板带动孔板载台移动的同时，带动检测试剂盒前后移动，从而通过以上零件的相互配合、协调运动，使相机可以对准检测试剂盒的个小孔中任何一个进行拍摄，从而大大提高效率。

摘要： 本实用新型是一种用于酶联免疫斑点读数仪的移动平台，包括基板、X向移动机构、Y向移动机构和用于装载微孔培养板的托盘机构，Y向移动机构设置在基板上，X向移动机构设置在Y向移动机构上，托盘机构设置在X向移动机构上。本实用新型结构简单、新颖，制作方便，成本低，作为酶联免疫斑点读数仪一部分，能够全自动化的检测，快速移动、准确定位，适于工业化生产与使用，有较大的应用价值。

摘要： 本发明公开了一种基于酶联免疫斑点试验试剂盒计算ESAT‑6抗原孔平均斑点面积的方法，该方法首先将收集待测的外周血单个核细胞悬液加入包被有IFN‑γ抗体的微孔培养板内；并向待测的外周血单个核细胞悬液中加入ESAT‑6蛋白液培养，再向对应的微孔内加入IFN‑γ抗体酶标工作液孵育；每孔加入底物室温避光孵育、干燥；使用斑点计数仪计算微孔板内斑点形成细胞的平均斑点面积；本发明的方法通过ELISPOT技术检测结核特异性抗原ESAT‑6刺激条件下外周血单个核细胞释放IFN‑γ并通过显色形成的斑点的平均斑点面积，从而指导医生对活动性结核患者和潜伏性结核患者进行鉴别诊断。

摘要： 本发明公开了一种T淋巴细胞的酶联免疫斑点试验方法，包括以下步骤：采用英国OxfordImmunotec公司生产的T-SPOT.TB试剂盒，取枸橼酸钠抗凝静脉血5ml，分离外周血单个核细胞放在包被γ-干扰素抗体的微孔板，加入结核特异性抗原早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和培养滤过蛋白(CFP-10)作为刺激原，温箱培养24h后，洗去抗原致敏效应T淋巴细胞，加入生物素标记的二抗，再经酶联显色，在细胞因子分泌的地方形成斑点，通过记录斑点数检测结核特异抗原致敏的效应T淋巴细胞数量。本发明方法有助于菌阴肺结核早期筛查。