红藻氨酸

摘要： 目的:探讨颞叶癫痫幼鼠海马神经发生与Miat及Wnt7b/β-catenin信号通路的变化。方法:将日龄21~23 d的幼鼠分为生理盐水(NS)组与红藻氨酸(KA)组,每组18只。取KA组幼鼠侧脑室注射KA构建颞叶癫痫模型,埋入脑电波接收电极,观察幼鼠的癫痫发作情况与脑电波变化情况。在第1周、第4周、第8周通过Y型迷宫检测幼鼠学习、记忆能力。取幼鼠脑组织,包埋切片后检测BrdU阳性细胞数与DCX蛋白表达。镊取幼鼠海马组织,提取RNA检测Miat含量,提取蛋白检测Wnt7b/β-catenin信号蛋白表达。结果:KA组幼鼠在不同时期出现癫痫发作,脑电波连续出现高频/高幅棘波;随着时间进展,与KA-1周组发作频率[(7.50±1.87)次/天]、发作等级(3.31±0.48)相比,KA-8周组癫痫发作频率[(2.33±1.21)次/天]与等级(1.19±0.40)降低(P<0.05),脑电波中高频/高幅棘波间歇性出现。Y型迷宫中,与NS组相比,KA组幼鼠正确反应次数减少,正确反应时间延长;与KA-1周组正确反应次数[(8.17±1.72)次]、正确反应时间[(11.83±1.72)s]相比,KA-8周组幼鼠正确反应次数[(10.50±2.74)次]增加,正确反应时间[(9.50±2.74)s]缩短。与NS组相比,KA组幼鼠BrdU阳性细胞数、DCX蛋白表达、Miat含量、Wnt7b/β-catenin信号通路与BDNF/TrkB信号通路蛋白表达减少(P<0.05);与KA-1周组相比,KA-8周组幼鼠BrdU阳性细胞数、DCX蛋白表达、Miat含量、Wnt7b/β-catenin信号通路与BDNF/TrkB信号通路蛋白表达增加(P<0.05)。结论:颞叶癫痫幼鼠海马体中存在神经发生减少,这可能与抑制Miat及Wnt7b/β-catenin信号通路相关。

摘要： 目的探讨右美托咪定对红藻氨酸(KA)诱导的癫痫模型大鼠神经元凋亡的作用。方法SD大鼠腹腔注射KA构建癫痫模型,将实验动物随机分为3组:对照组、K组、K+D组,每组15只。对照组腹腔注射生理盐水,K组腹腔注射KA(15 mg/kg),K+D组在注射KA前的30 min腹腔注射右美托咪定(5μg/kg),1次/d,给药3 d。用Racine量表进行癫痫评分;用尼氏染色观察海马神经元的细胞结构;用TUNEL染色测定神经元细胞凋亡情况;免疫印迹法观察海马组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3、Caspase-9、Caspase-12的蛋白表达水平。结果与对照组比较,KA组癫痫发作评分明显升高(P<0.05);与KA组比较,K+D组癫痫发作评分显著降低(P<0.05);与对照组相比,KA组海马CA3区神经元数量明显减少且排列较为疏松,与KA组比较,K+D组海马神经元CA3区神经元数量明显增多(P<0.05);与对照组相比,KA组的海马CA3区阳性细胞数量明显增多,与KA组比较,K+D组海马CA3区阳性细胞数量明显较少(P<0.05);与对照组相比,KA组海马组织Caspase-3、Caspase-9、Caspase-12表达显著增加,而K+D组海马组织Caspase-3、Caspase-9、Caspase-12表达较KA组明显减少(P<0.05)。结论右美托咪定对KA引起的海马神经元凋亡有明显的抑制作用,能减轻KA引起的神经毒性作用。

摘要： 目的 研究超声刺激(ultrasound stimulation,US)在红藻氨酸(kainate,KA)诱导的小鼠癫痫模型中的抗癫痫作用.方法 将小鼠随机分为对照组(n=11)、KA组(n=12)和KA+US组(n=12).通过侧脑室注射KA建立小鼠癫痫模型,并给予US处理2周.通过视频监控记录US对KA诱发的小鼠癫痫相关行为的影响;通过脑电图检测US对小鼠癫痫发作时的脑电活动的影响;通过尼氏染色观察US对海马CA3区神经元大体形态和密度的影响;通过FJB与NeuN共定位观察US对海马CA3区神经元退化变性的影响;通过GFAP免疫组织化学染色观察US对海马CA3区星形胶质细胞活化增生的影响.结果 US可显著减少KA处理后小鼠癫痫发作次数并延长癫痫发作潜伏期.脑电图记录结果显示,US可显著降低棘波频率.尼氏染色显示,KA组海马CA3区神经元呈现核固缩且神经元密度降低;相对于KA组,KA+US组海马CA3区神经元核固缩明显减少,神经元密度明显增加.FBJ和NeuN共定位染色显示,US可显著降低KA引起的海马CA3区神经元退化变性.GFAP免疫组织化学染色显示,KA组海马CA3区星形胶质细胞明显增多,而US可减少其数量.结论 US具有抗癫痫作用,且这一作用可能与其抑制海马CA3区的神经元退化并降低星形胶质细胞活化增生相关.

摘要： 目的研究超声刺激(ultrasound stimulation,US)在红藻氨酸(kainate,KA)诱导的小鼠癫痫模型中的抗癫痫作用。方法将小鼠随机分为对照组(n=11)、KA组(n=12)和KA+US组(n=12)。通过侧脑室注射KA建立小鼠癫痫模型,并给予US处理2周。通过视频监控记录US对KA诱发的小鼠癫痫相关行为的影响;通过脑电图检测US对小鼠癫痫发作时的脑电活动的影响;通过尼氏染色观察US对海马CA3区神经元大体形态和密度的影响;通过FJB与NeuN共定位观察US对海马CA3区神经元退化变性的影响;通过GFAP免疫组织化学染色观察US对海马CA3区星形胶质细胞活化增生的影响。结果US可显著减少KA处理后小鼠癫痫发作次数并延长癫痫发作潜伏期。脑电图记录结果显示,US可显著降低棘波频率。尼氏染色显示,KA组海马CA3区神经元呈现核固缩且神经元密度降低;相对于KA组,KA+US组海马CA3区神经元核固缩明显减少,神经元密度明显增加。FBJ和NeuN共定位染色显示,US可显著降低KA引起的海马CA3区神经元退化变性。GFAP免疫组织化学染色显示,KA组海马CA3区星形胶质细胞明显增多,而US可减少其数量。结论US具有抗癫痫作用,且这一作用可能与其抑制海马CA3区的神经元退化并降低星形胶质细胞活化增生相关。

摘要： 目的探讨西罗莫司对红藻氨酸诱导小鼠癫痫反应的治疗作用。方法 60只小鼠按随机数字表法随机分为对照组、模型组和西罗莫司低、中、高剂量组。西罗莫司低、中、高剂量组采用预防加治疗给药方式,造模前1周,分别腹腔注射西罗莫司1 mg/kg、3 mg/kg和9 mg/kg,1次/d,模型组和对照组分别腹腔注射同等剂量的9 g/L盐水。预防给药1周后,除对照组外,所有小鼠腹腔注射30 mg/kg红藻氨酸溶液,对照组注射相等剂量的9 g/L盐水。造模后继续给药治疗1周后处理小鼠。记录小鼠出现癫痫样症状时间和未出现癫痫症状的小鼠个数、癫痫发作时间和平均发作次数、检测小鼠Morris水迷宫试验,采集小鼠到达平台时间、游泳距离和穿越平台次数数据,检测小鼠脑部海马区mTOR通路相关蛋白基因表达水平和海马组织凋亡细胞阳性数目。结果造模后模型组较早出现了癫痫症状,各给药组出现癫痫样症状的时间显著后移(P=0.001 9),癫痫分级模型组显著高于各给药组,造模后第6天小鼠癫痫发作时间显著高于造模后第3天。模型癫痫小鼠到达平台所需的时间和游泳长度显著长于对照组小鼠(P=0.000 1),同时小鼠穿越平台次数显著下降(P=0.000 2),给药组显著缓解,模型组小鼠中其海马区的mTOR通路关键蛋白mTOR和S6的基因表达水平显著上调(P=0.000 1),同时不同剂量的西罗莫司给药后均能显著的下调PI3K、AKT、mTOR和S6的基因表达水平(P=0.000 1)。与对照组相比模型组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR和p-S6与正常的PI3K、AKT、mTOR和S6蛋白灰度比值显著升高(P=0.000 1),同时西罗莫司给药后能够显著下调(P=0.000 1)。结论西罗莫司可显著抑制红藻氨酸诱导的癫痫小鼠海马区mTOR信号通路过度激活,缓解小鼠癫痫症状和增加学习记忆能力。

摘要： 目的 观察内皮素(ET)-1在红藻氨酸(KA)致癫痫大鼠海马的表达及依达拉奉对其影响.方法 50只雄性 Wistar大鼠被随机分成5组,每组10只.正常组、磷酸盐缓冲液(PBS)组、癫痫组,治疗组1(地西泮治疗),治疗组2(地西泮+依达拉奉治疗).癫痫组在大鼠右侧海马以每公斤体重注射 1.5 μg/μl KA,PBS组采取同样的方法在相同部位注入等量PBS,治疗组1在癫痫模型成立后给予10 mg/kg地西泮终止癫痫,治疗组2在治疗组1的基础上1 h后再给予依达拉奉30 mg,1次/12 h,正常组不注射任何药物.结果 激光共聚焦显微镜观察,癫痫组ET-1的表达密度显著高于PBS组及正常组(P<0.05),治疗组较正常组、PBS组及癫痫组表达显著下降(P<0.05),治疗组1较治疗组2表达显著增高(P<0.05).十二烷基硫酸钠、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示ET-1的相对分子质量为2 492 D,其在癫痫组的表达较正常组及PBS组显著增加,治疗组较癫痫组显著降低(均P<0.05),与激光共聚焦的结果相一致.结论 ET-1表达增加对癫痫后大鼠海马的神经元损伤具有细胞保护作用.

摘要： Objective To determine the expression levels of multifunction cytokine AK2 in kainic acid-induced epileptic rat,and to investigate whether AK2 participates in the pathogenesis of EP.Methods 60 male SD rats were divided into control group (10 cases) and model group (50 cases),the animal model of temporal lobe epilepsy was established in model group by intra cerebroventricular injection of KA.Then the rats in the model group were divided into 6 hours group,12 hours group,1 day group,3 days group and 1 week group,with 10 cases in each group,according to the different time points after seizures.AK2 mRNA and protein expression in frontal lobe and hippocampus tissue were measured by semi-quantitative RT-PCR and Western blotting.Results In the model group,expression levels of AK2 in both front al lobe and hippocampus tissue were significant increased compared with the control group (P ＜ 0.05).And the expression levels were reached the highest 3 days after seizures and then gradually declined 1 week later (P ＜ 0.05).Conclusion AK2 may participate in the pathophysiological process of EP and provide a new mechanistic basis for the pathogenesis of epilepsy.%目的 研究红藻氨酸(KA)致大鼠颞叶癫痫(TLE)后腺苷酸激酶2(AK2)的表达变化,探讨AK2参与颞叶癫痫的发病机制.方法 将60只雄性SD大鼠分为正常组(10只)和模型组(50只),模型组建立TLE模型;按致痫后6h、12h、1d、3d、1周对模型组再次进行分组,每组各10只.利用半定量RT-PCR法及Western bloting技术检测AK2 mRNA及蛋白在大鼠额叶及海马中的表达变化.结果 致痫后额叶及海马组织中AK2 mRNA及蛋白表达均较正常组明显升高(P＜0.05);致痫后3d组AK2 mRNA及蛋白含量达到高峰,致痫后1周逐渐降低(P＜0.05).结论 AK2可能参与癫痫的发生机制,为癫痫发病机制提供新的依据.

摘要： 目的 通过观察大鼠痫性发作后血清和脑脊液中炎症因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平的动态变化,进而探讨炎症反应与癫痫的关系.方法 侧脑室注射红藻氨酸(Kainic acid,KA)建立颞叶癫痫大鼠动物模型,用ELISA方法测定大鼠痫性发作后6小时、24小时、72小时、1周血清和脑脊液中IL-6的水平,并与对照组相比较.同时观察癫痫发作后神经元的病理变化.结果 血清和脑脊液中IL-6水平在癫痫发作后6小时逐渐增加,24小时达高峰,以后逐渐下降.致痫24小时后出现大量神经元坏死.结论 炎症反应参与了癫痫后神经元损伤.IL-6或许可作为癫痫脑损伤后的早期外周生化标志物.

摘要： 目的：观察重组腺相关病毒介导人源性神经肽Y基因(rAAV2/1-hNPY-EGFP)转染对红藻氨酸(kainic acid,KA)致痫大鼠海马组织中P35表达的影响,以探讨其在癫痫发病机制中的作用以及NPY基因治疗慢性癫痫的可能机制.方法：Wistar健康老年雄性大鼠96只,随机分为A、B、C、D4组,A组:海马CA3区间断注射KA 1.5μl(0.4μg/μl)5次制成慢性癫痫大鼠模型;B组:在A组模型基础上,脑室注射rAAV2/1-empty-EGFP 10μl,滴度为5×1011/ml;C组:在A组模型基础上,脑室注射rAAV2/1-hNPY-EGFP 10μl,滴度为5×1011/ml;D组:注射药物为生理盐水,方法同A组.将4组大鼠分别于基因导入后2周和4周,取大脑海马组织,荧光定量PCR技术检测大鼠海马中NPY和P35 mRNA的表达,免疫组织化学技术检测二者蛋白的表达.结果：在注射后2周,A、B、C组大鼠NPY和P35 mRNA及蛋白的表达水平均升高,与A组相比有明显差异(P＜0.05);在注射后4周,rAAV2/1-hNPY-EGFP在癫痫病理状态下的脑组织中实现有效表达,C组大鼠海马组织中NPY的表达明显升高,而P35的表达明显降低,与A组及B组大鼠相比有明显差异(P＜0.05).结论：rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染可以抑制KA致痫大鼠海马中P35的表达,进而发挥抗癫痫作用,为NPY基因治疗癫痫病提供了有力试验支持.

摘要： 目的:探讨阿魏酸对红藻氨酸诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制.方法:采用50.0μmol.L-1KA诱导PC12细胞凋亡建立AD神经细胞模型,然后将处理后的PC12细胞分为KA模型组和KA+阿魏酸(25.0,50.0,100.0μmol.L-1)处理的低、中、高剂量组,同时设立正常对照组.采用MTT比色法检测PC12细胞的存活率;采用免疫细胞化学法观察PC12细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax和Cyt c的表达;膜联蛋白-Ⅴ,PI双染流式细胞仪检测PC12的细胞凋亡率,蛋白免疫印记技术检测PC12细胞中Bcl-2、Bax和Cyt c的表达水平.结果:MTT法和凋亡蛋白表达检测显示,与正常组相比,模型组PC12细胞的存活率明显下降,且细胞中Bcl-2表达减少(P＜0.01),而Bax和Cyt c表达升高,Bcl-2/Bax比值下降(P＜0.01),流式细胞检测细胞的凋亡率显示,模型组细胞的凋亡率显著上升(P＜0.01).蛋白印迹术检测显示,模型组细胞中Bcl-2表达量减少,Bax和Cyt c表达量升高,与正常组比较,差异极显著(P均＜0.01).当采用阿魏酸干预后,与模型组相比,25.0,50.0,100.0μmol.L-1组细胞的存活率明显上升,细胞凋亡率减少,而且能增加Bcl-2阳性百分率和表达水平,明显减少Bax和Cyt c阳性百分率和表达水平,使Bcl-2/Bax比值增加 (P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).结论:KA在50.0μmol.L-1剂量时可明显诱导PC12发生凋亡,阿魏酸在25.0～100.0μmol.L-1剂量时能显著抑制KA诱导的PC12细胞凋亡,其神经保护机制可能是通过抑制Bax和Cyt c的表达,升高Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路而提高神经细胞的存活率.

摘要： 目的：观察重组腺相关病毒介导人源性神经肽Y基因(rAAV2/1-hNPY-EGFP)转染对红藻氢酸(kainic acid,KA)致痫大鼠海马组织中P35表达的影响,以探讨其在癫痫发病机制中的作用以及NPY基因治疗慢性癫痫的可能机制。方法：72只Wistar健康雄性成年大鼠,随机分为点燃组(n=48)和对照组(n=24)。点燃组海马CA3区间断注射KA1.5μl(0.4 μg/μl)5次制成慢性癫痫大鼠模型后,又随机分为神经肽Y(neuropeptide,NPY)组(n=24)和KA组(n=24)。NPY组脑室注射rAAV2/I-hNPY-EGFP 1Oμl,KA组脑室注射等量的生理盐水.对照组海马CA3区注射等量的生理盐水(本研究的前期实验已证明rAAV2/I-empty-EGFP对实验结果无明显影响)。将3组大鼠分别于注射后2周和4周断头取大脑海马组织,Western blot法检测大鼠海马组织中NPY和P35的mRNA表达,免疫组织化学技术检测NPY和P35的蛋白表达。结果：在注射后2周,NPY组和KA组大鼠NPY和P35的mRNA及蛋白表达水平均升高,与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05)；在注射后4周,NPY组海马组织中NPY的表达高于KA组(P＜0.05),而P35的表达则明显低于KA组,有显著性差异(P＜0.05).。结论：rAAV2/1-hNPY-EGFP基因转染可以抑制KA诱导的癫痫大鼠海马组织中P35的表达,NPY有可能通过下调海马组织中P35的表达水平来发挥抗癫痫作用。

摘要： 本发明提供了红藻多糖、红藻寡糖及其衍生物在制备吸附大气污染物的吸附剂中的应用，所述红藻多糖主要包括卡拉胶和琼胶；将红藻多糖、红藻寡糖及其衍生物制成其质量体积浓度为0.1µg/mL~2000mg/mL的水溶液或甘油溶液用于制备吸附剂。所述制备的吸附剂的应用领域十分广泛，其使用方法是以任何可以接受的方式置于鼻腔中，如置于口罩、面罩、头套、头盔等防护用具上，以任何可以接受的方式喷洒于室内、工厂、汽车等排出大气污染物的设备的出口附近，具有良好的市场应用前景。

摘要： 本发明涉及到一种利用液质联用方法检测坛紫菜中红藻糖苷和异红藻糖苷含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：样品处理、液相色谱和质谱检测条件设置、标准曲线绘制、测定待测样品、结果计算等步骤。与现有技术相比，本发明用于坛紫菜中红藻糖苷和异红藻糖苷的定量检测，样品处理和检测方法简单、快速，准确度和灵敏度高，重复性好；红藻糖苷和异红藻糖苷的标准溶液在0.08μg/mL～91.9μg/mL之间线性良好。

摘要： 本发明提出一种基于海洋微生物酵素的红藻饮品制备方法及所得红藻饮品，属于食品加工技术领域，能够解决海藻腥味的问题，同时使得到的红藻饮品具有良好的可饮性并保留红藻相应的功能。该技术方案包括红藻酵素的制备、酒花茶的制备、预处理红藻饮品的制备以及对其进行碳酸化得到红藻饮品等几个步骤。本发明提供的红藻饮品解决了海藻腥味的问题，同时具有良好的可饮性并保留红藻相应的功能。

摘要： 本发明公开了一种红藻氨酸的合成方法，该方法以(S)‑5‑氧代‑四氢呋喃‑3‑氨基甲酸苄酯为原料，采用串联N‑烯丙基化‑SN2’反应一步构建了红藻氨酸核心骨架—2,3‑顺‑3,4‑反三取代吡咯烷中间体，该中间体中的酯基经还原、氧化成醛基后，再经霍纳尔‑沃兹沃思‑埃蒙斯反应、汞离子促进甲醇水解反应得到增加一个碳原子的酯基，最后经酯交换、氧化、水解得到红藻氨酸。本发明所用原料价格低廉、反应步骤短、操作工艺简便、红藻氨酸总收率高，可大大降低其合成成本，有望实现红藻氨酸的工业化生产。

摘要： 本发明公开了红藻氨酸在制备抗贝氏隐孢子虫药物中的应用。发明人通过将红藻氨酸与可接受的辅料，制成散剂，添加至饲料中，混匀，按日常饲料量喂食岭南黄鸡，添加量为每100kg饲料中添加4g红藻氨酸；或将红藻氨酸制成水溶性粉剂，溶于水中按日常饮水量喂食小白鼠，添加量为每100kg水中溶于2g红藻氨酸。通过动物感染实验证实添加红藻氨酸可使贝氏隐孢子虫排卵囊量降低78%以上，具有较好的抗隐孢子虫作用。

摘要： 本发明公开了一种红藻氨酸的合成方法，该方法以(S)-5-氧代-四氢呋喃-3-氨基甲酸苄酯为原料，采用串联N-烯丙基化-SN2’反应一步构建了红藻氨酸核心骨架-2,3-顺-3,4-反三取代吡咯烷中间体，该中间体中的酯基经还原、氧化成醛基后，再经霍纳尔-沃兹沃思-埃蒙斯反应、汞离子促进甲醇水解反应得到增加一个碳原子的酯基，最后经酯交换、氧化、水解得到红藻氨酸。本发明所用原料价格低廉、反应步骤短、操作工艺简便、红藻氨酸总收率高，可大大降低其合成成本，有望实现红藻氨酸的工业化生产。

摘要： 本发明公开了红藻氨酸在制备抗贝氏隐孢子虫药物中的应用。本发明人通过将红藻氨酸与可接受的辅料，制成散剂，添加至饲料中，混匀，按日常饲料量喂食岭南黄鸡，添加量为每100kg饲料中添加4g红藻氨酸；或将红藻氨酸制成水溶性粉剂，溶于水中按日常饮水量喂食小白鼠，添加量为每100kg水中溶于2g红藻氨酸。通过动物感染实验证实添加红藻氨酸可使贝氏隐孢子虫排卵囊量降低78%以上，具有较好的抗隐孢子虫作用。

摘要： 本发明涉及具式(Ⅰ)的新颖的8－取代－9H－1,3－二氧杂环戊烷并/4,5－h//2,3/苯并二氮杂衍生物,这些化合物的制备方法以及含有这些活性物质的药物组合物。式(Ⅰ)化合物可以抑制Ampa/红藻氨酸受体。

摘要： 本发明涉及式(Ⅰ)的1,3－二氧杂环戊烷并/4,5－H//2,3－苯并－二氮杂衍生物,这些化合物的制备方法以及含这些活性物质的药物组合物,它们用于选择性抑制AMPA/红藻氨酸受体。

摘要： 本发明涉及能抑制红藻氨酸神经细胞毒性的神经细胞保护剂及作为能抑制红藻氨酸神经细胞毒性的神经细胞保护剂的有效化合物。更具体涉及以通式(Ⅰ)表示的吡啶并噻嗪衍生物或其制药学上允许的盐为有效成分的红藻氨酸神经细胞毒性抑制剂,以及通式(Ⅰ)表示的吡啶并噻嗪衍生物或其制药学上允许的盐。(式中符号具有以下含义,A环:吡啶环(见上式),R