白屈菜红碱

摘要： 本文旨在建立一种使用常规高速逆流色谱技术分离制备高纯度博落回血根碱和白屈菜红碱的方法。通过分析型高速逆流色谱对六种溶剂体系进行快速筛选,确定以三氯甲烷-甲醇-0.2 mol/L盐酸水溶液(4:2:2,V/V/V)为两相溶剂体系并放大到制备型高速逆流色谱上,以上相为固定相,下相为流动相,流速8 mL/min,转速为455 r/min,进样量1000 mg,温度为25°C条件下分离制备博落回血根碱和白屈菜红碱。实验结果表明:此方法一次性能够从1000 mg博落回生物碱粗品分离得到博落回血根碱盐酸盐505 mg和白屈菜红碱盐酸盐435 mg。经超高效液相色谱(UPLC)检测,按照外标法计算,两者纯度分别为99.77%、99.73%。采用标准品对照法、1H NMR和13C NMR对目标产物进行了结构鉴定。分离所得产物的结构数据与文献一致。该方法具有后处理简单、成本低廉、分离产物纯度高、实用性强等特点,适用于血根碱和白屈菜红碱的大量制备。

摘要： 将健康的50头长大白杂交猪均分为5组,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别按每千克饲料添加博落回散30、150、300、600mg混饲给药,相当于推荐临床剂量的1、5、10、20倍,对照组(CK)饲料中不添加博落回散,连续饲喂60d,研究不同剂量博落回散对猪的生长性能、血液学指标、血清生化指标及组织病理学的影响,基于网络药理学探讨博落回提取物(MCE)抗结肠炎的潜在机制。结果表明,与CK相比,饲料中添加30mg/kg的博落回散可显著提高试验猪的平均日增质量,显著降低料肉比,其他所用剂量的博落回散对试验猪的生长性能均无显著影响;饲料中添加30~600 mg/kg的博落回散的试验猪血液学和血清生化指标均无显著变化,且各脏器组织未见异常病理性损害。可见,饲料中添加30~600 mg/kg博落回散连续饲喂60 d,试验猪具有较好的耐受性。通过SwissTargetPrediction、Genecards、STRING等工具和数据库初步揭示了MCE可能是通过作用于ESR1、BCL2L1、MTOR、MCL1、PTGS2、MAPK8、MMP9、MAPK1、ERBB2和PIK3CA等靶点,并通过ErbB和TNF等信号途径发挥抗炎作用的。

摘要： 为开发低毒、环保的植物源农药,对盐碱地水稻稻曲病进行生物防治,以白屈菜红碱(Chelerythrine)及耐盐碱水稻品种通系926为材料,筛选适宜助剂,最终研发了以白屈菜红碱为主要成分的悬浮剂农药配方,并比较不同浓度悬浮剂对盐碱地水稻稻曲病菌的田间防治效果。结果表明,该悬浮剂农药喷施两次,对稻曲病的田间防治效果较好,当有效成分用量为192mL·hm^(-2)时,防治效果达95.88%,高于对照药剂,具有残留低、环境友好等特点。

摘要： 目的制备白屈菜红碱聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒,并考察其体内药动学。方法溶剂挥发法制备PLGA纳米粒,XRPD进行晶型分析,测定溶解度、体外释药。以表面活性剂种类和浓度、PLGA用量、超声功率、超声时间为影响因素,包封率、载药量、粒径为评价指标,单因素试验优化制备工艺。大鼠随机分为2组,分别灌胃给予白屈菜红碱及其PLGA纳米粒的0.5%CMC-Na混悬液,于不同时间点采血,HPLC法测定白屈菜红碱血药浓度,计算主要药动学参数。结果最佳条件为白屈菜红碱用量30 mg,PLGA用量400 mg,表面活性剂(F68)浓度1%,超声功率300 W,超声时间12 min,平均包封率为(83.71±1.73)%,载药量为(5.76±0.27)%,粒径为(231.82±15.73)nm,PDI为0.101±0.014,Zeta电位为(-17.11±1.94)mV。白屈菜红碱以无定形状态存在。PLGA纳米粒溶解度为原料药的13.4倍,72 h内累积释放度为81.07%。与原料药比较,PLGA纳米粒t_(max)、t_(1/2)延长(P<0.01),C_(max)、AUC _(0-t)、AUC _(0-∞)升高(P<0.01),生物利用度增加至4.08倍。结论PLGA纳米粒可促进白屈菜红碱体外溶出,提高其口服生物利用度。

摘要： 博落回提取物为博落回属多年生草本植物的提取物,主要成分为血根碱,还含有白屈菜红碱、原阿片碱、α-别隐品碱和β-别隐品碱。血根碱具有广谱的杀虫和杀菌活性,可以有效防治农业上的多种病虫害。作为植物源农药,血根碱具有环境相容性好和作用谱广等特性,可以作为农业综合防治的重要手段。本文介绍新型博落回植物源农药的理化性质、毒性、环境生物安全性评价、生物活性和登记情况。

摘要： 建立同时测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱两种主要有效成分的含量的方法,评价市售不同厂家博落回注射液的质量。采用Waters-Symmetry C18色谱柱(5μm,4.6×250 mm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相,流速为1.0 mL/min,梯度洗脱,UV检测波长为270 nm,进样量5μL,柱温30°C。结果显示血根碱和白屈菜红碱均呈良好的线性关系,日内精密度分别为0.18%、0.15%,日间精密度分别为0.72%、0.32%,回收率范围分别为99.07%~103.01%、99.09%~102.45%。厂家A每支博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量分别为22.80、6.831 mg;厂家B每支博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量分别为19.80、6.449 mg;而厂家C、D均未检出血根碱和白屈菜红碱。本研究初步建立了同时测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱含量的HPLC测定方法,可用于评价市售博落回注射液的质量。

摘要： 目的:建立测定东北产区白屈菜中6种生物碱含量的方法,完善和提升白屈菜药材现有的质量评价体系。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-1%三乙胺(用磷酸调节pH值至3.0),梯度洗脱(0~5 min,10%~20%A;5~15 min,20%~24%A;15~55 min,24%A;55~60 min,24%~10%A),流速1.0 mL∙min^(-1),柱温35°C,检测波长274 mm。结果:12批东北产区白屈菜药材中白屈菜碱、二氢黄连碱、人血草碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱的质量浓度分别在1.68~33.60、3.40~68.00、2.32~46.40、3.84~76.80、1.72~34.40、1.89~37.76μg∙mL^(-1)与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9999),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%,平均加样回收率分别为99.12%、98.79%、98.60%、98.94%、98.25%、99.39%,RSD均小于2.0%。结论:该方法操作简单、准确、灵敏、重复性好,可为东北产区白屈菜药材质量标准的提升和完善提供实验依据和参考。

摘要： 目的 筛选24种中药单体中有效抑制海洋弧菌的成分。方法 采用纸片法对中药单体进行初筛,采用微量肉汤稀释法对初筛阳性的成分进行复筛和抗菌谱研究。结果 石吊兰素、芹菜素、盐酸白屈菜红碱和雷公藤红素对创伤弧菌(Vibrio vulnificus,VV)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)有不同程度的抑制作用,雷公藤红素抑菌作用最强,其抑制VV和VP的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为2.2μmol/L和1.1μmol/L;其次为盐酸白屈菜红碱,其抑制VV和VP的MIC均为2.6μmol/L。这2种化合物对粪肠球菌均具有很强的抑制作用,雷公藤红素和盐酸白屈菜红碱的MIC分别为4.4μmol/L和10.4μmol/L。盐酸白屈菜红碱还对金黄色葡萄球菌有抑制作用,MIC为41.6μmol/L。24种中药单体对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,VA)均无抑制作用。结论 雷公藤红素和盐酸白屈菜红碱能够特异性抑制海洋弧菌的成分,为治疗海洋弧菌类感染提供了研究基础。

摘要： 白屈菜红碱是从天然植物中提取分离得到的一种季钱型苯并菲唳类生物碱,广泛存在于罂粟科、芸香科植物中,具有抗炎、抗病毒、抑菌、抗肿瘤、抗肝纤维化等多种生物活性。本文综述了白屈菜红碱的理化性质、资源分布、提取方法、药理作用及相关机制,为白屈菜红碱今后的研究与应用提供参考依据。

摘要： 1.地域范围新宁博落回地理标志地域保护范围为新宁县黄金瑶族乡、麻林瑶族乡、水庙镇等16个乡镇(街道)、316个行政村(社区),发展重点村32个。2.品质特征新宁博落回株高2~5米,叶缘锯齿状,有6处凹陷对称排列,叶面长20~40厘米,宽15~30厘米;果下垂,倒卵状长椭圆形,颜色褐色,有光泽,果荚长1.5~3厘米,宽4~7毫米;种子4~8枚。水分≤10%,总灰分≤8%,浸出物≥24%,原阿片碱、别隐品碱、血根碱、白屈菜红碱含量之和(按干燥品计算)≥3%。

摘要： 采用高效液相色谱法(HPLC)对小果博落回中血根碱与白屈菜红碱2种生物碱含量进行了测定,并分析了HPLC的最佳色谱条件.结果表明,在最佳提取条件下,测得小果博落回中血根碱与白屈菜红碱的含量分别为0.74,1.38mg/g;HPLC的最佳色谱条件为:色谱柱Extend-C18,流动相为乙腈/乙酸(体积比)23/77,流速为1.0mL/min,柱温为25°C,检测波长为277nm;采用混合标准液20μL进样.

摘要： 目的:观察连续给予抗肿瘤药物白屈菜红碱后由于积蓄而对机体产生的毒性反应及其严重程度.方法:采用Wistar种大鼠,受试物共分成4个给药组(12.6mg、8.4mg、5.6mg和3.7mg/kg BW)和1个溶剂对照组.腹腔注射给药6天,停药8天为一个周期,连续给药三个周期.结果:大鼠在ip给药后,立即出现腹膜刺激征,一周之内出现消瘦和被动体态等,体重增长缓慢,摄食量减少,出现部分死亡;红细胞系各项降低,白细胞数及分类细胞异常,凝血时间延长,葡萄糖降低、碱性磷酸酶增加;肺脏瘀血,腹腔大量血性腹水,脏器粘连并严重变形;肝脏和脾脏明显增大,前列腺和睾丸明显减小;睾丸生精上皮细胞和精子明显减少等.结论:＞5.6mg/kg BW剂量下,可见因局部刺激和药物毒性所引起的全身性明显的异常反应,以致部分大鼠死亡.3.7mg/kg BW出现毒性反应较小.

摘要： 目的:建立人血草干燥全草中黄连碱和白屈菜红碱的含量测定方法。方法:采用反相HPLC法.色谱柱为YMC-Pack ODS-AA(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-水(0.2％磷酸+0.2％三乙胺)体系梯度洗脱,检测波长280nm,流速1.0mL· min-1,柱温30°C。结果:黄连碱在13.24～264.8μg·mL-1浓度范围内面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9997);加样回收率为99.4％,RSD为1.1％(n=6).白屈菜红碱在6.36～127.2μg· mL-1浓度范围内面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.9998);加样回收率为101.6％,RSD为1.2％(n=6)。结论:本法简单、准确,重复性好,可用于人血草药材的质量。

摘要： 目的：测定动物一次给予抗肿瘤药物白屈菜红碱后的急性毒性反应和近似致死量。rn 方法：应用小鼠、大鼠和犬等多种动物，按照药品审批规程要求进行一次给药后的观察。rn 结果：动物出现安静少动，俯卧，呼吸深慢，精神萎靡，被毛疏松、无光泽，对弱刺激反应不敏感;死亡动物解剖发现胸腔有血性液体，多个脏器肿大、存在大面积充血和瘀血，尾静脉注射针孔处出血时间延长等异常变化。大鼠还出现明显的扭体反应和横向滚动等腹腔刺激症状。rn 结论：小鼠iv给药的LD50及95％可信限为22．84(20．95-24．90)mg／kg。大鼠ip给药的LD50及95％可信限为24．30(22．29-26．88)mg／kg。纯种Beaglc犬iv给药的致死剂量为23．93mg/kg：无明显毒性反应剂量为7．09mg/kg;近似致死剂量为19．94mg／kg。

摘要： 目的：测定动物一次给予抗肿瘤药物白屈菜红碱后的急性毒性反应和近似致死量。方法：应用小鼠、大鼠和犬等多种动物，按照药品审批规程要求进行一次给药后的观察。结果：动物出现安静少动，俯卧，呼吸深慢，精神萎靡，被毛疏松、无光泽，对弱刺激反应不敏感；死亡动物解剖发现胸腔有血性液体，多个脏器肿大、存在大面积充血和瘀血，尾静脉注射针孔处出血时间延长等异常变化。大鼠还出现明显的扭体反应和横向滚动等腹腔刺激症状。结论：小鼠iv给药的LD50及95%可信限为22.84(20.95~24.90)mg/kg。大鼠ip给药的LD50及95%可信限为24.30(22.29~26.88)mg/kg。纯种Beagle犬iv给药的致死剂量为23.93mg/kg；无明显毒性反应剂量为7.09mg/kg；近似致死剂量为19.94mg/kg。

摘要： 目的：建立吸附树脂分离工艺，实现博落回中血根碱和白屈菜红碱的分离。rn 方法：采用合成树脂R1、R2、R3、R4分离，HPLC法定量两种生物碱，并考察R3的吸附和解吸。rn 结果：R3树脂具有最佳的分离效果，以博落回提取物为原料(其中含有37.6％血根碱和18.2％白屈菜红碱)，可分离得到白屈菜红碱样品(其中含血根碱仅为3.2％，含白屈菜红碱为50.9％)和血根碱样品(其中含血根碱为62.5％，含白屈菜红碱仅为2.0％)。rn 结论： R3树脂与血根碱和白屈菜红碱结合力强弱会产生明显不同，在不同的解吸条件下，可实现二者的完全分离，该分离工艺操作简便、处理量大、适于大规模工业化生产。

摘要： 血根碱和白屈菜红碱的分析文献报道较多,而用制备色谱分离制备这两种生物碱鲜有报道.本文通过结晶、大孔吸附树脂预纯化、反相制备液相色谱制备血根碱和白屈菜红碱.在制备色谱中对多种溶剂系统进行了探讨,并比较了挥发性与不挥发性的改性剂对上样量的影响.

摘要： 血水草(Eomecon chinantha Hance)是婴粟科白屈菜族血水草属植物，是我国独属、独种的特有物种，目前已从血水草根茎中分离得到白屈菜红碱(chelerythrine)等六个生物碱和一个三萜羽扇豆醇乙酸酯；杜方麓等又从地上部分分离得到β-香树脂醇乙酸酯及β-谷甾醇等成分，并通过GC-MS技术对血水草硅胶柱层析分离得到的低熔点部分进行了分析，确认了血水草中的新化合物。

摘要： 血水草系罂粟科白屈菜族血水草属多年生草本植物(Eomecon chionantha Hance),是我国独属、独种的特有物种,广泛分布于我国浙江、江西、四川、湖南等南方各省区,根及根茎入药.《中药志》记载其味苦、性寒、有小毒.具有清热解毒之功效.民间用来治疗急性结肠炎、眼结膜炎、疮痈疗毒以及毒蛇咬伤等症.血水草中含有白屈菜红碱(Chelerythrine)、血根碱(Sanguinarine)、原托品碱(Protopine)、α-别隐品碱(α-allocrypopine)、氧化血根碱(Oxysanguinarine)和白屈菜红默碱(Chelerythridimerine)等生物碱类成分,其中白屈菜红碱含量最高.现代药理研究证明血水草中生物碱能抗菌、抗微管蛋白聚合、抗PKC等抗癌作用.而提取工艺未见报道,我们以白屈菜红碱为含量指标,正交实验法优选其提取工艺的最佳条件,从而为实现血水草生物碱的生产提供科学依据.

摘要： 本发明公开一种提高博落回血根碱和白屈菜红碱含量的诱导培养基及方法，所述诱导培养基主要由MS培养基和诱导子组成，所述诱导子为茉莉酸甲酯或水杨酸，所述诱导子的浓度为100μmol/L。所述方法是将16小时光培养和8小时暗培养，光照强度为4500～9000Lx，培养60天的无菌组培苗置于上述诱导培养基上，25°C下在16小时光周期下诱导培育24～120h；然后定量分析代谢产物含量及基因表达量。本发明通过在培养基中添加诱导子茉莉酸甲酯或水杨酸，能促进博落回中P6H基因和DBOX基因的表达，进而促进血根碱和白屈菜红碱的合成，以提高博落回组培苗中血根碱和白屈菜红碱的含量。

摘要： 一种高效酶催化合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其分别从已知的普罗托品‑6‑羟基化酶基因、二氢苯并菲啶氧化酶基因及细胞色素P450还原酶基因中通过异源表达和结果比对分析，筛选出表达效率高的最优基因，然后对选出的最优基因进行密码子优化；再将优化基因序列构建到表达载体上，之后转入酵母工程菌中进行转化获得重组酵母工程菌株；最后用博落回的叶片原料液前体饲喂重组酵母工程菌进行发酵，即得。本发明从基因水平、发酵工艺等多方面上提高血根碱和白屈菜红碱的酶催化效率，利用博落回的非传统药用部位叶片原料液直接与工程菌进行发酵，将叶片中生物碱含量高的原阿片碱和别隐品碱转化成高价值的血根碱和白屈菜红碱，以实现博落回资源的综合利用。

摘要： 本发明提供一种以博落回叶片原液为底物合成血根碱和白屈菜红碱的方法，具体包括如下步骤：S1、博落回叶片原液前处理；S2、构建酵母工程菌；S3、以步骤S1前处理后的博落回叶片原液作为底物，前体饲喂步骤S2构建的酵母工程菌；S4、收集培养后的酵母工程菌，裂解菌体、分离纯化，即得。本发明以博落回非传统药用部位叶片的粉末为底物前提饲喂酵母工程菌进行生物转化，使原料中的原阿片碱与别隐品碱转化成高价值的血根碱与白屈菜红碱，既可以提高血根碱与白屈菜红碱的含量，又可以省去传统提纯原阿片碱与别隐品碱的操作，从而降低血根碱和白屈菜红碱的生产成本以及实现博落回资源的综合利用。

摘要： 本发明公开了博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的甲基转移酶基因及其应用。首次在博落回基因组中发现6个参与血根碱与白屈菜红碱合成的甲基转移酶基因，包括Mc2833、Mc769、Mc8567、Mc833、Mc830、Mc9487基因。利用酿酒酵母体系验证通过上游前体饲喂分别验证了这几步反应，可实现血根碱与白屈菜红碱中间体的合成。本发明进一步揭示了血根碱在博落回中合成的分子机制，为高血根碱与白屈菜红碱含量博落回育种提供了理论依据和分子辅助育种目标；同时为血根碱与白屈菜红碱的体外人工合成提供了宝贵经验。

摘要： 本发明公开了博落回中参与血根碱与白屈菜红碱合成的细胞色素P450酶基因及其应用。首次在博落回基因组中发现5个参与血根碱与白屈菜红碱合成的细胞色素P450酶基因，包括基因Mc9485、Mc2661、Mc217、Mc11229、Mc11218。利用酿酒酵母体系验证通过上游前体饲喂分别验证了这几步反应，可实现血根碱与白屈菜红碱中间体的合成。本发明还通过酿酒酵母异源表达体系比较了博落回与罂粟和花菱草同功能基因的转化效率，发现博落回基因的转化效率显著高于罂粟和花菱草。本发明进一步揭示了血根碱在博落回中合成的分子机制，为高血根碱与白屈菜红碱含量博落回育种提供了理论依据和分子辅助育种目标；同时为血根碱与白屈菜红碱的体外人工合成提供了宝贵经验。

摘要： 本发明属于新型农药技术领域，尤其涉及血根碱衍生物、白屈菜红碱衍生物及其应用。本发明通过在天然博落回血根碱分子、博落白屈菜红碱分子中引入氮杂环结构合成了一类结构新颖的含有氮杂环结构取代的博落回血根碱衍生物、白屈菜红碱衍生物。本发明所合成的血根碱衍生物、白屈菜红碱衍生物，与血根碱、白屈菜红碱相比，具有更强的生物活性；血根碱衍生物对桃蚜具有较强的杀虫活性，大部分血根碱衍生物的校正死亡率在85％以上，部分血根碱衍生物的LC50在10g/mL以下，仍对桃蚜表现出优异的杀虫活性。

摘要： 本发明公开一种提高博落回血根碱和白屈菜红碱含量的诱导培养基及方法，所述诱导培养基主要由MS培养基和诱导子组成，所述诱导子为茉莉酸甲酯、水杨酸中的一种或两种，所述诱导子的浓度为50～150μmol/L。所述方法是将16小时光培养和8小时暗培养，光照强度为4500～9000Lx，培养60天的无菌组培苗置于上述诱导培养基上，25°C下在16小时光周期下诱导培育24～120h；然后定量分析代谢产物含量及基因表达量。本发明通过在培养基中添加诱导子茉莉酸甲酯或水杨酸，能促进博落回中P6H基因和DBOX基因的表达，进而促进血根碱和白屈菜红碱的合成，以提高博落回组培苗中血根碱和白屈菜红碱的含量。

摘要： 本发明提供一种利用机械损伤高效合成血根碱和白屈菜红碱的方法，具体包括如下步骤：选取按照16小时光培养和8小时暗培养，光照强度为4500～9000Lx，培养60天的无菌组培苗；使用无菌针头将无菌组培苗的幼苗叶片扎8～12个孔，然后置于MS培养基中，25°C下在16小时光周期下培育24～120h；提取步骤(2)经过扎孔处理培育后的无菌组培苗中的代谢产物并进行定量分析，即得。本发明通过对博落回无菌组培苗进行机械损伤促进参与博落回中血根碱和白屈菜红碱的合成的P6H基因和DBOX基因的表达，进而促进血根碱和白屈菜红碱的高效合成，然后通过从培育的无菌组培苗中提取代谢产物，高效获得血根碱和白屈菜红碱。

摘要： 本发明提供一种以博落回叶片原液为底物合成血根碱和白屈菜红碱的方法，具体包括如下步骤：S1、博落回叶片原液前处理；S2、构建酵母工程菌；S3、以步骤S1前处理后的博落回叶片原液作为底物，前体饲喂步骤S2构建的酵母工程菌；S4、收集培养后的酵母工程菌，裂解菌体、分离纯化，即得。本发明以博落回非传统药用部位叶片的粉末为底物前提饲喂酵母工程菌进行生物转化，使原料中的原阿片碱与别隐品碱转化成高价值的血根碱与白屈菜红碱，既可以提高血根碱与白屈菜红碱的含量，又可以省去传统提纯原阿片碱与别隐品碱的操作，从而降低血根碱和白屈菜红碱的生产成本以及实现博落回资源的综合利用。

摘要： 一种高效酶催化合成血根碱和白屈菜红碱的方法，其分别从已知的普罗托品‑6‑羟基化酶基因、二氢苯并菲啶氧化酶基因及细胞色素P450还原酶基因中通过异源表达和结果比对分析，筛选出表达效率高的最优基因，然后对选出的最优基因进行密码子优化；再将优化基因序列构建到表达载体上，之后转入酵母工程菌中进行转化获得重组酵母工程菌株；最后用博落回的叶片原料液前体饲喂重组酵母工程菌进行发酵，即得。本发明从基因水平、发酵工艺等多方面上提高血根碱和白屈菜红碱的酶催化效率，利用博落回的非传统药用部位叶片原料液直接与工程菌进行发酵，将叶片中生物碱含量高的原阿片碱和别隐品碱转化成高价值的血根碱和白屈菜红碱，以实现博落回资源的综合利用。