结核,抗多种药物性

摘要： 目的探讨MicroDST^(TM)(微孔药敏检测法)微孔板法检测结核分枝杆菌的耐药情况分析。方法用MicroDST^(TM)微孔板法对贵阳市公共卫生救治中心2018年1月至2019年11月期间部分用比例法药敏试验随机筛选的33例耐多药结核病(MDR-TB)阳性菌株进行16种抗结核药药物敏感性检测。结果异烟肼、利福平耐药率与比例法比较符合率为97.0%(32/33)、93.9%(31/33);对16种药总耐药率33%(174/528);一线总耐药率70.5(93/132)、二线总耐药率20.5(81/396)。结论微孔板法检测的MDR-TB病人筛选率与比例法具有较高符合率、且本地区MDR-TB病人的耐药情况较严重,应加强药物监测,选择有效药物化疗,而MicroDST^(TM)微孔板法的推广使用有利于MDR-TB诊断和药物筛选。

摘要： 目的:探究荧光PCR熔解曲线法快速检测耐多药肺结核患者对左氧氟沙星(Lfx)和莫西沙星(Mfx)耐药性的临床价值。方法:以2018年11月至2019年12月在黑龙江省传染病防治院采用BACTEC MGIT 960全自动分枝杆菌培养及比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”)确诊为耐多药肺结核的195例患者为研究对象,同时经荧光PCR熔解曲线法进行筛查,通过与药敏试验结果进行对比,分析荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌对Lfx和Mfx耐药性的准确性。结果:195株耐多药结核分枝杆菌经比例法药敏试验检测,对Lfx和Mfx耐药率分别为46.15%(90/195)和48.72%(95/195);以比例法药敏试验结果为标准,荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌对Lfx和Mfx耐药性的敏感度分别为95.56%(86/90)和95.79%(91/95),特异度分别为73.33%(77/105)和77.00%(77/100),一致率分别为83.59%(163/195)和86.15%(168/195),Kappa值分别为0.83和0.85。结论:荧光PCR熔解曲线法检测耐多药肺结核患者对Lfx和Mfx耐药的结果与比例法药敏试验结果高度一致,适用于筛查耐多药肺结核患者对Lfx和Mfx的耐药性。

摘要： 目的 通过全基因组测序技术分析深圳市耐多药结核分枝杆菌(MDR-MTB)的耐药性检测情况,为MDR-TB患者的治疗及防控提供科学依据.方法 选取2013-2017年存储于深圳市慢性病防治中心结核病实验室并成功复苏的420株MDR-MTB临床分离株,对其提取DNA后进行全基因组测序.使用内部Perl脚本分析原始数据,参考MTB耐药基因数据库、耐药决定突变数据库及无害突变数据库确定相关基因突变以判断菌株对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、氟喹诺酮类、吡嗪酰胺、乙硫异烟胺、对氨基水杨酸、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、利奈唑胺、贝达喹啉和氯法齐明的耐药情况,同时绘制菌株耐药情况弦图,以及准广泛耐药MTB(pre-XDR-MTB)及XDR-MTB菌株耐药情况热图.结果 全基因组测序从420株菌株中检出23株XDR-MTB菌株(5.48％)和97株pre-XDR-TB菌株(23.10％);其中,所有菌株除对异烟肼、利福平全部耐药外,对链霉素的耐药率最高,达67.86％(285/420),其次为乙胺丁醇(66.19％,278/420)、氟喹诺酮(28.57％,120/420)、吡嗪酰胺(28.33％,119/420)、乙硫异烟胺(13.33％,56/420),对氨基水杨酸(7.38％,31/420)、卡那霉素(6.67％,28/420)、阿米卡星(5.48％,23/420)、卷曲霉素(5.48％,23/420)、利奈唑胺(0.24％,1/420),但未见对贝达喹啉和氯法齐明耐药.全基因组测序发现菌株有212种基因突变类型,以katG-315-S/T(81.43％,342/420)、rpoB-450-S/L(58.57％,246/420)、rpsL-43-K/R(65.96％,188/285)、embB-306-M/V(32.37％,90/278)突变居多.结论 全基因组测序预测深圳市MDR-MTB临床分离株中的pre-XDR-MTB比例较高,对一线抗结核药品及氟喹诺酮类药品的耐药率较高,临床实践中应结合药敏试验结果谨慎使用;而对乙硫异烟胺、氯法齐明、对氨基水杨酸等二线抗结核药品的耐药率较低,考虑这些药品可作为MDR-TB患者治疗方案的组成部分.

摘要： 目的 评估PCR-反向点杂交法检测复治涂阳患者痰标本中MTB耐药性的价值.方法 收集2015年6月至2019年1月上海市肺科医院诊治的400例复治涂阳肺结核患者的痰标本,每份标本量均不少于2 ml;每例患者采用同一标本进行PCR-反向点杂交法MTB耐药基因检测、GeneXpert MTB/RIF检测和BACTEC MGIT 960液体培养、菌种鉴定、微孔板法药物敏感性试验(简称"药敏试验"),最终纳入357例(株)为研究对象.以微孔板法药敏试验结果为参考标准,评价PCR-反向点杂交法的检测效能.结果 以微孔板法药敏试验结果为参考标准,PCR-反向点杂交法检测MTB对利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率和Kappa值分别为97.5％(115/118)、97.1％(232/239)、94.3％(115/122)、98.7％(232/235)、97.2％(347/357)和0.937,对异烟肼耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率和Kappa值分别为82.5％(113/137)、99.1％(218/220)、98.3％(113/115)、90.1％(218/242)、92.7％(331/357)和0.841,对链霉素耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率和Kappa 值分别为86.5％(115/133)、99.1％(222/224)、98.3％(115/117)、92.5％(222/240)、94.4％(337/357)和0.877,对乙胺丁醇耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率和Kappa 值分别为60.7％(37/61)、98.6％(292/296)、90.2％(37/41)、92.4％(292/316)、92.2％(329/357)和0.682.结论 PCR-反向点杂交法检测复治涂阳患者痰标本中MTB耐药性有较好的效能.

摘要： 目的 探究结核分枝杆菌中利福平和异烟肼耐药基因突变谱的分布,为研发更为精准的耐药分子诊断技术和临床决策提供依据.方法 收集国家耐药监测点新疆维吾尔自治区柯坪县、岳普湖县和疏勒县193株和湖南省怀化市、永顺县、祁东县、桃江县和耒阳市592株结核分枝杆菌.采用微孔板法测定菌株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).根据药物敏感性试验(简称"药敏试验")结果选取利福平和异烟肼耐药菌株,经CTAB/NaCl法提取核酸后进行全基因组测序(whole genome sequencing,WGS),将所得基因组原始序列过滤后上传至TBprofiler分析工具以确定耐药基因型.结果 785株结核分枝杆菌中,124株(15.80％)为利福平和(或)异烟肼耐药,包括利福平耐药74株,异烟肼耐药111株,耐多药61株(7.77％).97.22％(70/72)利福平耐药菌株检测出rpoB基因位点突变,其中98.57％(69/70)的突变位于利福平耐药决定区(RRDR),1株检测出RRDR区以外的与利福平耐药相关的罕见突变I491F.利福平耐药突变主要位于rpoB 450、rpoB 445及rpoB 435密码子,占81.43％(57/70),其中rpoB S450L突变出现的频率最高(45.71％,32/70),rpoB 450位点突变对应高浓度利福平耐药(MIC≥16 μg/ml),rpoB 452位点突变主要对应低浓度利福平耐药(MIC=2 pg/ml).93.58％(102/109)的异烟肼耐药菌株存在耐药相关基因突变,85.29％(87/102)的异烟肼突变位于katG 315及fabG1启动子区,katG S315T为最常见的耐药突变(57.84％,59/102),主要对应高浓度异烟肼耐药(MIC≥2 μg/ml),其次为fabG1(C15T)(16.67％,17/102),主要对应低浓度异烟肼耐药(MIC=0.25～1.00 μg/ml).结论 不同耐药基因突变导致的结核分枝杆菌耐药水平不同.对于利福平,rpoB 452位点突变对应低浓度耐药,rpoB445和450位点突变对应高浓度耐药;对于异烟肼,发病fabGl-15突变对应低浓度耐药,katG315突变对应高浓度耐药.

摘要： 耐多药结核病的防治对于结核病的防控具有重要意义,已成为结核病防治的难点和热点问题.早期对结核病患者进行耐多药检测能够提高耐多药结核病患者的治疗成功率.耐多药结核病的诊断方法包括传统的培养方法及新型分子生物学诊断方法.作者对耐多药结核病的诊断方法进行综述,以期为耐多药结核病防治提供科学依据.

摘要： 介绍2019年南非《利福平耐药结核病管理临床指南》的要点,包括耐药结核病治疗方案的制订、药品选择、特殊人群的治疗、密切接触者的管理等,并与我国《耐药结核病化学治疗指南(2019年)》对比,对于不同之处进行分析.

摘要： 目的 了解并分析耐多药/广泛耐药肺结核并发2型糖尿病患者的耐药特征.方法 搜集黑龙江省传染病防治院耐药病区2018年6月至2020年6月收治的经结核分枝杆菌培养及药物敏感性试验(简称"药敏试验")确诊的耐多药/广泛耐药肺结核患者233例,其中并发2型糖尿病者84例(简称"并发糖尿病组"),未并发糖尿病者149例(简称"未并发糖尿病组").对两组患者的肺结核初复治情况、所耐药品数量、耐药谱进行分析,采用SPSS 18.0软件进行统计学分析,组间计数资料"构成比或率"的比较采用x2检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 并发糖尿病组初治肺结核26例,占比为30.95％(26/84);未并发糖尿病组初治肺结核16例,占比为10.74％(16/149),两组比较差异有统计学意义(x2 =14.854,P＜0.01).在所耐药品数量上,并发糖尿病组与未并发糖尿病组比较,耐异烟肼与利福平的构成比分别为10.71％(9/84)、7.39％(11/149),耐3种药品的构成比分别为28.57％(24/84)、24.16％(36/149),耐4种药品的构成比分别为19.05％(16/84)、24.83％(37/149),耐5种药品的构成比分别为17.86％(15/84)、19.46％(29/149),耐6种及以上药品的构成比分别为23.81％(20/84)、24.16％(36/149);两组间差异均无统计学意义(x2值分别为0.759、0.546、1.023、2.063、0.882,P值分别为0.383、0.460、0.312、0.151、0.348).在耐药谱方面,并发糖尿病组与未并发糖尿病组比较,异烟肼与利福平耐药的比率分别为10.71％(9/84)、7.40％(11/149),氟喹诺酮类药品耐药的比率分别为29.76％(25/84)、29.53％(44/149),抗结核药品二线注射剂耐药的比率分别为4.76％(4/84)、6.71％(10/149),异烟肼与利福平+氟喹诺酮类药品+抗结核药品二线注射剂同时耐药的比率分别为8.33％(7/84)、13.42％(20/149),两组间差异均无统计学意义(x2值分别为0.760、0.009、0.361、1.358,P值分别为0.383、0.926、0.548、0.244).结论 耐多药/广泛耐药肺结核并发2型糖尿病患者以初治肺结核多见,是否并发糖尿病对耐多药/广泛耐药肺结核所耐药品数量、耐药谱均没有影响.对糖尿病等易感人群要加强防护,避免因感染耐药结核分枝杆菌而发生原发性耐药结核病.

摘要： 目的 采用BACTEC MGIT 960(简称"MGIT 960")和荧光PCR熔解曲线法(简称"PCR熔解曲线法")对结核性脓胸不同手术标本进行病原学及耐药性检测,并进行比较研究.方法 搜集2019年1月至2020年6月150例结核性脓胸患者(经术前胸腔穿刺标本MTB MGIT 960阳性且MPB64单克隆抗体测定为MTB菌株,或组织病理检查表现为典型结核肉芽肿性炎伴干酪样坏死确诊).不同手术标本(病灶组织、脓液各150份)分别进行MGIT 960液体培养和表型药物敏感性试验(简称"药敏试验")、PCR熔解曲线法行核酸及耐药基因检测.对比分析两种技术检测不同手术标本的病原学诊断阳性率,以及两种技术同时进行耐药性检测的40份病原学阳性标本的检测结果.结果 300份手术标本(脓液和组织),PCR熔解曲线法核酸检测MTB的总体阳性率(44.0％,132/300)明显高于MGIT 960(18.0％,54/300)(x2 =47.405,P = 0.000);但前者检测组织标本的阳性率[50.0％(75/150)]明显高于脓液标本[38.0％,(57/150)](x2=4.383,P=0.048),而后者检测组织标本的阳性率[12.7％(19/150)]明显低于脓液标本[23.3％(35/150)](x2 = 5.781,P=0.024).进一步分析MGIT 960、PCR熔解曲线法和两种技术联合检测对150例患者的病原学诊断阳性率(只要其中1种方法检测为阳性即判定该例患者为病原学阳性),结果显示:前者阳性率[30.7％(46/150)]明显低于后两者[分别为66.7％(100/150)、70.7％(106/150)](x2值分别为38.908,48.009;P值均为0.000),而后两者的比较差异无统计学意义(x2 =0.558,P=0.455).两种方法同时进行耐药性检测的40份病原学阳性标本的检测结果显示,MGIT 960和PCR熔解曲线法对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、左氧氟沙星的耐药检出率分别为20.0％(8/40)和17.5％(7/40)、17.5％(7/40)和15.0％(6/40)、17.5％(7/40)和17.5％(7/40)、17.5％(7/40)和22.5％(9/40)、5.0％(2/40)和7.5％(3/40),差异均无统计学意义(x2值分别为0.082、0.092、0.000、0.313、0.213,P值均＞0.05).结论 结核性脓胸患者术中病灶送检PCR熔解曲线法核酸检测MTB的总体阳性率明显高于MGIT 960培养,且组织标本送检该方法检测的阳性率高于脓液标本,耐药检出率与MGIT 960表型药敏试验相近,可快速检测病原学及耐药性.

摘要： 目的 分析2014-2018年杭州市肺结核患者对一线抗结核药品的耐药特征及其影响因素,为杭州市防治耐药结核病提供科学依据.方法 收集2014-2018年浙江省中西医结合医院结核病诊疗中心就诊的杭州市全部常住人口中的活动性肺结核患者,共12 851例,纳入结核分枝杆菌培养阳性且对一线抗结核药品药物敏感性试验(简称"药敏试验")信息全面的3807例患者.通过国家结核病信息管理系统和结核病实验室信息系统(laboratory information system,LIS)收集所有患者的性别、年龄、户籍、职业、治疗分类(初治和复治)、肺部有无空洞、患者来源及现居住地、结核分枝杆菌培养及药敏试验结果.运用单因素和多因素非条件logistic回归分析的方法研究杭州市耐药肺结核患者耐药特征及其影响因素.结果 3807株菌株中,907株(23.82％)对4种一线抗结核药品耐药,耐药顺位依次为异烟肼(18.57％,707例)、链霉素(18.41％,701例)、利福平(12.03％,458例)、乙胺丁醇(6.41％,244例);所有患者的耐多药率和多耐药率分别为11.11％(423/3807)和4.44％(169/3807).2014-2018年不同年份肺结核患者耐药率分别为22.87％(185/809)、25.55％(198/775)、25.60％(181/707)、23.04％(188/816)、22.14％(155/700),差异无统计学意义(x2趋势=4.275,P=0.370);耐多药率分别为11.12％(90/809)、13.16％(102/775)、11.88％(84/707)、11.40％(93/816)、7.71％(54/700),差异有统计学意义(x2趋势=11.276,P=0.024).多因素条件logistic回归分析显示,相对于男性和初治患者,女性和复治肺结核患者是发生耐药的危险因素[OR(95％CI)=1.308(1.111～1.540);OR(95％CI)=4.281(3.498～5.238)];相对于下沙区,居住在其他6个区的结核病患者发生耐药的可能性较大,萧山区和富阳区的风险更高[OR(95％CI)= 4.400(2.559～7.565);OR(95％CI)=3.803(2.037～7.098)].相对于男性、＜40岁、初治患者,女性、≥40岁、复治的肺结核患者是产生耐多药的危险因素[OR(95％CI)= 1.724(1.364～2.178);40～岁组:OR(95％CI)= 3.418(1.599～7.305);60～岁组:OR(95％CI)=3.885(1.832～8.239);复治:OR(95％CI)= 7.645(5.984～9.766)].结论 杭州市应该加强年龄≥40岁、复治、女性、居住在萧山地区、富阳区耐药结核病患者的管理和治疗,是降低杭州市耐药及耐多药结核病产生和传播的关键.

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的药物转运蛋白基因多态性位点及其应用，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明公开了一种基于核磁共振技术早期预测抗结核药物所致肝功能异常的方法及其应用。该方法为对待测者血浆进行核磁共振检测，分别得到3.62ppm、7.80ppm、3.81ppm、3.69ppm和7.79ppm的化学位移代表的差异代谢产物的相对表达量，再根据差异代谢产物的相对表达量区分待测者是否存在抗结核药物所致的药物性肝损伤。与传统方法相比，本发明提供的方法具有样本处理简单、样本无破坏性、进样量少、重复性号、成分低等优点。本发明具有重要的应用价值。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的UGT2基因多态性位点及其应用，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的GSTA基因多态性位点及其应用，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的细胞色素P450基因多态性位点，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明公开了一种用于防治抗结核药物性肝损伤的药物组合物及其应用，该药物组合物以黄芩提取物和五味子提取物为有效药物成份，与药物中可以接受的辅助添加成份共同组成；有效药物成分黄芩提取物和五味子提取物分别以其提取用原料生药黄芩和五味子的重量份计的比例为1/(0.5～1.0)。所述的药物组合物可用于防治抗结核药物性肝损伤。本发明利用五味子提取物和黄芩提取物应用于抗结核药引起的肝损伤，取得显著的防治效果，防治作用明显优于现在市场上的西药双环醇和水飞蓟宾。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的药物转运蛋白基因多态性位点及其应用，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的GSTA基因多态性位点及其应用，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的细胞色素P450基因多态性位点，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。

摘要： 本发明提供了与抗结核药物性肝损伤发生相关的UGT2基因多态性位点及其应用，具体地，本发明发现了一批与抗结核药物肝毒性相关性显著的基因多态性位点，实验结果表明，本发明提供的与抗结核药物性肝损伤发生相关的SNP位点能够作为敏感的抗结核药物性肝损伤易感生物标志，临床上可以用来评估使用抗结核药物的患者是否易于引发肝损伤，进而指导临床用药。