分枝杆菌,结核

摘要： 针对结核分枝杆菌潜伏感染高危人群开展预防性治疗是降低结核病发病率的直接手段,也是实现终结结核病流行(End TB)全球战略目标的重要组成部分.作为结核病高负担国家,我国如何通过开展结核分枝杆菌潜伏感染人群的预防干预,实现结核病发病率快速下降的目标,值得探讨.其中,准确掌握我国的结核分枝杆菌潜伏感染负担和流行特征是讨论策略可行性和科学性的前提.在缺乏全国范围的结核分枝杆菌潜伏感染流行病学调查的背景下,中国医学科学院病原生物学研究所和中国疾病预防控制中心联合中国科学院地理科学与资源研究所,以全国结核病报告发病率为辅助变量,利用多中心的基于γ-干扰素释放试验检测的结核分枝杆菌潜伏感染流行病学调查数据和小样本空间统计模型,开展了全国结核分枝杆菌潜伏感染率的估算.结果 显示,2013年我国5周岁及以上人群结核分枝杆菌潜伏感染率为18.1％(95％CI:13.7％～22.4％);15周岁及以上人群结核分枝杆菌潜伏感染率为20.3％(95％CI:15.6％～25.1％),呈现随着年龄升高而增长的趋势,同年龄段内男性高于女性.领域内专家针对估算结果进行了广泛论证并形成了《全国结核分枝杆菌潜伏感染率估算专家共识》,以供我国结核病防治工作者借鉴和参考.

摘要： 目的:估算全国结核分枝杆菌潜伏感染率.为我国结核病综合防控策略提供依据.方法:综合2013年多中心的基于γ-干扰素释放试验的结核分枝杆菌潜伏感染流行病学调查数据和20132019年全国各县(区)肺结核报告发病率等多源数据.基于三位一体空间统计框架利用纠偏空间统计推断模型(Biased Sample Hospital based Area Disease Estimation.B-SHADE)估算全国结核分枝杆菌潜伏感染率.利用交叉验证法和两个新增研究现场的调查数据进行精度验证.结果:2013年.我国5岁及以上人群结核分枝杆菌潜伏感染率为18.08％(95％CI:13.73％～22.42％);15岁及以上人群结核分枝杆菌潜伏感染率为20.34％(95％CI:15.63％～25.06％).呈现出随着年龄增长而升高的趋势,男性潜伏感染率[24.02％ (95％ CI:18.27％～29.77％)]高于女性[16.91％(95％CI:12.13％～21.70％)].B-SHADE模型对两个新增验证点估计结果的平均绝对误差为0.95％.结论:基于多中心的流行病学调查结果和B-SHADE的全国结核分枝杆菌潜伏感染率估算填补了近年来相关全国性数据的空缺,将为我国适时加强结核分枝杆菌潜伏感染重点人群预防干预、完善"预防为主"的防控策略提供数据依据.

摘要： 目的:评价新型国产改良Middlebrook液体培养试剂用于临床样本中结核分枝杆菌培养的效果.方法:采集2021年3-4月西安市胸科医院诊治的疑似肺结核患者痰液和肺泡灌洗液标本,对其中质量合格的89份痰液标本和61份肺泡灌洗液标本进行分枝杆菌改良试剂培养(改良试剂法)和BACTEC MGIT 960(简称"MGIT 960")培养.比较两种方法检测分枝杆菌的阳性率、报阳时间和污染率差异,并以MGIT 960培养结果为参照标准,评价改良试剂法的检测效能.结果:改良试剂法检测痰液和肺泡灌洗液标本结核分枝杆菌的总阳性率[44.7％(67/150)]和报阳时间[中位数(四分位数):13.0(8.5,17.0)d]与MGIT 960培养结果[分别为42.7％0(63/150)和13.0(8.0,17.5)d]相比,差异均无统计学意义(x2=0.571,P=0.453;Z=-1.344,P=0.179).两种方法检测肺泡灌洗液标本均未出现污染,但改良试剂法检测痰液标本的污染率[12.4％(11/89)]明显高于MGIT 960培养[4.5％(4/89)],差异有统计学意义(x2=4.000,P=0.039).改良培养试剂的成本[(49.6±10.5)元/份]仅约为MGIT 960培养试剂[(75.4±15.8)元/份]的60％.以MGIT 960培养结果为参照标准,改良试剂法检测痰液和肺泡灌洗液标本结核分枝杆菌的总敏感度为96.9％(62/64)、总特异度为94.2％(81/86),Kappa值为0.905,一致性好.结论:分枝杆菌改良Middlebrook液体培养试剂检测痰液和肺泡灌洗液标本与MGIT 960培养诊断结核病的一致性好,但应注意痰液标本检测污染率较高的问题.

摘要： 吡嗪酰胺是结核病最重要的一线治疗药物之一,但结核分枝杆菌对其耐药性在逐年增长,目前对于结核分枝杆菌吡嗪酰胺的耐药基因的分子机制尚无定论.作者对结核分枝杆菌吡嗪酰胺的相关耐药基因pncA、rpsA、panD、fadD2及FAS-I的研究进展进行综述.

摘要： 目的:探讨荧光PCR探针熔解曲线法(简称“熔解曲线法”)与微孔板法检测利福平药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果不一致的原因,为临床基因型与表型药敏结果不一致提供解释。方法:收集2019年8月至2020年9月西安市胸科医院收治的分枝杆菌培养阳性的结核病患者资料,共2562例,筛选同时进行利福平熔解曲线法耐药基因检测和微孔板法表型药敏试验且结果不一致的菌株1294株。通过对rpoB基因测序,分析不一致结果与rpoB基因突变位点的相关性。结果:54例(4.17%,54/1294)熔解曲线法与微孔板法检测结果不一致的患者中,45例为熔解曲线法检测突变型而微孔板法检测敏感,8例为熔解曲线法检测野生型而微孔板法检测耐药,1例熔解曲线法检测出异质性耐药,未纳入分析。其中rpoB基因在507~512位密码子发生突变时,其与微孔板法结果不一致率最高,为70.59%(24/34),且不一致的菌株在微孔板法中最低抑菌浓度(MIC)的测定值多分布在≤1μg/ml。Leu511Pro是观察到不一致菌株最多的突变位点,占45.28%(24/53),其次观察到较多的突变位点是Leu533Pro,占所有不一致菌株的15.09%(8/53),Asp516Tyr和His526Asn突变率均为5.66%(3/53)。8例熔解曲线法检测敏感而微孔板法检测耐药的菌株进行测序,结果显示rpoB基因区域未发生突变。结论:rpoB基因Leu511Pro、Leu533Pro、Asp516Tyr和His526Asn位点突变是造成临床结核分枝杆菌基因型与表型药敏结果不一致的主要原因,但其是否与低水平耐药机制有关还需要进一步研究。

摘要： 结核病疫情防控面临的新形势需要考虑新的快速、便捷的早期筛查或诊断技术。简便、快速和廉价的免疫学诊断技术是结核病研究人员重点关注并且坚持不懈的努力方向。目前结核分枝杆菌抗原靶标包括单一抗原的检测和多种抗原同时检测,涉及的检测技术包括免疫学技术、质谱技术及纳米技术。随着技术的进步,结核分枝杆菌抗原在检测技术和研究思路上都取得了较大的进展,但仍存在一些问题。结核分枝杆菌抗原研发的方向应注重多种特异性抗原同时检测。随着新型纳米材料和传感方法的发展,特异性强、免疫原性好的抗原得到不断发现和深入研究,这将有助于结核分枝杆菌抗原检测得到新的完善和发展。

摘要： 目的:评价结核感染控制培训班学员感染控制相关知识掌握、传播及运用情况。方法:采用横断面调查研究的方法,于2020年10月对参加2016—2019年中国疾病预防控制中心举办的结核感染控制培训班的156名学员进行在线问卷调查,有效参加人员131名(84.0%)。使用描述性方法和主题框架分析法,分析学员结核感染控制知识(30题)正确率、培训相关知识传播情况、本机构感染控制现况改善情况、防控新型冠状病毒肺炎(简称“新冠肺炎”)效果,以及本机构在改进结核感染控制中面临的问题和挑战。结果:调查对象结核感染控制知识应答正确率范围为23.7%(31/131)~100.0%(131/131),正确率中位数(四分位数)为86.7%(80.0%,93.3%),正确率>90%的有18个问题、>80%的有23个问题、<80%的有7个问题。131名调查对象均对培训效果做出反馈,其中,74.8%(98/131)的调查对象向本地区/机构提出了150条结核感染控制改进建议,并有141条(94.0%)被本地区/机构采纳,以个人防护方面的建议最多(28条,18.7%)。48.1%(63/131)的调查对象将学习到的理论与技能在本地区/机构定期培训中进行了传播。85.5%(112/131)的调查对象提出了132条本地区/机构提高结核感染控制水平所面临的问题和挑战。来自收治新冠肺炎患者定点医疗机构的90.6%(48/53)的调查对象反馈培训班内容为成功处理新冠肺炎疫情发挥了重要作用。结论:培训班在掌握及传播结核感染控制理论与技能、提高地区和机构感染控制现况、帮助应对新冠肺炎疫情等方面均取得了显著效果。感染控制培训仍需更多关注和投入。

摘要： 目的 探讨GeneXpert MTB/RIF(简称Xpert)法诊断肺结核的可靠性及了解复治患者群体特点,为复治结核病患者人群调查提供线索.方法 收集2019年7月至12月来南华大学附属长沙中心医院结核科就诊的疑似肺结核患者痰液905例,采用Xpert法进行结核病快速筛查,并用MGIT960进行痰快速培养及传统药敏试验,比较Xpert法和传统药敏方法学差异.查阅Xpert阳性患者资料,比较初治/复治患者性别、年龄、RIF耐药、职业以及患糖尿病差异性,并采用二元logistic回归分析RIF耐药相关危险因素.结果 905例疑似肺结核患者中Xpert检测总的检出率为28.7％(260/905);260例阳性患者中利福平(RIF)耐药率为20.8％(54/260),突变类型以Probe-E和Probe-D为主;传统药敏法与Xpert法检测RIF耐药性差异无统计学意义(P＞0.05);Xpert法和传统药敏病例中,Xpert法预测异烟肼(INH)耐药性差异无统计学意义(P =0.293);Xpert阳性初治和复治患者相比,两者年龄(t =-3.835,P＜0.05)、性别、RIF耐药率和农民占比差异均具有统计学意义(x2 =5.091、16.862、4.808、P＜0.05);二元logistic回归结果显示,患者复治是影响RIF耐药结局的相关危险因素(OR= 3.739,P = 0.004).结论 Xpert法诊断肺结核病及RIF耐药临床应用价值较高;复治患者年龄较大,农民家庭男性占比较大、对RIF耐药率较高.

摘要： 结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是全球单一传染病致死的十大死亡原因之一.2020年全球结核病研究领域学者做出了诸多努力,在结核病基础、诊断、治疗和预防等方面研究均有很多突破.这些突破给结核病防治科技工作者带来了很多的启发和思路,也为临床治疗带来了更多的希望,例如:结核分枝杆菌Sulfolipid-1的致咳机制研究带来了控制结核分枝杆菌传染的新思路;M72/AS01E疫苗的良好保护效果让我们看到继卡介苗之后的新希望;Nix-TB的研究结果为复治或难治耐多药/广泛耐药结核病(MDR/XDR-TB)患者带来了新的曙光;mRNA标记物等新型诊断方法研究也在不断取得进步.为了提高全国结核病防治人员的诊疗能力,及时了解全球结核病研究在新技术、新方法、新理念和新药物研发上的突破,中国防痨协会组织专家对2019年10月至2020年10月于国际上发表的重要文献进行解读,以期为推动我国结核病领域研究工作做出贡献.

摘要： 目的 分析荧光PCR探针熔解曲线法与微孔板法药物敏感性试验(简称"药敏试验")检测结核分枝杆菌(MTB)对抗结核药品耐药性结果的一致性及MTB基因突变与耐药的相关性,为临床诊疗优化提供参考.方法 搜集2019年1 -12月分离自西安市胸科医院就诊患者并经鉴定确认的343株MTB临床分离株,菌株均进行了微孔板法药敏试验和荧光PCR探针熔解曲线法检测.以微孔板法药敏试验结果为参照,评价荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、莫西沙星和左氧氟沙星耐药性的检测效能,并分析荧光PCR探针熔解曲线法检测的MTB基因突变与微孔板法药敏试验最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentra-tion,MIC)的相关性.结果 以微孔板法药敏试验结果为参照,荧光PCR探针熔解曲线法检测MTB对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、莫西沙星和左氧氟沙星耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为:96.20％ (76/79)、95.28％(242/254)、0.88;93.62％(44/47)、94.58％ (279/295)、0.79;96.88％ (62/64)、94.96％ (264/278)、0.86;93.33％(14/15)、95.37％ (309/324)、0.61;92.31％ (24/26)、97.16％ (308/317)、0.80;91.18％ (31/34)、99.35％(307/309)、0.92.荧光PCR探针熔解曲线法检测结果与微孔板法表型药敏试验检测结果不一致的菌株中,发生异烟肼AhpC启动子区(-44?-30及-15?3位点),利福平rpoB基因507～512位点,链霉素rrs基因905?908位点多位点突变和乙胺丁醇embB基因406位点突变的菌株,表型药敏试验耐药率较低,分别为1/5、1/5、1/10和1/5;而发生异烟肼KatG基因315位点、利福平rpoB基因529?533位点、链霉素rpsL基因43位点突变的菌株,表型药敏试验耐药率较高,分别为92.42％(61/66)、92.31％(36/39)和95.74％(45/47).结论 荧光PCR探针熔解曲线法与微孔板法药敏试验检测MTB对抗结核药品耐药性结果具有较好的一致性;MTB对异烟肼、利福平、链霉素的耐药与其部分基因突变具有一定相关性.

摘要： 本发明公开了一种检测结核性分枝杆菌(M.tuberculosis)和分枝杆菌属的组合物，其包含：(i)靶向结核性分枝杆菌特异性基因(IS6110)的引物和/或探针；和(ii)靶向分枝杆菌属特异性基因(内部转录间隔区(ITS))的引物和/或探针；和非必需地，(iii)靶向作为内对照的源自植物的基因的引物和/或探针。当使用所述组合物进行实时多重聚合酶链式反应时，可以通过单个反应检测非结核性分枝杆菌和分枝杆菌属，因此可以以高可靠性快速且容易地实现临床诊断。

摘要： 本发明涉及新的分枝杆菌培养基，特别是结核分枝杆菌复合群的培养基，所述培养基明显减少培养分离时间，并因此减少诊断分枝杆菌特别是结核病分枝杆菌的时间。本发明的培养基含有去纤维蛋白血液、卵磷脂和去补体的胎牛血清。本发明还涉及培养和鉴定分枝杆菌、特别是结核分枝杆菌复合群的细菌的方法。更具体而言，本发明涉及新的净化方法，其中用氯己定处理所谓的新的分离和分枝杆菌培养基中的生物学样品。本方面还涉及通过本发明的固体培养基，通过表型确定分枝杆菌对抗生素敏感性的方法。最后，本发明还涉及通过质谱分析法在液相中进行鉴定的新方法，因此有助于明显缩短诊断分枝杆菌病特别是结核的时间。为了进行质谱分析，根据本发明，分析通过双离心直接由培养液所获得的细菌。

摘要： 本发明公开了一种检测结核性分枝杆菌(M.tuberculosis)和分枝杆菌属的组合物，其包含：(i)靶向结核性分枝杆菌特异性基因(IS6110)的引物和/或探针；和(ii)靶向分枝杆菌属特异性基因(内部转录间隔区(ITS))的引物和/或探针；和非必需地，(iii)靶向作为内对照的源自植物的基因的引物和/或探针。当使用所述组合物进行实时多重聚合酶链式反应时，可以通过单个反应检测非结核性分枝杆菌和分枝杆菌属，因此可以以高可靠性快速且容易地实现临床诊断。

摘要： 本发明提供一种用于检测结核分枝杆菌复合群或分枝杆菌属的组合物，其包含：(i)靶向IS6110的引物和/或探针，所述IS6110为结核分枝杆菌复合群-特异性基因；(ii)靶向rpoB的引物和/或探针，所述rpoB为分枝杆菌属-特异性基因；和视需要的(iii)作为内对照的靶向植物源基因的引物和/或探针。当使用本发明的组合物进行多重实时PCR时，可以通过单轮PCR测定检测结核分枝杆菌复合群和分枝杆菌属。因此，本发明实现了具有高可靠性的快速且容易的临床诊断。

摘要： 本发明的课题在于提供一种即使存在于试样中的分枝杆菌属的浓度(拷贝数)存在差异，也能够检测它们的方法，并涉及“一种引物组，其包含：(i)由序列号1所表示的碱基序列构成的正向引物与由序列号2所表示的碱基序列构成的反向引物的组合构成的结核分枝杆菌检测用引物对；(ii)由序列号3所表示的碱基序列构成的正向引物与由序列号4所表示的碱基序列构成的反向引物的组合构成的鸟分枝杆菌检测用引物对；及(iii)由序列号5所表示的碱基序列构成的正向引物与由序列号6所表示的碱基序列构成的反向引物的组合构成的胞内分枝杆菌检测用引物对。”。

摘要： 本发明属于微生物基因检测领域，具体涉及一种用于鉴别结核分枝杆菌和龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌的膜条及制备和使用方法；所述的特异性探针包括用于检测结核分枝杆菌的碱基序列SEQ ID NO.1‑2；用于检测龟分枝杆菌的碱基序列SEQ ID NO.3‑4；用于检测脓肿分枝杆菌的碱基序列SEQ ID NO.5‑6以及分枝杆菌属质控探针SEQ ID NO.7‑8；对应的引物对为SEQ ID NO.9‑10。本申请建立起了一种快速、准确的区分结核分枝杆菌、龟、脓肿分枝杆菌的检测方法，可作为一种市场化分枝杆菌菌种鉴定试剂盒的有益补充鉴定方法，具有良好的临床应用前景。

摘要： 本发明涉及新的分枝杆菌培养基，特别是结核分枝杆菌复合群的培养基，所述培养基明显减少培养分离时间，并因此减少诊断分枝杆菌特别是结核病分枝杆菌的时间。本发明的培养基含有去纤维蛋白血液、卵磷脂和去补体的胎牛血清。本发明还涉及培养和鉴定分枝杆菌、特别是结核分枝杆菌复合群的细菌的方法。更具体而言，本发明涉及新的净化方法，其中用氯己定处理所谓的新的分离和分枝杆菌培养基中的生物学样品。本方面还涉及通过本发明的固体培养基，通过表型确定分枝杆菌对抗生素敏感性的方法。最后，本发明还涉及通过质谱分析法在液相中进行鉴定的新方法，因此有助于明显缩短诊断分枝杆菌病特别是结核的时间。为了进行质谱分析，根据本发明，分析通过双离心直接由培养液所获得的细菌。

摘要： 本实用新型属于微生物基因检测领域，具体涉及一种鉴别结核分枝杆菌和龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌的膜条；所述的特异性探针包括用于检测结核分枝杆菌的碱基序列SEQ ID NO.1‑2；用于检测龟分枝杆菌的碱基序列SEQ ID NO.3‑4；用于检测脓肿分枝杆菌的碱基序列SEQ ID NO.5‑6以及分枝杆菌属质控探针SEQ ID NO.7‑8；对应的引物对为SEQ ID NO.9‑10。本研究的主要目的在于提供了可针对性检测M.TB和龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌的菌种检测膜条，通过在不同的位置设置不同的特异性探针,可以快速、准确的区分结核分枝杆菌、龟、脓肿分枝杆菌。

摘要： 本发明涉及一种具有依赖利福平生长的特异性结核分枝杆菌(其保藏号为：CGMCC NO.1570)。还涉及依赖利福平结核分枝杆菌蛋白，其具有如序列1所示的氨基酸序列，其分子量为43894道尔顿，pI值为5.25。还涉及一种核酸，其具有如序列2所示的核苷酸序列。本发明还涉及采用人工诱导依赖利福平结核分枝杆菌，获得高表达浓度的所述依赖利福平结核分枝杆菌蛋白的方法。涉及包含所述依赖利福平结核分枝杆菌蛋白的组合物、试剂盒以及所述试剂盒在临床诊断依赖利福平结核分枝杆菌结核病、耐多药结核病及其流行病学监测调查中的应用。

摘要： 本发明涉及一种具有依赖利福平生长的特异性结核分枝杆菌(其保藏号为：CGMCC NO.1570)。还涉及依赖利福平结核分枝杆菌蛋白，其具有如序列1所示的氨基酸序列，其分子量为43894道尔顿，pI值为5.25。还涉及一种核酸，其具有如序列2所示的核苷酸序列。本发明还涉及采用人工诱导依赖利福平结核分枝杆菌，获得高表达浓度的所述依赖利福平结核分枝杆菌蛋白的方法。涉及包含所述依赖利福平结核分枝杆菌蛋白的组合物、试剂盒以及所述试剂盒在临床诊断依赖利福平结核分枝杆菌结核病、耐多药结核病及其流行病学监测调查中的应用。